糖尿病肾病患者血清色氨酸代谢谱的靶向研究*

目的: 研究糖尿病肾病(DKD)患者与健康对照人群血清色氨酸不同代谢通路中代谢物的差异,分析差异代谢物与临床指标之间的相关性。方法: 以包头医学院第一附属医院肾内科和内分泌科住院部患者为研究对象,选取10例DKD患者为疾病研究组,10例健康体检者为正常对照组,收集血液标本。采用靶向代谢组学方法分析两组人群中血清色氨酸及其代谢物的差异,进行生物信息学和统计学分析,阐明其在DKD中的意义。结果: 在两组血清中鉴定出5个差异代谢物,其中DKD患者血清中L-色氨酸(L-TRP)、5-羟色胺(5-HT)的水平明显低于健康对照组(P＜0.05),而5-羟基吲哚乙酸(5-HIAA)、犬尿氨酸(KYN)和3-吲哚丙酸(IPA)的水平则增加,差异具有统计学意义(P＜0.05),5-HIAA和IPA均与血肌酐呈显著正相关,与肾小球滤过率呈显著负相关。结论: DKD患者血清色氨酸代谢物水平与健康对照组相比具有明显的差异,其中的某些差异代谢物还与DKD的发生发展具有明显的相关性。     

基于UHPLC-Q-Orbitrap HRMS的PD-1抑制剂治疗的晚期肺腺癌患者血清代谢组学研究

目的:探索晚期肺腺癌患者化疗联合免疫治疗前后的差异代谢物及代谢通路,为评估预后寻找生物指标。方法:利用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱质谱(UHPLC-Q-Orbitrap HRMS)技术,对14例晚期肺腺癌患者在第1次使用化疗联合PD-1抑制剂治疗前3 d的血清以及治疗2周期后的血清进行代谢组学分析。通过对采集得到的图谱进行峰识别和匹配等相关处理,应用主成分和正交偏最小二乘法-判别分析对代谢组学的数据进行分析,筛选出重要变量性投影>1和P<0.05的差异代谢物,并筛选代谢通路。结果:治疗前后血清代谢物质有明显差异,治疗后患者血清代谢物中谷氨酰丝氨酸、脯氨酸、犬尿氨酸、脱氢抗坏血酸、N-硬脂酰鞘磷脂、5-羟基吲哚乙酸水平升高;色氨酸、亮氨酰脯氨酸、柠檬酸、硬脂酸、吲哚丙烯酸、丙酰肉碱、吲哚、3-甲基吲哚水平降低。色氨酸代谢通路是治疗前后的差异代谢通路。结论:犬尿氨酸/色氨酸比值可能作为评估PD-1抑制剂治疗的晚期肺腺癌患者预后的生物指标。     

儿童哮喘患者尿液中小分子代谢物分析

目的 采用基于气相色谱质谱联用（GC/MS）的代谢组学技术研究儿童哮喘患者尿液中小分子代谢物的变化。方法 取50例儿童哮喘患者尿样及49例年龄、性别匹配的正常儿童尿样,用GC/MS技术检测尿液中的小分子代谢物,应用正交偏最小二乘法（OPLSA）的方法,观察正常儿童对照组和儿童哮喘组的代谢轮廓差异。结果 正常儿童对照组和儿童哮喘组的代谢谱能明显的区分,利用商业化的代谢物谱库（如Wiley和NIST质谱库）及本实验室建立的标准品代谢物谱库鉴定了18个差异代谢物。与正常儿童对照组比较,儿童哮喘患者磷酸盐、L-苏氨酸含量降低;丁二酸、L-脯氨酸、β-D-呋喃木糖、肌酐、2,3-二羟基丁酸、苯乙酸、D-阿拉伯糖、1H-吲哚、木糖醇、α-L-吡喃甘露糖、苯乙酸、α-L-吡喃甘露糖、甘氨酸、D-葡萄糖、肌醇、尿酸、马尿酸、1H-吲哚-3-乙酸含量升高。结合代谢途径分析发现,儿童哮喘患者体内存在能量代谢、肠道菌群代谢、氨基酸代谢等代谢异常。结论 基于GC/MS的代谢组学技术能全面客观地反映儿童哮喘患者体内尿液中的代谢物变化,潜在的代谢标志物分析及代谢途径探讨将为儿童哮喘的诊断和发病机制研究提供一个可借鉴的思路和手段。     

