海狗油ω-3多不饱和脂肪酸对大鼠实验性脂肪肝的预防作用

目的:观察海狗油ω-3多不饱和脂肪酸(海狗油)对长期喂食高脂饲料引起的大鼠脂肪肝的预防作用。方法:于实验第1 d一次性皮下注射小剂量四氯化碳并长期喂食高脂饲料复制大鼠脂肪肝模型,同时各组分别口服灌胃(ig)等体积橄榄油(脂肪肝模型组)、辛伐他汀4 mg·kg-1(阳性药组)、海狗油0.5 g·kg-1,1.6 g·kg-1和4.8g·kg-1,每天1次,连续10周,测定血脂和肝脂,以肝脏的重量、肝脂质含量和肝细胞的脂变程度为主要衡量指标,观察海狗油预防脂肪肝效果。结果:小剂量四氯化碳损伤肝脏合并高脂饲料引起大鼠肝脏脂肪性变,表现为肝重量和肝组织甘油三脂(TG)、总胆固醇(TC)、丙二醛(MDA)、游离脂肪酸(FFA)含量显著增加,SOD活性明显降低。病理组织学检查苏丹Ⅲ染色和HE染色显示肝细胞肿胀,内部充满大小不等的脂滴,而海狗油各组大鼠与模型组相比肝组织TG、TC、NDA和FFA值显著降低,肝细胞的脂变程度减小,脂滴减少,SOD活性逐渐升高并趋于恢复正常,并有量效关系,具有明显的抑制作用。结论:该药物对脂肪肝的形成具有明显的预防作用。     

海狗油对实验性脂肪肝脂代谢和血栓素A2及丙二醛的影响

目的:探讨海狗油抑制脂肪肝的作用机理。方法:小剂量四氯化碳合并高脂饲料复制大鼠脂肪肝模型7周后,模型组灌胃(ig)给予等体积橄榄油;辛伐他汀组给予辛伐他汀4mg·kg-1·d-1,海狗油低、中、高剂量组ig海狗油0.5、1.6、4.8g·kg-1·d-1,连续8周,正常大鼠作为空白组。测定肝脂、肝内前列环素的代谢产物(6ketoPGF1α)与血栓素A2的代谢产物(TXB2)含量,观察脂质过氧化作用和组织学检查结果。结果:海狗油各组肝细胞内TXB2含量降低,6ketoPGF1αTXB2比值增加,超氧化物歧化酶(SOD)活性升高,甘油三脂(TG)、总胆固醇(TC)、丙二醛(MDA)、游离脂肪酸(FFA)含量显著降低,组织学检查显示肝内脂变减轻,细胞色素P4502E1(CYP2E1)免疫组织化学染色显色指数减小。结论:海狗油使实验性脂肪肝的肝脂和肝内血栓素A2的代谢产物减少,即抑制肝脂合成、促进肝脂代谢(直接作用);使肝内血液粘度减少、血液流动性增加(间接作用),从而对实验性脂肪肝有抑制作用;同时海狗油使MDA含量降低、SOD活性升高而有抗氧化作用。     

海狗油对非酒精性脂肪肝肝细胞色素P450 2E1表达及与氧化抗氧化关系的影响

目的 :研究海狗油对非酒精性脂肪肝肝细胞色素P4 5 0 2E1表达及与氧化抗氧化关系的影响。方法 :于实验d 1一次性皮下注射小剂量四氯化碳并长期喂食高脂饲料复制大鼠脂肪肝模型 ,7周后 ,开始分别口服灌胃 (ig)给予模型组等体积橄榄油 ,阳性药辛伐他汀 4mg·kg-1,海狗油各组ig海狗油0 .5、1.6和 4 .8g·kg-1,每天 1次 ,连续 8周。观察肝组织病理形态的变化和肝细胞色素P4 5 0 2E1的表达 ;测定血清和肝内丙二醛 (MDA)、超氧化物歧化酶 (SOD)以及游离脂肪酸 (FFA)含量的变化。结果 :与脂肪肝模型组比较 ,海狗油不同给药组病理切片苏丹Ⅲ染色和HE染色显示肝细胞的脂变程度明显减轻 ,脂滴减少 ,免疫组化证明肝细胞色素P4 5 0 2E1表达受到不同程度的抑制 ,同时血清及肝内MDA、FFA显著降低 ,SOD活性升高。在模型组和各给药组不同的肝组织内 ,CYP2E1的表达强度及分布的方式存在着差异。结论 :海狗油能显著抑制大鼠脂肪肝CYP2E1的表达 ,减轻脂质过氧化反应。动物个体间存在CYP2E1多态性     

