以纤维蛋白胶为载体的注射型骨修复材料对兔桡骨骨缺损修复的实验研究

目的　了解以纤维蛋白胶 (FS)为载体的注射型骨修复材料修复兔桡骨节段性骨缺损的能力 ,为其临床的应用提供实验依据。方法　实验分组为 :实验组b (FS +bFGF +牛BMPbBMP)、对照组b1(FS +bBMP)、实验组r (FS +bFGF +rhBMP- 2 )、对照组r1(FS +rhBMP)、对照组FS。于 70只新西兰白兔右侧桡骨干处造成 1 5cm缺损 ,然后严密缝合皮下组织及皮肤 ,将各组材料经正常皮肤注射骨缺损处 ,术后不同时间进行放射学、组织学和骨密度等方法检查 ,对其成骨效应进行研究。结果　在以bBMP为成骨因子的实验区中 ,实验组b骨缺损区在成骨活跃程度、骨密度和再生髓腔结构等方面均显著优于对照组b1,使骨缺损得到了较彻底的修复 (P <0 0 1) ;同样 ,在以rhBMP - 2为成骨因子的实验区中 ,实验组r骨缺损区在成骨活跃程度、骨密度和再生髓腔结构等方面均显著优于对照组r1,使骨缺损得到了较彻底的修复 (P <0 0 1) ,对照组FS不能产生骨性愈合。结论　以FS为载体复合BMP和bFGF的注射型骨修复材料具有高效的骨修复能力。     

一种新型注射型骨修复材料对犬桡骨骨缺损修复的实验研究

目的 探讨以纤维蛋白胶(fibrin sealant,FS)为载体复合牛骨形态发生蛋白(bBMP)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的注射型骨修复材料修复犬桡骨节段性缺损的效果. 方法 12只家犬随机分为实验组和对照组,每组6只.12只成年健康家犬右侧桡骨中上段造成2.0 cm缺损,制成犬桡骨2.0 cm骨缺损实验模型,然后严密缝合皮下组织及皮肤.对照组和实验组分别经切口周围正常皮肤注射FS和FS bFGF bBMP到骨缺损处,术后4、8、16、24周进行放射学检查,术后24周取标本进行组织学和骨密度检查,研究其成骨效应. 结果 ①影像学:实验组术后4周缺损区有密度较低的骨痂形成;术后24周,皮质完全连接,髓腔再通.对照组术后24周内缺损区均无骨痂生长,骨缺损未得到修复.②骨密度测定:术后24周时实验组的骨密度(456.33±13.74)mg/cm2显著高于健侧(433.33±6.77)mg/cm2(t=2.57,P=0.00)及对照组(0mg/cm2)的骨密度.③组织形态学:术后24周实验组新生皮质骨十分致密,骨皮质连接完整,髓腔完全再通;对照组无新生骨形成,缺损处完全为结缔组织修复. 结论 以FS为载体复合bBMP和bFGF的注射型骨修复材料具有高效的骨修复能力,对家犬的骨缺损有良好的修复效果.     

纤维蛋白胶复合骨形成蛋白的注射型骨修复材料对兔骨髓基质细胞增殖和分化的影响

目的观察以纤维蛋白胶（fibrin sealant，FS）为载体复合骨形成蛋白（bone morphogenetic protein，BMP）的注射型骨修复材料对体外培养的兔骨髓基质细胞（marrow stromal cells，MSCs）增殖和分化的影响，为其临床应用提供实验依据。方法取3日龄新西兰兔骨髓进行培养传代，采用第3代细胞进行研究。实验分为3组，实验组：以含1μg／ml rhBMP-2注射型FS培养细胞；FS对照组：以单纯FS培养细胞；空白对照组：不作任何处理。采用细胞培养、组织化学及电镜等方法对各组兔MSCs的增殖、贴壁率、碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）活性及染色、Ⅰ型胶原表达、超微结构及细胞在材料中的生长情况进行观察。结果各组细胞促增殖作用由强到弱依次是：FS对照组→实验组→空白对照组，各组间差异均有统计学意义（P〈0.05）；对细胞贴壁率的影响总体由强到弱依次是：FS对照组→实验组→空白对照组，各组间差异均有统计学意义（P〈0.05）。各组ALP活性由强到弱依次是：实验组→FS对照组→空白对照组，各组间差异均有统计学意义（P〈0.05）；各组细胞的Ⅰ型胶原表达水平由高到低依次是：实验组→FS对照组→空白对照组，差异均有统计学意义（P〈0.05）。扫描电镜观察，材料表面粗糙，有微孔存在，FS对照组、实验组细胞与材料融合生长。透射电镜观察：实验组细胞向成骨细胞分化程度高，但细胞增殖活性较FS对照组稍差；FS对照组细胞向成骨细胞分化的程度较实验组低，细胞增殖活性较好；空白对照组的细胞增殖活性较差，胞外基质少。结论以FS为载体复合BMP的注射型骨修复材料可显著提高MSCs向成骨细胞方向的分化水平，但对MSCs促增殖作用不明显。     

