改良聚羟乙基丙烯酸甲酯-聚甲基丙烯酸甲酯一体化人工角膜植入兔与猴角膜的研究

目的 探讨聚羟乙基丙烯酸甲酯（PHEMA）海绵支架材料与角膜组织的生物相容性,评价改良PHEMA-聚甲基丙烯酸甲酯（PMMA）一体化人工角膜植入兔与猴角膜的初步临床效果。方法通过两个阶段化学聚合结合车床机械切削合成改良的一体化人工角膜。实验分为两个部分完成。第1部分（A组）：将PHEMA海绵边裙材料植入10只正常兔角膜板层间,术后2、4周及2、3、4个月分别行组织病理、免疫组织化学及电镜检查,观察海绵边裙与角膜组织的生物学愈合情况。第2部分（B组）：8只兔眼和2只猴眼角膜囊袋内Ⅰ期植入一体化人工角膜,术后临床观察材料与组织的愈合情况;术后3个月时行Ⅱ期手术切除术眼角膜中央前板层角膜组织,暴露人工角膜中央镜柱,术后随访时间3—6个月,初步观察临床治疗效果。结果（1）A组：10只兔眼随访期间未见并发症。组织病理学显示,PHEMA海绵边裙材料植入术后2周始有成纤维细胞长入,术后2—3个月时多量成纤维细胞长入并伴有新生血管生长;免疫组织化学显示,海绵孔隙中长入的细胞和角膜基质细胞均对波形蛋白免疫反应呈阳性;电镜下可见,成纤维细胞在海绵材料间隙中生长,细胞生长状态良好,并分泌胶原和细胞外基质。（2）B组：6只兔眼的一体化人工角膜均在位,另2只兔眼Ⅰ期术后有前板层角膜基质融解。2只猴眼于Ⅰ期和Ⅱ期术后均未见明显并发症。结论PHEMA海绵能与角膜组织良好的生物学愈合;改良PHEMA—PMMA一体化人工角膜植入术后能获得相对稳定的治疗效果。（中华眼科杂志．2007,43：602-607）     

AlphaCor人工角膜移植治疗兔角膜碱烧伤

目的评价AlphaCor人工角膜移植对兔角膜碱烧伤的治疗效果。方法用1mol/LNaOH烧伤兔左眼建立角膜碱烧伤模型,选择角膜白斑、角膜缘新生血管〉2个象限的5只兔眼行人工角膜移植术。AlphaCor人工角膜移植手术分2期进行：Ⅰ期手术,将AlphaCor人工角膜植入角膜板层间;Ⅱ期手术,暴露人工角膜光学区。术后观察人工角膜、受体角膜及眼前节情况。结果碱烧伤后2～6周形成带新生血管的角膜白斑。Ⅰ期术后5例人工角膜均在位,2例人工角膜出现白色沉积物,其中1例并发角膜浅层基质溶解,另3例无并发症发生。Ⅱ期手术中麻醉死亡1例,其余术后人工角膜均在位,1例术后6周发生角膜感染、穿孔,另3例术后4～6周发生人工角膜前膜增生,未见其他并发症发生。结论 AlphaCor人工角膜移植治疗兔角膜碱烧伤具有良好的生物相容性,效果较好。     

改良PHEMA-PMMA一体化人工角膜治疗兔角膜碱烧伤的实验研究

目的评价改良聚羟乙基丙烯酸甲酯（PHEMA）-聚甲基丙烯酸甲酯（PMMA）一体化人工角膜时兔角膜碱烧伤的治疗效果。方法通过两阶段化学聚合结合车床机械切削合成改良的一体化人工角膜。将PHEMA海绵边裙材料植入10只正常兔角膜板层间，另10只碱烧伤兔眼角膜囊袋内1期植入一体化PHEMA—PMMA人工角膜，术后用组织病理、免疫组织化学和电镜检查观察海绵边裙与角膜组织的生物学愈合情况。术后2个月行II期手术．术后随访观察3～6个月。结果接受板层间植入术的10只兔角膜未见任何并发症。术后2周成纤维细胞长入PHEMA海绵，术后2～3个月多量细胞长入伴有新生血管；海绵孔隙中生长细胞和角膜基质细胞波形蛋白（Vim）免疫反应阳性；电镜下，细胞在海绵材料间隙中生长状态良好，并分泌胶原和细胞外基质。接受人工角膜移植术的10只碱烧伤兔眼中，1眼1期术中角膜穿孔而被排除，另9眼Ⅱ期术后，3眼2周内人工角膜镜柱偏位，6眼观察期间人工角膜在位。结论PHEMA海绵能够与角膜组织达到良好的生物学愈合；人工角膜的片型和整体强度有待进一步改良。     

