菟丝子总黄酮防护离体培养小鼠睾丸组织细胞凋亡的研究

目的研究菟丝子总黄酮对无血清培养睾丸细胞所致凋亡的保护作用及其机制。方法应用流式细胞仪PI法检测亚二倍体细胞凋亡;酶标仪测定MDA（丙二醛）含量。结果菟丝子总黄酮可抑制无血清培养诱导的睾丸细胞凋亡,降低丙二醛含量。其作用具有剂量依赖性．以500mg／L最明显。结论菟丝子总黄酮是具有抗凋亡、抗氧化的作用。     

桑叶总黄酮对2型糖尿病大鼠胰岛β细胞氧化损伤的影响

目的观察桑叶总黄酮对2型糖尿病大鼠胰岛β细胞氧化损伤的影响及作用机制。方法给大鼠腹腔注射30 mg·kg-1链脲佐菌素,建立2型糖尿病动物模型。造模后随机分成模型组,桑叶总黄酮低、中、高剂量组(50,100,150 mg·kg-1)和罗格列酮组(1.8 mg·kg-1),另取正常大鼠作为对照组,每组均为10只。灌胃给药,每日1次,连续5周后测定大鼠血清空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)水平和胰腺组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量。免疫组化法检测Bcl-2、Bax蛋白的表达,末端脱氧核糖核酸缺口标记法(TUNEL)加免疫组化法测定胰岛β细胞凋亡率。结果桑叶总黄酮能显著降低胰腺组织MDA水平,提高SOD和GSH-Px水平(P<0.05或P<0.01),显著上调抗凋亡基因Bcl-2表达,下调促凋亡基因Bax表达(P<0.05或P<0.01),使胰岛细胞凋亡率显著降低(P<0.05或P<0.01),并能显著降低FBG水平,升高FINS含量(P<0.05或P<0.01),其中以150 mg·kg-1桑叶总黄酮最为明显。结论桑叶总黄酮对2型糖尿病大鼠具有较好的抗氧化作用,可以缓解胰岛β细胞凋亡的发生。     

归芪五子方对睾丸损伤模型大鼠精子凋亡以及SOD和MDA与NOS水平的影响

目的观察归芪五子方对汽油尾气所致睾丸损伤模型大鼠精子凋亡率、睾丸组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、一氧化氮合酶(NOS)水平的影响。方法以气管滴定法复制汽油尾气睾丸损伤模型,并给予归芪五子方治疗,检测大鼠精子凋亡率及睾丸组织SOD、NOS、MDA水平。结果归芪五子方大剂量组精子凋亡率显著低于模型组(P<0.05);与模型组比较,归芪五子方大剂量组大鼠睾丸组织SOD水平显著升高,NOS、MDA水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论归芪五子方对汽油尾气所致睾丸损伤模型大鼠精子凋亡有一定抑制作用,机制可能为减少大鼠睾丸组织内自由基生成,提高其抗自由基能力。     

橄榄总黄酮对大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤的保护作用

目的观察橄榄总黄酮(total flavaone fromChinese Olive)对大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤的保护作用。方法线拴法阻塞大鼠中动脉2h/再灌注24h,观察橄榄总黄酮30、60mg.kg-1对神经功能缺失、脑梗塞体积、脑组织髓过氧化物酶(MPO)、还原型谷胱甘肽(GSH)、总抗氧化能力(T-AOC)的影响。结果橄榄总黄酮30、60mg.kg-1均对大鼠神经功能障碍有改善作用,明显缩小脑梗死灶,增加GSH活力和总抗氧化能力(T-AOC),缓解MPO升高。结论橄榄总黄酮对大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤有保护作用。     

豨莶草总黄酮对大鼠脑缺血损伤的保护作用及其作用机制研究

目的 探讨豨莶草总黄酮对大鼠局灶性脑缺血损伤的影响及其作用机制。方法 将SD大鼠随机分为6组:假手术组、模型组、银杏叶片(50 mg/kg)组及豨莶草总黄酮低、中、高剂量(5、10、20 mg/kg)组。采用线栓法建立大鼠局灶性脑缺血模型。观察豨莶草总黄酮对大鼠神经行为、脑梗死面积和脑组织含水量的影响。测定大鼠脑组织中丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性。结果 豨莶草总黄酮可明显改善大鼠神经功能缺陷,减轻脑水肿,减少脑梗死面积,降低脑组织MDA含量,提高脑组织SOD及GSH-Px的活性。结论 豨莶草总黄酮有抗脑缺血损伤作用,作用机制可能与其抗氧化作用有关。     

