大鼠门静脉高压食管静脉曲张动物模型

目的:建立大鼠门静脉高压食管静脉曲张的模型。方法:20只雄性SD大鼠随机分为对照组(假手术组)和实验组,实验组行门静脉两步法结扎加左肾上腺静脉结扎。结果:门静脉完全结扎后两周,实验组大鼠门静脉压力较对照组明显升高[20.90±3.27)cmH_2O vs(11.43±1.55)cmH_2O,P<0.01)],食管下段黏膜下血管数量及血管截面积皆较对照组明显增加(P<0.01)。结论:门静脉两步结扎加左肾上腺静脉结扎可建立门静脉高压食管静脉曲张的大鼠模型。     

TNF-α和CGRP在门脉高压大鼠胃黏膜中的表达及其意义

目的：观察肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）和降钙素基因相关肽（calcitonin gene-related peptide．CGRP）在门脉高压大鼠胃黏膜中的表达及其意义。方法：25只雄性sD大鼠随机分为两组,其中对照组10只,实验组15只。实验组采用门静脉两步结扎法左肾上腺静脉结扎。对照组入腹后仅分离出门静脉主干,并显露左肾及左肾静脉。门静脉完全结扎2w后检测门静脉压力以及胃组织中TNF-α、CGRP表达。结果：术后2w实验组大鼠门静脉压力较对照组明显升高（P〈0．05）。TNF-α阳性细胞为胞浆内可见棕黄色颗粒,主要分布在黏膜下层,实验组呈强阳性表达,对照组为阴性或仅为弱阳性。CGRP于黏膜层和黏膜下层可见阳性产物及少量的黄染CGRP神经纤维,实验组CGRP的表达强度明显高于对照组（P〈0．05）。结论：TNF-α和CGRP在门静脉高压症导致的胃黏膜病变中起一定的作用。     

TNF－α与CGRP在门脉高压大鼠肠组织中的表达及其意义

目的：在大鼠门脉高压模型上，观察肿瘤坏死因子－α（tumor necrosis factor－α，TNF－α）和降钙素基因相关肽（calcitonin gene—related peptide，CGRP）在门脉高压大鼠肠组织中的表达，探讨其在门脉高压性肠病中的意义。方法：雄性SD大鼠随机分为实验组和对照组，实验组采用门静脉两步结扎法加左肾上腺静脉结扎，并于门静脉完全结扎后两周测量门静脉压力；采用免疫组织化学的方法观察TNF－α和cGRP在肠组织中的表达。结果：实验组大鼠门静脉压力明显高于对照组，P〈0．05；实验组大鼠肠组织中的TNF－α、CGRP呈强阳性表达，而对照组呈阴性和弱阳性表达。结论：TNF－α、CGRP在门静脉高压症的肠黏膜病变中可能具有一定的作用。     

NOS、ET-1在大鼠食管静脉曲张形成中的动态表达及意义

目的：探讨iNOS、ecNOS、ET-1在门脉高压食管静脉曲张大鼠食管局部的动态变化及意义。方法：实验组大鼠行门静脉两步结扎加左肾上腺静脉结扎，并按门静脉完全结扎后7，14，21d分为3组(S7、S14、S21)，对照组亦相应分为3组(D7、D14、D21)；应用免疫组织化学SP法检测iNOS、ecNOS、ET-1在下段食管中的表达情况。结果；与相应对照组比较，iNOS、ecNOS在实验组表达强度皆增强，ET-1在S14、S21组增强。结论：在门脉高压大鼠食管静脉曲张形成中，NO升高可能是早期事件，并可能是激发食管局部体液因子改变的关键；ET-1可能在食管曲张静脉维持和发展阶段起一定作用。     

