MRSA杀白细胞素基因检测和SCCmec分子流行病学调查

目的 了解我院临床分离的耐甲氧西林金葡菌(MRSA)葡萄球菌染色体mec基因盒(staphyloccoccal cassette chromosome mec,SCCmec)的分布和杀白细胞毒素(Panton-Valentine Leukocidin,PVL)基因的携带状况.方法 收集我院2005年10月-2006年6月从临床标本中分离的30株MRSA(mecA基因阳性).运用多重PCR检测SCCmec的基因型和亚型;PCR扩增PVL基因;纸片扩散法检测MRSA对10种抗菌药物的耐药性.结果 30株MRSA中,SCCmecⅡ型6株(20.0%);SCCmecⅢ型15株(50.0%);SCCmecⅣa型1株和SCCmecⅤ型2株.6株MecA基因阳性菌株未能分型.PVL总阳性率36.7%(11/30),其中SCCmecⅡ1株、SCCmecⅢ5株、SCCmecⅣa 1株,SCCmecⅤ2株、未分型2株.SCCmecⅡ型和SCCmecⅢ型菌株除对β内酰胺类抗生素耐药以外,对其他抗菌药物呈现多重耐药.SCCmecaⅣa和SCCmecⅤ型的菌株除对β内酰胺类抗生素耐药以外,对其他类抗菌药物均敏感.结论 我院临床分离MRSA的SCCmec型别主要以SCCmecⅢ和SCCmecⅡ为主;PVL基因的阳性率较高;携带SCCmecⅡ和SCCmecⅢ的MRSA对抗菌药物呈现多重耐药现象.     

产P-V杀白细胞素金黄色葡萄球菌肺炎诊断与治疗

产Panton-Valentine杀白细胞素(Panton-Valentine Leukocidin,PVL)金黄色葡萄球菌近年来在全球范围广泛流行,并引起严重感染性疾病.PVL与一种以健康年轾人为主要感染人群的高发病率、高病死率坏死性肺炎密切相关,日渐受到广泛关注.本文就PVL的生物学特性、致病性,PVL相关的坏死性肺炎的诊断与治疗等作一综述.     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌杀白细胞素基因检测与耐药性分析

目的采用实时荧光PCR检测耐甲氧西林金葡菌(MRSA)杀白细胞素(PVL)基因,并分析其对抗菌药物敏感性,指导临床合理用药。方法采用双重实时荧光PCR技术对血液和脓液分离的40株MRSA进行PVL基因检测,并对PVL基因阳性菌株感染患者的临床资料进行分析;VITEK2-compact全自动微生物测试仪进行药敏试验。结果 40株MRSA检出7株PVL基因阳性,阳性率17.5%,PVL基因阳性菌株所致的感染分别为坏死性皮肤软组织感染3例,血流感染3例和乳腺脓肿1例。MRSA携带或不携带PVL基因菌株的药敏试验结果有所不同,未检出对万古霉素不敏感菌株。结论 MRSA携带或不携带PVL基因对抗菌药物敏感性有差异,本地区MRSA-PVL基因阳性率较高,应加强监测。     

MRSA和MSSA氨基糖苷类药物耐药性和耐药基因检测

目的比较耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(M RSA)和甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌(M SSA)对氨基糖苷类药物耐药性和耐药基因携带的不同。方法运用K-B法和PCR方法分别对16株M RSA和24株M SSA 4种氨基糖苷药物(丁胺卡那霉素、奈替米星、庆大霉素、妥布霉素)耐药性和氨基糖苷类耐药基因进行检测。结果M RSA与M SSA对氨基糖苷类药物耐药率分别为93.8%,62.5%,100%,100%和0.0%,0.0%,29.2%,33.3%,三种氨基糖苷类药物耐药基因aac(6')/aph(2')、aph(3')III、an t(4',4')携带率分别为68.8%,62.5%,6.3%和29.2%,8.3%,0.0%。结论M RSA较M SSA对氨基糖苷类药物有着更高的耐药性和耐药基因携带率。M RSA较M SSA对氨基糖苷类药物存在着更为复杂的耐药机制。     