二至丸对氧化性肝细胞损伤的保护作用研究

目的:研究二至丸对氧化性肝细胞损伤的保护作用。方法:采用过氧化氢体外诱导肝细胞氧化损伤,MTT法检测细胞活性,测定肝细胞上清总抗氧化能力(TAOC)、超氧化物歧化酶(SOD)的水平和丙二醛(MDA)的含量。结果:40、8μg·mL-1剂量的二至丸可显著提高肝细胞的TAOC和SOD水平,降低MDA含量,可明显抑制过氧化氢的氧化损伤,提高肝细胞总抗氧化能力。结论:二至丸可有效抑制肝细胞氧化损伤,该结论可为临床用药提供理论依据。     

芹菜素处理雄性大鼠肝、脑、睾丸、肾和血清某些生化指标的变化

目的观察芹菜素(Apigenin,AP)对雄性大鼠肝、脑、睾丸、肾和血清脂质过氧化的影响,并探究其作用机制。方法 48只SD雄性大鼠随机分为对照组(生理盐水10 ml/kg)、低剂量组(AP 234 mg/kg)、中剂量组(AP 468 mg/kg)和高剂量组(AP936 mg/kg),灌胃35 d后测定血清和肝、脑、睾丸、肾的总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力和丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)含量。结果肝和血清234、468和936 mg/kg剂量组及肾468和936 mg/kg剂量组T-AOC低于对照组(P0.05),睾丸234和468 mg/kg剂量组T-AOC高于对照组、936 mg/kg剂量组低于对照组(P0.05),脑468和936 mg/kg剂量组T-AOC高于对照组(P0.05);肝234 mg/kg剂量组MDA含量高于对照组,468和936 mg/kg剂量组低于对照组(P0.05),睾丸234 mg/kg剂量组MDA含量低于对照组(P0.05),肾468 mg/kg剂量组MDA含量低于对照组、936 mg/kg剂量组高于对照组(P0.05);脑468 mg/kg剂量组和睾丸234、468和936 mg/kg剂量组GSH含量低于对照组(P0.05);肝芹菜素组SOD、CAT、GSH-Px活力低于对照组,睾丸芹菜素组SOD、GSH-Px活力低于对照组,脑芹菜素组SOD、GSH-Px活力高于对照组(P0.05),肾和血清抗氧化酶变化复杂。结论芹菜素能影响大鼠肝、脑、睾丸、肾、血清的抗氧化系统,但不一致:在本实验条件下,芹菜素在脑组织表现为抗氧化作用,在睾丸组织较低剂量下表现为抗氧化作用、较高剂量下表现为促氧化作用,在肝、血清、肾表现为促氧化作用;芹菜素对大鼠脏器脂质过氧化和总抗氧化能力的影响不一致。     

复方总黄酮对小鼠慢性酒精性睾丸损伤的作用研究

目的探讨复方总黄酮对慢性酒精睾丸损伤小鼠的保护作用。方法 100只SPF级C57BL/6小鼠随机分为5组:正常对照组、慢性酒精组、酒精+低剂量药物组、酒精+高剂量药物组、药物对照组,每组20只。采用酒精浓度递增梯度法建立小鼠慢性酒精睾丸损伤模型,同时用复方总黄酮进行干预治疗,连续6个月,测定睾丸组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)以及睾酮含量。HE染色观察组织形态学变化,电镜观察其超微结构改变。结果慢性酒精组小鼠睾丸组织中MDA含量明显升高,SOD活力以及睾酮含量下降,与正常对照组比较差异有显著性(P<0.05);此外,睾丸生精上皮结构破坏,支持细胞和各级生精细胞均有退化变性,复方总黄酮可呈剂量依赖性地逆转上述改变。结论复方总黄酮对慢性酒精睾丸损伤小鼠的保护作用可能与其抑制脂质过氧化和提高睾酮活性密切相关。     

