夫西地酸钠联合利福平对表皮葡萄球菌体外培养生物膜的作用

背景：表皮葡萄球菌是材料植入后感染的主要病原体,致病机制是在材料表面形成生物膜,生物膜形成后,单一用药抑制其细菌生长的效果较差。目的：建立表皮葡萄球菌生物膜体外模型,观察夫西地酸钠联合利福平对表皮葡萄球菌体外培养生物膜的作用。方法：体外培养生物膜,微量肉汤稀释法检测最低抑菌浓度,将低于最低抑菌浓度的夫西地酸钠和利福平单独或联合使用作用于表皮葡萄球菌早期与成熟期生物膜,观察其对表皮葡萄球菌早期和成熟生物膜的影响。结果与结论：夫西地酸钠和利福平均可抑制表皮葡萄球菌的黏附和生物膜的形成,对早期及成熟期生物膜内细菌有杀菌效应,二者联合应用后疗效明显优于单独应用（P〈0.05）。提示夫西地酸钠联合利福平可明显抑制抑制表皮葡萄球菌的黏附和生物膜的形成,对早期及成熟期表皮葡萄球菌-生物膜有破坏作用,具有明显杀菌活性,是治疗细菌生物被膜相关感染的良好选择。     

本期专题：防止细菌生物膜生成的抗菌生物材料（本刊中文部）

1夫西地酸钠联合利福平对表皮葡萄球菌体外培养生物膜的作用 推荐理由：夫西地酸钠和利福平均可抑制表皮葡萄球菌的黏附和生物膜的形成,对早期及成熟期生物膜内细菌有杀菌效应,二者联合应用后疗效明显优于单独应用。提示夫西地酸钠联合利福平可明显抑制表皮葡萄球菌的黏附和生物膜的形成,对早期及成熟期表皮葡萄球菌-生物膜有破坏作用,具有明显杀菌活性,是治疗细菌生物稿-膜相关感染的良好选择。     

亚抑菌浓度红霉素对表皮葡萄球菌临床菌株的影响

目的探讨亚抑菌浓度红霉素对表皮葡萄球菌临床菌株的影响。方法收集该院表皮葡萄球菌临床菌株,按照临床实验室标准化协会推荐的方法进行药敏试验。采用免疫比浊法检测亚抑菌浓度红霉素对表皮葡萄球菌增殖的影响,并采用结晶紫染色法检测亚抑菌浓度红霉素对其生物膜形成的影响。最后,利用实时荧光定量PCR检测亚抑菌浓度红霉素对表皮葡萄球菌黏附基因表达的影响。结果共收集5株临床分离表皮葡萄球菌,最低抑菌浓度分别为16、32、16、64和32μg/mL。亚抑菌浓度的红霉素(8μg/mL)对表皮葡萄球菌浮游菌的增殖无影响(P0.05),但能显著抑制其生物膜的形成(P0.05)。8μg/mL的红霉素还能显著抑制黏附基因icaA和icaD基因的表达(P0.05)。结论亚抑菌浓度红霉素能抑制表皮葡萄球菌临床菌株生物膜的形成及黏附基因的表达。     

五倍子与阿奇霉素协同对金黄色葡萄球菌生物被膜的体外抗菌作用

目的观察五倍子与阿奇霉素协同对金黄色葡萄球菌生物被膜的影响。方法平板培养法制备细菌生物被膜,银染法初步鉴定生物被膜和测定生物被膜的黏附性,分别在生物被膜形成的不同时间单独或联合加入1/4最低抑菌浓度的阿奇霉素和不同浓度的五倍子,菌落计数法计数加药后生物被膜内细菌数,并与不加药物所形成的生物被膜作比较。结果五倍子的浓度在大于或等于0.25mg/mL时,对浮游的金黄色葡萄球菌有杀菌、抑菌的作用,但对金黄色葡萄球菌生物被膜作用不明显;但与1/4最低抑菌浓度的阿奇霉素联合作用后可显著减少细菌的黏附性,减少培养液和被膜中存活菌数。结论五倍子对金黄色葡萄球菌具有很强的杀菌、抑菌作用,但对生物被膜作用不明显;阿奇霉素可减少细菌的黏附,预防或抑制细菌生物被膜的形成;五倍子与阿奇霉素联合用药可增强对金黄色葡萄球菌生物被膜的杀菌作用。     