人工角膜在治疗严重化学烧伤眼中的研究

目的探讨严重化学烧伤性角膜混浊患者行人工角膜植入术的临床效果和并发症等。方法选择2000年10月至2006年3月于解放军总医院眼科就治的28例因严重化学烧伤导致双眼盲目患者的单侧眼,术前视力14只眼为手动,14只眼为光感,并且角膜混浊病变无法采用常规角膜移植手术达到复明目的。其中严重碱烧伤20只眼,严重酸烧伤8只眼。人工角膜植入术分两期：Ⅰ期手术将人工角膜支架植入角膜层间,所选患眼行角膜表面或层间加固性手术。3个月后行Ⅱ期手术,植入带螺纹的人工角膜光学部。常规行晶状体、部分虹膜及前部玻璃体切除术,将外1／3上、下睑缘做永久性缝合。对完全睑球粘连者,用上、下睑皮肤覆盖角膜表面,仅暴露人工角膜光学部。结果Ⅱ期术后观察3—65个月,平均22．6个月,28只眼中有21只眼裸眼视力≥0．05（75％）,其中2只眼裸眼视力≥1．0。经镜片矫正后,11只眼（39％）视力为0．6—1．2;1只眼（4％）0．3～0．5;5只眼（18％）0．05—0．25;3只眼（11％）手动;3只眼（11％）光感;1只眼（4％）无光感。手术并发症包括分离角膜板层时穿人前房,晶状体皮质残留,继发性青光眼,镜柱前表面组织或上皮增生遮盖,镜柱后壁沉着物,角膜溶解,眼内炎,视网膜脱离。结论人工角膜是目前对严重角膜瘢痕、血管化的双眼化学烧伤患者有效的复明手段。该术式结合自体结膜遮盖、自体骨膜移植加固及睑裂部分缝合等,有利于人工角膜的长期存留。术后定期复查、积极预防并发症是保持视力的有效手段。     

改良聚羟乙基丙烯酸甲酯-聚甲基丙烯酸甲酯一体化人工角膜植入兔与猴角膜的实验研究

目的：探讨聚羟乙基丙烯酸甲酯（PHEMA）海绵支架材料与角膜组织的生物相容性,评价改良聚羟乙基丙烯酸甲酯（PHEMA）一聚甲基丙烯酸甲酯（PMMA）一体化人工角膜植入龟与猴角膜的初步临床效果。方法：通过两个阶段化学聚合结合车床机械切削合成改良的一体化人工角膜。实验分为两个部分完成。第1部分（A组）：将PHEMA海绵边裙材料植入10只正常兔角膜板层间,术后2,4wk及2,3,4mo分别行组织病理、免疫组织化学及电镜检查,观察海绵边裙与角膜组织的生物学愈合情况。第2部分（B组）：8只兔眼和2只猴眼角膜囊袋内I期植入一体化人工角膜,术后临床观察材料与组织的愈合情况;术后3mo时行Ⅱ期手术切除术眼角膜中央前板层角膜组织,暴露人工角膜中央镜柱,术后随访时间3～6mo,初步观察临床治疗效果。结果：1）A组接受角膜板层间边裙植入术的10只兔眼,随访期间未见并发症：组织病理学显示,PHEMA海绵边裙材料植入术后2wk始有成纤维细胞长入,术后2～3mo时多量成纤维细胞长入并伴有新生血管生长;免疫组织化学显示,海绵孔隙中长入的细胞和角膜基质细胞均对波形蛋白免疫反应呈阳性;电镜下可见,成纤维细胞在海绵材料间隙中生长,细胞生长状态良好,并分泌胶原和细胞外基质。2）B组接受一体化人工角膜移植术的,6只兔眼一体化人工角膜均在位,男2只兔眼I期术后有前板层角膜基质融解。接受一体化人工角膜移植术的2只猴眼,I期和Ⅱ期术后均未见明显并发症。结论：PHEMA海绵能与角膜组织良好的生物学愈合;改良PHEMA-PMMA一体化人工角膜植入术后能获得相对稳定的治疗效果。     

