双抗原夹心酶联免疫吸附试验对丙型肝炎病毒抗体检测灵敏度及特异性的影响

目的:探究双抗原夹心酶联免疫吸附试验对丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)检测灵敏度及特异性的影响。方法:选取2016年5月~2017年4月我院进行手术和血液透析前抗-HCV检测的患者270例,经血液筛查(荧光定量PCR法)抗-HCV阳性12例,抗-HCV阴性258例,采用双抗原夹心酶联免疫吸附法(ELISA)和间接ELISA分别对270例患者血清进行抗-HCV检测,比较两种检测方法的特异性、灵敏度。结果:双抗原夹心ELISA法灵敏度、特异性均高于间接ELISA法(P<0.05)。结论:双抗原夹心酶联免疫吸附试验可提高丙型肝炎病毒抗体检测灵敏度及特异性,可作为临床血液标本筛查首选方法。     

献血者抗-HCV ELISA与RIBA法检测结果比较分析

血站系统检测抗-HCV，使用不同厂家ELISA（酶联免疫吸附试验）法试剂对血样进行2次检测，在日常检测中常出现两种试剂检测结果不一致的情况，为了解这些反应的特异性与非特异性情况，减少血液浪费，笔者对单试剂阳性结果和双试剂结果阳性的标本进行了抗-HCV确证试验，现报告如下。     

四种酶联免疫吸附试验试剂检测梅毒抗体的比较

目的评价国内常用的4种梅毒酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂的有效性,为临床选择梅毒诊断试剂提供依据。方法对180例临床血清分别进行快速血浆反应素环状卡片试验（RPR）、梅毒螺旋体颗粒凝集试验（TPPA）和4种试剂的ELISA（试剂分别为A、B、C、D）。以TPPA结果为参考对照,分别统计各ELISA试剂的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值。结果 180例血清标本中,RPR阳性58例,TPPA阳性84例,两者均阴性95例。TPPA检测阳性率为46.67%（84/180）,A试剂为44.44%（80/180）,B试剂为45.00%（81/180）,C试剂为45.00%（81/180）,D试剂为28.33%（51/180）。D试剂与TPPA及其他3种试剂的检测阳性率差异有统计学意义（P均〈0.01）。D试剂的敏感性最差（57.14%）,而其他几种ELISA试剂的敏感性较好（94.05%~95.24%）。4种ELISA试剂的特异性均较理想（96.88%~100.00%）。结论个别国产ELISA试剂的敏感性差,提示在选择这类试剂时,应以质控血清进行预试验,使用符合要求的试剂。     

4种国产丙型肝炎病毒抗体酶联免疫诊断试剂的检测结果分析

目的探讨不同国产酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂在实际血样丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)检测中的效能。方法采用4种不同厂家的ELISA试剂对59例初筛为抗-HCV阳性的标本分别进行抗-HCV检测,并对不同方法的检测结果进行比较分析,观察不同试剂间检测结果的一致性。结果 28 500份血样检测到阳性标本59例,阳性检出率为0.2%,4种试剂的检测结果具有较高的吻合性。结论随着现代生物技术的快速发展,国产抗-HCV酶法试剂在灵敏性、特异性、重复性、稳定性等方面都有了很大的提高。国产抗-HCV试剂广泛应用于临床检验,可以作为HCV感染的补充试验。     

HCV抗体酶联免疫诊断试剂的质量评价

目的评价抗-HCVEIA诊断试剂盒的质量。方法应用ELISA法对抗-HCV国家标准品血清盘、临床科研血清盘、临界值质控血清等进行检测，考评抗-HCV诊断试剂盒质量。结果6种厂家试剂均符合国家标准品血清盘判读标准，均能检出2NCU／ml定值质控血清，但测出S／CO比值的差异很大。用临床科研血清盘检测，其试剂的灵敏度、特异性、总符合率存在差异（χ^2=3．91，P〈0．05）。结论不同厂家试剂质量仍存在差异，综合评价，优选试剂，有利于控制和减少丙型肝炎的输血传播。     