复合基因重组人骨形成蛋白-2异种骨的研制及成骨活性研究

目的　研制新型具有诱导成骨活性的异种骨植骨材料。方法　在重组合异种骨 (RBX)基础上 ,以基因重组人骨形成蛋白 - 2 (rh BMP- 2 )取代从牛皮质骨中提取的牛 BMP,与去抗原牛松质骨载体 (BCB)复合 ,制成复合 rh BMP- 2的异种骨 (rh BMP- 2 / BCB) ;将 4周龄雄性 BAL B/ C小鼠 6 0只 ,随机分为实验组和对照组 ,于实验组小鼠左股部肌袋植入 rh BMP- 2 / BCB骨粒 ,对照组小鼠左股部肌袋植入 BCB骨粒 ,术后 7、14及 2 1天取材 ,通过组织学、骨计量学方法检测 rh BMP- 2 / BCB的诱导成骨活性。结果　 1实验组术后 7天在小鼠肌袋可诱导软骨生成 ,14天形成编织骨 ,2 1天改建成板层骨并形成大量骨髓 ;对照组于术后各时间点均未见有软骨及骨形成。 2实验组的碱性磷酸酶活性和钙含量均高于对照组 ,具有统计学意义 (P<0 .0 1)。结论　 rh BMP- 2 / BCB具有较好的骨诱导能力 ,是一种较理想的植骨材料     

重组人骨形态发生蛋白-2诱发黄韧带骨化的实验模型

目的 :建立脊柱黄韧带骨化的实验模型。方法 :以中国大白兔为实验对象 ,采用重组人骨形态发生蛋白 2(rhBMP 2 )作为诱导物 ,分别将rhBMP 2 /明胶海绵植入双侧黄韧带腹侧的硬膜外腔 (E1组 ) ,或直接将rhBMP 2注射到双侧的黄韧带内 (E2组 ) ,每一侧植入物中含rhBMP 2 10 0 μg。设立相应的对照组 (C1组、C2组 )。对手术节段进行X线、CT扫描及病理组织学检查。结果 :脊柱CT扫描发现E1组 4周时手术节段后正中椎板前方出现结节状高密度增高影 ,8周时密度进一步增高。病理组织学检查发现E1组手术节段韧带细胞分化为软骨细胞并发生骨化。E2组仅见黄韧带轻度增生肥厚及少量散在的软骨细胞。C1组和C2组黄韧带组织均未见明显异常改变。结论 :rhBMP 2可诱导脊柱黄韧带骨化 ;明胶海绵可作为BMP诱导成骨的载体。     

近交系小耳猪骨形态发生蛋白的骨诱导活性研究

目的 :探讨近交系西双版纳小耳猪骨形态发生蛋白骨诱导活性。方法 :用改良的Urist提取法从近交系小耳猪四肢皮质骨中提取纯化BMP ,行SDS PAGE蛋白电泳检测其分子量。将BMP 2mg、5mg 2种剂量分别植入 2组小鼠右侧股部肌袋中 ,于术后 7、14和 2 8d取材 ,X线摄片后行组织学观察、碱性磷酸酶检测。结果 :( 1)SDS PAGE显示小耳猪BMP相对分子量主要集中于 66KD、48KD、3 6KD、2 7KD、2 2KD及 14KD附近 ;( 2 )X线检测实验组BMP植入区及阴性对照组均未发现有明显的高密度影 ;( 3 )ALP活性检测显示 5mg组、2mg组及阴性对照组之间有显著性差异 (P <0 .0 1) ,5mg组ALP活性高于 2mg组及阴性对照组 (P <0 .0 1)。 ( 4 )组织学观察BMP 5mg组于术后 7d有大量间充质细胞增生聚集 ,第 14d有大量软骨细胞、类骨组织及少量新骨形成 ,第 2 8d可见板层骨及骨髓。结论 :研究结果显示小耳猪骨形态发生蛋白具有肯定的骨诱导活性。     