复合型人工角膜植入治疗重度角膜盲及并发症处理

目的 探讨钛支架复合型人工角膜植入治疗重度角膜盲的临床价值,以及并发症的处理.方法 回顾性系统病例研究.2002年3月至2005年6月期间中山大学中山眼科中心共完成永久性人工角膜植入9例(单侧眼9只),均为男性,年龄28～52岁.所有患者均为双眼损伤,受伤时间为1.5～5.0年.其中碱烧伤6只眼,爆炸伤3只眼,术前视力均为光感,其中2例光定位不准;均为多次角膜移植以及眼表重建手术失败的难治性重度角膜盲患者.手术分两阶段:一期手术显微镜下行钛支架复合型人工角膜植入联合自体耳软骨移植加固,二期行人工角膜前膜剪开,建立镜柱光学通路.术后评价视力恢复情况,分析并发症的发生原因,探讨相应的处理对策.结果 患者随诊时间1～3年.术后7只眼裸眼视力≥0.1,其中2只眼经镜片矫正后达到0.6.术前光定位不准的2例患者术后视力为0.02和0.04.术后并发症的发生情况为复发性人工角膜前膜5例,进行前膜切除,其中1例联合施行自体唇黏膜移植;角膜局限性融解1例,进行脱细胞真皮加固;人工角膜后膜1例,显微镜下施行后膜钩除术.以上并发症经相应处理均得到控制.随访期内所有人工角膜均保持原位,未发生人工角膜排出、房水渗漏.结论 人工角膜移植是使严重角膜盲患者复明的有效手段,联合自体耳软骨加固可减少并发症的发生,提高人工角膜植入的生物相容性.(中华眼科杂志,2009,45:104-109)     

改良聚羟乙基丙烯酸甲酯-聚甲基丙烯酸甲酯一体化人工角膜植入兔与猴角膜的实验研究(英文)

目的:探讨聚羟乙基丙烯酸甲酯(PHEMA)海绵支架材料与角膜组织的生物相容性,评价改良聚羟乙基丙烯酸甲酯(PHEMA)—聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)一体化人工角膜植入兔与猴角膜的初步临床效果。方法:通过两个阶段化学聚合结合车床机械切削合成改良的一体化人工角膜。实验分为两个部分完成。第1部分(A组):将PHEMA海绵边裙材料植入10只正常兔角膜板层间,术后2,4wk及2,3,4mo分别行组织病理、免疫组织化学及电镜检查,观察海绵边裙与角膜组织的生物学愈合情况。第2部分(B组):8只兔眼和2只猴眼角膜囊袋内I期植入一体化人工角膜,术后临床观察材料与组织的愈合情况;术后3mo时行Ⅱ期手术切除术眼角膜中央前板层角膜组织,暴露人工角膜中央镜柱,术后随访时间3 ～6mo,初步观察临床治疗效果。结果:1)A组接受角膜板层间边裙植入术的10只兔眼,随访期间未见并发症:组织病理学显示,PHEMA海绵边裙材料植入术后2wk始有成纤维细胞长入,术后2 ～3mo时多量成纤维细胞长入并伴有新生血管生长;免疫组织化学显示,海绵孔隙中长入的细胞和角膜基质细胞均对波形蛋白免疫反应呈阳性;电镜下可见,成纤维细胞在海绵材料间隙中生长,细胞生长状态良好,并分泌胶原和细胞外基质。2)B组接受一体化人工角膜移植术的,6只兔眼一体化人工角膜均在位,另2只兔眼I期术后有前板层角膜基质融解。接受一体化人工角膜移植术的2只猴眼,I期和Ⅱ期术后均未见明显并发症。结论:PHEMA海绵能与角膜组织良好的生物学愈合;改良PHEMA-PMMA一体化人工角膜植入术后能获得相对稳定的治疗效果。     

