胆汁中结合胆汁酸高效液相色谱定量分析法

本文报道采用高效液相色谱对人体胆汁中结合型胆汁酸进行定量分析的方法。认为本法预处理方法简便,可一次同时快速而精确地测定8～10种结合型胆汁酸,在胆石症的病因,病理和治疗方法学研究中,值得推广应用。     

高效液相色谱法测定人胆汁中结合胆汁酸

本文报道了用高效液相色谱法(HPLC)测定人胆汁中8种结合胆汁酸的方法。样品处理简便。流动相为甲醇:0.01M KH_2PO_4(75:25V/V,pH5.5),岛津 ODS 柱(6×150mm),210nm 波长检测,每例标本分析时间30min,8种结合胆汁酸均达到基线分离。峰高与各胆汁酸量之间线性关系良好。文中还讨论了胆汁酸结构,色谱条件与出峰顺序的关系。     

气相色谱法测定血清和胆汁中胆汁酸

报告气相色谱测定胆汁酸的方法。2ml血清用SEP—PAK C—18短柱萃取、甲醇洗脱、碱水解、乙醚萃取、正庚烷去杂质、六氟丙烷加三氟醋酐衍生化后进样。用ECD(电子捕获检测器)检测。胆汁中胆汁酸浓度较高,取10μl直接碱水解、以后之前处理步骤同血清、用FID(氢火焰检测器)检测。ECD对胆汁酸的检测限有1ng、各种胆汁酸回收率均在83%以上,相关系数在0.99以上。该方法稳定可靠,可供科研和临床常规应用。     

胆囊结石病人胆囊胆汁中钙离子浓度的变化

胆囊结石病人胆囊胆汁中钙离子浓度的变化毛伟征１王玉珍２于维林２１９９４年１２月～１９９６年２月，我们对３３例胆囊结石病人胆囊胆汁中游离Ｃａ２＋浓度进行了测定。以了解Ｃａ２＋在胆囊结石形成中的作用，现报告如下。１临床资料１．１一般资料３３例胆囊结石病人...     

胆汁中总胆汁酸测定及在胆石症时的临床意义

胆汁中总胆汁酸测定及在胆石症时的临床意义白求恩医科大学第二临床学院（１３００４１）吴铁占徐立长春中医学院附属医院岳新颜代鹤灵【关键词】胆汁总胆汁酸胆石症血清中总胆汁酸是肝实质性损伤及消化系统疾病的一个灵敏的诊断指标。但是胆汁中的总胆汁酸含量及其临床意...     

人工蛇胆汁中胆汁酸的薄层色谱分析

采用薄层色谱法考察了人工蛇胆汁的胆汁酸组成;以双波长薄层扫描法对人工蛇胆汁中的主要胆汗２酸成分牛磺胆酸、牛磺去氧胆酸（包括牛磺鹅去氧胆酸）进行了测定。薄层色谱斑点清晰;人工蛇胆汁中牛磺胆酸、牛磺去氧胆酸（扬牛磺鹅去氧胆酸）的含量分别为４０．２２ｍｇ／ｍＬ和２．３５ｍｇ／ｍＬ。结果表明牛磺胆酸是人工蛇胆汁中的主要胆汁酸成分;薄层鉴别和含量测定方法简便、可靠,重现性好,可用于人工蛇胆汁的质量控制。     