S-甲基异硫脲对大鼠门脉高压症食管静脉曲张的影响

目的观察诱导型一氧化氮合酶抑制剂SMT对大鼠门脉高压症食管静脉曲张的影响。方法健康雄性SD大鼠60只随机分为5组,假手术组、模型组、低剂量组、中剂量组和高剂量组。假手术组仅分离门静脉、左肾上腺静脉关腹,其余组门脉缩窄两步法加左肾上腺静脉结扎,建立门脉高压症食管静脉曲张模型。假手术组与模型组手术后给予腹腔注射生理盐水,其余3组手术后给予腹腔注射不同浓度SMT。手术后21 d,检测大鼠门脉血中TNOS、iNOS的活性及NO的浓度,免疫组化CD34标记食管血管内皮,测量每组大鼠食管横切面黏膜下血管的数目、面积。结果模型组大鼠门脉血中TNOS活性与iNOS活性以及NO浓度和食管黏膜下血管数目,血管平均截面积,血管总面积均较假手术组显著升高(P0.01)。中、高剂量组大鼠门脉血中TNOS活性与iNOS活性以及NO浓度和食管黏膜下血管的数目、血管平均面积、血管总面积较模型组均显著下调(P≤0.01)。结论大鼠门脉高压食管静脉曲张的发病机制中有NO参与,门脉缩窄型门脉高压食管静脉曲张病中NO主要由iNOS生成,SMT对大鼠门脉高压食管静脉曲张可能具有一定保护作用。     

精索静脉曲张对青春期大鼠生精细胞HIF-1α、Bcl-2和bax表达的影响

目的探讨精索静脉曲张（VC）对青春期大鼠生精细胞HIF-1α、Bcl-2和bax的影响。方法通过部分结扎左肾静脉方法制作左侧精索静脉曲张模型（EV）,雄性wistar大鼠36只,随机分为6组,EV持续2周、4周、8周组和相应的接受假手术的对照组（每组6只）。于造模成功后2周、4周、8周取实验组及对照组左侧睾丸,并用免疫组化方法检测睾丸组织HIF-1α、Bcl-2和bax的表达,用TUNEL法检测细胞凋亡并计算生精细胞的凋亡指数（AI）。结果实验组HIF-1α、bax较对照组表达明显升高（P〈0.05）,而实验组Bcl-2表达较对照组明显下降（P〈0.05）。实验组AI较对照组明显升高（P〈0.05）。结论精索静脉曲张可致大鼠睾丸组织缺氧,从而诱导睾丸组织细胞凋亡增加,影响睾丸生精功能。     

VEGF、SP在门脉高压大鼠肠黏膜组织的表达

目的：探讨血管内皮生长因子（VEGF）、P物质（SP）在门静脉高压症大鼠肠黏膜中的表达。方法：25只雄性SD大鼠随机分为两组,其中对照组10只,实验组15只。门脉高压模型制备对照组仅暴露并游离门静脉主干及左肾上腺静脉。造模2w后分别检测两组的门静脉压力,采用免疫组织化学SABC法检测肠黏膜组织VEGF、P物质的表达情况。结果：术后2w实验组大鼠腹壁血管、肠系膜血管扩张较对照组明显,实验组大鼠有1只可见腹腔内有少量腹水生成,余大鼠及对照组未见明显腹水生成。实验组大鼠门静脉压力较对照组明显升高（P〈0.05）;免疫组化发现与对照组比较,实验组结肠部位VEGF、P物质的表达及小肠部位P物质的表达明显升高（P〈0.05）,差异有统计学意义;小肠部位VEGF的表达与对照组比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：门脉高压症肠黏膜病变（PHE）是多因素共同作用的结果,VEGF、SP可能参与了PHE的发生发展。     