改良钛支架人工角膜生物相容性的实验研究

目的 探讨改良钛支架人工角膜的生物相容性和角膜生物愈合的过程.方法 实验研究.设计与制备改良钛支架人工角膜,钛支架采用喷砂、羟基磷灰石涂层处理,镜柱用聚甲基丙烯酸甲酯为原料按设计好的图纸手工磨制.将18只正常新西兰白兔采用单纯随机抽样方法分为A、B、C组,每组6只.18只新西兰白兔角膜碱烧伤模型采用单纯随机抽样方法分为E、F、G组,每组6只.其中A、E组和B、F组兔右眼角膜基质层内分别植入改良支架和对照支架(无涂层),C、G组仅做角膜板层切口;另取4只(分别为2只正常动物模型、2只碱烧伤模型)即D、H组分别作为空白对照;术后1、3个月取材,取出支架做拉出实验和扫描电镜检查;角膜组织行苏木素-伊红(HE)染色、透射电镜检查.另取8只兔(其中2只碱烧伤模型)植入改良支架,3个月后植入镜柱.两组剪切力比较采用t检验.结果 改良后的人工角膜支架表面呈鳞片状微孔结构,植入兔角膜反应轻,术后1、3个月取材,组织学检查见A、E组支架与角膜界面处成纤维细胞数多于B、F组支架.3个月时拉出试验测定剪切力A与B组比较、E与F组比较差异均有统计学意义(t=3.297,P<0.05;t=4.237,P<0.05),改良支架植入角膜3个月后的剪切力较对照支架强.扫描电镜检查显示A、E组支架表面被细胞外基质包裹,而B、F组支架细胞附着量明显少.透射电镜检查显示支架周围的胶原纤维束紊乱,A、E组支架与角膜的结合方式垂直或成一定角度,结合更牢固.支架植入后碱烧伤模型组角膜基质较正常兔角膜组愈合延迟.结论 改良钛支架人工角膜促进了材料与组织界面愈合,无论正常还是碱烧伤动物体内,改良钛支架人工角膜提高了材料的生物相容性.     

碱烧伤人角膜组织新生淋巴管的检测

目的 探讨人角膜碱烧伤后新生淋巴管的生长情况及其影响因素.方法 回顾性系列病例研究.分析2005年1至12月期间在中山大学中山眼科中心因角膜碱烧伤住院手术治疗的22例(22只眼)患者.记录患眼的烧伤时间(IT)和损伤等级(ID),并测量炎性反应指数(II)和角膜新生血管的相对面积(BVA);应用双重酶组织化学、免疫组织化学染色及透射电镜检测角膜标本的新生淋巴管(LVC)和血管(BVC);采用苏木素-伊红染色检测多形核白细胞(PMN)浸润情况.结果 采用配对Student t检验、Pearson相关检验及Stepwise回归进行统计学分析.结果 22例患者观测结果 IT为(57.62±31.72)个月、ID为(12.00±2.76)分、II为(2.32±2.63)分、BVA为29.79%±18.61%、BVC为(14.45±9.29)个、LVC为(2.73±4.57)个、PMN为(13.45±13.09)个,其中7例(占32%,IT<64个月)同时存在角膜新生淋巴管(8.6±3.8)个和血管(22.3±11.1)个,LVC总数为60个,占发生新生淋巴管的角膜中总管腔数(BVC和LVC,378个)的16%.LVC与IT、ID、BVA、PMN、II的相关系数分别为-0.673、0.604、0.755、0.806、0.873,均P<0.05;进一步回顾分析得出LVC近似等于II和BVA分别和特定的常数相乘后取和所得的淋巴管指数(LI).透射电镜从微观上证实了碱烧伤人角膜组织中存在具有典型结构特征的新生淋巴管和炎性细胞浸润.结论 碱烧伤后部分角膜组织存在新生淋巴管,通过II和BVA可间接估计其发生情况.LI是一项评估碱烧伤角膜新生淋巴管的有用临床参数.(中华眼科杂志,2009,45:115-121)     