帕金森氏病患者血清中犬尿氨酸、犬尿喹啉酸及色氨酸的测定及临床意义

目的 研究帕金森氏病 (Parkinson’s disease, PD) 患者血清犬尿氨酸（kynurenine, KYN）、犬尿喹啉酸（kynurenic acid, KYNA）和色氨酸 (trptophane, TRP) 浓度及代谢改变，探讨其临床意义。 方法 采用高效液相色谱-荧光检测法（HPLC-FLD）检测16例首发PD患者、36例美多巴（Madopar）治疗PD患者、20例正常对照人群血清KYN、KYNA和TRP的浓度，比较血清KYN、KYNA、TRP以及KYNA/KYN和KYN/TRP比值的差异性。结果美多巴治疗PD患者血清KYNA水平和KYNA/KYN比值较首发PD患者和正常对照人群显著升高（分别P＜0.01）；首发PD患者及美多巴治疗PD患者血清中TRP水平较正常对照人群显著升高（分别P＜0.01）。结论 采用高效液相色谱-荧光检测法（HPLC-FLD）检测PD患者血清中的KYN、KYNA及TRP的含量简便、快速、灵敏、特异，可为帕金森氏病的临床诊断和药物治疗提供部分实验室依据。     

色氨酸-犬尿氨酸代谢通路与神经退行性疾病及中医药干预作用的研究进展

色氨酸代谢是一个可高度调控的生理过程，犬尿氨酸通路是色氨酸代谢的主要途径，色氨酸-犬尿氨酸代谢通路涉及一系列酶促反应，代谢生成的多种生物活性物质统称为“犬尿氨酸能物质”。越来越多的研究表明，这些犬尿氨酸能物质与很多神经系统疾病的发生、发展有着密切关联，异常的色氨酸-犬尿酸代谢与诸如帕金森氏病、亨廷顿病和阿尔茨海默症等神经退行性疾病认知功能低下有关。文章就色氨酸-犬尿氨酸通路的代谢、生成的神经生物学活性物质、相关的神经系统疾病以及以此为靶点的中医药干预作用进行综述，为研究和治疗相应神经系统疾病提供一定策略与参考。     

吲哚胺2,3二加氧酶与自身免疫性疾病

色氨酸通过犬尿氨酸通路被分解代谢,而遍布全身的吲哚胺2,3二加氧酶(IDO)则是犬尿氨酸通路的首要的限速酶。IDO通过把左旋色氨酸转化为甲酰犬尿氨酸,甲酰犬尿氨酸能快速地转化为更为稳定的犬尿氨酸分子。犬尿氨酸通路可有许多中间产物,大多都有活性调节的功能。现如今公认IDO为机体内重要的内源性免疫抑制剂,在维持机体免疫稳态,移植耐受、肿瘤局部免疫抑制微环境的形成和维持,以及在介导肿瘤的免疫逃逸中发挥重要作用。IDO的存在对自身免疫性疾病的防治研究有重要的影响,具有广阔的发展前景。     

早发型与晚发型重度子痫前期患者胎盘绒毛组织代谢足迹差异的研究

目的探讨6%氧浓度下体外培养早发型及晚发型重度子痫前期患者胎盘绒毛组织培养液中代谢足迹的差异。方法选择早发型重度子痫前期组(13例)及晚发型重度子痫前期组(14例)的胎盘,胎盘母体面取绒毛组织,在6%氧浓度下培养96 h,采用高效液相质谱色谱仪检测培养液中代谢产物并使用标准品建立色氨酸及犬尿氨酸的色谱图库,观察两组绒毛组织代谢足迹及培养液中代谢物色氨酸及犬尿氨酸浓度的差异。结果 6%氧浓度下培养的早发型及晚发型重度子痫前期组胎盘绒毛组织代谢足迹比较,发现36种代谢物有显著性差异(P<0.05);与晚发型重度子痫前期组相比,早发型重度子痫前期组胎盘绒毛组织培养液中犬尿氨酸的浓度显著升高(P<0.05)。结论早发型与晚发型重度子痫前期的发病机制可能不同,代谢组学技术对其中的代谢产物进行定量分析,为预测重度子痫前期的发病时机提供一个新的途径。     