检测丙型肝炎病毒F抗体的一种间接ELISA的初步评价

目的评价以丙型肝炎病毒（HCV）F蛋白为包被抗原的间接酶联免疫吸附试验（ELISA）的准确性和可靠性。方法以基因工程重组HCV F抗原包被酶标微孔板,检测HCV感染者血清抗-F滴度,建立阳性判断值,计算HCV感染者血清抗-F阳性率。与某市售HCV ELISA试剂同时检测HCV感染者和非感染者抗-F阳性率,计算该ELISA的敏感性和特异性等技术指标。结果该间接ELISA检测的敏感性为66.7%,特异性为96.7%,正确指数为63.3%,一致率为81.7%,Kappa值为0.63,变异系数（CV）为6.23%。结论该间接ELISA初步评价指标符合准确性和可靠性要求,具有潜在补充检测HCV感染的扩展应用价值。     

国产酶联免疫双抗原夹心法检测丙型肝炎病毒抗体试剂的应用与分析

目的调查万泰酶联免疫双抗原夹心法检测抗-HCV试剂的实际使用情况并进行分析。方法采用A、B、C 3种试剂平行检测2016年6月份无偿献血标本3 828例,无反应性标本及A、B、C单试剂反应性标本做荧光定量PCR检测,A、B、C所有反应性标本(包括单试剂反应性、双试剂反应性及3种试剂均呈反应性)采用重组免疫印迹实验(RIBA)进行确认,比较3种试剂的阳性检出率和检测结果符合性;用抗-HCV考核血清盘3种试剂的灵敏度、特异性及最低检出限;3种试剂同时检测室内质控品,比较检测批内和批间精密度。结果 A、B、C这3种试剂阳性检出率分别为0.078%、0.13%、0.078%,无明显差异,且均无漏检现象,A、C这2种试剂检测结果符合性为:99.95%,B、C这2种试剂检测结果符合性为99.89%;A、B、C这3种试剂检测灵敏度为:100%、100%、100%,A、B、C这3种试剂检测特异性为90%、90%、95%;A、B试剂最低检出浓度水平约为0.1 NCU/m L,C试剂最低检出浓度约为0.05NCU/m L;A、B、C3种试剂检测批内精密度分别为:12.53%、12.34%、6.18%,3种试剂检测批间精密度分别为:19.76%、18.13%、15.61%。结论 3种抗-HCV试剂阳性检出率无统计学差异,双抗原夹心ELISA的C试剂检测精密度明显较好,在血清盘检测中呈现较好的特异性,检测结果的非特异性反应较少,可以有效减少不必要的血液报废。     

六种HIV酶免血液筛查试剂的评价

目的探讨血站实施HIV核酸检测后酶免ELISA试剂如何进行取舍,与核酸检测形成良好互补,降低HIV检测风险。方法应用艾滋血清盘对试剂灵敏度、特异性进行评估,使用室间质评血清进行比对;同时采用2遍酶免1遍核酸检测的方式对无偿献血标本进行HIV平行检测,筛查反应性标本送疾病预防控制中心(CDC)进行确认。结果质评结果均为100%,血清盘检测6种试剂敏感性均为100%,特异性其中1种试剂为95%,其余为100%,2种酶免试剂对无偿献血标本平行筛查时发现1例窗口期标本无法被其中1种试剂检测出。结论试剂整体符合检测要求,但不同厂家试剂检测水平有一定差异,血液筛查试剂选择时应对检测试剂进行综合评估,以选择临床检测灵敏度较高产品为佳。     

酶联免疫吸附试验两次血液检测结果符合性比较分析

目的 了解酶联免疫吸附试验(ELISA)法血液检测两次检验结果的符合性,进一步提高ELISA检测试剂的灵敏度和特异性,降低血液的报废率.方法 使用不同厂家的试剂对献血者的血液进行乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、人类免疫缺陷病毒抗体(抗-HIV)、丙型肝炎抗体(抗-HCV)、梅毒(TP)两次检验.结果 不同厂家的试剂TP的符合性为75.44%,抗-HCV为50%,抗-HIV为36.49%,HBsAg为32.14%.结论 由于不同厂家ELISA试剂方法特异性和灵敏度的差异等因素的影响,检测结果存在一定的假阳性,因此两次检测结果存在一定的不符合性.     

