海洛因依赖对大鼠颌下腺Bcl-2和Bax表达的影响

目的:观察海洛因依赖对大鼠颌下腺Bcl-2、Bax阳性细胞表达及分布的影响.方法:正常SD大鼠,随机分为正常对照组和海洛因依赖组,皮下注射海洛因建立海洛因依赖大鼠模型,分别于第10、17、24、31、38天取颌下腺组织,用免疫组织化学Envision法并结合图像分析方法,观察Bcl-和Bax表达.结果:(1) Bcl-2阳性细胞数量在海洛因依赖第10天明显下降(P＜0.05),此后开始增加,至第24天时达最高峰(P＜0.05),而在第38天时低于正常水平(P＜0.05);平均灰度值在依赖第10天明显上升(P＜0.05),后开始下降,第24天时达最低值(P＜0.05),至第31 ～38天时接近正常水平(P＞0.05);(2)Bax阳性细胞数量在依赖第10天明显降低(P＜0.05),第17天时又增加达峰值(P＜0.05);之后即开始下降,第31-38天时接近正常水平(P＞0.05);其平均灰度值在依赖第10天显著上升(P＜0.05),而在第17天时达最低值(P＜0.05),后随依赖时间延长,与正常水平无显著性差异(P＞0.05).结论:海洛因对颌下腺Bcl-2、Bax的表达有明显影响,且与依赖时间长短有关.     

不同时程海洛因依赖大鼠胃窦CD4、CD8和IL-2表达

目的：探讨海洛因依赖期间大鼠胃窦内CD4、CD8及白细胞介素-2（ IL-2）的表达。方法：正常成年SD大鼠,随机分为正常对照组（ NCG）、盐水对照组（ SCG组）和不同时程海洛因依赖组（ HDG组）;采用免疫组织化学SABC法及图像分析法,观察SCG组和HDG组造模第10、17、24、31及38天时大鼠胃窦黏膜CD4、CD8和IL-2表达。结果：与NCG组及SCG组比较,HDG组大鼠胃窦CD4、IL-2阳性细胞数量减少,染色变浅,图像分析的细胞计数和平均灰度值差异也有统计学意义（ P<0.05）;HDG组大鼠胃窦CD8阳性细胞较NCG及SCG组细胞数量增多,染色变深,在海洛因依赖第24天变化最为明显,差异有统计学意义（ P<0.05）。结论：在海洛因依赖期间,CD4、IL-2在胃窦表达减弱,CD8表达增强,提示海洛因依赖对大鼠胃黏膜免疫功能造成损伤。     

海洛因依赖大鼠中脑腹侧被盖区β-EP的表达

目的：探讨海洛因依赖对大鼠中脑腹侧被盖区（VTA）β-内啡肽（13-endrophin,β-EP）表达的影响。方法：成年雄性SD大鼠55只,分为海洛因依赖组（HDG）及生理盐水对照组（SCG）各25只,正常对照组（NCG）5只,建立海洛因依赖模型;分别于第10、17、24、31、38天取脑组织,用免疫组织化学SABC法显示VTA区β-EP阳性细胞,并用图像分析法测定平均光密度值。结果：显微镜观察显示,与盐水对照组和正常对照组比较,海洛因依赖组VTA区的β-EP阳性细胞免疫反应强度减弱,染色变浅;图像分析测定大鼠VTA区β-EP阳性细胞的平均光密度值,盐水对照组与正常对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）,海洛因依赖组与正常对照组和盐水对照组比较均显著降低（P〈0．05）,且随着依赖时间延长呈下降趋势。结论：在海洛因依赖期间,VTA区β-EP表达减少,提示海洛因抑制了内源性阿片肽的产生。     

海洛因依赖对大鼠垂体β-内啡肽表达的影响

目的：探讨海洛因依赖对大鼠垂体远侧部β-内啡肽（β-endrophin,β-EP）表达的影响。方法：成年雄性SD大鼠55只,随机分为正常对照组、盐水对照组及海洛因依赖组;皮下注射海洛因建立海洛因依赖大鼠模型,分别于模型建立的第10、17、24、31、38天取垂体组织,应用免疫组织化学SABC法、图像分析法观察大鼠垂体远侧部β-内啡肽表达。结果：与正常对照组和盐水对照组比较,海洛因依赖组大鼠垂体远侧部β-EP免疫反应明显减弱,平均灰度值增高（P〈0.05）。结论：在海洛因依赖期间,垂体远侧部β-EP表达减少,提示海洛因依赖使内源性阿片样物质的产生受到抑制。     