改良复合磷酸钙骨水泥诱导分化成骨作用的体外研究

目的 通过体外实验观察兔骨髓基质干细胞(BMSCs)与改良复合磷酸钙骨水泥(BCPC)共培养的生物相容性及诱导成骨活性,探讨其可能的机制.方法 配制相同大小规格的BCPC及普通磷酸钙骨水泥(CPC)块,实验分为4组:空白对照组(不加载体)、普通CPC组、BCPC组、加BMP组(加BMP的BCPC).将各组材料与兔BMSCs复合培养,倒置显微镜下观察细胞生长情况,进行细胞计数,碱性磷酸酶(ALP)试剂盒检测细胞合成ALP活性变化,扫描电镜观察细胞在材料表面的生长及长入情况,real-time PCR检测成骨及成软骨相关基因mRNA表达情况并比较表达差别.结果 复合培养后倒置显微镜观察各组细胞与载体边缘接触良好,各组细胞增殖差异无统计学意义(P＞0.05);扫描电镜观察细胞在BCPC表面生长增殖良好,逐渐伸出伪足并长入材料孔隙;复合培养7 d后,BCPC组及加BMP组比CPC组和空白对照组表达更高的ALP活性,差异有统计学意义(P＜0.05);复合培养第10天,BCPC组及加BMP组分别与CPC组及空白对照组比较,其成骨及成软骨相关基因mRNA表达差异有统计学意义(P＜0.05).结论 配制的BCPC具有良好的生物相容性和一定的成骨诱导能力,其疏松的结构及更大的孔径适宜细胞长入材料内部.     

胰岛素样生长因子-1对成纤维细胞向成骨细胞转化的影响

目的 探讨胰岛素样生长因子-1对成纤维细胞(Fb)向成骨细胞转化的影响. 方法 Fb来源于成年新西兰大白兔,通过分离、纯化、培养而得到.实验分为3组:空白对照组、成骨诱导组和实验组.空白对照组:常规培养液培养,不加入任何诱导剂及干预因子;成骨诱导组:成骨诱导液为常规培养液中加入浓度为1×10-8 mol/L地塞米松、50 mg/L维生素C、10 mmol/L β-甘油磷酸钠;实验组:成骨诱导液中加入终浓度为50 ng/mL的IGF-1.采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测各组细胞增殖情况,检测各组细胞碱性磷酸酶(ALP)活性,测定各组细胞培养后6d后的骨钙素含量,采用钙钴染色评价培养后2周的成骨能力.结果 实验组细胞增殖较其他两组旺盛,差异有统计学意义(P＜0.05),而空白对照组和成骨诱导组差异无统计学意义(P＞ 0.05).ALP活性和骨钙素测定:实验组ALP表达明显高于其他两组,差异有统计学意义(P＜0.05);成骨诱导组ALP表达高于空白对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).实验组钙化结节数量明显较其他两组多,成骨诱导组次之,空白对照组未见钙化结节.结论 胰岛素样生长因子-1可以促进Fb在成骨过程中的增殖以及增加其成骨能力.     