γ干扰素体外诱导骨髓间充质干细胞的IDO表达及其免疫调节作用

探讨γ干扰素（IFN-γ）体外诱导作用成人骨髓间充质干细胞（MSCs）的吲哚胺2，3-过氧化酶（IDO）的表达及IDO对异基因T淋巴细胞增殖的影响。从人骨髓中分离、培养MSCs，观察传代3次以上的细胞形态，应用流式细胞术检测其表面标志，以鉴定其纯度。分别用浓度为O、20、50、100、200U／ml的IFN-γ诱导作用MSCs后，以逆转录聚合酶链反应检测IDO mRNA的表达，蛋白印迹法检测IDO蛋白的表达，反相高效液相色谱法检测色氨酸的特异代谢产物犬尿氨酸的特异代谢率，     

糖尿病肾病患者尿液类胰蛋白酶水平检测及其病理意义分析

目的：肥大细胞与糖尿病肾病（ diabetic nephropathy， DN）的一些临床病理指标具有显著相关性，但确切病理意义仍有需进一步论证。文中通过检测肥大细胞特异性表达的含量最为丰富的丝氨酸蛋白酶———类胰蛋白酶在DN患者尿液中的表达情况，分析其与DN发生发展的关系，探讨类胰蛋白酶和肥大细胞与DN肾组织损伤的关系。方法收集2012年1月至2013年6月来南京军区南京总医院全军肾脏病研究所就诊的103例DN患者尿液，分为DN早期组（微量蛋白尿期，10例）、DN中期组（显性蛋白尿期，31例）和DN晚期组（肾功能不全期，62例），同时收集20例正常人尿液作为对照组；利用ELISA方法检测尿中类胰蛋白酶水平；比较分析对照组、DN早期组、DN中期组和DN晚期组尿液中类胰蛋白酶的变化情况，并分析尿液中类胰蛋白酶水平与患者各临床指标的相关性。结果①对照组中17人尿液中未检测到类胰蛋白酶（＜1．0 ng／mg肌酐），而DN组尿液中类胰蛋白酶的水平显著升高，并表现为随DN的发展而逐渐增加的趋势早期组（11．6±10．5） ng／mg肌酐、中期组（29．7±19．2）ng／mg肌酐、晚期组（44．6±43．4）ng／mg肌酐。②相关性分析显示，DN患者尿液类胰蛋白酶水平与血肌酐（r＝0．325， P＜0．01）、血胱蛋白酶抑制剂C（r＝0．391， P＜0．01）、血尿素氮（r＝0．27， P＜0．01）、24 h尿蛋白（r＝0．389， P＜0．01）、尿C3（r＝0．276， P＜0．05）、尿视黄醇结合蛋白（r＝0．365， P＜0．01）、尿溶菌酶（r＝0．461， P＜0．01），尿N-乙酰-β-葡萄糖苷酶（r＝0．568， P＜0．01）、尿肾损伤分子-1（r＝0．434， P＜0．05）和尿IL-18水平（r＝0．375， P＜0．05）均具有相关性，而与年龄、性别、空腹血糖、餐后血糖、糖化血红蛋白水平、血三酰甘油浓度、高密度脂蛋白和低浓度脂蛋白浓度则无明显相关性。结论肥大细胞在DN中具有重要作用，肥大细胞很可能是DN防治的有效新靶标。     

IDO/TTS介导的色氨酸代谢途径在免疫性血小板减少症患者发病及治疗中的作用

目的 探讨IDO/TTS介导的色氨酸代谢途径在免疫性血小板减少症患者的发病和治疗中的作用。 方法 选取2015年7月~2017年8月我院收治的36例免疫性血小板减少症患者和36例来我院体检的健康人为研究对象，分别为观察组和对照组，观察组给予地塞米松40 mg/d进行治疗，对照组不采取任何处理。通过液相-质谱分析仪检测血浆中犬尿氨酸（Kyn）和色氨酸（Trp）的浓度；通过流式细胞仪检测T淋巴细胞中IDO和TTS的表达。 结果 与对照组相比，治疗前免疫性血小板减少症患者血浆中Kyn、Trp、Kyn/Trp的表达量较高，IDO的表达量较低，而TTS的表达量则明显较高，差异有统计学意义（P<0.05）；观察组经有效治疗后，患者血浆中Trp的浓度降低，而Kyn浓度及Kyn/Trp比值则明显升高，差异有统计学意义（P<0.05）；患者IDO表达量明显上升，而TTS的表达量则明显下降，差异有统计学意义（P<0.05）。 结论 地塞米松对免疫性血小板减少症患者疗效显著，主要通过IDO/TTS介导的色氨酸代谢途径发挥作用，临床可以通过监测IDO、TTS的水平指导其治疗。     