双黄连注射液与莫西沙星联用对铜绿假单胞菌生物被膜的影响

目的采用体外复制铜绿假单胞菌生物被膜模型,研究双黄连注射液与莫西沙星联合应用对铜绿假单胞菌生物膜的影响及协同杀菌效果。方法采用二倍稀释法,测定药物的最低抑菌浓度;并用菌落计数法计数单独或联合加入不同浓度双黄连注射液与莫西沙星的生物膜内细菌数量。结果 1/16最小抑菌浓度(MIC)的双黄连注射液单独或与1/4MIC莫西沙星联合作用后可减少细菌对铜绿假单胞菌生物膜的抑菌活性。结论双黄连注射液与莫西沙星对铜绿假单胞菌生物被膜具有明显的协同作用。     

高浓度葡萄糖对表皮葡萄球菌生物膜在生物材料表面形成的影响

背景:因植入性材料所带来的生物材料感染在糖尿病患者中较高,在非糖尿病手术期间存在高血糖的患者也有较高感染率.在体外研究不同浓度血糖对生物材料上形成细菌生物膜的影响报道较少.目的:观察高浓度葡萄糖对表皮葡萄球菌生物膜在生物材料表面形成的影响.方法:采用不同浓度葡萄糖培养表皮葡萄球菌感染模型.结晶紫染色法对生物膜进行半定量检测,激光共聚焦显微镜观察生物膜的厚度.结果与结论:半定量实验显示生物膜形成阳性株(表皮葡萄球菌ATCC35984)吸光度值均大于0.12,随着培养基中葡萄糖浓度的增加,其吸光度值呈上升趋势,而在50 mmol/L 葡萄糖浓度时其吸光度值最高.激光共聚焦显微镜观察生物膜形成阳性株(表皮葡萄球菌ATCC35984)中,≥11.1 mmol/L 葡萄糖各组与无葡萄糖组相比,其生物膜厚度明显增加(P<0.05).生物膜形成最高值在 50 mmol/L 组.生物膜形成阴性株(表皮葡萄球菌 ATCC12228)中均无明显生物膜形成.结果表明高浓度葡萄糖明显诱导表皮葡萄球菌生物膜的形成,控制血糖是降低糖尿病生物材料感染的重要措施之一.     

注射用夫西地酸钠与转化糖电解质存在配伍禁忌

注射用夫西地酸钠的主要成分为夫西地酸钠。辅抖为甘氨酸、L-精氨酸，为白色疏松块状粉末，溶剂为白色的澄明液体。主治由各种敏感细菌尤其是葡萄球菌引起的感染，     

万古霉素联合利福平对降低金黄色葡萄球菌耐药的影响研究

目的研究万古霉素联合利福平对降低金黄色葡萄球菌耐药的影响。方法培养金黄色葡萄球菌ATCC25923,检测耐药指标最低抑菌浓度(MIC)、防细菌耐药突变体选择浓度(MPC)、突变选择窗(MSW);建立组织笼感染模型,给药后测定药代动力学指标。结果万古霉素和利福平联用的MIC、MIC99、MPC及发生耐药例数明显低于单独用药;药物浓度高于MPC所占的时间比率(T>MPC)、24 h曲线下面积(AUC24)/MIC、药物浓度在MSW内所占的时间比率(TMSW)均明显高于单独用药。结论万古霉素和利福平联合应用能够降低金黄色葡萄球菌的耐药程度、改善浓度效应和时间效应。     

夫西地酸钠与八种药物存在配伍禁忌

注射用夫西地酸钠的主要成分为夫西地酸钠,辅料为甘氨酸、L-精氨酸,为白色疏松块状粉末,溶剂为白色的澄明液体。主治由各种敏感细菌尤其是葡萄球菌引起的感染,如骨髓炎、心内膜炎、反复感染的囊性纤维化、肺炎、皮肤及组织感染。在临床中常与下列药物联合使用易出现配伍禁忌,现报告如下。     

RNAⅢ抑制肽抑制葡萄球菌对Hela细胞的黏附

背景：葡萄球菌导致的细菌感染和生物被膜形成可在骨科植入物或创口愈合时发生。受细菌群体感应机制调控,葡萄球菌RNAⅢ抑制肽可以干预葡萄球菌的群体感应系统,阻断葡萄球菌细胞间的信号传导通路,从而抑制葡萄球菌的生物被膜形成,防止葡萄球菌感染。
　　目的：观察RNAⅢ抑制肽抑制表皮葡萄球菌对人宫颈癌上皮细胞黏附的效果。
　　方法：体外培养人宫颈癌上皮细胞,实验分4组,空白组每孔加入DMSO的生理盐水,RNAⅢ抑制肽组加含RNAⅢ抑制肽的DMSO溶液,左氧组加入左氧氟沙星的水溶液,联合组用药剂量参照上述两组联合干预。通过组间对照的方法,对比研究表皮葡萄球菌在生理盐水、RNAⅢ抑制肽、左氧氟沙星及两药联合作用下对Hela细胞的黏附情况。
　　结果与结论：空白组 Hela 细胞层表面有大量细菌黏附,而各用药组细菌黏附的数量均显著低于空白组(P<0.001),左氧组光点计数明显低于RNAⅢ抑制肽组(P<0.05),而联合组Hela细胞层表面黏附的细菌数量进一步降低(P<0.01)。结果证实,RNAⅢ抑制肽可以有效抑制表皮葡萄球菌对宿主细胞表面的黏附,并且与抗生素有协同作用。     

