多药耐药相关蛋白与难治性癫(癎)

难治性癫癎占癫癎的20％～30％。一般指癫癎频繁发作，至少每月发作4次以上，应用一线抗癫癎药物正规治疗且血药浓度在有效范围内，至少观察2年仍不能控制发作且影响正常生活，但无进行性中枢神经系统疾病或占位性病变。难治性癫癎可造成患智力及躯体损害，并带来一系列的心理、社会问题，目前已成为癫癎研究的重点课题。癫癎耐药的重要特征是对不同化学结构和作用机制的抗癫癎药物耐药．说明其可能存在某种非特异性机制。[第一段]     

难治性癫癎患者外周血中MDR1基因的表达及临床意义

目的 研究难治性癫癎患者外周血中多药耐药1(MDR1)基因的表达以及抗癫癎药物和癎性发作在难治性癫癎多药耐药发生中的作用.方法 采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)半定量检测120例研究对象外周血中MDR1基因mRNA的表达.根据析因设计分癎性发作和抗癫癎药物两个因素,共分为A组(难治性癫癎组)、B组(癫癎治疗有效组)、C组(癎性发作未用药组)和D组(健康正常对照组),各30例.结果 4组的外周血中MDR1基因的表达水平明显不同(F=4.456,P=0.005),其中癎性发作引起MDR1mRNA的表达明显增高(F=10.005,P=0.002),抗癫癎药物的作用则不明显(F=0.919,P=0.340),抗癫癎药物与癎性发作两者之间没有交互作用(F=2.445,P=0.121).结论 难治性癫癎患者外周血中MDR1基因mRNA的表达上调是癎性发作而非使用抗癫癎药物的结果,外周血中MDR1基因mRNA表达水平的监测可以作为评价癫癎耐药的一项指标.     

药物难治性癫痫患者脑内多药耐药相关蛋白1表达的研究

目的 研究药物难治性癫痫患者脑内皮层多药耐药相关蛋白1（multidrug resistant-associated protein 1，MRP1）表达的情况。方法 选择12例药物难治性癫痫患者癫痫切除灶与12例正常对照脑组织标本．用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）、免疫组化及免疫蛋白印记（Western blot）方法，分析比较MRP1基因在各组的表达。结果 药物难治性癫痫患者组脑内MRP1的表达显著高于正常对照组（P〈0．01）。在癫痫病灶内广泛分布的MRP1免疫阳性细胞主要为毛细血管内皮细胞和星形胶质细胞。结论 脑内高表达的MRP1参与了难治性癫痫的耐药机制。     

多药耐药相关蛋白与难治性癫痫

难治性癫痫的发病机制尚不完全清楚,近年来发现在难治性癫痫患者病灶脑组织可检测出多药耐药相关蛋白(MRP)的过度表达,表明MRP与难治性癫痫耐药关系密切。MRP的过度表达受多种因素影响,其可能通过降低抗癫痫药物在血脑屏障的通透性,减少药物的有效浓度,从而引起抗癫痫药物耐药发生。鉴于MRP在难治性癫痫多药耐药中可能的重要作用,筛选非MRP底物的抗癫痫药物和选用适合长期服用的特异性强﹑安全性高﹑毒副作用性小的MRP抑制剂,可能会为今后临床治疗难治性癫痫翻开新的一页。     

难治性癫癎多药耐药机制研究进展

难治性癫(refractoryepilepsy ,RE)的发病机制一直是近年来研究的难点与热点。以往的研究发现,某些临床特征可能预示RE的发生,包括发病年龄早(1岁以前)、治疗前发作频繁、有高热惊厥史、第一种抗癫药物治疗失败、联合使用两种抗癫药而不能控制发作、有结构性脑损伤以及癫发作类型(如部分性发作)等[1] 。引起RE的原因可能由多因素造成,比如遗传因素、治疗期间抗癫药物耐受问题以及目前所使用的抗癫药作用机制的局限性等[2 ] 。近年来对RE的研究重点集中在多药耐药机制上,与肿瘤患者对多种化疗药物耐药的机制相似,RE的发生可…     