天山花楸叶总黄酮对大鼠心肌缺血/再灌注损伤的保护作用

目的观察天山花楸叶总黄酮对大鼠心肌缺血/再灌注(I/R)损伤的保护作用,探讨其作用机制。方法采用改良的Langendorff逆行恒压灌流方法,建立大鼠离体心脏I/R损伤模型,观察天山花楸叶总黄酮(4.0、6.0mg·L-1)对心脏I/R损伤后心功能、心肌组织中超氧岐化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量变化的影响。利用DPPH、羟自由基、超氧阴离子、脂质过氧化反应体系,检测了天山花楸叶总黄酮(6.25、12.5、25、50、100mg·L-1)体外抗氧化能力。结果天山花楸叶总黄酮(6.0mg·L-1)可明显改善离体心脏I/R损伤后左心室发展压(LVDP)和左室压力升高或降低最大速率(±dp/dtmax),明显增加冠脉流量;天山花楸叶总黄酮(6.0mg·L-1)处理后I/R损伤心肌组织中SOD活性升高,MDA含量减少。天山花楸叶总黄酮(6.25～100mg.L-1)可浓度依赖性地清除DPPH自由基、羟自由基和超氧阴离子自由基,并抑制脂质过氧化反应。结论天山花楸叶总黄酮对心肌缺血/再灌注损伤具有明显保护作用,与其具有较强的抗氧化活性有关。     

黄蜀葵总黄酮对MCAO大鼠脑细胞凋亡的影响

目的 观察黄蜀葵总黄酮(TFA)对MCAO大鼠脑细胞凋亡的影响。方法 透射电镜观察TFA对脑细胞超微结构的影响,TUNEL法对TFA脑细胞凋亡的影响进行半定量观察。结果 透射电镜观察发现 TFA 50、100mg·kg~(-1)能改善脑细胞超微结构的变化,TUNEL法观察发现TFA25、50、100mg·kg~(-1)能剂量依赖性地减少凋亡细胞的数目。结论 TFA能通过抗脑细胞凋亡发挥脑缺血损伤保护作用。     

Determination of flavonoids in Semen Cuscutae by RP-HPLC

Flavonoids contents in 40 samples of Semen Cuscutae collected from areas all around China were investigated. Five principal flavonoids, quercetin 3-O-beta-D-galactoside-7-O-beta-D-glucoside, quercetin 3-O-beta-D-apiofuranosyl-(1-->2)-beta-D-galactoside, hyperoside, quercetin and kaempferol were analyzed simultaneously by using a reversed phase liquid chromatograph system with 0.025 M phosphoric acid-methanol as mobile phase. The recovery of the method was 97.0-102.9%, and all the flavonoids showed good linearity (r > or = 0.9990) in a relatively wide concentration range. The results indicated that contents of flavonoids in S. Cuscutae varied significantly from species to species, locality to locality, and parasiting host to host. Cuscuta australis contained a much higher content of kaempferol than C. chinensis, and few flavonoids were detected in C. japonica. The quality of S. Cuscutae can be evaluated according to the contents of flavonoids.     

中药材菟丝子的质量情况分析

目的：通过对菟丝子常见伪品逐一梳理介绍鉴别要点,探讨分析菟丝子的质量情况。方法：通过菟丝子的日常验收检验,利用性状、水煮、压碎等简单的经验鉴定方法,区分出菟丝子不同的掺伪品。结果：菟丝子经验鉴别方法简单准确,62批市售菟丝子中只有8批样品为正品,其他54批样品存在掺杂、掺伪情况。结论：应加强对菟丝子掺伪品的鉴别,对菟丝子的质量情况进行系统分析研究,控制菟丝子的药材质量。     

种子类药材菟丝子提取工艺研究

目的 针对菟丝子种皮致密,提取溶剂不易渗透进入种子内部,有效成分难以提取出来的问题,本实验拟研究该药材的提取方法,优化提取工艺参数。 方法 以菟丝子中主要活性成分金丝桃苷含量为评价指标,采用单因素平行比较法确定菟丝子提取前处理方法(捣碎与否)、提取方式(包煎与否)和溶剂类型(水或乙醇),采用L₉(3⁴)正交试验法进一步优化提取工艺参数。 结果 包煎不利于有效成分的溶出,种子捣碎有利于有效成分的溶出,菟丝子最适宜的提取工艺为首先将其捣碎破裂开,然后采用不包煎的方式,用10倍量55%乙醇提取2次,每次1 h,验证实验菟丝子中金丝桃苷的提取量为2.04%,RSD(相对标准差)为1.7%。 结论 优选的菟丝子提取工艺稳定可行,可用于该药材的提取,为同类性质的种子类药材的提取提供参考。     

