银杏内酯B对谷氨酸诱发原代培养皮层神经元损伤的实验研究

目的观察银杏内酯B（Ginkgobalide B,GB）对谷氨酸致原代培养皮层神经元损伤的保护作用。方法采用体外培养皮层神经元的方法,利用终浓度为0．5mmol·L^-1的谷氨酸造成皮层神经元损伤,通过测定细胞存活率、细胞活性、乳酸脱氢酶（LDH）漏出率、丙二醛（MDA）含量,超氧化物歧化酶（SOD）活性,研究GB对谷氨酸造成神经元损伤的保护作用机制。结果GB10^-5 mol·L^-1可抑制谷氨酸所致LDH漏出率的升高。GB10^-4、10^-5 mol·L^-1可提高神经细胞活性;扭转谷氨酸致神经细胞存活率的下降;升高SOD酶的活性,抑制谷氨酸所致MDA含量的升高。结论提示GB对谷氨酸所致原代皮层神经元的损伤具有保护作用。     

银杏苦内酯B的临床和药理学研究进展

银杏苦内酯为“国宝”银杏叶提取物中的萜类化合物,分为银杏苦内酯A、B、C、M、J和白果内酯,编号分别为BN52020、BN52021、BN52022、BN52023、BN5202A,共同约占银杳提取物的6％。银杏提取物中仅含有微量银杏苦内酯B（BN52021）,但近年来国内外的研究显示该化合物可以抑制血小板聚集、抗炎、抗休克、以及保护心脑血管、治疗急性胰腺炎等。笔者对银杏苦内酯B的结构、理化性质、作用机制、临床和药理作用进行了概述。     

缺氧和机械损伤诱导大鼠神经细胞凋亡的体外研究

目的 探讨神经细胞调亡与缺氧和机械损伤的关系。方法 体外原代培养大鼠神经元细胞,经低氧或机械损伤处理后,应用光镜、电镜、末端脱氧核苷酸介导的Ｘ－ｄＵＴＰ缺口末端标记（ＴｄＴ－ｍｅｄｉａｔｅｄ ｄＵＴＰ ｎｅｉｋ ｅｎｄ ｌａｂｅｌｉｎｇ,ＴＵＮＥＬ）法、流式细胞仪、ＤＮＡ凝胶电泳及免疫组化分析细胞凋亡及其相关基因表达的改变。结果 经低氧或机械损伤后神经细胞出现恨的形态改变;其ＤＮＡ呈现“梯状”断裂     

银杏内酯B注射液细菌内毒素检查法的研究

目的探讨银杏内酯B注射液的细菌内毒素检查方法,并与热原检查法比较。方法参照中国药典2005年版细菌内毒素检查法干扰试验的基本原理和检查方法。结果将银杏内酯B注射液稀释成0.2mg·ml-1溶液(100倍稀释),可消除干扰作用。结论本方法简便、快速、准确,可用于银杏内酯B注射液的细菌内毒素检查。     

高原康胶囊预防急性高原病的抗氧化及抗缺氧效应研究

目的：通过实验了解高原康胶囊在急性高原病（Acute high altitude diseaes,AHAD）的预防过程中的抗氧化及抗缺氧效应。方法：将80名由平原乘飞机初次进入高原的战士随机分为实验组40名和对照组40名,实验组于平原登机前开始给予口服高原康胶囊,连服3日,对照组给予安慰剂,并对两组进入高原前后的血清一氧化氮（NO）、血浆内皮素（ET）、血氧饱和度（SaO2）、超氧化物歧化酶（SOD）活力、过氧化氢酶（CAT）活力、血清过氧化氢（H2O2）、乳酸（LD）及两组7d内AHAD的发病情况进行比较。结果：对照组进入高原后与平原比较SOD及CAT活力、血清H2O2、LD及血浆ET均显著升高,血清NO、SaO2显著降低（P〈0．001）;实验组除SaO2显著降低（P〈0．01）、LD显著升高（P〈0．05）外其余指标则无显著变化;进入高原后两组比较实验组SOD及CAT活力、血清H2O2、LD及血浆ET含量及AHAD发病率均显著降低对照组,血清N0及SaO2显著高于对照组（其中SOD、H2O2、LD、NO P〈0．05,CAT、ET、SaO2 P〈0．01,AHAD发病率P〈0．001）。结论：高原康胶囊具有显著的抗氧化及抗缺氧效应,能有效地预防急进高原者AHAD的发生。     

