不同吸氧浓度对新生鼠视网膜血管发育和血管内皮生长因子表达的影响

背景：吸氧在早产儿视网膜新生血管中起重要作用,但其具体吸氧范围以及作用机制仍不明确。目的：观察不同氧环境在新生鼠视网膜病的作用。方法：将新生鼠40只分为空气组、波动1,2,3组,各10只,分别以正常空气、浓度50%、20%变化氧气、40%、10%变化氧气、50%、10%变化氧气环境饲养。饲养14d后,视网膜铺片经ADP酶染色和视网膜切片经常规苏木精-伊红染色观察视网膜血管的增生情况。Western blot检测视网膜血管内皮生长因子的表达。结果与结论：视网膜铺片波动2,3组新生血管钟点数、突破视网膜内界膜的血管内皮细胞数和血管内皮生长因子表达水平明显高于空气组和波动1组,空气组和波动组1组未见明显的视网膜新生血管。证实了反复血氧浓度波动可导致新生鼠视网膜新生血管增生性病变,吸入氧浓度差的波动与病变程度有关;低氧比高氧对发生视网膜病变可能更重要,血管内皮生长因子在视网膜新生血管形成中起着重要作用,促进视网膜新生血管形成。     

血管内皮生长因子与放射性视网膜病变新生血管的形成

目的:放射性视网膜病变作为头、颈部肿瘤放射治疗的一种眼部并发症,国内外的报道不多,其发病机制尚未完全明确,因此归纳总结放射性视网膜病变的发病机制以为临床治疗提供依据。资料来源:应用计算机检索Pubmed数据库1990-01/2006-06期间有关放射性视网膜病变的文章,检索词“VEGF,Radiation Retinopathy,New Blood Vessels”,限定文章语言种类为English。同时计算机检索中国期刊全文数据库1990-01/2006-06期间的相关文章,检索词“血管内皮生长因子,放射性视网膜病变,新生血管生成”,限定文章语言种类为中文。资料选择:对资料进行初审,取符合研究要求的有关文章找全文。资料提炼:共收集到60篇有关血管内皮生长因子及放射性视网膜病变的文章,其中45篇为血管内皮生长因子在各系统器官中的作用,涉及糖尿病视网膜病变,放射性视网膜病变等方面;其中15篇为放射性视网膜病变文章,涉及病例个案报道,临床观察等方面。资料综合:①放射性视网膜病变眼底视网膜新生血管形成是其特点性病变。血管内皮生长因子近年来被确定为对新生血管性疾病发展过程有重要影响的细胞因子。②血管内皮生长因子可诱导视网膜下新生血管的形成。缺氧启动了血管新生的过程。③发病机制考虑为放射线诱导的DNA损伤使内皮细胞在有丝分裂过程中死亡,当正常分裂的细胞数量难以补偿丢失的细胞时,血管内皮连续性破坏,功能障碍。结论:目前放射性视网膜病变的发病机制仍有争议,但眼底新生血管出现是其重要的临床表现。血管内皮生长因子的表达高低与新生血管形成有关。     

血管生成素-2和血管内皮生长因子在酸中毒诱导早产儿视网膜病的大鼠动物模型中的表达

目的建立酸中毒诱导的早产儿视网膜病(ROP)大鼠动物模型(AIR模型),研究血管内皮生长因子(VEGF)、血管生成素-2(Ang-2)的表达变化规律,探讨其与ROP血管发育及新生血管形成之间的关系。方法 1日龄SD新生大鼠随机分为酸中毒诱导模型组(ROP组)和正常对照组(C组),通过管饲NH4Cl方法建立AIR模型。应用免疫组化方法标记视网膜VEGF、Ang-2的表达水平。结果免疫组化结果显示,8日龄ROP大鼠VEGF、Ang-2的表达水平明显低于对照组(P<0.05),而在停止管饲NH4Cl后的10日龄、13日龄ROP组大鼠视网膜VEGF、Ang-2表达水平明显高于对照组(P<0.05)。在实验过程中VEGF及Ang-2的表达趋势相同。结论酸中毒使VEGF及Ang-2的蛋白表达水平下调;停止管饲NH4Cl后2者表达水平上调;2者变化过程与视网膜新生血管发展进程有关。VEGF、Ang-2可能在视网膜正常血管发育及ROP的新生血管化进程中起到重要作用。     