基于核磁共振代谢组学分析糖尿病大鼠脑区特异性代谢变化

目的：运用基于核磁共振氢谱的代谢组学方法分析1型糖尿病大鼠多个脑区的代谢变化。方法： 取正常大鼠（ n =8）和链脲佐菌素（STZ）诱导的糖尿病大鼠（ n =8）的大脑皮层、纹状体、下丘脑、中脑组织 进行核磁共振氢谱代谢组学分析,并通过模式识别和代谢物通路分析考察糖尿病大鼠脑区特异性代谢变 化。结果：与对照组大鼠相比,糖尿病大鼠的大脑皮层、纹状体、下丘脑和中脑的代谢模式均发生显著改变。 代谢物定量分析显示,与正常大鼠相比,糖尿病大鼠不同脑区具有特异性代谢变化。大脑皮层中乳酸、牛 磺酸等代谢物的含量出现显著升高（ P ＜0.05）,而N-乙酰天门冬氨酸、胆碱等代谢物的含量显著降低（ P ＜0.05）;纹状体中乳酸、牛磺酸等代谢物的含量显著升高（ P ＜0.05）,而N-乙酰天门冬氨酸、γ-氨基丁酸等 代谢物的含量显著降低（ P ＜0.05）;下丘脑中牛磺酸、肌醇等代谢物的含量出现显著升高（ P ＜0.05）,而N乙酰天门冬氨酸、琥珀酸等代谢物的含量显著降低（ P ＜0.05）;中脑中乳酸、肌醇等代谢物的含量显著升 高（ P ＜0.05）,而N-乙酰天门冬氨酸、γ-氨基丁酸等代谢物的含量显著降低（ P ＜0.05）。结论：1型糖尿病大鼠脑代谢发生显著改变,而且具有脑区特异性的代谢变化,主要涉及能量代谢、神经递质代谢和胆碱代谢。     

直肠应用吲哚美辛在预防ERCP术后胰腺炎中作用的研究

目的：观察直肠应用吲哚美辛对ERCP术后胰腺炎（PEP）及高淀粉酶血症的预防作用。方法将行 ERCP检查的260例患者随机分为吲哚美辛组和对照组,吲哚美辛组在 ERCP术前60min直肠内给予吲哚美辛栓剂100mg ,对照组在ERCP术前不予直肠内治疗。观察ERCP术后患者有无腹痛,并于术后4、24、48h做血清淀粉酶测定。结果吲哚美辛组PEP发生率（6．9％）与对照组PEP发生率（22．3％）有统计学差异（ P ＜0．05）,吲哚美辛组ERCP术后高淀粉酶血症发生率（20．8％）显著低于对照组（52．3％,P ＜0．05）。结论直肠应用吲哚美辛可以预防ERCP术后胰腺炎（PEP）和高淀粉酶血症的发生。     

2型糖尿病合并代谢综合征患者血清C反应蛋白与尿微量白蛋白改变及与相关血管病变的研究

目的探讨血清C反应蛋白（CRP）与尿微量白蛋白在糖尿病合并代谢综合征（MS）不同亚型患者中的改变及与相关大血管病变的关系。方法选择132例2型糖尿病患者,将其分为MS组和无MS组,MS组分为4个亚组。血清CRP采用ELISA法测定,尿蛋白／肌酐（Alb／Cr）采用DCA2000测定。结果MS组血清CRP和尿Alb／Cr显著高于正常对照组和2型糖尿病组（P〈0．05）。血清CRP和尿Alb／Cr随着代谢组分的增加而升高,各亚组问差异有统计学意义（P〈0．0J）。MS组大血管病变显著高于无MS组（39．4％VS283％P〈0．05）,且随着代谢组分数目的增多而增加（分别为12．5％、35．1％、47．2％、51．2％,P〈0．05）。血清CRP与尿Alb／Cr和MS组分聚集程度之间正相关（相关系数分别为r=-0．217,P=0．05;r=0．220,P=0．012）Spearman相关分析显示CRP与尿Alb／Cr（r=0．211,P=0．042）、BMI（r=0．215,P=0．033）、LDL—C（r=0．212,P=0．037）、HbAlc（r=-0．333,P=0．001）呈显著正相关关系。结论检测糖尿病患者CRP和尿Alb／Cr可能有助于早期发现MS及血管病变高危人群。     