自溶素基因与表皮葡萄球菌生物膜形成相关性研究

目的研究自溶素(atlE)基因与表皮葡萄球菌生物膜形成的相关性。方法收集2015年6月至2016年6月该院临床分离的表皮葡萄球菌64株进行研究,用生物膜形成试验检测细菌生物膜,采用聚合酶链反应扩增atlE基因,分析atlE基因与表皮葡萄球菌生物膜形成的相关性。结果检出生物膜阳性菌株24株,检出率为37.5%;检出atlE基因菌株31株,检出率为48.4%;atlE基因与表皮葡萄球菌生物膜形成有明显的相关性(P0.05)。结论表皮葡萄球菌有生物膜形成能力,atlE基因与表皮葡萄球菌生物膜形成相关。     

头孢曲松对表皮葡萄球菌生物膜形成的抑制作用

目的观察头孢曲松等4种抗生素抑制表皮葡萄球菌生物膜的作用,探讨抗生素防治葡萄球菌感染的作用环节。方法用半定量粘附实验筛选出形成生物膜的表皮葡萄球菌15株,观察不同浓度的药物对生物膜形成的抑制作用。结果发现头孢曲松能抑制生物膜形成,而头孢他啶、红霉素无抑制葡萄球菌生物膜的作用,万古霉素对葡萄球菌有很强的杀菌作用,但无抑制生物膜的作用。结论头孢曲松能抑制葡萄球菌生物膜形成,可利用头孢曲松抑制生物膜的作用,通过阻止粘附来阻断葡萄球菌引起的粘附相关感染,达到预防感染的目的。     

肺癌患者中心静脉导管相关表皮葡萄球菌icaA、icaD表达及转化生长因子β1与生物膜的关系

背景：研究证实,以生物材料为中心的感染细菌临床株致病力与其在中心静脉导管材料表面形成细菌生物膜的能力呈正相关。目的：分析肺癌患者中心静脉导管相关表皮葡萄球菌icaA、icaDmRNA表达及外周血转化生长因子β1水平与细菌生物膜形成的关系。方法：种属鉴定相关性血流感染肺癌患者表皮葡萄球菌类型后行细菌基因组DNA抽提,PCR法检测生物膜形成相关基因icaA、icaDmRNA表达及生物膜表型。酶联免疫吸附试验检测相关性血流感染与未感染肺癌患者血清转化生长因子β1水平。结果与结论：相关性血流感染肺癌患者表皮葡萄球菌操纵子icaA、icaD基因表达与生物膜形成呈正相关（P〈0.01）,且表皮葡萄球菌生物膜阳性患者外周血转化生长因子β1水平较无相关性血流感染肺癌患者高（P〈0.05）。表明置入中心静脉插管引起表皮葡萄球菌感染icaA、icaD基因表达阳性肺癌患者较易形成细菌生物膜,外周血高水平转化生长因子β1对细菌生物膜形成有积极作用。     

In vitro activity of tigecycline against Staphylococcus epidermidis growing in an adherent-cell biofilm model

The activity of tigecycline against Staphylococcus epidermidis growing in an in vitro adherent-cell biofilm model was determined. Tigecycline minimum bactericidal concentrations (MBCs) ranged from 1 to 8 microg/ml for S. epidermidis growing in a biofilm of adherent cells, compared to MBCs of 0.12 to >32 microg/ml for freely growing cells. The killing activity of tigecycline against the adherent bacteria was at least fourfold better than that of vancomycin and daptomycin.     

Foreign body infections due to Staphylococcus epidermidis

Staphylococcal infections are one of the main causes of complications in patients with implanted foreign prosthetic material. Implants are associated with a significant reduction of the threshold at which contaminating Gram-positive bacteria, particularly Staphylococcus epidermidis, become infectious and develop a biofilm with phenotypic resistance to almost all antibiotics. A 1000-fold increase in minimal bactericidal levels against most antibiotics except rifampin has been repeatedly observed. Since only removal of the foreign material reverses these phenomena, the clinical challenge consists in finding approaches to cure the infection without removal of the implanted device. Rifampin combinations with other antibiotics, administration of exceedingly high antibiotic concentrations in situ, and early therapy before biofilm development are efficacious. Although these strategies have dramatically improved the outcome of foreign body infections, an improved understanding of biofilm-grown S. epidermidis is necessary to develop new antibacterial agents. Here, we review the pathogenesis, prevention, and treatment of implant infections due to S. epidermidis and highlight some new compounds with already promising in vitro results.     