环氧化酶-1、环氧化酶-2、Fas配体在门脉高压大鼠胃组织中的表达及意义

目的利用门脉高压大鼠模型观察环氧化酶-1（cyclooxygenase-1,COX-1）、环氧化酶-2（cyclooxygenase-2,COX-2）、Fas配体（Fas ligand,Fas-L）在其胃组织的表达情况并探讨其在门脉高压性胃病中的意义。方法雄性SD大鼠20只随机分为实验组和对照组,实验组采用门静脉半结扎法制作门静脉高压大鼠模型并于模型制作成功两周后测量门静脉压力;对照组为假手术组,单纯游离门静脉后缝合切口并于两周后测门静脉压力;测门静脉压后分别取实验组与对照组大鼠胃组织,运用免疫组织化学方法观察COX-1、COX-2、Fas-L的表达情况。结果实验组大鼠门静脉压力明显大于对照组大鼠门静脉压力（P〈0.05）;实验组大鼠胃组织中COX-1表达明显低于对照组（P〈0.05）;COX-2的表达二者没有明显差别;Fas-L的表达明显增高（P〈0.05）。结论 COX-1一定程度上参与了门脉高压性胃疾病的形成,而COX-2可能并没有参与这一过程的实现。     

缺氧诱导因子-1α和环氧合酶-2在食管鳞癌发展过程中表达变化及与新生血管关系的临床研究

目的：探讨缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）和环氧合酶-2（COX-2）在食管鳞癌发展过程中的表达变化。方法：选取我院食管鳞癌患者100例（实验组）和50例正常食管上皮组织（对照组）。采用回顾性分析的方法,分析我院收治的食管鳞癌患者临床资料,测定正常上皮组织和食管鳞癌组织中HIF-1α、COX-2表达及微血管密度（MVD）。结果：食管鳞癌组织中的HIF-1α、COX-2表达阳性率均明显高于正常上皮组织（χ2=127.9、82.1,P〈0.05）,正常上皮组织中MVD值明显低于食管鳞癌组织中（t=26.33,P〈0.05）,HIF-1α和COX-2、MVD均存在明显的正相关,差异均有统计学意义（r=0.491、0.487,P〈0.05）。结论：食管鳞癌组织中的HIF-1α和COX-2表达增加,其肿瘤血管增加可能与HIF-1α和COX-2有关,为食管鳞癌发展过程提供可靠的理论依据。     

食管鳞癌中HIF-1α的表达与凋亡的相关性研究

目的探讨缺氧诱导因子1α（HIF-1α）和凋亡抑制因子（bcl-2）在食管鳞癌中的表达及二者之间的相关性。方法采用SP免疫组织化学染色法检测60例食管鳞癌组织和10例正常食管黏膜中HIF-1α蛋白和bcl-2蛋白的表达情况。结果HIF-1α在正常食管黏膜不表达，食管鳞癌中的阳性表达率为61．7％，HIF-1α蛋白的阳性表达率随食管癌体积增大、组织分化程度降低而增高（P〈0．05），有淋巴结转移者的阳性表达率（78．3％）显著高于无淋巴结转移者（51．4％），（P〈0．05）；HIF-1α蛋白与bcl-2蛋白表达呈负相关（P〈0．01）。结论HIF-1α蛋白的高表达可能促进了食管鳞癌癌细胞的增殖和组织分化程度的降低，并参与了淋巴结转移：它还可能通过调节凋亡抑制因子bcl-2的水平而发挥抗凋亡作用。     

缺氧诱导因子-1α在酒精性急性胃黏膜损伤中的作用

目的检测缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）在酒精性急性胃黏膜损伤中的表达,探讨其在酒精性急性胃黏膜损伤中的作用。方法 60只SD大鼠随机分为4组（每组15只）：对照组和Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ实验组。对照组以2ml生理盐水灌胃,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ实验组分别予30%、65%、100%浓度酒精2ml灌胃。2h后处死大鼠取全胃剖开,肉眼观察形态学变化计算损伤指数;HE染色后光镜观察黏膜炎症程度;RT-PCR检测胃黏膜HIF-1αmRNA表达,蛋白免疫切迹法检测HIF-1α蛋白表达。结果肉眼观察实验组黏膜有充血、水肿及糜烂、溃疡形成,光镜下观察实验组均有炎症反应;对照组与实验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组损伤指数分别为0.47±0.52、9.27±2.49、11.07±2.71、28.60±3.11,实验各组损伤指数与对照组相比差异有统计学意义（P均〈0.05）,且随着酒精浓度增加损伤更为严重;实验组HIF-1αmRNA及蛋白表达随酒精浓度升高而递增（P〈0.01或P〈0.05）。结论随着酒精浓度的增高,大鼠急性胃黏膜损伤的程度加重,且胃黏膜HIF-1α的表达水平增加,推测HIF-1α在酒精性胃黏膜损伤过程中起重要作用     