实时荧光定量聚合酶链反应筛选重组人骨形态发生蛋白-2诱导比格犬骨髓基质干细胞成骨分化差异表达的miRNAs

目的 利用实时荧光定量聚合酶链反应(Q-PCR)方法筛选骨形态发生蛋白-2(rhBMP-2)诱导比格犬骨髓基质干细胞(BMSCs)成骨分化的miRNAs,探讨过表达miRNAs对成骨分化的影响.方法 选取4只比格犬分离BMSCs原代,取培养至第3代BMSCs分为2组:对照组(用基础培养基培养)和实验组(在基础培养基中加入rhBMP-2培养7d,诱导细胞成骨分化).采用碱性磷酸酶染色法验证细胞成骨分化情况,采用Q-PCR法筛选成骨分化细胞与对照组细胞差异表达的miRNAs;随机选择其中一种低表达miRNA(miR-125b),采用Lipofectamine2000进行转染,其中实验组1转染miR-125bmimics以过表达miR-125b,其阴性对照实验组2转染mimics-NC,验证过表达miR-125b 7 d后对rhBMP-2诱导的比格犬BMSCs成骨分化的影响. 结果 成功建立比格犬BMSCs培养方法;rhBMP-2诱导比格犬BMSCs成骨分化7d后,进行Q-PCR筛选,获得表达差异相对于对照组达到2倍以上的miRNAs 41个,其中表达上调的有13个,表达下调的有28个;实验组1相对于实验组2,细胞中miR-125b表达上调4.13倍(P＜0.05).转染7d后,ALP染色结果显示:实验组1细胞质中深蓝色粗大颗粒明显少于实验组2. 结论 采用Q-PCR方法筛选比格犬BMSCs成骨分化的miRNAs系统高效、准确.筛选获得的miRNAs中,miR-125b过表达能够显著抑制比格犬BMSCs的成骨分化.     

重组腺病毒体外诱导山羊骨髓间充质干细胞成骨分化的研究

目的 探讨腺病毒介导骨形态发生蛋白2(BMP2)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)双基因体外转染山羊骨髓间充质干细胞(BMSCs)后目的基因表达与诱导成骨情况. 方法 从2岁健康雌性山羊髂骨处骨穿抽取骨髓2ml,利用密度梯度离心法分离培养山羊BMSCs,将前期构建好的腺病毒载体Ad-BMP2-bFGF、Ad-BMP2分2组,以MOI=5000分别转染BMSCs,每2d用ELISA法检测BMP2和bFGF的表达情况,每周用ALP染色试剂盒及定量试剂盒检测ALP表达情况. 结果 Ad-BMP2-bFGF转染BMSCs 48 h后,目的蛋白已有显著表达(BMP2为3996.22 pg/ml、bFGF为1352.15 pg/ml),第6天达到高峰(BMP2为5146.63 pg/ml、bFGF为1434.75pg/ml),与未转染组比较差异有统计学意义(P＜0.05),3周后细胞呈现明显的成骨改变,ALP活性明显增高(266mol/L),Ad-BMP2-bFGF组ALP表达量约为Ad-BMP 2组的1.5倍(P＜0.05). 结论 经Ad-BMP2-bFGF转染的BMSCs具有持续高水平目的蛋白表达活性,转染后的BMSCs表现出明显的成骨活性,成骨活性明显强于Ad-BMP2组.     

重组合异种骨移植成骨活性及量效关系的实验研究

观察重组合异种骨的成骨活性及其量效关系。方法采用ＲＢＸ移植建立ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠股后肌袋模型,术后定期对移植组织进行放射学,病理学及碱性磷酸酶活性检查。结果（１）含不同比例的牛骨形态发生蛋白的ＲＢＸ组,成活性与ｂＢＭＰ含量呈正相关,存在着剂量依赖关系;（２）ＲＢＸＩ组成骨良好,同样含量的纯ｂＭＰ组也出现可见的成骨效应,但最终未能成骨;（３）ＡＬＰ活性以术后７天最高,４２例时仍较明显。结论ＲＢＸ是高效     