携带Panton-Valentine杀白细胞素基因金黄色葡萄球菌所致感染类型研究

目的 研究携带Panton-Valentine杀白细胞素（Panton-Valentine leukocidin，PVL）基因金黄色葡萄球菌所致感染类型。方法利用多重PCR检测金黄色葡萄球菌临床分离株的PVL基因，应用多位点基因序列分型（multilocus sequence typing，MLST）技术对PVL基因阳性的菌株进行序列分型，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（methicillin-resistant Staphylococcus aureus，MRSA）的SCCmec基因分型采用多重PCR。结果 26株携带PVL基因的金黄色葡萄球菌有13株为ST88，5株为ST239，5株为ST398，ST25、ST30和ST59各1株。20株为医院获得株，主要引起肺部感染和术后伤口化脓性感染；6株为社区感染株，主要引起软组织化脓性感染。7株MSSA全部为ST88，主要引起化脓性感染。而19株MRSA分布在6种ST型中，主要有ST88-SCCmecⅢA、ST239-SCCmecⅢ、ST398．SCCmecⅣ和ST398-SCCmecⅢ。26株菌株分布于14个病区，在产科发生过携带PVL基因的ST88．SCCmecⅢA．MRSA克隆株的播散。结论 本院分离的携带PVL基因的金黄色葡萄球菌的序列型主要为ST88、ST239和ST398，既可造成医院感染也可造成社区感染且可能引起克隆株的播散。     

多重PCR检测MRSA的SCCmec基因分型

目的了解我院MRSA的流行状况。方法收集2005年1—6月65株社区感染MRSA及60株医院感染MRSA，应用多重PCR对MRSA染色体Dlec基因盒（staphylococcal cassette chromosomeSCCmec）分型及杀白细胞毒素（PVI。）基因检测，应用K—B纸片法进行药敏分析。结果125株MRSA的mecA基因阳性，其中SCCmecII型1株，SCCmecⅢ型120株，SCCmecⅣ型3株，未分型1株；未发现携带PVL基因的MRSA。携带SCCmecII型、SCCmecⅢ型的菌株均为多重耐药株，而携带SCCmecⅣ型的菌株除对8内酰胺类药物耐药外，对其他类别的抗菌药敏感。结论本院分离的MRSA以SCCmecⅢ型为主，发现SCCmecIV型CA-MRSA，但不携带PVL基因；携带SCCmecⅡ、SCCmecⅢ的临床分离株耐药严重。     

金黄色葡萄球菌基因检测及耐药性分析

目的 了解清远地区金黄色葡萄球菌(SA)的耐药性及耐药基因的分布情况,为临床合理使用抗菌药物提供依据.方法 收集2018年7月至2019年7月清远市人民医院检验科微生物室分离的80株SA,采用BD PhoenixTM100全自动微生物鉴定和药敏试验系统以及纸片扩散法进行细菌鉴定与药敏试验,采用聚合酶链反应(PCR)检测...     

杀白细胞素基因阳性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的耐药性分析

目的 了解杀白细胞素(PVL)基因阳性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的耐药情况,指导临床合理用药.方法 对临床收集的47株PVL基因阳性MRSA采用PCR法检测PVL基因,采用纸片扩散法进行药敏试验,并对结果 进行分析.结果 47株MRSA的PVL基因检出率为46.8%,PVL基因阳性、阴性MRSA对β-内酰胺类抗菌剂均100.0%耐药,PVL基因阳性MRSA对氨基糖苷类、利福平、四环素、红霉素、环丙沙星、亚胺硫霉素等抗菌剂全部耐药,对盐酸克林霉素的耐药率为95.5%;PVL基因阴性MRSA对上述抗菌剂的耐药性虽比PVL基因阳性MRSA轻,但耐药率也在88.0%以上,2组间耐药性比较,差异有统计学意义(P＜0.05).对复方新诺明敏感率在90.0%以上,未发现对万古霉素耐药株.结论 PVL基因阳性MRSA在临床检出率已较高,耐药性严重并呈多重耐药特征,增加了临床抗感染治疗的难度.     