海洛因依赖对大鼠颌下腺5-羟色胺免疫反应细胞的影响

目的:研究海洛因依赖期间大鼠颌下腺内5-羟色胺(5-HT)免疫反应 (immunoreactive,IR)细胞表达及功能的改变,探讨颌下腺5-HT-IR细胞在海洛因依赖期间的可能作用.方法:皮下注射海洛因建立海洛因依赖大鼠模型,用免疫组织化学SABC法并结合图像分析方法进行研究.结果:海洛因依赖期间,5-HT-IR细胞的免疫染色明显增强.图像分析结果显示,5-HT-IR细胞数量增加,平均灰度值明显降低,且第24～31天时变化最明显(P＜0.05).结论:海洛因依赖期间,颌下腺5-HT-IR细胞的表达与功能均发生了改变,提示颌下腺5-HT-IR细胞可能参与调节海洛因依赖对机体的损伤过程.     

神经肽Y在海洛因戒断、脱毒及复吸大鼠直肠组织的表达

目的：探讨海洛因戒断、脱毒及复吸期间大鼠直肠内神经肽Y（NPY）的表达。方法：正常雄性SD大鼠随机分为实验组、盐水对照组和正常对照组,实验组又分戒断组、美沙酮脱毒组和复吸组,采用免疫组织化学SABC法及图像分析方法观察各组大鼠直肠NPY的表达。结果：（1）与正常对照组及盐水对照组比较,戒断组及复吸组大鼠直肠内的NPY阳性细胞免疫染色加深;图像分析NPY阳性细胞的细胞计数增多,平均灰度值低于正常及盐水对照组（P〈0.05）;（2）脱毒组与正常及盐水对照组比较,NPY阳性细胞免疫染色、细胞计数及平均灰度值变化差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论：海洛因戒断及复吸期间,NPY在直肠黏膜表达增强,用美沙酮脱毒治疗后NPY的表达接近正常,提示NPY可能参与海洛因戒断、脱毒和复吸期间机体的调节过程。     

电针对海洛因依赖大鼠海马神经细胞凋亡的影响

目的：观察海洛因依赖大鼠海马细胞凋亡情况及电针的干预作用,为针刺戒毒提供一定的理论依据。方法：SD大鼠24只随机分为对照组和实验组;实验组按剂量逐日递增原则,每日2次、连续9天皮下注射海洛因,第10天用纳洛酮催促戒断,建立海洛因依赖模型,再经跳台实验测试筛选,分为电针组和非电针组,每组8只动物;非电针组继续给予海洛因维持剂量,电针组停止给药,处于自然戒断状态,同时选取“百会”、“大椎”进行电针治疗,每天1次,连续7天;采用TUNEL法、Envision免疫组化法检测3组大鼠海马区细胞凋亡情况及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的变化。结果：与对照组比较,非电针组大鼠海马细胞凋亡指数显著升高（P〈0．01）,Bcl-2蛋白表达降低（P〈0,01）,Bax蛋白表达增加（P〈0．01）;与非电针组比较,电针组大鼠海马区细胞凋亡指数显著降低（P,〈0．01）,Bcl-2蛋白表达增加（P〈0．01）,Bax蛋白表达降低（P〈0．01）。结论：电针促进Bcl-2表达、抑制Bax表达,可加速细胞修复、保护损伤脑组织、改善海洛因依赖大鼠学习记忆能力。     

硫化氢对海洛因依赖大鼠一氧化氮/一氧化氮合酶体系的影响

目的探讨硫化氢（H2S）对海洛因依赖大鼠一氧化氮（NO）/一氧化氮合酶（NOS）体系的影响。方法实验大鼠随机分成3组：正常对照组、海洛因依赖组（herion组）、海洛因依赖＋NaHS组（heroin＋NaHS组）。采用比色法测定大鼠血浆及海马组织NO含量,Real time PCR测定海马组织nNOS mRNA表达量。结果血浆及海马NO含量比较,herion组与heroin＋NaHS组均高于对照组（〈0.05）,heroin＋NaHS组低于herion组（〈0.05）;海马组织nNOS mRNA表达量比较,herion组高于对照组（〈0.05）,heroin＋NaHS组与对照组无显著差异（〉0.05）,heroin＋NaHS组低于herion组（〈0.05）。结论海洛因依赖可导致大鼠体内NO水平升高,H2S供体NaHS可抑制NO的产生,下调nNOS mRNA表达。     