慢性肾脏病患者血清非对称性二甲基精氨酸水平与血压相关性研究

目的：探讨慢性肾脏病患者（CKD ）血清非对称性二甲基精氨酸（ADM A ）浓度与血压之间的相关性。方法选取30名慢性肾脏病患者作为研究对象,健康对照28名;应用高效液相色谱-质谱联用法测定研究对象血清与尿液ADM A浓度。结果慢性肾脏病患者血清ADM A 浓度明显高于健康对照组,而尿液ADM A浓度明显低于对照组,差异均有统计学意义（ P ＜0．01）;慢性肾脏病患者血清ADM A浓度与收缩压、舒张压呈明显正相关（分别为r＝0．724,P＜0．0l;r＝0．637, P ＜0．01）。结论慢性肾脏病患者血清ADM A 浓度较正常人群明显升高,且与血压水平呈正相关。     

基于卵泡液代谢组学的卵巢低反应生物标志物研究*

目的 通过卵泡液代谢组学探寻与卵巢低反应相关的生物标志物。方法 采用超高液相色谱-高分辨质谱联用仪对行体外受精-胚胎移植/单精子卵泡浆内显微注射-胚胎移植（IVF-ET/ICSI-ET）的卵巢低反应组30例，以及同时仅因男方因素行IVF-ET/ICSI-ET的对照组49例进行卵泡液代谢组学分析。对比两组的差异代谢物。结果 与卵巢低反应相关的潜在生物标志物有30种，其上调的代谢物有9种，包括L-苯丙氨酸、脯氨酸、色氨酸、1-羟基-2-氧代丙基四氢蝶呤、水杨酸镁、尿苷二磷酸、LysoPC（18∶1）、LysoPC（18∶2）及LysoPC（18∶3）；下调的代谢物有21种，包括6-氧代己酸酯、亚油酸酯、油酸、十六烷、花生四烯酸、二十二碳六烯酸、13，14-二氢视黄醇、石胆酸、7-脱氢甾醇、硬脂酰肉碱、25-羟基维生素D3、 27-羟基胆固醇、3α，7α，12α-三羟基-5β-胆甾烷、13-羟基-α-生育酚、强啡肽A、LysoPC（16∶1）、LysoPC（16∶0）、LysoPC（18∶0）、LysoPC（20∶5）、LysoPC（20∶4）、LysoPC（20∶3）。结论 卵巢低反应患者在卵巢储备、卵巢反应、卵子数目、质量方面比正常女性低；卵巢低反应患者卵泡液代谢物与正常女性比较，差异有统计学意义（P?<0.05）。这些差异代谢物可以作为卵巢低反应的生物标志物。     

HCF方案对大肠癌患者血清肿瘤坏死因子α的影响

目的：探讨应用以羟基喜树碱为主组成的化疗方案对大肠癌患者血清TNFα的影响及意义。方法：37例经病理学确诊的大肠癌患者采用羟基喜树碱，亚叶酸钙，5－氟脲嘧啶联合化疗，应用酶标免疫分析测定治疗前后TNFα变化，另选20例健康人作对照,结果：大肠癌患者化疗前血清中TNFα明显高于对照组（P＜0．005），化疗后TNFα降低，但仍高于对照组（P＜0．005），疗前与疗后对比，血清TNFα也有显著差异（P＜0．005），结论：羟基喜树碱为主的化疗方案有明显降低瘤负荷及抑制巨噬细胞分泌TNFα的作用。     