神经营养因子家族及其受体在重组人骨形态发生蛋白-2诱导成骨中的表达

[目的]通过观察重组人骨形态发生蛋白-2（rhBMP-2）诱导成骨过程中神经营养因子（NTFs）家族及受体的表达，探讨神经营养因子在BMP骨诱导中的作用。[方法]建立小鼠右侧股后部异位成骨模型，实验组植入rhBMP-2胶原复合物，对照组仅植入相同体积的胶原海绵。分别于术后7、14和21d取材，进行组织学、免疫组化及RT-PCR检测。[结果]组织学证实rhBMP-2胶原复合物具有良好的骨诱导能力，而对照组未见成骨。术后第7d，在大量软骨形成期NGF和TrkA阳性染色达到高峰，成纤维细胞、成软骨细胞、软骨细胞、肥大软骨细胞和成骨细胞中均有阳性表达；BDNF在软骨细胞及软骨基质中有阳性染色，其受体TrkB仅在成软骨细胞和软骨细胞中有表达；NT-3与NGF表达相似，其受体TrkC仅在成软骨细胞和软骨细胞中有阳性染色。术后第14d，NGF和TrkA阳性表达局限于部分成骨细胞、骨样细胞和成骨样细胞；NT-3在软骨细胞、成骨细胞中明显表达。术后21d，只有少量成骨细胞、成骨样细胞中有NGF和TrkA的表达。RT—PCR检测结果显示，NTFs mRNA于术后第7d表达最高，与免疫组化中蛋白质的表达结果相一致。[结论]NTFs及其受体在rhBMP-2诱导成骨过程明显表达，提示NTFs可能通过直接和间接的方式协同BMP的诱导成骨过程。     

多孔双相陶瓷复合重组人骨形态发生蛋白-2和碱性成纤维细胞生长因子缓释微球的异位成骨活性

目的 观察复合重组人骨形态发生蛋白-2(rhBMP-2)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)缓释微球的多孔双相陶瓷(BCP)异位成骨活性.方法 A组(rhBMP-2+bFGF缓释微球/BCP)、B组(BCP)、C组(bFGF缓释微球/BCP)、D组(rhBMP-2缓释微球/BCP),其中bFGF和rhBMP的浓度各为5、15μg.规格均为3mm×8mm×28mm.将材料植入兔背部肌袋内,术后4、8、12周分别取材,行大体、组织学观察,测量新骨面积和血管生成.结果 8、12周A组成骨活性较其他组优,差异有统计学意义 (P<0.05).A组4周材料中有较多间充质细胞,并有少量毛细血管的生长;8周时可见散在分布的不成熟新生骨组织,材料基本降解;12周时出现成熟度较低的编织骨,为膜内成骨.结论 BCP复合rhBMP-2和bFGF缓释微球具有良好的异位成骨活性.

Abstract：

Objective To investigate the heterotopic bone formation ability of biphasic ceramics phosphate (BCP) combined with recombinant human bone morphogenetic protein-2 (rhBMP-2) and basic fibroblast growth factor (bFGF) microspheres.Methods The rabbits were divided into group A (rhBMP-2+bFGF/BCP), group B (BCP), group C (bFGF/BCP), and group D (rhBMP-2/BCP). The concentrations of bFGF and rhBMP were 5 μg and 15 μg, respectively. All the samples were 3 mm×8 mm×28 mm in size. The muscle pouches of the rabbits were implanted with the samples. The ectopic bone formation was evaluated in the following aspects: histology, osteogenic area, and blood capillary number at 4th, 8th and 12th week after operation.Results At any specified time point, the value of the heterotopic bone formation was significantly higher in group A than other groups (P< 0.05). The histological analysis showed that group A had more mesenchymal (MES) cells and fewer blood capillaries at 4th week after operation. At 8th week, the composite was degradated and diffusely distributed, and the immature new bone was found. There were low-grade mature woven bones at 12th week, and the membranous bone formation occurred.Conclusion BCP combined with rhBMP-2 and bFGF microspheres has good heterotopic bone formation ability.     