多药耐药相关蛋白-1在难治性颞叶癫痫患者脑组织中的表达及丙磺舒的干预作用

目的 观察难治性颞叶癫痫患者脑组织中多药耐药相关蛋白1( MRPl)及应用MRP1拮抗剂丙磺舒干预后的表达,探讨MRP1与难治性颞叶癫痫多药耐药的关系.方法 应用免疫组化检测难治性颞叶癫痫患者脑组织实验组和对照组MRP1的表达情况,同时应用免疫蛋白印记(Western blot)方法检测实验组、丙磺舒干预组和对照组MRP1的表达.结果 免疫组化结果显示MRP1在难治性颞叶癫痫患者脑组织中表达增强,与对照组比较差异有显著性(P＜0.05).Western blot结果显示丙磺舒干预组MRP1蛋白水平较实验组明显较少,差异有显著性(P＜0.05).结论 脑内高表达的MRP1参与难治性颞叶癫痫的耐药机制,丙磺舒可以降低脑组织内MRP1的表达.     

难治性癫(癎)患者血清层粘连蛋白的表达

目的 探讨难治性癫(癎)患者的层粘连蛋白(1aminin)在血清的表达,并研究其发病机制.方法 2009-10~2010-12期间,我院诊治20例难治性癫(癎)患者,采用ELISA测定血清中层粘连蛋白的含量,同时正常对照者20例,也同样方法测定血清中层粘连蛋白含量.结果 ELISA结果显示层粘连蛋白含量难治性癫(癎)组...     

多药耐药蛋白及其在难治性癫痈中作用的研究进展

难治性癫痫的耐药性研究已取得了许多突破性进展。近年发现,难治性癫痫与多药物耐药蛋白存在着密切联系。文中介绍3种主要多药耐药蛋白（P-糖蛋白、多药耐药相关蛋白1、主穹窿蛋白）的结构和功能,并对其近年在难治性癫痫耐药中作用的研究进展作一综述。     

颞叶癫癎主穹窿蛋白表达及其作用研究

目的探讨主穹窿蛋白（major vault protein，MVP）在颞叶癫癎大鼠模型脑组织的表达及其与难治性癫癎耐药是否相关。方法用氯化锂-匹鲁卡品制作颞叶癫癎模型，并将它分为药物有效组和耐药组；用免疫组化和Westernblot法检测MVP表达。结果MVP主要表达在海马和皮质区的小胶质细胞，血管内皮细胞，血管周围的星形胶质细胞也有表达，神经元中少见表达；耐药组MVP表达较药物有效组和对照组明显增高，具有统计学意义（P〈0．05）。结论耐药大鼠模型中MVP过量表达，提示MVP可能与难治性癫癎的耐药性有关。     

难治性癫癎患者脑组织突触囊泡回收相关蛋白的表达

目的研究难治性癫患者脑组织内突触囊泡循环再生相关蛋白的表达,以探讨难治性癫的成因及其他可能的发病机制。方法用免疫组化、Western印迹法检测与突触囊泡循环再生密切相关的网格蛋白(clathrin)、突触囊泡膜蛋白Ⅰ(synaptotagminⅠ)在难治性癫患者脑部的表达,并与健康人群比较。结果免疫组化显示与突触囊泡循环再生密切相关的网格蛋白[在海马为(0·173±0·019),颞叶为(0·186±0·024)]、突触囊泡膜蛋白Ⅰ[在海马为(0·188±0·019),颞叶为(0·190±0·017)]在难治性癫患者脑部表达较健康人增强(P<0·05),Western印迹显示网格蛋白、突触囊泡膜蛋白Ⅰ在难治性癫组增加,电泳条带明显增宽,且免疫组化显示难治性癫患者脑组织中网格蛋白、突触囊泡膜蛋白Ⅰ表达随病程的延长而有增强的趋势。结论难治性癫患者脑组织内存在突触囊泡循环再生过程强化。     