MRSA对6种消毒剂耐药性及相关抗性基因的比较研究

目的观察医院分离的2株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和金黄色葡萄球菌标准株(ATCC 6538)对6种消毒剂的抗性与耐药基因变化。方法选择最小抑菌浓度(MIC)试验、悬液定量杀菌试验和耐消毒剂基因PCR检测。结果 MIC检测,医院分离的2株MRSA,对6种消毒剂的MIC,明显高于标准菌株。只有醋酸氯己定对MRSA-1的MIC值与标准菌株相同。PCR检测,2株MRSA均未携带耐消毒剂基因qacA/B。定量杀菌实验,苯扎氯铵、过氧乙酸、双癸基二甲基氯化铵对MRSA-1菌株的杀灭对数值低于标准菌株;苯扎氯铵、过氧乙酸、有效氯对MRSA-2菌株的杀灭对数值低于标准株。结论医院分离的2株MRSA对消毒剂的抗性普遍高于标准菌株,PCR检测未发现qacA/B基因。     

某院2010～2012年金黄色葡萄球菌的耐药性分析

目的分析广东省佛山市南海区第三人民医院金黄色葡萄球菌的耐药现状,为临床合理选用抗菌药物提供参考。方法收集2010年1月至2012年10月临床标本中分离的金黄色葡萄球菌,采用ATB new细菌鉴定分析仪进行鉴定和药敏试验,用K-B法进行耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的筛查。结果 (1)共分离金黄色葡萄球菌336株,标本类型主要为痰、伤口分泌物和血液,分别占64.9%、14.9%和8.9%;(2)痰液是MRSA检出率最高的标本类型,检出的MRSA对大环内酯类、氨基糖苷类、喹诺酮类抗菌药物呈多重耐药,其耐药率均大于90%。未发现耐万古霉素和利奈唑胺的金黄色葡萄球菌。(3)重症监护室(ICU)与非ICU病区分离株的耐药性不同:ICU分离的菌株对各种抗菌药物的耐药率明显高于其他非ICU病区(P<0.01),MRSA中有53.2%分离自ICU病区。结论该院金黄色葡萄球菌引起的感染以肺部感染最常见,临床分离株对常用抗菌药物的耐药率每年呈上升趋势,MRSA表现为多药高度耐药,但对糖肽类药物敏感性高。ICU病区是耐药性监测的重点科室,需重点把关,以防多重耐药菌株在院内暴发流行。     

宁夏地区耐甲氧西林金黄色葡萄球菌分子流行病学研究

目的调查临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的染色体m ec基因盒（SCCm ec）分型及杀白细胞素（PVL）的pvl基因携带率,初步了解宁夏地区MRSA分子流行病学特点。方法对2005年9月至2008年1月从临床标本中分离的MRSA菌株进行pvl基因检测,并应用多重聚合酶链反应（PCR）对MRSA菌株进行SCCm ec分型。结果 88株MRSA菌株中pvl基因阳性菌株8株（9.1%）,SCCm ec分型结果为Ⅲ型86株（97.7%）、Ⅱ型2株（2.3%）。结论宁夏地区分离的MRSA菌株SCCm ec分型以Ⅲ型为主,SCCm ec分型是探索MRSA多重耐药性有效的分子生物学手段。     

杀白细胞毒素基因阳性MRSA的临床和实验研究

目的了解2003-2006年我院MRSA临床分离株中杀白细胞毒素（PVL）基因的分布、SCCmec分型、药物敏感性及其临床特征。方法对2003年1月至2006年12月我院1366株MRSA临床分离菌株，用PCR方法筛选PVL基因阳性菌株，用多重PCR方法进行SCCmec分型；并进行回顾性研究，分析PVL基因阳性及阴性株所致感染的临床特点及相关危险因素；用琼脂稀释法测定其对临床常用抗菌药的敏感性（MIC）。结果在1366株MRSA菌株中共筛出5株PVL基因阳性菌株，阳性率为0．37％。50株MRSA临床分离菌株中，SCCmecI型1株，占2％（1／50）；SCCmecⅡ型26株，占52％（26／50）；SCCmecⅢ型16株（其中包括SCCmecⅢA1株），占32％（16／50）；SCCmecⅣ型1株，占2％（1／50）；SCCmecⅤ型2株，占4％（2／50）；4株（8％）未能分型。5株PVL基因阳性株中SCCmec11型1株，SCCmecIV型1株，SCCmecⅤ型2株，未分型1株。MIC结果显示PVL基因阳性株较阴性株对多种非β内酰胺类抗生素更为敏感，未发现万古霉素不敏感菌株。该5株PVL阳性菌株所致感染分别为皮肤软组织感染2例、肺部感染2例和尿路感染1例。结论PVL基因阳性MRSA已在我院检出，应加强医院感染控制防治其播散流行。     