糖尿病大鼠视网膜血管内皮生长因子和一氧化氮的变化

背景：糖尿病患者外周血中的血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)和一氧化氮存在正相关，但糖尿病时视网膜组织的VEGF和一氧化氮是否发生变化尚不清楚。目的：探讨糖尿病大鼠视网膜VEGF和一氧化氮的变化及其在糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy，DR)发生发展过程中的作用。设计：随机对照实验研究。地点和材料：选择健康成年SD大鼠(上海SIPPR-BK实验室提供，合格证：152)，在福建医科大学动物实验室喂养。实验在福建医科大学解剖学与组织胚胎学实验室完成。干预：随机分成正常对照组、糖尿病1月、糖尿病3月和糖尿病5月组，每组20只。除正常组外所有大鼠均一次性腹腔注射链脲佐菌素(streptozotin，STZ)诱发糖尿病模型。应用免疫组织化学方法观察各组视网膜组织VEGF的表达情况，并检测各组视网膜组织中一氧化氮合酶(nitric oxide synthase，NOS)活性和一氧化氮含量变化。主要观察指标：①各组视网膜组织VEGF的表达情况。②各组大鼠视网膜组织中NOS活性和一氧化氮含量变化。结果：正常大鼠视网膜VEGF免疫阳性反应仅见于内核层细胞，NOS和一氧化氮含量分别为(36．11&;#177;1．83)μkat／g和(36．77&;#177;2．33)μmol／g；3个月时，糖尿病大鼠视网膜VEGF表达增强，NOS和一氧化氮含量分别为(115．19&;#177;31．5)μkm／g和(68．34&;#177;5．46)μmol／g，与正常组比较，差异有显著性意义(t=7．43，8．15；P&;lt;均0．01)；5个月时，糖尿病大鼠视网膜表达进一步增强，NOS和一氧化氮含量分别为(72．35&;#177;16．34)μkat／g和(50．62&;#177;3．01)μmol／g，与糖尿病3月组比较，差异有显著性意义(t=4．76，4．19；P均&;lt;0．05)。结论：糖尿病大鼠视网膜VEGF的过度表达和NOS活性、一氧化氮含量的变化在DR的发生发展过程中起重要作用。     

糖尿病大鼠视网膜血管内皮生长因子和一氧化氮的变化

背景 糖尿病患者外周血中的血管内皮生长因子 (vascular endothelial growth factor,VEGF)和一氧化氮存在正相关,但糖尿病时视网膜组织的 VEGF和一氧化氮是否发生变化尚不清楚.目的 探讨糖尿病大鼠视网膜 VEGF和一氧化氮的变化及其在糖尿病视网膜病变( diabetic retinopathy,DR)发生发展过程中的作用.设计 随机对照实验研究.地点和材料 选择健康成年 SD大鼠(上海 SIPPR-BK实验室提供,合格证 152),在福建医科大学动物实验室喂养.实验在福建医科大学解剖学与组织胚胎学实验室完成.干预 随机分成正常对照组、糖尿病 1月、糖尿病 3月和糖尿病 5月组,每组 20只.除正常组外所有大鼠均一次性腹腔注射链脲佐菌素( streptozotin,STZ)诱发糖尿病模型.应用免疫组织化学方法观察各组视网膜组织 VEGF的表达情况,并检测各组视网膜组织中一氧化氮合酶( nitric oxide synthase,NOS)活性和一氧化氮含量变化.主要观察指标 ①各组视网膜组织 VEGF的表达情况.②各组大鼠视网膜组织中 NOS活性和一氧化氮含量变化.结果 正常大鼠视网膜 VEGF免疫阳性反应仅见于内核层细胞, NOS和一氧化氮含量分别为( 36.17± 1.83) μ kat/g 和 (36.77± 2.33) μ mol/g; 3个月时,糖尿病大鼠视网膜 VEGF表达增强, NOS和一氧化氮含量分别为 (115.19± 31.5) μ kat/g 和 (68.34± 5.46) μ mol/g,与正常组比较,差异有显著性意义( t=7.43,8.15;P《 均 0.01); 5个月时,糖尿病大鼠视网膜表达进一步增强, NOS和一氧化氮含量分别为 (72.35± 16.34) μ kat/g 和 (50.62± 3.01) μ mol/g,与糖尿病 3月组比较,差异有显著性意义( t=4.76, 4.19;P均 《 0.05).结论 糖尿病大鼠视网膜 VEGF的过度表达和 NOS活性、一氧化氮含量的变化在 DR的发生发展过程中起重要作用.     