奥卡西平对癫癎患儿外周血MDR1表达的影响

目的通过比较奥卡西平(oxcarbazepine,OXC)和卡马西平(carbamazepine,CBZ)对癫癎患儿外周血多药耐药基因1(MDR1)表达的影响,初步探讨长期应用OXC治疗癫癎对患儿外周血MDR1的诱导作用。方法 48例癫癎患儿分为2组,26例口服OXC,22例口服CBZ,治疗时间均超过12个月;25例无癫发作患儿为空白对照组。选择用药前、用药后6个月及12个月三个时间点,应用RT-PCR法测定患儿外周血MDR1-mRNA的表达。结果 OXC组和CBZ组外周血MDR1-mRNA表达在用药后6个月、12个月较对照组增高(P<0.01);OXC组和CBZ组患儿外周血MDR1-mRNA表达在用药后6个月及12个月较开始服药前均有增高(P<0.05);OXC组在用药6个月及12个月后外周血MDR1-mRNA表达和卡马西平组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论长期口服OXC和CBZ均会增加癫癎患儿外周血MDR1基因的表达。     

丙磺舒逆转多药耐药相关蛋白的表达在难治性癫痫治疗中的作用

耐药基因表达成为难治性癫痫重要原因的发现为难治性癫痫的治疗开辟了一条新途径,寻找耐药基因的逆转剂就成为实现这个目标的主要手段。近年来,数10种耐药基因的逆转剂在临床上作过探索,其中最为成熟的药物就是丙磺舒。本文就目前有关丙磺舒在癫痫中的研究进展作一文献复习。 1难治性癫痫中多药耐药相关蛋白的表达及对抗癫痫药物的影响上世纪70年代有学者提出多药耐药的概念。随后在动物和难治性癫痫患者中的研究发现多药耐药基因及其产物P-     

MCP-1在难治性癫(癎)患者脑组织中的表达

目的 了解难治性癫(癎)患者脑组织中单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)的表达,探索其在难治性癫(癎)发病机制中的作用.方法在基因芯片扫描获阳性结果基础上,用免疫组织化学方法 研究40例难治性癫(癎)患者脑组织中MCP-1的表达,并与对照组进行比较.结果 基因芯片扫描显示MCP-1 mRNA表达上调,免疫组化结果进一步证实MCP-1在难治性癫(癎)患者脑组织中的表达较对照组明显增多(P＜0.05).结论 MCP-1在难治性癫(癎)的发病机制中可能起着重要作用,阻断MCP-1有可能改变难治性癫(癎)的预后.     

左乙拉西坦添加治疗难治性癫癎的疗效和安全性分析

目的:探讨左乙拉西坦添加治疗难治性癫痫的疗效和安全性。方法:回顾性分析了35例左乙拉西坦添加治疗的难治性癫痫患者,随访3～18个月,观察其疗效及不良反应。结果:左乙拉西坦添加治疗难治性癫痫总有效率为48.6%,对部分性发作和全面性发作的疗效无显著差异。不良反应发生率为31.5%,无严重不良反应。结论:左乙拉西坦是一种安全有效的难治性癫痫治疗药物,可以用于难治性癫痫的添加治疗。     