重组人骨形成蛋白2骨诱导中神经生长因子及其受体的表达

目的 观察重组人骨形成蛋白2（recombined human bone morphogenetic protein2，rhBMP-2）异位诱导成骨过程中神经生长因子（nerve growth factor，NGF）及其高亲和力受体（tyrosine kinasere ceptor A，TrkA）的表达，探讨NGF在BMP骨诱导中的作用。方法ICR小鼠36只，随机分为实验组和对照组，每组18只，均制备右侧股后部肌袋异位成骨模型。实验组植入含rhBMP-2胶原复合物，对照组仅植入相同体积的胶原海绵。分别于术后7、14和21d取材，行大体、组织学、免疫组织化学观察及RT-PCR检测。结果大体观察实验组术后7d，右股后部可扪及较硬肿块；术后14、21d，肿块硬度增加。对照组各时间点未发现肿块。组织学观察实验组中rhBMP-2胶原复合物具有良好的诱导成骨能力，免疫组织化学结果显示骨诱导材料植入后7d，NGF于成纤维细胞、成软骨细胞、软骨细胞、肥大软骨细胞和成骨细胞中均有阳性表达；14d，NGF阳性表达局限于部分成骨细胞、幼稚骨细胞和成骨样细胞，同时在骨髓中单核巨噬细胞、多核巨噬细胞和破骨细胞中有明显表达；21d，只有少量成骨样细胞和破骨细胞以及骨髓中多核巨噬细胞有NGF表达；TrkA免疫组织化学染色与NGF的表达基本一致。对照组术后各时间点未见成骨现象。实验组NGFmRNA的RT-PCR检测显示，术后7dNGF的mRNA表达最高，14d表达下降，21d只有微量表达。结论rhBMP-2复合物是一种有效的诱导成骨材料。在外源性BMP诱导成骨过程中有明显的NGF及其高亲和力受体TrkA的表达，NGF可以通过直接和间接的方式参与BMP的诱导成骨过程。     

脱蛋白骨,骨形态发生蛋白和三种生长因子重组合人工骨成？…

OBJECTIVE: To compare the osteogenesis of recombination artificial bones, which are bovine deproteined bone (bDPB) and bovine bone morphogenetic protein (bBMP), combined with tumor necrosis factor alpha (TNF alpha), basic fibroblast growth factor (bFGF), epidermal growth factor (EGF) respectively. METHODS: One hundred trephined skull bone defects in fifty rabbits were divided into four groups, which implanted with bDPB/bBMP/TNF alpha, bDPB/bBMP/bFGF, bDPB/bBMP/EGF, and bDPB/bBMP respectively. X-ray and histological changes were observed in the 1st, 2nd, 4th, 6th, 8th weeks after implantation. The content of 35S and 45Ca and ash weight were measured at 10 and 42 days after operation. RESULTS: The osteogenesis of bDPB/bBMP/TNF alpha group was stronger than that of bDPB/bBMP/bFGF group(P < 0.01), while bDPB/bBMP/bFGF group was stronger than that of bDPB/bBMP/EGF(P < 0.01). No significant statistical difference were found between bDPB/bBMP/EGF and bDPB/bBMP(P > 0.05). CONCLUSION: TNF alpha combined with bBMP and carrier can stimulate bone formation and increase the volume of new bone in vivo. It suggests that bDPB/bBMP/TNF alpha is a valuable biomaterial of bone graft.     

HA、RBM、BMP及FS复合物修复骨缺损的实验研究

目的探讨羟基磷灰石HA、自体红骨髓RBM、骨形态发生蛋白(BMP)及纤维蛋白(FS)复合物修复骨缺损的能力及其作为人工骨移植替代材料的可行性。方法在新西兰大白兔双侧桡骨制备骨缺损模型,将HA-RBM-BMP-FS复合物植入骨缺损动物模型处,以自体骨移植及空白组(不植入任何物质)作为对照,在2、4、8、12周四个时间点分别进行大体标本观查、组织病理学、X线片观察及生物力学测试,比较三者修复骨缺损的能力。结果大体标本观查、组织病理学、X线片显示,在12周,HA-RBM-BMP-FS复合物与自体骨移植组骨缺损均已完全修复,HA无明显吸收,而空白对照组骨缺损未修复;生物力学测试显示自体骨移植组与HA-RBM-BMP-FS复合物组差异无显著性意义。结论HA-RBM-BMP-FS复合物具有较强的成骨能力,可修复骨缺损,并能作为自体骨移植的一种替代物。     

BMP binding peptide: a BMP-2 enhancing factor deduced from the sequence of native bovine bone morphogenetic protein/non-collagenous protein.