嘌呤核苷酸补偿对海洛因依赖大鼠脑组织中 5-HT及5-HIAA 含量的影响及其机制

目的：研究嘌呤核苷酸补偿对海洛因依赖大鼠的戒断症状及脑组织中 5-羟色胺（5-HT）及 5-羟吲哚乙酸（5-HIAA）含量的影响及其作用机制。方法：剂量递增腹腔注射海洛因,建立海洛因依赖大鼠模型,110 只正常雄性 Wistar 大鼠随机分为对照组（C）、海洛因组（H）、海洛因补偿 AMP + GMP 组（HAG）、海洛因补偿 AMP 组（HA）、海洛因补偿 GMP 组（HG）,每组 22只。应用荧光分光光度法测定大鼠脑组织中5-HT和 5-HIAA 的含量,ELISA 法测定大鼠脑组织中色氨酸羟化酶（TPH）的含量,免疫组化法检测脑组织中 TPH 蛋白的表达,每组中有 8 只鼠于第 10 天第 1 次给药后 4 h 观察戒断症状,每组中有4只鼠用于免疫组化。结果：与 H 组比较,HAG、HA 及 HG 组大鼠的咀嚼、齿颤及睑下垂次数均明显减少 (P<0.05)。与 C 组比较, H 组大鼠脑组织中 5-HT 和 5-HIAA 含量显著下降 (P<0.05);与 H 组比较, HAG、HA 和 HG 组大鼠脑组织中 5-HT 和 5-HIAA 含量均有所升高 (P<0.05)。与 C 组比较,H 组大鼠脑组织中 TPH 含量显著下降 (P<0.05);与 H 组比较,HAG、HA 和 HG 组大鼠脑组织中 TPH 含量均有所升高 (P<0.05)。与 C 组比较,H 组大鼠脑组织中 THP 表达的阳性细胞计数明显减少(P<0.05);与 H 组比较,HAG、HA 及 HG 组大鼠脑组织中 THP 表达的阳性细胞计数有所升高(P<0.05)。结论：嘌呤核苷酸补偿能够减轻海洛因依赖大鼠的戒断症状,并能增加大鼠脑组织中 5-HT 和 TPH 的含量。     

羟基红花黄色素A对急性脊髓损伤模型大鼠神经细胞凋亡的影响

目的：观察羟基红花黄色素A（HSYA）对急性脊髓损伤（ASCI）模型大鼠神经细胞凋亡的影响。方法30只SD大鼠随机分为空白对照组、损伤对照组和HSYA治疗组,每组10只。采用Allens’s打击法建立急性脊髓损伤大鼠模型,分别于术后1、7、14天观察各组大鼠行为学评分,术后14天通过免疫组化方法观察脊髓损伤部位神经细胞caspase-3 p20、Bcl-2和Bax表达。结果HSYA治疗组与损伤对照组大鼠下肢功能均有恢复（P〈0.05）,且HSYA治疗组恢复更明显（P〈0.05）;与损伤对照组比较,HSYA治疗组caspsase-3p20阳性细胞数表达明显减少（P〈0.05）,Bcl-2阳性细胞显著增加（P〈0.05）,Bax阳性细胞明显减少（P〈0.05）。结论 HSYA对急性脊髓损伤模型大鼠神经细胞凋亡有明显抑制作用,从而减少脊髓损伤部位继发性损伤,促进功能恢复。     

早期肠内免疫营养对烫伤大鼠炎症反应及肠黏膜屏障功能的影响

目的：探讨早期肠内免疫营养对烫伤大鼠炎症反应的影响及对肠黏膜屏障功能的保护作用。方法：SD雄性大鼠54只,制成烫伤动物模型（30%TBSAⅢ度烫伤）,随机分为标准营养组（EN组）和免疫营养组（EIN组）,每组24只,EIN和EN组给予等热量肠内营养液,各组于伤后2h开始灌喂营养液。另取6只正常大鼠作为伤前对照（Control）。分别于伤前、伤后1、4、7、10d,处死每组各6只大鼠并立即心脏取血,检测血清中TNF-α、IL-2、IL-6、IL-8及D-乳酸的含量。结果：（1）烫伤后观察期内EIN组和EN组大鼠血清TNF-α、IL-6、IL-8水平均明显高于Control组（P〈0.01或P〈0.05）,而IL-2水平则低于Control组（P〈0.01或P〈0.05）,但EIN组于伤后7d恢复（P〉0.05）;伤后4、7、10dEIN组血清TNF-α、IL-6和IL-8水平显著低于EN组（P〈0.05）,而IL-2则明显高于EN组（P〈0.05）;（2）烫伤后血清D-乳酸水平升高,EN组在观察时间内血清D-乳酸水平没有恢复至伤前水平,EIN组在伤后4d恢复。结论：烫伤后早期给予肠内免疫营养,可减轻烫伤后大鼠全身炎症反应,同时改善肠黏膜的屏障功能,效果优于标准肠内营养。     