蒲黄提取物对汞损伤SD大鼠原代培养神经细胞抗氧化能力的影响

目的观察氯化汞损伤神经细胞后抗氧化指标的变化及蒲黄提取物对受损神经细胞的修复作用。方法大鼠神经细胞用浓度为0.2mmol·L-1氯化汞损伤24h,检测细胞中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量。结果损伤后的大鼠神经细胞中GSH-Px和SOD活性显著下降,MDA含量显著上升。神经细胞突触显著减少,胞间质脱落,变形。经蒲黄水提物和醇提物共同培养后,大鼠神经细胞中GSH-Px活性和SOD活性上升,MDA含量下降。神经细胞突触显著增加,胞间质完好,形态趋于正常。结论蒲黄提取物无论是水提物还是醇提物均可显著提高汞损伤神经细胞的抗氧化能力,能促进损伤细胞的恢复,对神经细胞具有保护作用。     

银杏内酯 B 对急进高原致大鼠空间记忆障碍的保护作用

目的探索银杏内酯B对大鼠急性低压低氧所致大脑空间记忆形成与保持能力的影响。方法80只SD大鼠随机分为5组：平原组（对照组,n=16）、急进海拔6000m组（6000m组,n=16）、急进海拔6000In不同剂量银杏内酯B给药组（6000m＋3、6、12mg·kg^-1组,每组n=16）。实验分为两部分,实验Ⅰ：大鼠急进高原损伤在Morris水迷宫定位导航实验与空间探索实验之间,实验Ⅱ：大鼠急进高原损伤之后进行Morris水迷宫定位导航实验和空间探索实验。两部分实验使用不同的大鼠,统计分析各实验组大鼠逃避潜伏期、游泳总路程、60S内穿越平台次数和目标象限滞留时间。结果实验Ⅰ中,预先给予6、12mg·kg^-1银杏内酯B组大鼠较6000m组60s内穿越平台次数显著增多（P〈0．05）,目标象限滞留时间显著增长（P〈0．05、P〈0．01）,而给予3mg·kg^-1剂量组较6000m组无显著性差异（P〉0．05）。实验Ⅱ中,预先给予6、12mg·kg^-1银杏内酯B组大鼠较6000m组第7天平均逃避潜伏期显著缩短（P〈0．05、P〈0．01）,平均游泳总路程显著缩短（P〈0．05、P〈0．01）,60s内穿越平台次数显著增多（P〈0．05、P〈0．01）,目标象限滞留时间显著增长（P〈0．05）,而给予3mg·kg^-1剂量组较6000m组无显著性差异（P〉0．05）。结论银杏内酯B可有效改善急进高原大鼠空间记忆的形成与保持能力。     

缺氧预激及药物对心脏缺氧应激耐受力的影响

缺氧预激和自由基清除剂对心脏氧应激耐受力的影响被研究，结果表明：缺氧预激显著增强了心脏的耐受力，这可能与缺氧预激动员了心脏内在的自由基清除机制有关。外源性自由基清除剂ＳＯＤ、ＶｉｔＥ，ＶｉｔＣ也有同样的增强心脏耐受缺氧应激的作用。     

富勒烯衍生物对自由基的清除作用及其生物学效应

富勒烯及其衍生物因其独特的化学结构和理化性质,尤其是它们强大的清除自由基的能力,引起了生物医学界研究者的极大关注,开展了大量生物学效应研究,近年来取得较大进展.在此重点探讨多种富勒烯衍生物的生物学效应,特别是对自由基清除效应的应用意义及应用前景.     

人参皂甙的抗鼠脑缺氧损伤作用

目的　用离体海马脑片缺氧实验 ,结合电生理学和超微结构两方面的变化 ,研究人参皂甙的抗脑缺氧作用。方法　 (1)观察大鼠离体海马脑片缺氧条件下顺向群峰电位 (orthodromic populationspikes,OPS)的变化及人参茎叶总甙对它的影响 ;(2 )同时观察缺氧后海马脑片 CA1区锥体细胞层超微结构变化及人参茎叶总甙对它的影响。结果　 (1)在对照组海马脑片 ,缺氧时缺氧损伤电位出现率为 71.4% ,缺氧后 OPS恢复率为 14.2 % ,恢复程度为 (2 4.8± 31.9) % ;而使用人参皂甙的海马脑片在缺氧前即见OPS减小 ,缺氧时未出现缺氧损伤电位 (hypoxic injury potential,HIP) ,缺氧后 OPS恢复率和恢复程度分别为 10 0 %及 (10 9.5± 37.3) %。与对照组比较均有显著性差异。 (2 )电镜观察显示 ,缺氧组海马脑片的神经细胞呈变性至坏死等不同程度的损伤 ,而人参皂甙组脑片神经细胞与正常细胞相似 ,损伤较轻 ,突触结构清晰 ,兴奋性神经递质小泡无明显耗竭。结论　 (1)人参皂甙有明显的抗缺氧脑损伤作用 ;(2 )人参皂甙抗脑缺氧作用机制可能是 :降低神经元兴奋性 ,减少能耗 ,并保护线粒体 ,以维持胞内 ATP水平 ;抑制兴奋性神经递质释放 ,减轻其兴奋毒性。     