50Hz低电压电刺激对大鼠缺血心肌血管新生及血管内皮生长因子表达的影响

目的探讨50 Hz的低电压电刺激心肌对大鼠缺血心肌毛细血管新生及血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响。 方法将12只心肌梗死模型大鼠随机分为50 Hz低电压电刺激组（电刺激组）和非电刺激对照组（对照组），用免疫组化法和逆转录-多聚酶链反应（RT-PCR）方法测定大鼠缺血心肌中内皮细胞（EC）数、毛细血管密度（CD）和VEGF mRNA和蛋白的表达。 结果与对照组比较，电刺激组大鼠缺血心肌中EC数和CD、VEGF mRNA及蛋白表达均增加，差异具有统计学意义(P<0.01)。 结论50 Hz低电压电刺激能促进大鼠缺血心肌中的毛细血管新生，其机制可能与上调VEGF蛋白和mRNA的表达有关。     

血管内皮生长因子在鼠尾胶原凝胶诱导三维血管新生中的作用研究

背景:血管新生在组织工程研究中已引起了高度重视.血管内皮生长因子在二维平面培养中已证实能促进血管新生.目的:观察血管内皮生长因子在三维血管新生中的作用.方法:取SD大鼠骨髓,分离出内皮祖细胞.待细胞融合至70%～80%时添加鼠尾另一层胶原凝胶建立三维立体模型.实验组采用完全培养液含M199培养液、胎生血清加血管内皮生长因子及双抗;对照组培养液中不含血管内皮生长因子.培养第1,4,7,20天观察骨髓来源内皮祖细胞的体外培养和扩增情况并进行细胞鉴定.三维立体模型建立后第3,6,9,12天进行形态观察及定性定量分析.结果与结论:实验组内皮祖细胞在三维基质内向胶原基质内生长,24 h内即可出现向胶原内的出芽及浸润并逐渐形成分支样结构,对照组细胞生长慢,出芽慢,管状结构细小,向胶原内浸润的深度浅,网状结构稀疏,不完整.实验组新生血管数目显著高于对照组(P<0.01).取第3,6,9,12天的凝胶块检测,可见内皮素1、内皮型一氧化氮合成酶3表达阳性.结果表明,血管内皮生长因子能动员和诱导内皮祖细胞促进血管新生.鼠尾胶原凝胶可以诱导内皮祖细胞表现出血管新生中的迁移、增殖和发芽等步骤.     

血管内皮生长因子及其受体对类风湿关节炎新生血管的影响

目的：探讨血管内皮生长因子及其受体与类风湿关节炎新生血管的关系.资料来源：应用计算机检索Pubmed 2000-01/2005-02有关血管内皮生长因子及其受体对类风湿关节炎血管新生的影响的文献,检索词＂vascular endothelial growth factor,vascular endothelial growth factor receptor,rheumatoid arthritis,angiogenesis＂,并限定文章语言种类为Ennlish.资料选择：对检索到的血管内皮生长因子及其受体与类风湿关节炎血管新生方面的相关信息进行整理,选取针对性强的文章.同一领域的文献则选择近期发表或权威杂志的文章.资料提炼：共检索到37篇相关文献,其中19篇文章符合要求.排除18篇,其中15篇系重复同一研究,3篇为Meta分析.资料综合：血管内皮生长因子通过与其受体结合发挥生物学作用,促进内皮细胞有丝分裂,进一步增殖分化、迁移,导致血管新生,形成血管翳,在类风湿关节炎的病理过程中起关键作用.针对血管内皮生长因子从不同水平进行抗血管新生治疗类风湿关节炎取得了显著效果,为治疗类风湿关节炎提供了新的策略.结论：血管内皮生长因子在类风湿关节炎病理性新生血管化过程中所起的作用已基本肯定,但其作用途径尚未完全明确.抗血管新生从理论上为治愈类风湿关节炎提供了可能,但该类药物的安全性及更为精细的治疗靶点都有待于进一步探索.     