海狗油ω-3多不饱和脂肪酸对大鼠脂肪肝的治疗作用

目的观察海狗油ω 3多不饱和脂肪酸 (海狗油 )对大鼠脂肪肝的治疗作用。方法小剂量四氯化碳合并高脂饲料复制大鼠脂肪肝模型 7周后 ,模型组ig等体积橄榄油 ,阳性药组ig辛伐他汀 4mg/kg ,海狗油低、中、高剂量组分别ig海狗油 0 .5、1.6、4 .8g/kg ,1次 /d ,连续 8周 ,正常大鼠作为空白组。以肝脏的重量、肝脂质含量、6 酮 前列腺素F1α与血栓素B2 比值 (6 keto PGF1α/TXB2 )、脂质过氧化作用和病理检查为主要衡量指标 ,观察其防治效果。结果海狗油各组与模型组相比大鼠肝重减轻 ,肝组织中甘油三脂、总胆固醇、丙二醛、游离脂肪酸含量显著降低 ,超氧化物歧化酶活性升高 ,6 keto PGF1α/TXB2 增加 ,病理检查苏丹Ⅲ染色、HE染色和细胞色素P4 5 0 2E1免疫组织化学染色显示肝内脂变减轻 ,表达减弱。结论海狗油对实验性脂肪肝的形成具有治疗作用。     

海狗油对实验性大鼠脂肪肝的抗脂质过氧化作用

目的:探讨海狗油对实验性大鼠脂肪肝的抗脂质过氧化作用及抗脂肪肝的作用机制。方法:小剂量四氯化碳合并高脂饲料建立大鼠脂肪肝模型,7周后,模型组ig等体积橄榄油、阳性药组ig辛伐他汀4mg·kg-1·d-1、海狗油低(L)、中(M)、高(H)剂量组分别ig海狗油0.5,1.6,4.8g·kg-1·d-1,连续8周,正常大鼠作为空白组。测定血清和肝脏中的丙二醛(MDA)、游离脂肪酸(FFA)、超氧化物歧化酶(SOD)、肝细胞色素P450 2E1(CYP2E1)免疫组化表达水平及脂肪肝指标即肝TC、TG、肝重、肝脏系数和组织学检查。结果:海狗油各治疗组与模型组相比血清和肝组织的MDA、FFA含量显著降低,SOD活性升高,CYP2E1免疫组化表达减弱。与之相应,大鼠脂肪肝指标肝重减轻,TC、TG减少,组织学检查显示肝细胞脂变程度显著减轻。结论:海狗油可诱导抗氧化酶SOD的活性,清除过多的氧自由基,从而减轻实验性脂肪肝症状,具有抗脂质过氧化作用。     

维可健对急性肝损伤小鼠自由基代谢的影响

目的：探讨维可健对四氯化碳(CCl4)肝损伤小鼠GPT、MDA和SOD的影响。方法：采用腹腔注射四氯化碳(CCl4)致小鼠急性肝损伤为模型，经光学比色法则量GPT、MDA和SOD活性。结果：维可健能够明显降低CCl4致急性肝损伤小鼠血清GPT、肝组织MDA含量(P＜0．01)，提高SOD活性(P＜0．05)。结论：维可健对肝损伤具有保护作用。     

肝乐宁粉针剂对实验性肝损伤的保护作用

研究肝乐宁粉针剂对实验性肝损伤的保护作用。方法：采用四氯化碳致小鼠和大鼠肝脏损伤,测定生化指标及观察病理组织学改变。结果：肝乐宁粉针剂能显著降低四氯化碳引起的急性肝损伤小鼠和慢性肝损伤大鼠血清丙氨酸氨基转换酶和天门冬氨酸氨基转换酶增高;亦能明显降低大鼠血清唾液酸和肝羟脯氨酸含量,升高血清总蛋白和白蛋白水平;病理组织学检查肝乐宁粉针剂明显减轻肝细胞的变性和坏死,并抑制慢性肝损伤胶原纤维形成。结论：肝乐宁粉针剂具有肝细胞保护及抗肝纤维化作用。     