人工角膜表面组织增生的临床病理分析

目的 探讨人工角膜植入术后表面组织增生(STP)的临床和病理特点,以及其形成原因和防治方法.方法 回顾性病例研究.选择2000年1月至2009年12月间在解放军总医院接受人工角膜植入手术的患者85例(85只眼),男性72例,女性13例,平均年龄为(45±15)岁.术前诊断包括眼烧伤(56只眼)、自身免疫性干眼终末期(14只眼)、眼爆炸伤(10只眼)和重复移植失败(5只眼),对术后STP进行临床观察和治疗.以正常眼前节标本作为对照,对手术切除的增生膜进行病理和免疫组织化学分析.应用Pearson卡方检验比较不同病因患者人工角膜STP阳性率的差异.结果 22例(26%)患者在二期术后出现STP,发生组织增生的中位数时间为7个月(2～63个月).不同病因患者STP的阳性率依次为眼烧伤34%(19/56)、自身免疫性干眼终末期14%(2/14)、爆炸伤10%(1/10)、重复移植失败患者未见组织增生,各组间比较差异无统计学意义(x2=5.93,P=0.11).22例患者中,11例表现为上皮增生,于裂隙灯显微镜下去除增生的上皮,适当调高镜柱后增生被抑制;4例接受了超高频眼表成形手术;7例由于增生膜较厚,在手术显微镜下进行了切除.组织学上,增生膜由上皮细胞和纤维血管组织组成,伴间质慢性炎症反应.免疫组织化学显示,与正常角膜和结膜相比,增生膜上皮层中增殖细胞核抗原表达增多、增强,间质组织中可见大量波形蛋白表达阳性的成纤维细胞和一些α平滑肌肌动蛋白表达阳性的肌纤维母细胞,基质中散在CD45RO阳性的T淋巴细胞,还可见灶状分布的CDllc阳性的树突状细胞和CD68阳性的巨噬细胞.结论 人工角膜镜柱周围组织增牛会导致人工角膜前膜形成,材料-组织交界处过度的炎症反应以及不适当的镜柱高度是引起组织增生的主要原因.

Abstract：

Objective To investigate the clinical and histopathologic features of the superficial tissue proliferation ( STP) following the implantation of MICOF keratoprosthesis, and to analyze the formation and treatment of STP. Methods Retrospective study. Eighty-five patients ( 85 eyes) received MICOF keratoprosthesis surgery from January 2000 through December 2009 in Genera) Hospital of PLA, which included 72 males and 13 females. The mean age of the patients was (45 ±15) years. Preoperative diagnoses were ocular burn (56 eyes) , end-stage of autoimmune dry eye ( 14 eyes) , severe ocular trauma (10 eyes) and repeated graft failure (5 eyes). Postoperatively, STPs of Kpro were observed and treated. The membranes anterior to the optical cylinder were removed and investigated by histological and immunohistochemical methods, and anterior segment specimens from normal eyes were taken as control. Results Twenty-two (26% ) patients presented STP during the follow-up, and proliferations occurred ranging from 2 to 63 months (median, 7 months). The incident rates of STP were 34% (19/56 eyes) in burned eyes,14% (2/14 eyes)in end-stage dry eye, 10% (1/10 eyes)in severe mechanical ocular trauma, and none in repeated grafts failure. Difference among four groups did not arrive significance statistically (x2 =5. 93, P = 0. 11). The epithelial proliferations were observed in 11 patients, which were removed easily. To prevent from recurrence, the height of the cylinder was adjusted. Other 4 patients underwent ultra-high frequency ocular surface plastic operation and 7 patients received membranectomy. Histologically, the superficial proliferative membrane was composed of proliferative epithelium and fibrovascular tissue incorporating inflammatory cells. The immunohistochemical staining demonstrated the expression of PCNA increased in the epithelium, compared with control cornea and conjunctiva. Many vimentin-positive fibroblasts and a few α-SMA-positive myofibroblasts presented in the interstitial tissue, and the numbers of CD45RO-positive T cells, CD11c-positive dendritic cells, and CD68-positive macrophages were increased in proliferative membranes. Conclusions The tissue proliferation around optical cylinder results in membrane formation anterior to the Kpro. The excessive inflammation at the prosthesis-corneal junction and the unsuited height of the optical cylinder might have been the main reasons of STP.     

PMMA-硅胶夹持型人工角膜植入碱烧伤兔眼的实验研究

目的探讨自制的PMMA-硅胶夹持型人工角膜植入碱烧伤兔眼角膜的手术方法和疗效。方法建立兔眼碱烧伤模型：将PMMA-硅胶夹持型人工角膜植入碱烧伤后形成白斑的兔眼角膜,观察6个月。结果人工角膜手术操作顺利,术后1只实验兔眼出现了眼内炎,人工角膜脱出,另1只兔术后7周死亡,余3只兔眼在观察期内未见角膜组织溶解、房水渗漏、青光眼、感染或人工角膜前后膜增生等并发症,人工角膜稳定在位并保持透明。结论本实验自制的PMMA-硅胶夹持型人工角膜,手术操作简单,术中及术后并发症较小,似有实际临床应用价值。     