显色培养基检测医务人员手和鼻咽携带耐甲氧西林金黄色葡萄球菌方法的应用评价

目的：通过对本院医生、护士及护理员的手及鼻咽前庭进行耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）检出情况的分析,比较两种检验方法MRSA的检出效果。方法将医护人员的678例手标本及179例鼻咽前庭标本分别用两种检验方法进行MRSA鉴定,一种将标本用血平板分离培养初筛后,再用全自动微生物鉴定仪进行菌种鉴定,同时用头孢西丁（30μg/片）和苯唑西林（1μg/片）纸片扩散法按2010年美国CLSI抗菌药物敏感试验标准进行药物敏感试验鉴定MRSA,此传统检测方法为本实验的参考方法,结果准确可靠,另一种将标本直接接种于MRSA选择性显色培养基上,根据判定说明书观察在培养基上金黄色葡萄球菌的生长情况鉴定MRSA,此为快速检测方法,并进行两种方法MRSA检出效果的比较。结果传统检测方法检出手标本有5株MRSA,44株甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA）,鼻咽前庭拭子标本有3株MRSA,22株MSSA;快速检测方法检出手标本有6株MRSA,43株MSSA,鼻咽前庭拭子标本有3株MRSA,22株MSSA。结论采用MRSA选择性显色培养基方法与传统检测方法比较,手标本检出MRSA的总符合率为95.9%,鼻咽前庭标本检出MRSA的总符合率为100%,两种检测方法对于MRSA及MSSA检出结果均无显著性差异（P〉0.05）,由于其操作简便,特异性高,适合于在各级临床实验室广泛推广用于鉴定MRSA。     

上海地区3所医院MRSA的随机扩增多态DNA分型

目的分析上海3所医院分离的MRSA分布现状,以确定在这些医院内是否存在MRSA流行。方法用苯唑西林纸片扩散法、头孢西丁纸片扩散法、mecA基因扩增等方法检测MRSA,用随机扩增多态DNA(RAPD)法对所分离的112株MRSA进行同源性分析。结果RAPD法将检测菌株分为4个型别(A～D型),其中RAPDC型是上述2所医院的惟一流行菌株,B型和C型存在于另1所医院。结论在上述3所医院内存在相对单一的MRSA流行株。     

Description of Methicillin-Susceptible Staphylococcus aureus Clonal Complex 30 Related to the Pandemic Phage Type 80/81 Isolated from Patients in Three Tertiary Hospitals in Jos,North Central Nigeria

ObjectiveThe prevalence of phage 80/81 Staphylococcus aureus strains, the pandemic strains that were dominant in the 1950s, had declined in the 1960s and 1970s. However, these strains have reemerged in some countries in recent years. This study investigated the antibacterial resistance, virulence, and the genetic backgrounds of CC30-MSSA isolates obtained from patients in three tertiary hospitals.Materials and MethodsTwenty-two CC30-MSSA isolates cultured from different clinical samples were investigated using antibiotic sensitivity testing, spa typing, multilocus sequence typing, and DNA microarray analysis.ResultsAll 22 isolates were susceptible to vancomycin (MIC ≤2 μg/mL), teicoplanin (MIC ≤2 μg/mL), and cefoxitin but were resistant to penicillin G (n = 22; 100.0%), tetracycline (n = 12; 54.5%), ciprofloxacin (n = 15; 68.2%), cadmium acetate (n = 22; 100%), mercuric chloride (n = 13; 59.1%), and ethidium bromide (n = 3; 13.6%). The isolates belonged to sequence type, ST30, and five spa types: t012 (n = 12; 54.5%), t019 (n = 5; 22.7%), t017 (n = 2; 9.1%), t037 (n = 2; 9.1%), and t318 (n = 1; 4.5%). All 22 isolates were positive for agrIII, cap8, clfA, clfB, icaA, icaC, icaD, cna, and staphylococcal enterotoxin gene clusters (seg, sei, sem, sen, seo, seu). Eight isolates carried lukS-PV and lukF-PV that code for Panton-Valentine leukocidin.ConclusionThe current CC30-MSSA isolates share phenotypic and genotypic characteristics with the pandemic phage 80/81 isolates that were common in the 1950s and 1960s. Continued surveillance is recommended to keep abreast of the changing epidemiology of S. aureus causing healthcare and community-associated infections.     