难治性癫(癎)相关耐药蛋白在局灶性皮质发育不良脑组织中的表达

目的 通过对P-糖蛋白、多药耐药相关蛋白和肺耐药相关蛋白在难治性癫痫相关局灶性皮质发育不良脑组织中表达部位的初步研究,以及对其在不同程度病变脑组织中表达量的比较,进一步阐明难治性癫疴的耐药机制,为癫(癎)患者的临床合理用药提供理论依据.方法 选取16例难治性癫(癎)患者手术切除脑组织标本作为患者组(局灶性皮质发育不良Ⅰ型和Ⅱ型患者各8例),5例无癫(癎)发作病史的胶质瘤患者手术切除脑组织标本的非病灶区域作为对照组.应用Envision二步法进行免疫组织化学标记,观察3种耐药蛋白在脑组织中的表达部位和表达强度;应用Western blot法进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,对3种耐药蛋白在脑组织中的表达进行定量分析.结果 P-糖蛋白主要表达于毛细血管内皮细胞,多药耐药相关蛋白主要表达于脑组织内的神经元成分,肺耐药相关蛋白的表达则涌盖了毛细血管内皮细胞、气球细胞及病灶区域部分基质.3种耐药蛋白在局灶性皮质发育不良脑组织中的表达均显著高于对照组脑组织(P-糖蛋白:0.520±0.121,多药耐药蛋白:0.132±0.018,肺耐药相关蛋白:0.092 4-0.018,U=0.000,P<0.01),其中P-糖蛋白和肺耐药相关蛋白在局灶性皮质发育不良Ⅱ型患者的病灶区域(3.809±0.842、0.655±0.303)表达高于病灶周围区域(2.636 4±0.622、0.290±0.096,U=6.000、4.500,P<0.01).结论 P-糖蛋白、多药耐药相关蛋白和肺耐药相关蛋白在不同程度的局灶性皮质发育不良脑组织中具有不同的表达部位和表达量,提示其作用机制和作用强度有所差异.     

难治性癫痫大鼠脑内多药耐药相关蛋白1表达的研究

目的 研究杏仁核电刺激点燃的难治性癫痫大鼠脑内多药耐药相关蛋白1（multidrug resistant-associated protein 1 MRP1）表达的情况.方法 建立杏仁核电刺激点燃的难治性癫痫大鼠模型,用免疫组织化学及免疫蛋白印记（western blot）的方法,分析比较MRP1蛋白在癫痫模型组与正常对照组的表达.结果 药物难治性癫痫大鼠组脑内多药耐药相关蛋白的表达显著高于正常对照组（P〈0.01）.在癫痫大鼠脑内广泛分布的MRP1免疫阳性细胞主要为毛细血管内皮细胞和星形胶质细胞.结论 癫痫大鼠脑内高表达的MRP1参与了难治性癫痫的耐药机制.     

多药耐药相关蛋白1基因多态性及蛋白表达与癫痫患者耐药机制关系的研究

目的探讨多药耐药相关蛋白1 (MRP1)基因G128C (rs41395947)、C218T (rs41494447)、G2168A(rs4148356)、G3173A(rs41410450)多态性及MRP1蛋白水平与癫痫耐药的关系,进一步探究MRP1基因多态性更易导致癫痫患者对哪种抗癫痫药物(AED)耐药。方法对2017年11月至2018年6月就诊于包头医学院第一附属医院门诊、病房和包头中心医院癫痫门诊,且诊断符合2014年国际抗癫痫联盟关于癫痫的诊断标准,均经视频脑电图及头颅MRI证实的31例耐药性癫痫患者和67例药物敏感性癫痫患者进行调查问卷。采用DNA测序的方法分别检测MRP1基因,从而分析其多态性分布情况,采用酶联免疫吸附(ELISA)测定的方法分别检测两组人群中MRP1蛋白的浓度,采用化学发光法检测癫痫患者卡马西平、丙戊酸钠的血药浓度。结果经DNA测序发现,AED耐药组和AED敏感组癫痫患者MRP1基因中第128位和第3173位未出现基因突变,第218位、2168位中存在单核苷酸多态性。MRP1的C218 T(rs41494447)突变5例,其中AED耐药组4例,ADE敏感组1例,C218T(rs41494447)多态性在AED耐药组与AED敏感组中的分布差异无统计学意义(P 0. 05)。MRP1的G2168A(rs4148356)突变9例,其中AED耐药组6例,ADE敏感组3例,G2168 A (rs4148356)多态性在AED耐药组与AED敏感组中的分布差异有统计学意义(P 0. 05); MRP1的2168位GA基因型在AED耐药组67%高于AED敏感组33%。MRP1蛋白水平测定结果:AED耐药组高于AED敏感组,差异有统计学意义(P 0. 05)。MRP1的2168位GA基因型患者的卡马西平、丙戊酸钠血药浓度低于GG基因型患者,差异有统计学意义(P 0. 05)。比较MRP1的C218T(rs41494447)、G2168A(rs4148356)不同基因型的MRP1浓度,差异无统计学意义(P 0. 05)。结论MRP1的G2168A (rs4148356)多态性可能是癫痫患者发生AEDs耐药的风险位点。MRP1基因的G128 C (rs41395947)、C218 T (rs41494447)、G3173 A (rs41410450)三个位点可能不是癫痫患者发生AEDs耐药的风险位点。MRP1蛋白高表达可能是引起癫痫患者耐药的一个因素。癫痫患者中存在MRP1的G2168A单核苷酸多态性者更易对卡马西平、丙戊酸钠耐药。耐药性癫痫患者MRP1基因218位点及2168位点突变可能不是引起MRP1蛋白高表达的原因。     