碱烧伤后角膜新生淋巴管与炎症反应指数间的关联

目的 探讨角膜碱烧伤后的角膜新生淋巴管与炎症反应指数间的关联.方法 实验研究.制备大鼠角膜碱烧伤模型.采用5'核苷酸酶-碱性磷酸酶(5'-NA-ALP)双重酶组织化学染色及全角膜免疫荧光法分别检测碱烧伤后1、3 d,1、2、3、4、5、6、7及8周的角膜新生淋巴管和血管的动态变化,并进行淋巴管计数(LVC)和血管计数(BVC).同时,于裂隙灯显微镜下观察角膜炎症反应的变化,记录炎症反应指数(IF),并比较LVC和IF之间的关联.11例人角膜取自碱烧伤后行角膜移植的11例患者.淋巴管内皮细胞受体(LYVE-1)免疫组织化学染色法标记人角膜中的新生淋巴管,LVC和IF之间的关联运用Pearson's相关分析,采用配对t检验比较角膜中存在淋巴管和不存在淋巴管的患者之间IF、炎性细胞计数、碱烧伤病史、年龄的差异.结果 碱烧伤后,角膜基质层存在着新生淋巴管.碱烧伤后3 d时出现角膜新生淋巴管,2周末达到高峰,5周末消退.新生淋巴管的出现滞后于炎症反应,但先于炎症反应和新生血管而消退.LVC与IF之间呈正相关(r=0.572,P＜0.01).11例患者中3例存在着角膜新生淋巴管.与另8例角膜中无新生淋巴管的患者相比,前者IF显著性升高(t=3.28,P＜0.05)、炎性细胞计数显著性增加(t=2.42,P＜0.05),年龄显著性下降(t=2.62,P＜0.05),而碱烧伤病史无显著性差异(t=1.28,P＞0.05).结论 角膜碱烧伤后有淋巴管生成,角膜新生淋巴管和炎症反应指数之间存在着密切的关联.     

国产化人工角膜植入兔眼的稳定性评估

目的 评价国产化人工角膜在兔眼角膜中的中长期稳定性.方法 实验研究.采用长耳大白兔10只,均选右眼作为国产化Moroz改良型永久性人工角膜植入眼,左眼为对照眼.手术分两期完成,一期手术用第三眼睑(软骨组织与人耳软骨有类似效果)加固角膜前层,联合自体结膜遮盖植入人工角膜支架;3个月后进行二期手术,植人人工角膜镜柱.全部手术完成后观察6个月以上.术后抗生素滴眼预防感染,定期观察,照相记录.最终行眼组织病理学检查.并与左眼进行对照.结果 除1只兔在二期术中因麻醉意外死亡外,9只兔均顺利完成手术和术后观察,术后各观察时间点人工角膜均在位,眼表血管化良好,未发生角膜组织融解、房水渗漏、高眼压、感染等严重并发症.组织病理学检查显示:加固的软骨组织均在位,人工角膜支架与周围组织紧密结合,有较活跃的纤维组织增生包绕,角膜炎症反应很轻.对侧眼无异常.结论 国产化人工角膜具有良好的生物相容性和中长期在位稳定性,用耳软骨加固和自体结膜遮盖有助于提高人工角膜稳定性.     

角质细胞生长因子2促进兔角膜碱烧伤上皮愈合机制的研究

目的　探讨角质细胞生长因子2 (KGF- 2 )对实验性兔角膜中央碱烧伤后角膜上皮愈合的作用及其机制。方法　24只新西兰白兔的24只角膜碱烧伤眼按随机数字法分成4组,每组6只眼,其中A、B、C组为治疗组,分别以3种不同浓度: 1μg/ml、50μg/ml、100μg/mlKGF 2滴眼液治疗;D组为对照组,用磷酸盐缓冲液(PBS)滴眼液治疗;观察角膜上皮愈合情况,并做形态学检查及P63、角质蛋白单克隆抗体(AE5)、表皮细胞生长因子单克隆抗体(EGFR)免疫组化研究。结果　1 ~100μg/mlKGF 2能够促进兔角膜上皮愈合。角膜碱烧伤24h后100μg/mlKGF- 2组和对照组角膜上皮愈合率分别为40%和74% (P<0 .05);第4天时4组均出现一定反复;第10天时各治疗组近完全愈合。碱烧伤后第7天即可观察到P63阳性细胞不仅存在于角膜缘区的部分基底细胞中,同时也向角膜内迁移。如角膜碱烧伤后第7天角膜缘区P63阳性细胞数: 100μg/mlKGF 2组为( 53 .8±2. 6)个,对照组为(29. 5±2. 2)个,正常角膜为(17. 0±2. 1)个(P=0. 000);同时非角膜缘区P63阳性细胞数分别为: 100μg/mlKGF 2组为(69. 5±2. 8)个,对照组为(19 5±2 8)个,正常角膜为0个(P=0 .000)。结论　KGF- 2可激活角膜上皮干细胞,使其不断增殖分化,从而促进角膜上皮损伤的愈合。     