培哚普利吲达帕胺复方制剂对老年单纯收缩期高血压患者的降压疗效探讨

目的：探讨培哚普利吲达帕胺复方制剂治疗老年单纯收缩期高血压（ISH）的临床疗效及用药安全性。方法将800例老年 ISH患者采用数字表法分为两组,每组各400例,对照组口服硝苯地平控释片,观察组给予培哚普利吲达帕胺复方制剂,比较8周后两组降压效果及不良反应发生情况。结果观察组总有效率为92．75％,显著高于对照组的80．75％（P＜0．05）;观察组治疗后收缩压为（130．21±4．15）mm Hg,显著低于治疗前的（158．61±5．52）mm Hg和治疗后对照组的（145．72±4．70）mm Hg（P＜0．05）;两组治疗前、后舒张压比较差异无统计学意义（P＞0．05）;两组不良反应发生率比较差异无统计学意义（P＞0．05）。结论培哚普利吲达帕胺复方制剂治疗老年 ISH效果显著,可有效控制患者血压,且不良反应少,具有较好的临床应用价值。     

妊娠肝内胆汁郁积症患者脂质代谢变化

目的：探讨妊娠肝内胆汁郁积症（ICP）患者血清胆酸（CG）水平升高对脂质代谢的影响。方法：对83例孕妇用放射免疫法测定血CG，酶法测定血总胆固醇（CH）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白－胆固醇（HDL－C）、低密度脂蛋白－胆固醇（LDL－C）及LDL－C／HDL－C比值。以血CG≥500ug/dl为标准组成ICP组（48例）；血CG＜250ug/dl为正常组（35例）。结果：ICP组血CG水平明显高于对照组（P＜0．001），ICP组LDL－C高于对照组（P＜0．01），LDL－C／HDL－C比值明显高于对照组（P＜0．001）。结论：ICP患者脂质代谢有明显变化，说明该病的病理生理变化与血清CG浓度增高有关。     

哌甲酯干预儿童多动症患者尿液的代谢组学研究

目的 基于代谢组学方法研究哌甲酯干预儿童多动症患者尿液内源性代谢物的变化,并探索哌甲酯的作用机制。方法 采用气相色谱-质谱联用技术（GC-MS）检测37例儿童多动症患者哌甲酯干预前（病例0周组）、干预6周（病例6周组）、干预12周（病例12周组）和同期40例健康者（对照组）尿液内源性代谢物,经正交偏最小二乘法（OPLS）分析,寻找显著差异的变量,鉴定潜在生物标志物。结果 对照组、病例0周组、病例12周组的尿液代谢谱发生了明显变化,病例0周组与对照组的代谢谱能够区分,同时病例12周组样本远离病例0周组,靠近对照组;利用商业化的代谢物谱库（如Wiley和NIST质谱库）及本实验室建立的标准品代谢物谱库鉴定了24种相关代谢标志物,哌甲酯干预后,这些代谢物的水平逆转到正常水平。结论 本研究表明哌甲酯治疗儿童多动症具有良好的疗效,其作用机制可能与丙酮酸代谢、色氨酸代谢、苯丙氨酸代谢、甘氨酸,丝氨酸和苏氨酸代谢等代谢异常有关,代谢组学从机体整体代谢角度揭示了哌甲酯治疗儿童多动症的作用机制。     

Ⅱ型糖尿病患者骨代谢生化指标的临床意义

目的：探讨Ⅱ型糖尿病患者骨代谢的特点，方法：对64例Ⅱ型糖尿病患者测定了血清25OHD和完整骨钙素（IBGP），尿HOP和Crosslaps。结果：（1）Ⅱ型糖尿病患者的血清25OHD均低于对照组，男性和绝经前女性与正常对照比较P均＜0．01，绝经后女性与正常对照比较P＜0．05，（2）Ⅱ型糖尿病患者的血清IBGP均低于对照组，P＜0．01，（3）Ⅱ型糖尿病患者的HOP和Crossplaps的测定结果显示：男性患者的尿HOP高于对照组P＜0．05，而女性患者尿HOP与对照组无显著性差异，但全部患者尿Crosslaps则高于对照组，绝经前女性与正常对照比较P＜0．05，男性和绝经后女性与正常对照比较P均＜0．01，结论：Ⅱ型糖尿病患者的骨代谢存在维生素D缺乏，骨形成和骨转换减低，骨吸收增强等表现：并且血清IBGP和尿Crosslaps可作为评价骨代谢较敏感的生化指标。