胆石症患者血清胆汁酸谱的检测与分析

目的 通过检测胆石症患者血清中的胆汁酸谱,探讨胆石症患者血清胆汁酸谱的检测在胆石症临床诊断及早期预防中的应用价值。方法 收集2019年9月至2020年6月在河北医科大学第一医院（以下简称“我院”）住院的48例胆囊结石患者（胆囊结石组）、11例胆管结石患者（胆管结石组）及26例同期在我院健康体检者（对照组）的血清,利用高效液相色谱串联质谱法测定其胆汁酸中的15种亚组分[胆酸（CA）、鹅脱氧胆酸（CDCA）、脱氧胆酸（DCA）、石胆酸（LCA）、甘氨胆酸（GCA）、甘氨熊脱氧胆酸（GUDCA）、甘氨鹅脱氧胆酸（GCDCA）、甘氨脱氧胆酸（GDCA）、牛磺胆酸（TCA）、牛磺脱氧胆酸（TDCA）、牛磺熊脱氧胆酸（TUDCA）、牛磺鹅脱氧胆酸（TCDCA）、牛磺石胆酸（TLCA）、甘氨石胆酸（GLCA）、熊脱氧胆酸（UDCA）],并进行比较。结果 三组GCA、GUDCA、GCDCA、TCA、TUDCA、TCDCA这6种胆汁酸亚组分比较,差异有统计学意义（P <0.05）;胆囊结石组和胆管结石组中的GCA、GUDCA、TCA、TCDCA及TUDCA显著高于对照组,差异有高度统计学意义（P ...     

成石性和非成石性胆汁中结合胆汁酸/总酯比值的比较研究

对成石性和非成石性胆汁中结合胆汁酸/总酯比值进行了比较研究,结果证实成石性胆囊胆汁和成石性胆管胆汁中总结合胆汁酸/总酯比例明显减少(对照组64.1%,胆囊结石组51.1%,胆管结石组41.4%),其中主要是甘氨胆酸/总酯和甘氨鹅脱氧胆酸/总酯比例的降低。这种降低与胆汁稳定性的破坏和胆石形成有重要的关系。     

驻极体诱导3T3细胞内游离钙离子浓度的变化

目的：研究公主体对3T3细胞内游离Ca^2 浓度变化的,体诱导3T3细胞凋亡与游离Ca^2 浓度变化之间的关系。方法：选用－300V和－500V驻极体作用3T3细胞48h,即时依次加入CaCl2,A23187,EDTA,通过流式细胞术检测细胞内Ca^2 浓度的变化和3T3细胞的凋亡量。结果：（1）负极性驻极体作用3T3细胞后,3T3细胞出现10％的凋亡量;（2）驻极体作用3T3细胞以后,细胞质游离Ca^2 浓度升高,Ca^2 浓度的升高不是由于细胞内钙池的释放,而是由于细胞外Ca^2 内流所引起,结论：驻极体诱导3T3细胞凋亡的机制可能是细胞外Ca^2 内上起的。     

钙通道在大鼠逼尿肌不稳定膀胱中的表达及变化

目的　探讨电压依赖钙通道与逼尿肌功能变化之间的关系。方法　根据膀胱压力容积测定结果将动物分为稳定组 ( 2 9只 )和不稳定组 ( 9只 ) ,其中稳定组分为BOO( 11只 )、SCI模型 ( 9只 )和对照组 ( 9只 ) ,通过RT PCR技术测定逼尿肌中L型和T型钙通道mRNA表达及变化。结果　正常大鼠中逼尿肌不稳定发生率为 2 4.3 %。L型和T型钙通道在逼尿肌中均有表达。正常对照组膀胱逼尿肌L型钙通道mRNA含量明显多于T型钙通道mRNA ,两者之比约 2 .1∶1;BOO组、SCI组和不稳定组中L和T型mRNA含量均有不同程度增加 ,T型钙通道mRNA增加更明显 (P <0 .0 1) ,两者比值明显缩小 ,分别为 1.5 3、1.41和 1.83。结论　钙通道的表达增加可能是导致平滑肌细胞自发性除极易化、兴奋性增高、引起逼尿肌不稳定的重要原因 ,其中T型钙通道起着重要的作用     

异紫堇啡碱对培养乳鼠心肌内游离钙的影响

目的　观察异紫堇啡碱 (ISOC)对去甲肾上腺素 (NA)和高钾所致培养乳鼠心肌细胞内游离钙浓度([Ca2 + ]i)增高的影响 ,初步分析该药心脏效应的作用原理。方法　利用钙荧光指示剂Fura - 2 /AM负载的培养乳鼠心肌细胞 ,动态地观察在ISOC存在下 ,由NA和高钾所增加的 [Ca2 + ]i 改变。结果　ISOC对培养乳鼠心肌细胞的静息 [Ca2 + ]i 无影响 ,其在 10 -5和 3× 10 -5mol/L时也不显著抑制高钾所致心肌细胞 [Ca2 + ]i 的增高 ,但能降低由NA所升高的心肌细胞 [Ca2 + ]i。结论　ISOC抑制由受体中介的心肌细胞 [Ca2 + ]i 的增高     