兔眼角膜去端肽猪皮Ⅰ型胶原膜移植的研究

目的 探讨去端肽猪皮I型胶原行板层角膜移植术后的角膜愈合情况,及其作为角膜移植替代物的可行性.方法 实验研究.选用中国白兔100只,其中80只兔根据角膜植片来源不同随机分为胶原材料实验组(A组)及同种异体对照组(B组),两组均行单眼前板层角膜移植术.各组根据不同处死时间,随机分为3 d、14 d、1个月、3个月和6个月亚组,每组8只.余20只兔(40只眼)作为B组角膜移植供体来源.术后行大体、裂隙灯观察角膜愈合情况并记录角膜透明度与角膜新生血管(CNV)评分情况,HE染色组织学观察以及上皮细胞标志蛋白K3的免疫组化检测.结果 采用Friedman秩和检验行组内比较,两两之间比较行Wilcoxon符号秩和检验.结果 两组术后角膜透明度逐渐升高(A组:x2=31.250,P=0.000;B组:x2=32.566,P=0.000),1、3及6个月两组角膜透明度评分(A组:2.50、1.94、1.94;B组:2.88、2.25、1.63)比较差异无统计学意义(Z=-1.414,0.000,-0.743;P=0.157,1.000,0.458).术后7 d两组均有CNV长入,A组CNV评分逐渐增高,14 d最高,术后1个月变化不明显,后逐渐减轻(x2=20.727,P=0.001);B组CNV评分逐渐增高,14 d达高峰,后逐渐减轻(x2=25.562,P=0.000);术后6个月两组CNV比较差异有统计学意义(Z=-2.070,P=0.038).组织学观察A组术后1个月胶原材料几乎完全降解,胶原排列趋于规则,术后6个月胶原排列基本规则,但两组局部均有不同程度胶原紊乱区.结论 去端肽猪皮I型胶原可促进角膜上皮细胞与基质细胞重建,但完全取代同种异体角膜植片还需进一步研究.

Abstract：

Objective To investigate corneal wound healing in rabbit after lamellar keratoplasty with porcine type I atelocollagen. Methods One hundred Chinese white rabbits, 80 rabbits were randomly divided into collagen materials group (group A) and allograft group (group B) , and group A and B were operated for the lamellar keratoplasty in one eye. Rest 20 rabbits'eyes (40 eyes) were used as the source of allograft for group B. After operation,the rabbits'eyes were observed by naked eyes and slit lamp, and recorded the score of the transparency and neovascularization of the cornea. The rabbits were sacrificed at 3rd, 14th day, the 1st, 3rd, and 6th month (each group eight eyes). The corneas were observed by histopathology, and the epithelial cells marker protein K3 were detected by immunohistochemistry. The results were analyzed by Rank sum test. Results The transparency of the cornea was increased gradually in A and B groups, and reached the peak on the 6th month(group A; x2 =31.250, P=0.000; group B: x2= 32.566, P = 0.000). The difference had not statistics significance in the comparison of the transparency from the 1st to 6th month(Z= -1.414, 0.000, -0.743;P=0. 157, 1.000, 0.458). The two groups had corneal neovascularization after 7 days, the intensity of corneal neovascularization in A group increased gradually, reached the peak on day 14, then decreased gradually (x2 = 20.727, P = 0.001); the intensity of corneal neovascularization in B group increased gradually, reached the peak on day 14, and then decreased gradually (x2 =25. 562, P =0. 000). The difference had statistics significance in the comparison of the neovascularzation of the cornea on the 6th month between A and B group(Z=-2.070,P=0.038).Histopathology showed the collagen material nearly disappeared after 1 month of surgery and arrangement of collagen tends to be regular.On the 6th month,arrayed collagen was regular in general,but disordered partly.Conclusions Porcine type I atelocollagen can promote corneal cells regeneration.But it needs more study to be a cornea substitute that can completely replace the corneal allogaft.