两种化学发光免疫分析试剂用于血液筛查丙肝抗体的检测性能评价

目的评价两种化学发光免疫分析(CLIA)试剂检测丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)的性能,重点探讨用于献血者筛查的可行性。方法采用CLIA、ECLIA和2种酶联免疫吸附试验(ELISA)(A为双抗原夹心法,B为间接法)试剂平行检测常规献血者标本与血清盘,比较4种试剂的灵敏度、特异性和变异系数。结果 CLIA、ECLIA、A和B试剂的灵敏度依次为99.06%(315/318)、99.69%(317/318)、99.06%(315/318)和99.69%(317/318),临床特异性分别为99.97%(2 995/2 996)、99.06%(2 994/2 996)、99.97%(2 995/2 996)和100%(2 996/2 996);ECLIA试剂的批内和批间精密度(CV均8%)均比ELISA试剂高(ELISA批内变异系数在15%以内,批间变异系数在20%以内),CLIA试剂的精密度也基本满足要求(批内和批间精密度CV14%)。结论在本次研究中,该ECLIA试剂检测血清盘表现出较高的灵敏度和精密性,以及对常规标本的筛查特异性均符合血液筛查的要求;该CLIA试剂具有较高的特异性,灵敏度与间接法ELISA试剂相同,可与灵敏度较高的其他试剂联合使用筛查献血者丙肝抗体。     

评估第4代HIV酶联免疫法诊断试剂对静脉吸毒者感染窗口期的检测能力

目的应用BBI公司血清抗体阳转盘评价第4代人类免疫缺陷病毒（HIV）酶联免疫法诊断试剂（以下简称第4代试剂）对窗口期感染的检测能力,并应用其从静脉吸毒人群样本中筛查窗口期感染者,从而分析第四代试剂检测临床样本的特异性和敏感性。方法首先应用第3代HIV酶联免疫法诊断试剂筛查BBI血清阳转盘和收集的吸毒人群样本,阳性样本进一步用免疫印迹法确认。再用第4代试剂分别检测阴性和阳性样本,阴性样本中出现阳性反应者,进行p24抗原和HIV RNA病毒载量检测,证实是否为窗口期样本。对证实为窗口期的感染者随访至抗体阳转。结果用第3代试剂检测BBI阳转血清盘,未发现阳性样本;检测静脉吸毒人群样本2629份,发现HIV抗体阳性样本77份,经免疫印迹法（WB）确认均为阳性,阴性样本2552份。第4代试剂可检出BBI阳转血清盘第14天的窗口期样本;在2552份静脉吸毒人群抗体阴性样本中检出2份窗口期样本,一例随访至血清阳转,一例失访。临床检测特异性为99.2％,假阳性率0.8％（95％可信区间0．4％～1．1％）。结论第4代试剂比第3代试剂能够更早地发现HIV感染者,降低窗口期漏检,减少HIV传播。     

人类免疫缺陷病毒抗体酶联免疫诊断试剂的质量评价

目的 评价市场流通中HIV抗体酶联免疫诊断试剂的质量。方法 从使用单位抽取20家试剂，用国家参考品、确证为阳性的样品和阴性样品对其进行检测和分析。结果 20家试剂均符合200107批国家参考品的质量要求，对76份确证为阳性样品的检出率为100．0％，16家试剂对88份阴性样品的检出率为100．0％，3家试剂为98．9％，1家试剂为97．7％。结论 我国HIV抗体诊断试剂的灵敏度较高，但某些试剂的特异性仍需提高。     

新型冠状病毒监测网络省市级疾控实验室核酸检测室间质评

目的 对全国32个省市级疾控机构新冠监测网络实验室新型冠状病毒（新冠病毒）变异株核酸检测能力进行室间质评,同时对常规所用新冠病毒核酸检测试剂性能进行评价。方法 制备新冠病毒武汉株及4个关切变异株、人冠状病毒OC43(HCoV-OC43)和H3亚型流感病毒（H3N2）核酸样本,发放给全国31个省、自治区及直辖市和新疆生产建设兵团疾病预防控制中心新冠监测网络实验室进行室间质评。每个实验室的考核样本盘包括两种不同Ct值（～35、～30）的新冠病毒武汉株、关切变异株（α和γ或β和δ）、HCoV-OC43、流感病毒核酸样本共10支。根据反馈结果计算检测符合率并对检测结果进行深入分析。同时,收集各考核实验室常用的新冠病毒核酸检测试剂盒进行检测性能验证。结果 全国省市级疾控机构新冠监测网络实验室室间质评总体达标率为100%(32/32),总体优秀率72%(23/32);初测中,新冠病毒、HCoV-OC43核酸样本检测总符合率为99.7%(319/320)、89%(57/64)。对32个考核实验室送检的新冠病毒核酸检测试剂盒进行性能验证,66%(33/50)的试剂盒检测限与说明书相符,92%(11/1...     