肝舒胶囊对急性肝损伤动物的保护作用

目的 研究肝舒胶囊对大、小鼠急性肝损伤的保护作用.方法 采用皮下注射四氯化碳(CCl_4)诱导小鼠产生急性肝损伤模型,测定血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸基转移酶(AST)、总胆红素(TBIL)的含量和肝指数;腹腔注射D-氨基半乳糖胺盐酸盐(D-Gal)致大、小鼠急性肝损伤模型,测定血清中ALT、AST、ALP的含量及对肝指数的影响.结果 肝舒胶囊对CCl_4致小鼠急性肝损伤血清中的ALT、AST、TBIL升高有一定的抑制作用,但无统计学差异;肝舒胶囊高、中剂量能显著降低D-Gal致急性肝损伤小鼠血清中ALT、AST、ALP的含量,中剂量(0.95 g·kg~(-1))能显著降低D-Gal致急性肝损伤大鼠血清中ALT、AST的含量.结论 肝舒胶囊对化学性急性肝损伤有一定的保护作用.     

胆宁片对实验性急慢性肝损伤的保护作用

目的：研究胆宁片对实验性小鼠急性肝损伤预防作用，及对大鼠慢性肝损伤的预防和治疗作用。方法：分别用D-氨基半乳糖和四氯化碳复制小鼠急性肝损伤和大鼠慢性肝损伤模型，检测小鼠和大鼠血清谷草转氨酶（AST）和谷丙转氨酶（ALT）的改变，观察胆宁片对大鼠血清总蛋白、白蛋白、A／G的影响、同时观察肝脏病理学改变。结果：胆宁片可明显抑制D-氨基半乳糖和四氯化碳引起的ALT、AST升高（P〈0．05或P〈0．01）；可显著升高四氯化碳引起的血清总蛋白和白蛋白含量降低（P〈0．05或P〈0．01）；肝脏病理组织学检查显示胆宁片可减轻肝细胞脂肪变性程度和纤维化程度。结论：胆宁片对小鼠D-氨基半乳糖急性肝损伤有较好的保护作用，对四氯化碳所致大鼠慢性肝损伤有一定的预防及治疗作用。     

柴胡乳剂对急性化学性肝损伤的保护作用

目的研究中药柴胡乳剂对急性化学性肝损伤的保护作用。方法经预防给药7 d后,采用四氯化碳(CCl4)、扑热息痛两种肝毒剂复制小鼠急性肝损伤模型,采用四氯化碳复制大鼠急性肝损伤模型,16 h后眼眶取血,测定大鼠、小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)含量及血清蛋白的变化,观察柴胡乳剂对四氯化碳、扑热息痛所致小鼠及大鼠急性化学性肝损伤的保护作用。结果柴胡乳剂大、中剂量组均能明显降低四氯化碳、扑热息痛所致急性肝损伤后小鼠血清ALT、AST含量(P<0.01);柴胡乳剂大剂量组能明显降低四氯化碳所致急性肝损伤大鼠血清ALT、AST(P<0.05)含量,增加血清白蛋白(Alb)含量(P<0.05),改善肝功能。结论柴胡乳剂对四氯化碳、扑热息痛所致化学性急性肝损伤有一定的保护作用。     

常见肝损伤动物模型构建和应用的研究状况

肝是机体生物转化的最主要器官,对于维持机体的生命活动发挥着重要作用.因此肝损伤会对机体造成严重伤害,轻则引发脂肪肝,持续性加重将诱导肝纤维化和肝硬化,最终导致肝衰竭或肝癌,严重危及人体生命健康.对此,建立与临床肝损伤的病理生理过程及发病程度相似的动物模型对于更好地探究肝损伤患者的发病机制及临床治疗方法就具有十分重要的意...     

肝损状态下尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶研究进展

肝脏是人体内最重要的代谢器官,包含绝大部分的Ⅰ相和Ⅱ相代谢酶,在内源性和外源性物质的代谢解毒方面起着重要的作用.参与葡萄糖醛酸代谢的尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶(UGT)是Ⅱ相代谢中最重要的酶,与常见的CYP450酶相比,研究相对滞后,尤其在肝损伤状态下UGT的相关研究仍处于探索阶段.本文参考最新UGT的研究成果,综述了UGT分子生物学目前研究的概况、肝脏分布及其与肝脏疾病的关系;总结了几种不同诱因的肝损伤病理状态UGT表达和葡萄糖醛酸代谢的变化情况并且深入探讨了相关机制,旨在为药物的肝脏代谢尤其是在肝损状态下葡萄糖醛酸结合消除研究提供一定的参考依据,为肝脏疾病患者的临床合理用药提供指导.     