高压氧对大鼠脊髓损伤后脂质氧化过程的影响

目的观察大鼠脊髓损伤后高压氧（HBO）对脊髓损伤（SCI）又氧自由基引起的脂质氧化过程和功能的影响,探讨高压氧对脊髓继发性损伤的保护作用。方法SD大鼠30只随机分为3组,一组椎板切除不损伤脊髓,另两组采用改良Allen法制备大鼠SCI模型,一组术后两小时内进行高压氧治疗,治疗时间共90分钟,1天1次,连续进行5天;另一组不进行任何处理。分别于术后第2、5天尾静脉取血,测定血清中超氧化物歧化酶（SOD）、脂质过氧化产物丙二醛（MDA）。结果高压氧组与非高压氧组相比较,高压氧组血清中SOD升高（P〈0.01）,MDA降低（P〈0.01）,与假手术组相比,SOD和MDA变化不明显,无统计学意义（P〉0.01）。结论高压氧具有抗氧化、清除自由基功能,能有效抑制SCI受损引起脂质过氧化反应,对SCI具有保护和治疗作用,并能促进神经功能的恢复。     

MRI demonstration of cortical laminar necrosis and delayed white matter injury in anoxic encephalopathy

Summary We performed serial radiological examinations on a patient with anoxic encephalopathy. In the early term after the anoxic insult, T1-weighted MRI revealed high signal intensity areas distributed laminarly in the cerebral cortex and diffusely in the putamen, which were thought to refect the cortical necrosis and necrosis in the putamen. Single photon emission computed tomography using I-123 isopropylamphetamine showed persistent hypoperfusion in the arterial watershed zones. T2-weighted MRI performed several months after the anoxic episode revealed diffuse high-intensity lesions in the arterial water-shed zones. These delayed-onset white matter lesions continued to extend over several months.     

低剂量辐射兴奋效应的自由基机制探讨

目的 研究低剂量照射(6 cGy)的骨髓细胞悬液,离心后得到的上层相(刺激液)对正常或辐射损伤细胞能否产生低剂量辐射兴奋效应,并探讨其机制。方法 刺激液与受0、2或5 Gy照射的骨髓细胞悬液进行混合培养,使用MTT比色法检测各组细胞的增殖能力,采用细胞色素c还原法测定细胞中O₂^-的浓度。最后,通过加入二亚苯基碘和肉豆蔻醋酸酯实验性、特异地降低或提高细胞中O₂^-的浓度,观察此种变化对刺激液产生上述作用的影响。结果 正常和受大剂量照射的骨髓细胞与刺激液共培养后,其增殖能力明显高于对照组。减少细胞中O₂^-的浓度可降低辐射损伤细胞的增殖活力,而增加细胞中O₂^-的浓度可提高辐射损伤细胞的增殖能力。结论 上述低剂量辐射兴奋效应发生的机制可能与细胞中O₂^-浓度的变化有关。     

神经元损伤修复机制研究的离体模型--体外培养原代神经元损伤模型的建立及损伤后c-Fos蛋白表达

目的：建立一个模拟脊髓全横断损伤后脊髓组分——原代培养的脊髓神经元损伤的模型。方法：取Wistar大鼠(孕14d)脊髓，培养10～12d后，采用所设计的标准模板，直视下进行损伤。观察损伤前后不同时间神经元的形态及即刻早期基因c-fos的表达变化。结果：在损伤8～12h后，损伤两侧存活的神经元突起便开始朝着损伤部位生长，随着时间的延长，神经元突起甚至可跨越损伤处而延伸至对侧。c-fos基因在损伤后10min即有表达，2h达到最高峰，随后逐渐下降。结论：此模型可用于模拟体外培养的脊髓神经元受到机械损伤以及观察神经元损伤后进行修复的一些分子事件，简便而可靠，实用性较强。     

海水浸泡诱导小鼠肺组织氧自由基的改变及其防护的研究

目的：观察海水浸泡条件下，小鼠肺组织氧自由基的改变及超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）的防护作用。方法：选用１２０只小鼠，随机分组，检测其ＳＯＤ活性及丙二醛（ＭＤＡ）含量的变化。结果：除未注射ＳＯＤ的小鼠，在海水浸泡２０分钟组ＳＯＤ活性稍高且无统计学意义外，其余各组ＳＯＤ活性均较相应对照组低，并均有显著性差异（Ｐ＜０．０１），而ＭＤＡ含量变化则相反。注射ＳＯＤ小鼠浸泡不同时间后，其各时间点ＳＯＤ活性均较未注射ＳＯＤ小鼠者高，而ＭＤＡ含量变化则相反并与注射ＳＯＤ的剂量有关。结论：海水浸泡可诱导小鼠肺组织氧自由基的改变，并有可能引起肺组织损伤，而注射ＳＯＤ对小鼠肺组织氧自由基的改变有防护作用。因此，为加强对海水浸泡伤害的防护，使用ＳＯＤ制剂值得推荐。     