菟丝子对D-半乳糖所致衰老模型小鼠红细胞免疫功能的影响

目的 :观察菟丝子对 D-半乳糖所致衰老模型小鼠红细胞免疫功能的影响。方法 :采用 D-半乳糖所致衰老模型小鼠 ,灌服菟丝子水煎剂 30 d,测定红细胞 C3b受体花环率 (RBC- C3b RR)及免疫复合物花环率 (RBC- ICR)。结果 :菟丝子水煎剂能提高小鼠 RBC- C3b RR(P <0 .0 5 ) ,使小鼠 RBC- ICR降低 (P <0 .0 5 )。结论 :中药菟丝子明显增强衰老模型小鼠的红细胞免疫功能 ,具有延缓衰老作用     

中药材菟丝子中金丝桃苷含量测定的影响因素研究

目的 研究菟丝子中金丝桃苷含量测定结果的影响因素。方法 分别对供试品溶液制备的影响因素进行初步考察,发现粉碎是影响含量高低的关键因素。采用不同效能的粉碎机、不同的粉碎时间、粉碎次数等,对菟丝子药材进行粉碎,通过测定过筛后粉末中金丝桃苷的含量,以重点考察粉碎对测定结果的影响。结果 粉碎是影响菟丝子金丝桃苷含量高低的关键因素,而金丝桃苷在菟丝子种子不同部位的分布存在较大差异,其中以胚中含量较高。结论 由于菟丝子较难粉碎,而金丝桃苷含量在种子各部位的分布不均,含量测定中的粉碎是关键操作步骤。本研究为进一步完善粉碎的要求提供了一定的实验依据。     

正交设计优选菟丝子中总黄酮的提取工艺

目的:确定菟丝子总黄酮的最佳回流提取工艺。方法:采取正交优化实验,以芦丁为对照品,采用紫外分光光度法对提取物中的总黄酮含量进行测定。结果:检测波长为510nm,芦丁对照品在0.095~0.475mg/mL内线性良好(r=0.9992),最佳提取工艺条件为提取时间150分钟,提取次数3次,醇浓度为50%,料液比为1:8。结论:该方法稳定,经济,工艺合理。     

异硫氰酸苯乙酯对人乳腺癌MCF-7细胞凋亡作用及机制研究

目的探讨异硫氰酸苯乙酯诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡的作用及其可能的机制。方法以不同浓度异硫氰酸苯乙酯处理人乳腺癌MCF-7细胞,应用MTS法观察异硫氰酸苯乙酯对MCF-7细胞的抑制率,流式细胞术检测异硫氰酸苯乙酯对细胞凋亡、细胞周期以及活性氧表达的影响。结果将不同浓度的异硫氰酸苯乙酯作用于MCF-7细胞72h后,抑制了MCF-7细胞的增殖,其IC50为15.2μmol.L-1;以10和20μmol.L-1的异硫氰酸苯乙酯作用MCF-7细胞24h后,细胞出现凋亡现象,细胞周期阻滞在G2/M期,并造成细胞氧化损伤。结论异硫氰酸苯乙酯能够促进人乳腺癌MCF-7细胞凋亡,影响细胞周期,其作用机制可能与异硫氰酸苯乙酯可造成肿瘤细胞氧化损伤有关。     

荔枝核的抑瘤作用及对肝癌组织端粒酶活性的影响

目的:建立肝癌荷瘤小鼠模型,研究荔枝核水提物对小鼠模型实体瘤生长的影响。方法:小鼠S180肿瘤细胞与肝癌细胞混悬液用生理盐水按1∶1进行稀释,制成含瘤腹水混悬液;在给药前24h每只小鼠腋窝皮下接种0.2mL,整个操作在无菌条件下60min内完成。对小鼠S180肿瘤细胞、肝癌细胞连续10d给予荔枝核水提物,观察S180肿瘤细胞和肝癌细胞的生长情况、肝癌荷瘤小鼠体内Bcl -2的水平及肝癌细胞的凋亡情况。结果:荔枝核水提物能显著抑制S180肿瘤细胞和肝癌细胞的生长(P<0.01) ;荔枝核能显著升高肝癌荷瘤小鼠体内Bcl -2的水平(P<0.05或P<0.01) ;荔枝核能够显著促进肝癌细胞的凋亡。结论:荔枝核的抑瘤作用可能与升高动物体内的Bcl -2水平及促进癌细胞的凋亡有关。