头孢曲松对表皮葡萄球菌生物膜形成的抑制作用

目的观察头孢曲松等4种抗生素抑制表皮葡萄球菌生物膜的作用,探讨抗生素防治葡萄球菌感染的作用环节。方法用半定量粘附实验筛选出形成生物膜的表皮葡萄球菌15株,观察不同浓度的药物对生物膜形成的抑制作用。结果发现头孢曲松能抑制生物膜形成,而头孢他啶、红霉素无抑制葡萄球菌生物膜的作用,万古霉素对葡萄球菌有很强的杀菌作用,但无抑制生物膜的作用。结论头孢曲松能抑制葡萄球菌生物膜形成,可利用头孢曲松抑制生物膜的作用,通过阻止粘附来阻断葡萄球菌引起的粘附相关感染,达到预防感染的目的。     

耐药表皮葡萄球菌生物被膜形成前、后差异蛋白表达的分析

目的探讨耐药表皮葡萄球菌生物被膜形成前、后差异蛋白的表达。方法将耐药表皮葡萄球菌分为药物处理组（用400μg/mL鞣酸处理）和对照组（用生理盐水处理）,观察菌落生长情况,并采用快速银染法鉴定药物作用前、后生物被膜的形成;用CRA平板法检测药物作用前、后,表皮葡萄球菌产生细胞间多糖黏附因子（PIA）的能力。用双向电泳技术对细菌总蛋白进行分离,并对差异蛋白点进行高效液相色谱-芯片/质谱（HPLC-Chip/MS）鉴定。结果与对照组比较,药物处理组表皮葡萄球菌菌落数明显减少（P〈0.01）,PIA生成能力减弱,生物被膜的形成被抑制。通过电泳分离,共得到19个差异表达的蛋白分子,其中13个仅在药物处理组表达升高,有6个仅在对照组表达升高。结论生物被膜形成是表皮葡萄球菌耐药的主要途径,差异蛋白在生物被膜的形成中可能起到关键作用。     

Using bacteriophages to reduce formation of catheter-associated biofilms by Staphylococcus epidermidis

Use of indwelling catheters is often compromised as a result of biofilm formation. This study investigated if hydrogel-coated catheters pretreated with a coagulase-negative bacteriophage would reduce Staphylococcus epidermidis biofilm formation. Biofilms were developed on hydrogel-coated silicone catheters installed in a modified drip flow reactor. Catheter segments were pretreated with the lytic S. epidermidis bacteriophage 456 by exposing the catheter lumen to a 10-log-PFU/ml culture of the bacteriophage for 1 h at 37 degrees C prior to biofilm formation. The untreated mean biofilm cell count was 7.01+/-0.47 log CFU/cm2 of catheter. Bacteriophage treatment with and without supplemental divalent cations resulted in log-CFU/cm2 reductions of 4.47 (P<0.0001) and 2.34 (P=0.001), respectively. Divalent cation supplementation without bacteriophage treatment provided a 0.67-log-CFU/cm2 reduction (P=0.053). Treatment of hydrogel-coated silicone catheters with an S. epidermidis bacteriophage in an in vitro model system significantly reduced viable biofilm formation by S. epidermidis over a 24-h exposure period, suggesting the potential of bacteriophage for mitigating biofilm formation on indwelling catheters and reducing the incidence of catheter-related infections.     

表皮葡萄球菌生物膜形成与细菌耐药性的相关性分析

目的探讨表皮葡萄球菌临床分离株生物膜的形成情况,分析其生物膜形成与细菌耐药性的相关性。方法收集2014年1月至2015年2月住院患者血标本分离出的表皮葡萄球菌62株,采用生物膜形成试验和聚合酶链式反应(PCR)扩增试验检测细菌生物膜,并采用纸片扩散法(K-B法)进行细菌药物敏感性试验。结果利用生物膜形成试验检出生物膜阳性菌株23株,检出率为37.1%;PCR扩增试验检出icaA基因27株,检出率为43.5%,差异无统计学意义(P0.05);两种方法同时阳性的菌株为14株。生物膜阳性菌株对所测抗菌药物的耐药率普遍高于生物膜阴性菌株,其中对庆大霉素、青霉素G、苯唑西林、左旋氧氟沙星、头孢西丁的耐药率比较差异有统计学意义(P0.05),所有菌株对万古霉素、利奈唑胺、奎奴普丁/达福普汀均敏感。结论两种方法对表皮葡萄球菌生物膜的检出率无明显差异,生物膜阳性菌株耐药率普遍高于生物膜阴性菌株。