食管鳞癌中雄激素受体与缺氧诱导因子-1α的表达关系及其临床意义

目的：探讨雄激素受体（AR）与缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）在食管鳞癌患者中的表达及其相互关系。方法：采用免疫组织化学SP法对67例食管鳞癌及30例正常食管组织中AR与HIF-1α进行检测,结合临床病理特征进行分析。结果：AR与HIF-1α在食管鳞癌中的表达水平明显高于正常食管黏膜组织（P〈0.01）。AR与HIF-1α的表达与食管鳞癌的分化程度、浸润深度、淋巴结反应增生、淋巴结转移、临床分期有关,且AR与性别有关（P〈0.05）。AR与HIF-1α之间明显相关性（r=0.277,P〈0.05）。结论：AR、HIF-1α与食管癌生物学行为关系密切,二者的过度表达可能共同参与了食管癌的发生、发展过程。     

肝硬化门静脉高压模型犬舌下络脉形态和舌下组织血管内皮生长因子及低氧诱导因子1α的表达

目的：观察肝硬化门静脉高压犬舌下络脉变化及舌下组织血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）和低氧诱导因子1α（hypoxia-inducible factor1α,HIF-1α）的表达情况。 方法：将12只Beagle犬随机分为正常组和模型组。用二甲基亚硝胺（dimethylnitrosamine,DMN）诱导肝硬化门静脉高压,观察Beagle犬舌下络脉形态、颜色;生物电记录系统测定其门静脉压力;免疫组织化学EnVision法检测犬舌下组织VEGF及HIF-1α蛋白的表达。 结果：模型组Beagle犬舌下血管形态学和颜色较正常组有明显改变。免疫组织化学结果显示,正常对照组犬舌下血管VEGF、HIF-1α几乎无表达;模型组犬舌下组织VEGF、HIF-1α蛋白表达显著增高,差异有统计学意义（P〈0.01）。 结论：门静脉压力变化可能是肝硬化门静脉高压模型犬异常舌下络脉形成的一个重要因素,舌下血管VEGF和HIF-1α蛋白表达增加可能参与了这一过程。     

NOS、TNF α在门静脉高压大鼠结肠黏膜中表达及意义

目的探讨一氧化氮合酶（NOS）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）在门静脉高压性结肠病发生机制中的作用。方法成年雄性Wistar大鼠19只，随机抽取8只作为正常对照组，其余大鼠按复合因素法制作肝硬化模型，10周后测量肝静脉压力梯度（HVPG），门静脉取血测定一氧化氮（NO）含量，取大鼠降结肠全层行免疫组化染色，观测黏膜及黏膜下层，进行图像分析以测定NOS、TNF-α表达量。结果与对照组相比，模型组NO水平、HVPG显著增高（P〈0．01）。诱导型NOS（iNOS）、TNF-α在结肠黏膜下层血管内皮细胞高度表达，与对照组相比差别具有显著性（P〈0．05）。内皮型NOS（eNOS）在黏膜层及黏膜下层表达差异无显著性（P〉0．05）。结论iNOS表达增加上调NO含量促进了门静脉高压性结肠病的发生，TNF-α则是促进iNOS表达增加的重要因素。     

食管彩超评价经内窥镜食管静脉曲张结扎前后食管下段静脉血流动力学变化

用带自制水囊彩色多谱勒食管超声探查２４例门静脉高压食管静脉曲张患者的食管下段静脉。结果显示,该法能清晰显示门静脉高压时食管下段静脉,有效评价经内窥镜食管静脉曲张结扎前后食管下段静脉血流动力学变化,有活动性出血组的周围静脉最大血流速度高于无活动性出血组     