叔丁基对苯二酚对大鼠视网膜新生血管的作用及其机制

目的探讨叔丁基对苯二酚对大鼠视网膜新生血管的作用及其机制。方法雄性Sprague Dawley大鼠30只随机分为3组(对照组、模型组与治疗组),每组10只。对照组为正常SD大鼠,给予基础饲料喂养;模型组与治疗组为氧诱导视网膜病变模型,治疗组在模型构建后7 d采取玻璃体注射叔丁基对苯二酚治疗。记录大鼠治疗前和治疗后第7天、第14天与第21天体重;观察大鼠视网膜无灌注区铺片面积和新生血管内皮细胞数量和视网膜病理情况;检测大鼠核因子E2相关因子2(Nrf2)、血管内皮生长因子(VEGF)蛋白相对表达量。结果模型组和治疗组造模成功后(治疗前)和治疗后第7天、第14天与第21天的体重均显著低于对照组(P 0. 05),治疗前和治疗后第7天模型组和治疗组大鼠体重比较差异无统计学意义(P 0. 05),治疗后第14天与第21天治疗组大鼠的体重显著高于模型组(P0. 05)。对照组大鼠视网膜未见无灌注区及新生血管内皮细胞出现,治疗组大鼠视网膜无灌注区铺片面积和新生血管内皮细胞数量均显著少于模型组大鼠(P 0. 05)。与模型组相比,治疗组的视网膜层次病理性变化减弱,水肿程度降低,各层的结构稀疏排列的程度降低。模型组与治疗组大鼠的Nrf2、VEGF蛋白相对表达量均显著高于对照组(P 0. 05),治疗组Nrf2、VEGF蛋白相对表达量均显著低于模型组(P 0. 05)。结论叔丁基对苯二酚治疗的可促进视网膜病变模型大鼠体重恢复,并抑制新生血管内皮细胞的生成和Nrf2、VEGF蛋白的表达,减轻视网膜损伤。     

叶酸对鼠胎盘血管内皮生长因子表达及血管发育的影响

目的：选择与人类高度相似的大鼠胎盘为研究对象、以血管发育为切入点、经灌胃途径给予妊娠大鼠大、中、小剂量的叶酸干预、选择受精后13.5 d 为时间点,原位、在体观察叶酸对胎盘的作用。方法实验进行时间为2012年9月至2014年1月间,应用免疫细胞化学等技术检测叶酸干预后,胎盘血管内皮生长因子（VEGF）、凝血因子Ⅷ（Ⅷ因子）的表达及游离雌三醇（FE3）的水平。结果叶酸可能通过影响细胞增殖正负向调节因素 VEGF 和Ⅷ因子的表达,促进妊娠大鼠胎盘细胞的增殖活性。叶酸还通过提高胎盘的合成功能,促进胎盘的发育。结论一定剂量的叶酸对胎盘组织结构发育及功能发挥起到有益作用。     

High vitreous concentration of vascular endothelial growth factor in diabetic patients with proliferative retinopathy using statins

Background. Vascular endothelial growth factor (VEGF) plays an important role in the development of diabetic retinopathy. Previous studies have suggested that angiotensin‐converting enzyme (ACE) inhibitor therapy may reduce vitreous VEGF concentration in diabetic retinopathy. Also HMG CoA reductase inhibitors (statins), known for their beneficial effects on vascular endothelium, might influence vitreous VEGF concentration in diabetic retinopathy.

Aim. Vitreous VEGF concentration of diabetic patients with proliferative retinopathy using statin therapy and/or ACE inhibitor therapy was studied.

Methods. Fifty diabetic patients with proliferative diabetic retinopathy, 21 diabetic control patients without proliferative retinopathy, and 43 non‐diabetic control subjects underwent vitrectomy. Vitreous samples were collected at the beginning of surgery, and VEGF concentration was assessed using a chemiluminescent VEGF immunoassay.

Results. Vitreous VEGF concentration was significantly higher in diabetic patients with proliferative retinopathy using statins than in those not using statins. The diabetic patients with proliferative retinopathy were divided into subgroups according to use of ACE inhibitor and/or statin medication. These groups did not differ significantly in concentration of vitreous VEGF.

Conclusions. Statin therapy is associated with high vitreous VEGF concentration in diabetic patients with proliferative retinopathy. In contrast to previous reports, ACE inhibitor use did not significantly influence vitreous VEGF concentration in these patients.     

In vivo fluorescence molecular imaging of the vascular endothelial growth factor in rats with early diabetic retinopathy

Anti-vascular endothelial growth factor (anti-VEGF) therapy is effective for reducing the severity level of diabetic retinopathy (DR). However, it is difficult to determine the in vivo spatial and temporal expression of VEGF in the DR retina at an early stage. Here, we report a quantitatively fluorescence molecular imaging and image analysis method by creating a VEGF targeted fluorescence imaging probe, which can potentially detect and predict anti-VEGF treatment response. Moreover, the ex vivo multiscale fluorescence imaging demonstrated the spatial correlation between VEGF relative expression and vascular abnormalities in two and three dimensions. It revealed that VEGF was mainly abnormally expressed at the bifurcation of the microvessels, which advances the knowledge of the DR progression by molecular fluorescence imaging. Our study has the potential to achieve early detection of DR disease, provide more insight into understanding anti-VEGF treatment, and may help stratify patients based on the molecular imaging of retinal VEGF.     