医院MRSA感染危险因素分析

目的分析医院耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)感染危险的因素,以便采取有效措施降低感染率。方法对各科室送检标本实施MRSA菌株分离,然后采用1∶1成组病例对照选取非医院MRSA感染患者60例,并与60例医院MRSA感染患者料进行单因素分析、多因素研究分析。结果单因素分析结果显示高龄、住院时间长、抗生素使用超过2种、广谱抗菌药使用时间超过7 d、侵入性操作超过2项等因素与医院MRSA感染有关。多因素分析结果显示医院MRSA感染的危险因素主要有住院时间长、侵入性操作超过2项、广谱抗菌药使用时间超过7 d和抗生素使用超过2种。结论侵入性操作、长时间住院、光谱抗菌药长时间使用和抗菌药的不合理应用是医院MRSA感染的危险因素。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的耐药性及分子流行病学调查

目的了解MRSA的耐药性及分子流行病学特点。方法采用纸片扩散法检测住院患者分离的160株MRSA的耐药性;采用随机引物(AP)-PCR法对其中的36株MRSA作同源性分析。结果160株MRSA对万古霉素、替考拉宁和复方磺胺甲噁唑的敏感率分别为100%、100%和95%;对红霉素、庆大霉素和左氧氟沙星的耐药率分别为97.5%、87%和59%;左氧氟沙星的中介率为26%。36株MRSA的AP-PCR图谱有10种类型(A～J型),主要型别为A型12株、B型7株及C型6株,ICU的25株,分别为A型10株、B型6株、C型3株、D型3株及F、I、J各1株。结论医院获得性MRSA是多重耐药菌,ICU的MRSA菌株主要基因型为A、B型。     

2018年信阳市7家县级医院细菌耐药监测分析

目的了解2018年信阳市县级医院临床分离菌的分布及耐药性。方法对信阳市7家县级医院临床分离菌进行药物敏感性试验,结果按照美国临床和实验室标准化协会(CLSI)2017版标准判断结果。结果共收集2018年上述7家医院临床分离菌1953株,以革兰阴性细菌为主(71.8%)。肠杆菌科细菌多数菌属对碳青霉烯类抗菌药物的耐药率低于5.0%,但耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)检出率为11.3%。鲍曼不动杆菌对碳青霉烯耐药率达40.0%以上。铜绿假单胞菌对碳青霉烯耐药率低于10.0%。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)检出率分别为32.5%、47.5%;甲氧西林敏感凝固酶阴性葡萄球菌(MSCNS)对庆大霉素和环丙沙星耐药率明显高于甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)。屎肠球菌对多数抗菌药物的耐药率高于粪肠球菌。儿童中对青霉素耐药的肺炎链球菌高于成人。结论信阳市7家县级医院细菌耐药性低于河南省整体耐药水平,但CRKP等耐药菌主要集中在重症监护室,所以临床医生应重视标本送检,做好院感控制,防止耐药菌扩散。     

金黄色葡萄球菌临床分布及耐药性分析

目的对金黄色葡萄球菌（SAU）的临床分布、构成及耐药性进行分析,以指导临床合理用药。方法分离出金黄色葡萄球菌290株,采用VITEK-2 Compact全自动细菌鉴定仪进行细菌鉴定和药物敏感试验。结果2年共分离出金黄色葡萄球菌290株,其类型主要包括了以下几种：痰106株（36.5%）,伤口95株（32.8%）,血液53株（18.3%）。主要分布于针灸科41株、脉管炎科34株、肾病科28株、内分泌科28株、脑病科24株、ICU 22株、肺病科17株等,对青霉素G、红霉素、四环素、环丙沙星、克林霉素、庆大霉素的耐药率分别为92.8%、65%、62.1%、57.5%、48.7%、47.9%,复方新诺明、利福平、呋喃妥因的耐药率低于20%,对万古霉素、利奈唑胺、替加环素、替考拉宁的敏感率为100.0%。290金黄色葡萄球菌中检出耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）174株（60.0%）。结论了解和掌握本院金黄色葡萄球菌的分布和构成以及耐药状况,对指导临床合理选用抗菌药物、延缓细菌耐药株产生具有重要意义。