一期门静脉缩窄法制备犬门静脉高压症动物模型门静脉压力变化的研究

目的：通过一期门静脉缩窄法制备犬门静脉高压症动物模型,观察门静脉压力的变化情况,探讨制备动物模型时门静脉压力控制的合理范围。方法：犬24只,分为A、B、C3组,行开腹结扎法缩窄门静脉,术中A组门静脉压力控制在20.0～25.0cmH2O,B组控制在25.0～30.0cmH2O,C组控制在30.0～35.0cmH2O。分别于术后2、4、6、8、10、12、14周测量门静脉压力。并于14周开腹观察胃底食管下段静脉曲张情况。结果：术后各组门静脉压力逐渐下降,14周门静脉压力已平稳。A组门静脉压力自（22.87±1.43）cmH2O下降至（19.56±0.80）cmH2O（P〈0.05）,14周后有4只动物胃底食管下段静脉曲张不显著,无动物死亡。B组门静脉压力自（27.22±1.47）cmH2O下降至（21.81±0.99）cmH2O（P〈0.05）,14周后所有动物胃底食管下段静脉曲张显著,1只动物死亡;C组门静脉压力自（31.86±1.52）cmH2O下降至（25.32±1.79）cmH2O（P〈0.05）,所有动物胃底食管下段静脉曲张显著,3只动物死亡。结论：一期门静脉缩窄法制备犬门静脉高压症动物模型,术中门静脉缩窄后门静脉压力应控制在25.0～30.0cmH2O,在这个范围内动物模型胃底食管下段静脉曲张显著,且死亡率低。     

HIF—1α、2α和Survivin蛋白在食管鳞癌中的表达及临床意义

目的探讨缺氧诱导因子（HIF-1α、HIF-2α）和生存素蛋白（survivin）在食管正常粘膜、食管炎、食管鳞癌（ESCC）组织中的表达，并测定食管正常粘膜、食管炎、食管鳞癌组织中的微血管密度，初步分析它们与食管鳞癌生物学行为之间的关系。方法采用免疫组织化学（SP）方法分别检测65例食管正常粘膜、食管炎、食管鳞癌组织中HIF-1α、HIF-2α和survivin的表达，同时测定微血管密度（MVD）计数。结果（1）HIF-1α、HIF-2α和survivin在食管正常粘膜组织中不表达，食管炎组织中低表达，食管鳞癌中高表达，在食管不同组织分型中三者的表达比较具有显著性差异（P〈0．01）。随正常粘膜-炎症-癌的次序MVD计数呈逐渐升高趋势。（2）Survivin在食管鳞癌组织中表达越强，组织分化程度越低（P〈0．01）、TNM分期越晚（P〈0．01）、淋巴结转移率越高（P〈0．01）；HIF-1α和HIF-2α在食管鳞癌组织中表达越强，淋巴结转移率越高（P〈0．01），组织分化程度越低（P〈0．05），两者与组织分化程度、TNM分期呈负相关。（3）食管鳞癌中HIF-1α、HIF-2α表达与survivin表达呈正相关（P〈0．01），三者表达与MVD呈正相关（P〈0．01）。结论（1）HIF-1α、HIF-2α和survivin表达对食管鳞癌的发生、发展起正性协同作用；（2）检测食管鳞癌组织中survivin的表达对判断肿瘤的发生、发展具有重要意义。survivin可望成为诊断和治疗食管鳞癌的新靶点。     