Forty years ago, Marshall Urist described a partially purified extract of demineralized bone matrix which induced the formation of ectopic bone. This substance, bone morphogenetic protein/non-collagenous protein (BMP/NCP), was never purified to homogeneity but other investigators used similar starting materials to clone a number of recombinant BMPs. Urist recognized that his material probably contained the BMPs which had been cloned by others but always contended that it contained another, more potent, bone inducing material which differed significantly in its physical and chemical properties from the known BMPs. We have used Urist's protocol to isolate a protein that has the chemical and physical properties of Urist's "BMP". It is an 18.5 kD fragment of the bone matrix protein, SPP-24. This fragment contains the cystatin-like domain of SPP-24. We have located a 19 amino acid region which is similar to the TGF-beta/BMP-binding region of fetuin, a member of the cystatin family of protease inhibitors. A cyclic peptide, which we call BMP binding peptide (BBP) was generated using this sequence. The peptide avidly bound rhBMP-2 with a KD of 3 x 10(-5) M. When implanted alone in mouse muscle, the peptide frequently induced dystrophic calcification. When implanted with rhBMP-2, the peptide enhanced the osteogenic activity of the recombinant molecule. We hypothesize that Urist's "BMP" was a fragment of SPP-24 which influenced bone induction by binding to bone morphogenetic proteins. BBP may be clinically useful because of its effects on other bone-inducing substances.     

Reindeer BMP extract in the healing of critical-size bone defects in the radius of the rabbit

Background?Native BMP extracts from reindeer effectively induce ectopic new bone formation in vivo, but their bone healing properties have not yet been evaluated. We investigated the effect of reindeer BMP extracts on the healing of long bone defects.

Methods?The implants tested contained 5?mg or 10?mg of unsterilized BMP extract from reindeer and 10?mg of gamma-sterilized BMP extract administered with collagen carrier (Lyostypt, B. Braun, Germany). 70 μg of rhBMP-2 with collagen carrier (InductOs; Wyeth Europa) served as positive control, and collagen implants (Lyostypt) and untreated defects served as negative controls. New Zealand White rabbits with 1.5?cm of critical-size radius bone defects were used, with 8 weeks of follow-up.

Results?Radiographic analysis showed bone formation (BF) to be higher in all groups containing BMPs than in the untreated controls. BF was also higher in the rhBMP-2 group, and marginally higher in the group treated with 10?mg of unsterilized reindeer BMP extract (p = 0.06) as compared to the collagen controls. Bone union (BU) was better in the unsterilized BMP extract groups and rhBMP-2 group than in the untreated controls. BU was also better in the implants with 10?mg of unsterilized reindeer BMP extract and rhBMP-2 than in the collagen-treated implants. The mean area of new bone at the site of the defect proved to be higher in all implants containing BMP than in the untreated defects. It was also higher in the groups with 10?mg of unsterilized reindeer BMP extract and rhBMP-2 than in the collagen-treated controls. Mechanical tests showed torsional stiffness of the bones to be higher in the group with 10?mg of unsterilized BMP extract than in the collagen group. The mean cross-sectional bone area measured by pQCT densitometry was higher in the rhBMP-2 group than in the collagen group. The mean bone density at the defect area was higher in the group with 10?mg of unsterilized BMP than in the rhBMP-2 group.

Interpretation?We conclude that both reindeer BMP extract and rhBMP-2 induced improved healing of the rabbit radius bone defects at the doses used. Gamma sterilization of reindeer BMP extract reduced osteoinductivity slightly, but not significantly.     

纳米化仿生诱导骨的构建及促进兔横突间融合研究

目的 探讨纳米化仿生诱导骨促进兔脊柱融合的可行性.方法 成骨化兔脂肪基质细胞(ADSCs)接种在纳米级β磷酸三钙/壳聚糖/聚已内酯基质,构建纳米化仿生诱导骨;建立兔腰5～6横突间融合模型,A组纳米化仿生诱导骨,B组自体髂骨,C组脂肪基质细胞移植,D组空白支架,E组rhBMP-2注射.行影像学、组织学、免疫组化、新骨及诱导因子定量分析等检查.结果 A组融合能力最强,融合率100%、新骨面积比(87.32±1.68)%、BMP含量及力学指标(128±19)、(331.56±3.21)N、(526.78±3.19)Nmm均高于其他组,差异有统计学意义(P＜0.05);B、C组次之,E组新骨生长不明显,融合相对延缓.D组未融合.结论 仿生诱导骨能强化骨再生,促进脊柱融合.