难治性癫患者外周血中MDR1基因的表达及临床意义

目的研究难治性癫患者外周血中多药耐药1(MDR1)基因的表达以及抗癫药物和性发作在难治性癫多药耐药发生中的作用。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)半定量检测120例研究对象外周血中MDR1基因mRNA的表达。根据析因设计分性发作和抗癫药物两个因素,共分为A组(难治性癫组)、B组(癫治疗有效组)、C组(性发作未用药组)和D组(健康正常对照组),各30例。结果4组的外周血中MDR1基因的表达水平明显不同(F=4.456,P=0.005),其中性发作引起MDR1mRNA的表达明显增高(F=10.005,P=0.002),抗癫药物的作用则不明显(F=0.919,P=0.340),抗癫药物与性发作两者之间没有交互作用(F=2.445,P=0.121)。结论难治性癫患者外周血中MDR1基因mRNA的表达上调是性发作而非使用抗癫药物的结果,外周血中MDR1基因mRNA表达水平的监测可以作为评价癫耐药的一项指标。     

难治性癫癎患者脑组织中5种耐药基因产物的同步表达及临床意义

目的　观察难治性癫患者脑组织中 5种耐药基因产物的同步表达 ,探索其临床意义。方法　 17例难治性癫患者分为长 (≥ 10年 )、短病程 (<10年 )两组 ,测定两组患者术后脑组织中P 糖蛋白 (Pgp)、多药耐药相关蛋白 (MRP)、谷胱甘肽硫转移酶 π(GST π)、肺耐药相关蛋白 (LRP)及拓扑异构酶Ⅱ (Topo Ⅱ )的表达 ,并与对照组比较。结果　短病程组患者胶质细胞Pgp表达 (M =4 0 )较长病程组 (M =0 0 )、对照组 (M =0 0 )增强 ,长、短病程组神经元Pgp表达 (M值均为 3 0 )较对照组 (M =0 0 )增强 ;神经元MRP、LRP表达在长病程组较短病程组增多 ,短病程组较对照组增多 ;GST π在神经元的表达长病程组 (M =6 5 )较短病程组 (M =2 0 )、对照组 (M =0 0 )增强 ;长、短病程组神经元Topo Ⅱ表达 (M值分别为 5 0、4 0 )较对照组 (M =0 0 )增强 ,差异均具有显著性意义 (P<0 0 1)。结论　Pgp、MRP、GST π、LRP及Topo Ⅱ均参与难治性癫耐药的形成。在病程早期 ,耐药机制以Pgp为主 ,并有LRP、MRP参加 ;在后期 ,Pgp作用减弱 ,LRP、MRP的作用进一步增强 ,同时GST π参与后期耐药的形成 ;TopoⅡ可能与难治性癫形成有关 ,具体机制尚待进一步研究。     

难治性癫(癎)患者颞叶GFAP表达的变化

目的 观察难治性癫(癎)患者手术切除的颞叶脑组织中GFAP表达的变化,以探讨颞叶癫(癎)的发病机制.方法 以12例难治性癫(癎)患者为实验组,2例意外死亡的健康人为对照组,采用免疫组织化学方法观察2组颞叶脑组织中GFAP表达的变化.结果 与对照组相比,实验组颞叶GFAP的表达显著升高(P＜0.05).结论 反应性胶质细胞增生参与了癫(癎)发生的病理过程,GFAP的表达上调可能是难治性癫(癎)发病的分子学机制之一.