吲哚菁绿 15 min 滞留率在肝储备功能评估中的价值探讨

目的 探讨吲哚菁绿 15 min 滞留率（ICGR15）评估肝储备功能的价值。 方法 肝病患者 185 例, 其中肝衰竭组 45 例、肝硬化组 90 例（Child A、B 及 C 分别为 16、26 及 48 例）、急性肝炎组 20 例、慢性肝炎组（轻、中度）30 例。 比较各组的 ICGR15 表达水平差异。 比较肝衰竭组治疗前及治疗后 1 个月时 ICGR15、总胆红素（TBIL）、白蛋白（ALB）、凝血时间（PT）的变化。 急性肝炎组治疗前及治疗后 1 个月丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、 TBIL 及 ICGR15 水平的变化。 结果 肝衰竭组、肝硬化组、急性肝炎组、慢性肝炎组 ICGR15（%）分别为 56.3±14.7、 28.9±9.6、 22.4±6.8、 13.7±2.3, 呈逐渐下降趋势（F=125.317, P＜ 0.05）。 其中 , 肝硬化组 Child A 、 B 及 C 级别组 ICGR15（%）水平分别为 17.3±5.4、25.7±7.5、34.5±7.3, 呈逐渐升高趋势（P＜ 0.05）。 治疗后１个月时, 肝衰竭组 TBIL、 PT 及 ICGR15 均低于治疗前, 急性肝炎组 ALT、AST、TBIL 及 ICGR15 均低于治疗前（P＜ 0.05）。 结论 ICGR15 可以反映肝功能储备情况, 且不受 ALB、鲜血浆应用的影响, 弥补了 ALB、PT 检查的不足。     

人工肝支持系统在各型重型肝炎治疗中的应用

目的 探讨人工体外支持系统在重型肝炎治疗中的疗效及其影响疗效的因素。方法 采用血浆交换仪进行血浆交换和胆红素吸附治疗各型重型肝炎患75例,共141例次。结果 75例重型肝炎患经血浆置换和/或胆红素吸附治疗后临床症状得到一定程度的改善,血清胆红素从平均495.6umol/L降至256.7unol/L,凝血酶原活动度从26.9%提高至54.3%。人工肝支持治疗后总生存率为58.6%(44/75）,但该疗法对早期慢性重型肝炎疗效最佳,其存活率达86.2%(25/29）。肝肾综合征对该治疗效果影响最大,出现该并发症的患病死率高达82.6%(19/23）。结论 人工肝支持治疗对重型肝炎病情的改善、存活率的提高、黄疸的消退、凝血功能的改善均有肯定的疗效;该治疗对早期慢性重型肝炎疗效较好。     

复方中药对肝星状细胞胶原合成与降解的影响

目的观察中药复方丹参对肝星状细胞胶原合成与降解的影响.方法选择肝星状细胞系作为体外研究对象,MTT法观察药物对细胞增殖的影响,ELISA法检测细胞上清液Ⅰ、Ⅲ、V型胶原含量,RNA-cDNA分子杂交检测细胞内Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原及TGF β1 mRNA稳态水平.逆转录多聚酶链反应检测间质胶原酶及金属蛋白酶组织抑制因子-1基因表达水平.结果中药复方丹参明显抑制肝星状细胞增殖且呈剂量依赖趋势,与对照组比较,中药组细胞上清液中Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原含量明显降低,细胞内Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原及TGF β1 mRNA稳态水平明显降低,间质胶原酶基因表达水平明显增强,金属蛋白酶组织抑制因子-1基因表达水平明显受到抑制(P＜0.01).结论中药复方丹参可能通过抑制肝星状细胞的增殖,抑制胶原的异常合成,促进异常沉积胶原的降解,从而起到抗肝纤维化的作用.     

Novel findings for the development of drug therapy for various liver diseases: Current state and future prospects for our liver regeneration therapy using autologous bone marrow cells for decompensated liver cirrhosis patients

We have developed an in vivo mouse model [the green fluorescent protein (GFP) / carbon tetrachloride (CCl(4)) model] and reported that infused GFP-positive bone marrow cells administered via a tail vein efficiently repopulated cirrhotic liver tissue under conditions of persistent liver damage induced by CCl(4). Moreover, bone marrow cells infused into the liver improved liver function and ameliorated liver fibrosis with higher expression of matrix metalloproteinase 9 (MMP-9), consistent with improved survival rate. Based on these findings, we started a multicenter clinical trial of autologous bone marrow cell infusion (ABMi) therapy for decompensated liver cirrhosis patients and demonstrated the efficacy of this approach without unexpected complications. However, this therapy involves bone marrow aspiration under general anesthesia and is not indicated for patients for whom general anesthesia is difficult. We therefore aimed to develop a new liver regeneration therapy in which cells having a curative effect on liver cirrhosis are isolated and cultured from a small amount of autologous bone marrow aspirated under local anesthesia and infused back into the same subject. Herein, we present results for the GFP/CCl(4) model and ABMi therapy and future prospects for a new liver regeneration therapy.     