异紫堇啡碱抑制血管平滑肌由受体中介的细胞内游离钙的增高

目的　观察扩血管药异紫堇啡碱 (ISOC)对去甲肾上腺素 (NA)和高钾所致血管平滑肌细胞内游离钙浓度 ([Ca2 ]i)增高的影响 ,分析该药扩血管作用的原理。方法　利用钙荧光指示剂Fura 2 /AM负载的家兔血管平滑肌培养细胞 ,动态地观察在ISOC存在下 ,由NA和高钾所增加的 [Ca2 ]i的改变 ,分析ISOC对NA和高钾所致钙内流和 /或钙释放的影响。结果　ISOC对血管平滑肌静息 [Ca2 ]i无影响 ,该药在 10 -5和 5× 10 -5mol/L时对高钾所致 [Ca2 ]i的增高也无明显抑制 ,但能明显抑制NA所致细胞 [Ca2 ]i的增高。结论　ISOC抑制由受体中介的血管平滑肌 [Ca2 ]i的增高。     

花椒油素对A23187和钙调节血小板及细胞内游离钙作用的研究

目的 研究花椒油素对CaCl2和钙离子载体A23187调节血小板及其中Ca2+浓度的作用。方法 比浊法测定血小板聚集，用Fura-2/AM荧光法测定细胞内游离钙的水平。结果 花椒油素显著地抑制CaCl2和A23187诱导的血小板聚集，前者的抑制率为9.0%(67.1%，后者的抑制率为18.1%(72.5%。明显降低A23187诱导的血小板胞质游离Ca2+浓度，降低率为12.8%(63.4%。结论 花椒油素抑制聚集作用与降低细胞内游离Ca2+水平之间呈线性正相关（P<0.01）。     

盐酸普罗帕酮注射液对缺血再灌注损伤心肌细胞钙离子和氧自由基的影响

目的 研究盐酸普罗帕酮对缺血再灌注损伤心肌细胞钙离子和氧自由基影响及其发生的可能机制.方法 体外培养心肌细胞,建立缺血再灌注损伤模型,激光共聚焦显微镜观察细胞内钙离子荧光染色;722可见光分光广度计检测丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)的含量;透射电镜观察心肌细胞超微结构的变化.结果 盐酸普洛帕酮注射液可以使培养液中的荧光像素值和染色面积降低,可以使缺血再灌注心肌细胞培养液中的SOD升高,MDA降低,并且在药物浓度为40%的时候效果达到最佳.结论 盐酸普洛帕酮注射液对缺血再灌注损伤的心肌细胞有保护作用,最佳药物浓度为40%.     

肝硬化患者血小板钙离子浓度变化及机制研究

目的　探讨肝硬化患者血小板 [Ca2 + ] i 和甘氨脱氧胆酸 (GDCA)对血小板 [Ca2 + ] i 的影响。方法　荧光分光光度法测定肝硬化患者血小板 [Ca2 + ] i,以Fura2 /Am负载血小板 ,用甘氨脱氧胆酸作为处理因素 ,观察加入甘氨脱氧胆酸前后及不同浓度 ,不同时间 ,血小板 [Ca2 + ] i的变化。结果　①肝硬化患者血小板 [Ca2 + ] i明显高于对照组 (P <0 0 1) ,上消化道出血组明显高于无出血组 (P <0 0 1)。②静息状态血小板 [Ca2 + ] i 为 5 8 74± 5 45 (n =3 ) ,在血小板处于无Ca2 +情况下 ,加入GDCA终浓度为 10 0 μmol/L时 ,随时间的延长血小板 [Ca2 + ] i 显著增加 ;GDCA终浓度分为 0、5 0、10 0、15 0、2 0 0 μmol/L时血小板 [Ca2 + ] i 随浓度增加而显著增加。血小板在有Ca2 + 环境下 (Ca2 + 终浓度为 1 3mmol/L) ,加入GDCA后 ,血小板 [Ca2 + ] i 随作用时间和GDCA浓度的增加而显著增加。结论　肝硬化患者血小板 [Ca2 + ] i 显著增加。GDCA能诱导血小板外Ca2 + 内流和内贮Ca2 + 释放 ,并与GDCA浓度和作用时间有关。肝硬化患者血小板 [Ca2 + ] i 可能与胆汁淤积所致胆汁酸增加有关     