国产抗-HIV ELISA诊断试剂质量提高的血清学证实

目的　了解国产抗 HIVELISA诊断试剂质量提高情况 ,保证检测结果的准确性。方法　使用卫生部艾滋病预防与控制中心艾滋病参比实验室的试剂质量考核血清盘 ,对 3种国产抗 HIVELISA试剂质量考核 ,并对结果比较分析。结果　 2 0 0 1年生产的抗 HIVELISA诊断试剂敏感性比 1998、1999年的试剂明显提高 ,阳性漏检率明显减少。结论　国产抗 HIVELISA诊断试剂质量在不断提高 ,双抗原夹心法试剂敏感性优于间接法试剂     

Comparison of three automatic chemiluminescent immunoassays for monitoring dynamic profile of SARS‐CoV‐2 IgG and IgM

BackgroundSeldom performance evaluation and diagnosis comparison studies were reported for different chemiluminescent immunoassay (CLIA) kits approved under an emergency approval program for SARS‐CoV‐2 infection.MethodsA total of 100 and 105 serum separately from non‐infected populations and COVID‐19 patients were detected with SARS‐CoV‐2 IgM and IgG kits. The characteristics including precision, functional sensitivity, linearity, and accuracy were evaluated for Axceed, iFlash, and Maglumi CLIA kits.ResultsMaglumi and iFlash had the best analytical sensitivity for IgM and IgG, respectively. Axceed kits had a linearity response in the detected concentration. The clinical sensitivity of Axceed, iFlash, and Maglumi was 68.0%, 64.9%, and 63.9% with a specificity of 99.0%, 96.0%, and 100% for IgM, 85.6%, 97.9%, and 94.8% with a specificity of 97.0% for IgG. ROC analysis indicated all kits had a diagnostic power greater than 0.9. Notably, either IgM or IgG kits obtained a poor agreement (Kappa value from 0.397 to 0.713) with others. Among 38 recovered patients, 94.7% had an effective immune response, and both seropositive IgM and IgG accounted for the biggest proportion (medium, 42 days onset), then followed by the single seropositive IgG (medium, 50 days onset) in Ab profile.ConclusionThe performance of CLIA kits satisfied the diagnosis of SARS‐CoV‐2 infection. Both positive of IgG and IgM contributes to improve the specificity, and a positive one will enhance the sensitivity.     

人巨细胞病毒IgG抗体质控盘的建立

目的建立人巨细胞病毒IgG抗体质控盘,为以酶联免疫法和化学发光法为原理的人巨细胞病毒IgG抗体诊断试剂盒的性能评价提供可靠的质控物质。方法通过试剂盒筛选出人巨细胞病毒IgG抗体的阳性和阴性血清,将10份不同来源的阳性血清作为质控盘的P1~P10,5份不同来源的阴性血清作为质控盘的N1~N5,5份阳性血清混合制成质控盘的L1~L3。之后,用不同的试剂盒验证建立的质控盘。结果六家公司的试剂盒对本质控盘进行的准确性、特异性和检测限的验证结果均符合要求。对本质控盘的稳定性研究结果表明,质控盘的稳定性良好。成功建立了人巨细胞病毒IgG抗体质控盘。结论本研究建立的质控盘可用于以酶联免疫法和化学发光法等原理的人巨细胞病毒IgG抗体诊断试剂盒的性能评价。     

Evaluation of the performance of 44 assays used in countries with limited resources for the detection of antibodies to hepatitis C virus