Overdose pattern and outcome in paracetamol-induced acute severe hepatotoxicity

AIMS

Paracetamol (acetaminophen) hepatotoxicity is the commonest cause of acute liver failure (ALF) in the UK. Conflicting data regarding the outcomes of paracetamol-induced ALF resulting from different overdose patterns are reported.

METHODS

Using prospectively defined criteria, we have analysed the impact of overdose pattern upon outcome in a cohort of 938 acute severe liver injury patients admitted to the Scottish Liver Transplantation Unit.

RESULTS

Between 1992 and 2008, 663 patients were admitted with paracetamol-induced acute severe liver injury. Of these patients, 500 (75.4%) had taken an intentional paracetamol overdose, whilst 110 (16.6%) had taken an unintentional overdose. No clear overdose pattern could be determined in 53 (8.0%). Unintentional overdose patients were significantly older, more likely to abuse alcohol, and more commonly overdosed on compound narcotic/paracetamol analgesics compared with intentional overdose patients. Unintentional overdoses had significantly lower admission paracetamol and alanine aminotransferase concentrations compared with intentional overdoses. However, unintentional overdoses had greater organ dysfunction at admission, and subsequently higher mortality (unintentional 42/110 (38.2%), intentional 128/500 (25.6%), P < 0.001). The King''s College poor prognostic criteria had reduced sensitivity in unintentional overdoses (77.8%, 95% confidence intervals (CI) 62.9, 88.8) compared with intentional overdoses (89.9%, 95% CI 83.4, 94.5). Unintentional overdose was independently predictive of death or liver transplantation on multivariate analysis (odds ratio 1.91 (95% CI 1.07, 3.43), P= 0.032).

CONCLUSIONS

Unintentional paracetamol overdose is associated with increased mortality compared with intentional paracetamol overdose, despite lower admission paracetamol concentrations. Alternative prognostic criteria may be required for unintentional paracetamol overdoses.     

Staggered overdose pattern and delay to hospital presentation are associated with adverse outcomes following paracetamol-induced hepatotoxicity

AIMS

Paracetamol (acetaminophen) poisoning remains the major cause of severe acute hepatotoxicity in the UK. In this large single centre cohort study we examined the clinical impact of staggered overdoses and delayed presentation following paracetamol overdose.

RESULTS

Between 1992 and 2008, 663 patients were admitted with paracetamol-induced severe liver injury, of whom 161 (24.3%) had taken a staggered overdose. Staggered overdose patients were significantly older and more likely to abuse alcohol than single time point overdose patients. Relief of pain (58.2%) was the commonest rationale for repeated supratherapeutic ingestion. Despite lower total ingested paracetamol doses and lower admission serum alanine aminotransferase concentrations, staggered overdose patients were more likely to be encephalopathic on admission, require renal replacement therapy or mechanical ventilation and had higher mortality rates compared with single time point overdoses (37.3% vs. 27.8%, P = 0.025), although this overdose pattern did not independently predict death. The King''s College poor prognostic criteria had reduced sensitivity (77.6, 95% CI 70.8, 81.5) for this pattern of overdose. Of the 396/450 (88.0%) single time point overdoses in whom accurate timings could be obtained, 178 (44.9%) presented to medical services >24 h following overdose. Delayed presentation beyond 24 h post overdose was independently associated with death/liver transplantation (OR 2.25, 95% CI 1.23, 4.12, P = 0.009).

CONCLUSIONS

Both delayed presentation and staggered overdose pattern are associated with adverse outcomes following paracetamol overdose. These patients are at increased risk of developing multi-organ failure and should be considered for early transfer to specialist liver centres.     

单纯端-端吻合的胆道重建对于肝移植术后早期肝功能恢复的观察

为比较肝移植术单纯端-端吻合胆道与术中放置T管的胆道重建方式对于术后早期肝功能的影响,将所选实验对象分为两组对比术后6个时相点ALT、TBIL、ALP、GGT水平,并经统计学处理分析。结果单纯端-端吻合胆道（不留置T管）的胆道重建对于术后早期肝功能的恢复略优于放置T管的常规术式。