三康胶囊对高原人体运动自由基代谢和血乳酸的影响

目的：探讨三康胶囊对高原人体运动自由基代谢和血乳酸（BLA）的影响。方法：对进驻海拔3700m高原1年的10名健康青年在服药前和服药第15天分别采用功率自行车进行渐增负荷运动，测定血清中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）和BLA含量。结果：服药后较服药前运动后SOD增高，MDA、BLA降低，有非常显著差异（P〈0．01）。结论：三康胶囊能明显抑制高原运动造成的自由基损伤，具有提高运动能力，延缓运动性疲劳发生的作用，是一种很有前景的抗缺氧、抗疲劳、抗幅射纯中药制剂。     

白藜芦醇对IEC-6细胞辐射损伤的防护作用及机制研究

目的 探讨白藜芦醇对大鼠小肠隐窝细胞（IEC-6）辐射损伤的防护作用及机制。方法 采用不同剂量（2、4、6、8、10 Gy）的6 MeV高能X射线对大鼠IEC-6细胞进行照射,应用克隆形成实验检测细胞增殖,建立IEC-6细胞辐射损伤模型。应用CCK-8检测不同浓度白藜芦醇（0.1、0.5、1、5、10、20、40 μmol/L）对IEC-6细胞活力的影响,以及不同浓度白藜芦醇（0.1、1、2、4、6、8 μmol/L）对照射后细胞活力的影响。将细胞分为对照组、模型组（10 Gy）和白藜芦醇组（10 Gy,1 μmol/L）,对照组接受伪照射并予等量载体孵育;模型组接受6 MeV高能X射线照射,予等量载体孵育;白藜芦醇组在照射前2 h予相应浓度的白藜芦醇预处理,接受与模型组等剂量的高能X射线照射。采用 Annexin V-PI染色检测细胞凋亡;DCFH-DA荧光探针检测活性氧;β-Gal染色检测细胞衰老;Real-time qPCR、Western Blot检测p16、p21、CAT和SOD2的mRNA水平及相应蛋白质表达情况。多组间数据比较采用单因素方差分析,应用Tukey’s HSD法进行事后两两比较。结果 4~10 Gy电离辐射明显抑制IEC-6细胞增殖,呈剂量依赖性（均P<0.05）;浓度为0.1、0.5、1、5 μmol/L的白藜芦醇对细胞活力无明显影响（均P>0.05）;浓度为0.1 μmol/L、1 μmol/L的白藜芦醇可增加电离辐射后细胞活力（均P<0.05）。白藜芦醇组细胞凋亡率、DCFH-DA荧光强度、β-Gal 阳性率均低于模型组（均P<0.05）;白藜芦醇组细胞中CAT、SOD2的mRNA水平及相应蛋白质表达较模型组升高（均P<0.05）,但p16、 p21的mRNA水平及相应蛋白质表达较模型组降低（均P<0.05）。结论 白藜芦醇可以降低活性氧水平,抑制细胞衰老和凋亡,从而减轻IEC-6细胞辐射损伤。     

氧烛对海拔5 200m高原人体自由基代谢及血乳酸的影响

目的：研究在海拔5200m高原利用氧烛建立富氧室对人体自由基代谢及血乳酸的影响。方法：8名受试者在富氧（氧浓度为24%～25%）前后分别检测血中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、乳酸（BLA）、一氧化氮（NO）及其合酶（NOS）含量。结果：富氧较未富氧SOD、NO、NOS增加,MDA、BLA降低,差异有显著性意义（P〈0.05或P〈0.01）。结论：富氧对低氧造成的自由基损伤有明显的抑制作用,增强机体抗氧化酶活性和乳酸清除能力。氧烛在高原供氧有着广泛的社会效益和军事用途。     

高压氧预处理对脊髓神经元氧化损伤中超氧化物歧化酶和血红素氧合酶-1的影响

目的 研究高压氧(HBO)预处理诱导脊髓神经元氧化耐受的机制.方法 取胚胎小鼠脊髓行原代神经元培养,分为正常对照组和HBO预处理组(HBO组).利用Westem Blot、RT-PCR等方法,观察HBO预处理对脊髓神经元抗氧化酶水平的影响.结果 HBO预处理前后超氧化物歧化酶(SOD)表达无统计学差异,血红素氧合酶(HO-1)在处理后表达增多.行RT-PCR检测HBO处理前后HO-1 mRAN水平,发现在预处理后4 h开始明显增多,处理后8 h表达达到高峰,直至处理后24 h其表达量仍比预处理前高.结论 HBO预处理对脊髓神经元氧化损伤的保护作用可能与诱导HO-1表达有关.