刀豆素A诱导小鼠腹腔巨噬细胞内吞与细胞内游离钙的关系

采用电镜和粘附式细胞仪（ＡＣＡＳ５７０）观察了胶体金标记的刀豆素Ａ（ＣｏｎＡ－Ａｕ）与小鼠腹腔巨噬细胞（Ｍφ）表面ＣｏｎＡ受体的结合、内吞及其在Ｍφ中转运的形态学改变，同时分析ＣｏｎＡ刺激后Ｍφ内游离钙（Ｃａ２＋）的变化。ＣｏｎＡ孵育１ｍｉｎ后，配体进入内吞小泡，第２次内吞约需２０ｍｉｎ。粘附式细胞仪分析表明：ＣｏｎＡ刺激后５０ｓ，Ｃａ２＋急剧上升，平均住值达０．５５７Ｕ；约１００ｓ后，恢复到刺激前水平；１８ｍｉｎ后，Ｃａ２＋重新回升，持续约１８ｍｉｎ后开始下降。本实验揭示配体再内吞与Ｃａ２＋重新上升的时间相吻合，其肯定性和机理有待于进一步研究证实。     

Ca~(2+)在大鼠应激性胃粘膜损伤中作用的研究

目的 :探讨大鼠胃粘膜与急性胃粘膜损伤之间的关系。方法 :采用原子吸收光谱分析法 ,测定胃粘膜Ca2 +含量。结果 :胃粘膜损伤程度随应激时间延长而加重 ,胃粘膜Ca2 + 含量却下降 ,二者呈明显负相关 ,但是 ,CaCl2 预应激或应用钙通道阻断剂 ,可减轻胃粘膜损伤程度。结论 :Ca2 + 在急性胃粘膜损伤中有一定的作用。     

D-AP5 blocks the increase of intracellular free Ca2+ induced by glutamate in isolated cochlear IHCs

Objective To investigate the effect of D-AP5 (D-2-amino-5-phosphonopentanoate, a spec ific NMDA-antagonist) on the increase of intracellular free Ca(2+) concent ration (［Ca(2+)］(i)) induced by glutamate in isolated cochlear inner hair cells (IHCs), and to detect the autoreceptors of the IHC membrane. Methods When a laser scanning confocal microscope (LSCM) was used, the exogenous glutama te (Glu) -induced changes in ［Ca(2+)］(i) of isolated IHCs and OHCs of guinea pig c ochlea were observed with fluo-3, a fluorescent probe for ［Ca(2+)］(i).A fter D-AP5 or CNQX (6--cyano--7--nitroguinoxaline--2, 3--dione, a sp ecific AMPA- antagonist) was administrated, the exogenous glutamate (Glu)-indu ced changes in ［Ca(2+)］(i) of isolated IHCs were recorded.Results In the presence of a low concentration Glu (3. 85 μmol/L), there was an inc rease of ［Ca(2+)］(i) in IHCs, whereas there was no change in OHCs.W hen 50 μmol/L of D-AP5 was administrated in advance, Glu did not induce a corresponding increase in ［Ca(2+)］(i) in IHCs, and 50 μmol/L of CNQX did not completely block the increase of ［Ca(2+)］(i) in IHCs.Conclusions These results suggest that the autoreceptors existing in the IHC membrane are m ainly of NMDA type, while there are relatively few AMPA receptors.Exogenou s Glu is capable of increasing ［Ca(2+)］(i) in IHCs by acting on the NMDA autoreceptor of IHCs in a positive feedback manner.