Parathyroid hormone stimulates the endothelial expression of vascular endothelial growth factor

Background We showed previously that parathyroid hormone (PTH) may stimulate the endothelial expression of pro‐atherosclerotic and pro‐inflammatory markers. Considering the impact of PTH on vasculature, we decided to evaluate its effect on mRNA and intra‐cellular protein expressions of endothelial vascular endothelial growth factor (VEGF) taking into account that VEGF may play a role in the pathogenesis of endothelial dysfunctions. Materials and methods Human umbilical vein cords endothelial cells (HUVEC) were stimulated for 24 h with 10^?12–10^?10 mol L^?1 PTH. The VEGF‐165 mRNA expression (critical in stimulating endothelial cell proliferation) was evaluated by RT/PCR and the intra‐cellular VEGF protein expression by flow cytometry. The pathways by which PTH may have an effect on VEGF expression were also evaluated. Results PTH (10^?10 mol L^?1) significantly increased VEGF‐165 mRNA expression (P < 0·05). The addition of 50 nmol L^?1 protein kinase C (PKC) and 10 µmol L^?1 protein kinase A (PKA) inhibitors significantly reduced the VEGF‐165 mRNA expression (P = 0·01). We also examined whether nitric oxide (NO) may be involved in the PTH‐induced stimulation of VEGF‐165 expression. Pre‐treatment of the cells with 200 µmol L‐nitro arginine methyl ester (L‐NAME, NO synthase inhibitor) was found to inhibit VEGF‐165 mRNA expression (P = 0·006). VEGF protein could not be detected in the medium of HUVEC but it was present in the cell cytoplasm. PTH had no significant effect on cytoplasmatic VEGF protein expression. Conclusion The stimulatory effect of PTH on endothelial VEGF‐165 mRNA expression is partly through PKC and PKA pathways and is also NO dependent.     

胶原诱导性关节炎大鼠滑膜血管内皮生长因子与微血管密度

背景：目前发现的促进血管增生活性最强的是血管内皮生长因子,其在类风湿关节炎滑膜细胞呈现强表达。 目的：观察对胶原诱导性关节炎大鼠不同时间点滑膜血管内皮生长因子表达和微血管计数的变化,探讨血管内皮生长因子和微血管在类风湿关节炎发病机制中的作用及其相关性。 方法：采用Ⅱ型胶原与完全福氏佐剂诱导 SD 大鼠实验性关节炎模型,采用免疫组织化学方法观察实验性关节炎大鼠不同时间点滑膜组织血管内皮生长因子的表达水平和新生血管计数,并同时观察发病时间与关节炎指数积分、血管内皮生长因子及滑膜新生血管数之间的关系。用直线相关分析法分析血管内皮生长因子表达与滑膜新生血管数之间的关系,用等级相关分析法分析关节炎指数积分与血管内皮生长因子表达及滑膜新生血管数之间的关系。 结果与结论：随着实验性关节炎发病时间的延长,滑膜新生血管逐渐增多,滑膜增厚,关节炎指数积分逐渐增加,血管内皮生长因子表达水平和微血管数也随之升高;其关节炎指数积分与血管内皮生长因子表达水平呈正相关关系（r=0.535、P 〈0.05）,血管内皮生长因子表达水平与微血管计数呈显著正相关关系（r=0.860, P〈0.01）。血管内皮生长因子参与了实验性关节炎大鼠滑膜血管翳的形成过程,血管内皮生长因子与微血管密度在类风湿关节炎的发病中具有重要意义。     

血管内皮生长因子在大鼠急性肺损伤中表达的变化

目的:探讨油酸诱导大鼠急性肺损伤(ALI)中血管内皮生长因子(VEGF)表达的变化及黄芪对VEGF和ALI的影响。方法:将18只Wistar大鼠随机分成3组:正常组、油酸组、黄芪组。ELISA方法检测肺组织及血浆VEGF的表达,观察肺组织病理形态学变化。结果:VEGF在ALI大鼠肺组织的表达较正常组和黄芪组显著降低(P<0.05)、而血浆中VEGF的表达显著增加(P<0.05),肺组织与血浆VEGF的表达有显著负相关(r=-0.49,P<0.05)。结论:VEGF在油酸诱导大鼠ALI形成过程中起重要作用,黄芪对ALI具有一定的治疗作用。