BACKGROUND: This study was conducted by the International Consortium for Blood Safety (ICBS) and its Collaborating Center, the Paul Ehrlich Institute, to identify high-quality, affordable assays for the detection of hepatitis C virus (HCV) antibodies and make available information on their performance for the benefit of developing countries. STUDY DESIGN AND METHODS: Forty-four assays were evaluated for their sensitivity and specificity. The assays' sensitivity was evaluated on a characterized panel of 200 anti-HCV-positive samples comprising major HCV genotypes 1 through 6. Three seroconversion panels were used to estimate sensitivity in the early infectious phase. Specificity was evaluated with a characterized ICBS-negative panel of 181 verified negative samples. RESULTS: Sensitivity was 100 percent for 15 assays, 99.5 percent for 11 assays, 99.0 percent for 6 assays, and less than 99.0 percent for 12 assays. The false-negative results found were not linked to the genotype. Anti-HCV detection in the early infectious phase was, on average, 16.7 days later than for tests licensed in the European Union. Specificity in 25 tests was 100 percent, whereas 11 assays showed 1 false-positive result (99.45%) and the other assays were nonspecific in 2 or more samples. Two assays were not supplied in sufficient quantity to test for specificity. CONCLUSIONS: On applying criteria for highest sensitivity (100%) and high specificity (> or =99.5%), 11 tests met the criteria. An additional 19 tests reached a performance comparable to WHO's criteria for human immunodeficiency virus antibody assays. The genotype diversity of HCV was found not to influence sensitivity of the assays.     

细菌性阴道病联合测定试剂盒方法学评价

目的分析细菌性阴道病联合测定试剂盒对细菌性阴道病（bacterial vaginosis,BV）的诊断效能,评估其临床应用价值。方法以Amsel法为诊断BV的参考方法,随机选取罗湖区妇幼保健院妇产科门诊患者98例,每位患者均一次性留取2份阴道分泌物标本,分别采用Arosel法和联合测定试剂盒进行检测;分析联合测定试剂盒检测结果阳性率、敏感性和特异性。结果Amsel法阳性率为21．4％,联合测定试剂盒阳性率为23．5％,二者差异无统计学意义（P〉0．05）。联合测定试剂盒的敏感性为95．2％,特异性为96．1％,阳性预测值为87．8％,阴性预测值为98．7％,总有效率为95．9％。结论联合测定试剂盒检测BV有较高的敏感性、特异性和总有效率,可作为临床筛查BV的常规方法。     

TORCH血清学检测室间质量评价分析

目的 对目前国内临床实验室TORCH血清学检测情况进行评价.方法 通过室间质量评价的方式:每年进行2次室间质评,每次发放5支质评样本;要求各临床实验室在规定时间内检测、回报检测结果、所用的检测方法、仪器和试剂;卫生部临床检验中心对各实验室的结果进行统计分析,将结果反馈给各实验室,同时对检测结果、试剂情况进行评价.结果 2007年单纯疱疹病毒(HSV)IgM、风疹病毒(Rubella virus)IgM和巨细胞病毒(CMV)lgM 3个项目临床实验室检测合格率均达到了80%以上,弓形虫(Toxo)IgM符合率较低,仅53.1%.试剂的使用评价分析显示,不同试剂各个项目的 阳性符合率均较低(均小于80%).相同的试剂在不同的实验室检测得到的样本吸光度(A)值与阳性结果判定值的比值(S/CO值)有很大差异.结论 TORCH血清学检测室间质量评价反映出多数实验室得到了满意的成绩(PT≥80),但阳性样本的检出率较低,除试剂的原因,也有实验室工作人员操作方面的原因.     

ELISA法HBsAg检测试剂盒质量评价

目的比较国产ELISA法HBsAg检测试剂盒的质量差异,优选适宜于献血者HBsAg检测的试剂盒。方法应用HBsAg国家参考品对所购进的试剂盒进行质量评价。结果5个厂家试剂的阴性符合率、阳性符合率、总符合率、灵敏度和精密度存有一定差别,2个厂家试剂有假阳性出现,2个厂家的试剂有最低检出限量参考品未检出。结论不同厂家的试剂质量存在明显差异,因此试剂使用前必须进行质量抽检,综合评价其质量。选择灵敏度高、特异性强的试剂,以提高献血者HBsAg的检测质量。