人参三七组方对急性心肌梗死大鼠缺血心肌血管内皮生长因子受体2和缺氧诱导因子1α表达的影响

目的：探讨人参三七组方对急性心肌梗死（acute myocardial infarction,AMI）大鼠缺血心肌血管内皮生长因子受体2（vascular endothelial growth factor receptor-2,VEGFR-2）和缺氧诱导因子1α（hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α）表达的影响。 方法：100只Wistar大鼠随机分为正常对照组、假手术组、模型组、美托洛尔（商品名倍他乐克）组和高、低剂量人参三七组方组。除正常对照组大鼠外,结扎各组大鼠冠状动脉左前降支建立心肌缺血模型,并于造模后予相应药物治疗12 d。治疗结束后,检测缺血心肌微血管密度（microvessel density,MVD）,蛋白免疫印迹法检测缺血心肌的血管内皮生长因子受体VEGFR-2和HIF-1α的蛋白表达,实时聚合酶链式反应法检测缺血心肌VEGFR-2和HIF-1α mRNA表达。 结果：模型组缺血心肌MVD较正常对照组及假手术组显著增加（P〈0.05）;高、低剂量人参三七组方组及倍他乐克组MVD较模型组显著增加,差异均有统计学意义（P〈0.01）;高、低剂量人参三七组方组之间比较,差异有统计学意义（P〈0.01）。模型组VEGFR-2、HIF-1α的蛋白和mRNA表达上调,与正常对照组及假手术组比较差异有统计学意义（P〈0.05）;高、低剂量人参三七组方组及倍他乐克组VEGFR-2、HIF-1α蛋白和mRNA表达均显著高于模型组（P〈0.05）;高、低剂量人参三七组方组之间比较,差异亦有统计学意义（P〈0.05）。 结论：人参三七组方能够促进缺血心肌VEGFR-2和HIF-1α表达,提高缺血心肌毛细血管密度,从而改善心肌缺血,促进侧支循环的形成。     

缺血再灌注损伤后大鼠视网膜细胞凋亡与低氧诱导因子1α表达的关系

目的研究缺血再灌注损伤后大鼠视网膜细胞凋亡与低氧诱导因子1α（HIF-1α）的表达变化并探讨两者的相关性。方法雄性SD大鼠随机分为正常对照组和缺血再灌注损伤1 d、3 d和5 d组（n=6）。眼前房灌注生理盐水调节大鼠眼压至110 mmHg并持续50 min,制作实验性视网膜缺血再灌注损伤模型。制备视网膜切片,测量内网层（IPL）、内核层（INL）厚度及节细胞层（GCL）细胞数;采用DNA原位末端标记（TUNEL）法检测视网膜凋亡细胞;免疫组织化学染色观察损伤后不同时间HIF-1α在视网膜细胞中的表达;采用RT-PCR检测HIF-1αmRNA的表达。结果缺血再灌注损伤1 d、3 d和5 d组大鼠的IPL和INL厚度显著小于正常对照组（P〈0.01）,GCL细胞少于正常对照组（P〈0.05）。视网膜细胞凋亡位于GCL;缺血再灌注损伤1 d、3 d和5d组的细胞凋亡率均明显高于正常对照组,差异有统计学意义（P〈0.01）。缺血再灌注损伤1 d、3 d、5 d组视网膜GCL的HIF-1α蛋白表达阳性细胞比例分别为（47.88±14.71）%、（50.28±13.11）%、（43.09±10.04）%,与视网膜细胞凋亡率呈正相关（r=0.953）。缺血再灌注损伤3 d组视网膜细胞HIF-1αmRNA表达明显高于正常对照组（P〈0.05）。结论缺血再灌注后大鼠视网膜细胞凋亡与HIF-1α的表达均增加,两者呈正相关;HIF-1α的表达可能参与视网膜细胞凋亡。     

一氧化氮合酶在门脉高压大鼠肠黏膜中的表达及意义

目的 :探讨一氧化氮合酶 (nitricoxidesyethase ,NOS)在门脉高压大鼠肠黏膜中的表达及意义。方法 :将SD大鼠随机分成两组。实验组大鼠行门静脉两步结扎加左肾上腺静脉结扎 ,对照组为假手术组。门静脉完全结扎 2周后 ,应用免疫组织化学方法检测巨噬细胞型NOS(iNOS)和内皮细胞型NOS(ecNOS)在大鼠肠黏膜中的表达情况。结果 :门脉高压对大鼠肠道黏膜影响不完全一致。与对照组比较 ,实验组iNOS ,cNOS在小肠黏膜中高表达 ,iNOS在结肠黏膜中高表达 (P <0 .0 5 )。结论 :一氧化氮合酶与门脉高压大鼠肠黏膜局部病变有关。检测NOS对了解门脉高压性肠病有重要意义。