嗅鞘细胞移植对大鼠脊髓损伤后水通道蛋白-4的影响

目的：探索大鼠嗅鞘细胞（olfactory ensheathing cells,OECs）移植对大鼠脊髓损伤（spinal cord injurySCI）后水通道蛋白-4（AQP-4）和后肢功能的影响。方法：取Wistar大鼠150只,随机分为正常组（50只）、模型组（50只）、OECs移植组（50只）,模型组和OECs移植组用改良的Allen法制成脊髓损伤模型,造模成功后,其中OECs移植组在损伤处移植嗅鞘细胞,模型组移植DF-12培养液。于术后1、3、7、14、21、28 d进行BBB（Basso-Beattle-Bresnahan）运动功能评分,应用免疫组织化学技术检测脊髓组织AQP-4的表达,并用图像分析仪进行定量分析。结果：术后3~28 d,OECs移植组的BBB评分较模型对照组明显提高,术后第1天,模型组和OECs移植组受损脊髓灰质、白质中AQP-4的表达明显增加;第3天时均达到高峰,但OECs移植组低于模型组（P〈0.05）。第7、14、21、28天,与模型组比较,OECs移植组AQP-4表达也较低（P〈0.01）。结论：OECs移植使脊髓损伤后AQPa表达减少,这可能有利于抑制脊髓水肿、消除脊髓继发性损伤,保存残存正常脊髓组织并促进神经轴突再生,改善其肢体运动功能。     

大鼠创伤性脑损伤后降钙素基因相关肽对骨折愈合的影响

目的通过侧方液压脑损伤骨折模型研究脑损伤后大鼠血清中降钙素基因相关肽（calcitoningene—related peptide,CGRP）的变化及对骨折愈合的影响。方法SD大鼠随机分成三组,空白对照组10只（A组,n=10）,单纯骨折组48只（B组,n=48）,脑损伤骨折组48只（C组,n=48）,通过侧方液压脑损伤及开放骨折建立模型,损伤后适时取SD大鼠血清及骨折标本,通过放射免疫荧光、免疫组化、X片、骨折直径及生物特性测量骨痂直径、骨痂中阳性细胞的数量表达及抗应力的大小等,了解血清中CGRP的含量、骨折愈合情况。结果伤后各组血清中CGRP的含量：从伤后CGRP水平的变化看,脑损伤骨折组CGRP含量明显升高,第7天达高峰（196．73±54．98）pg／ml,随后逐渐下降,单纯骨折组CGRP含量也升高,第5天达高峰（74．70±20．76）pg／ml,随后下降;脑损伤骨折组中CGRP含量明显高于单纯骨折组,且高峰时间长,差异有统计学意义（P〈0．05）;脑损伤骨折组骨痂无论在影像学、直径大小及骨痂抗应力均大于单纯骨折组,免疫组化发现脑损伤骨折组骨痂中阳性细胞明显增多,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论脑损伤骨折大鼠骨折愈合快于单纯骨折,推测脑损伤血清中CGRP可促进骨折愈合。     

激动素通过抑制纤溶酶原激活物抑制因子1减轻博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化

目的研究激动素对博莱霉素A5（BLM-A5）诱导的大鼠肺纤维化的干预作用。方法雌性Wistar大鼠60只随机分为对照组、模型组和治疗组,每组20只。模型组与治疗组大鼠经穿刺向气管内注入BLM-A5（5mg／kg）,对照组在相同条件下注入等体积生理盐水。治疗组于灌注BLM-A5的第1d开始腹腔注入0．5％激动素（0．5mL／100g）,每日1次。分别于第3、7、14、28d处死大鼠,取肺组织病理切片行HE及Masson染色观察肺部炎症和纤维化情况,ELISA方法检测肺组织羟脯氨酸（HYP）含量及肺组织和血浆中尿激酶型纤溶酶原激活物（u-PA）、组织型纤溶酶原激活物（t-PA）、PAl．1含量。结果模型组第7d肺泡炎最明显,到28d时肺纤维化最严重;治疗组肺泡炎及肺纤维化程度均较模型组显著减轻,但仍较对照组严重（P〈0．05）。模型组第7d时HYP含量开始升高,28d最高;各组变化趋势与肺纤维化变化相一致。模型组肺组织u-PA在第3d开始下降,至7d时最低,14d仍显著低于其他两组（P〈0．05）,28d时三组间无明显差异（P〉0．05）。模型组血浆u-PA水平在第3d开始下降,至7d时最低,与其他两组比较有显著差异（P〈0．05）,14d后三组之间无明显差异（P〉0．05）。三组t-PA在肺组织和血浆中的含量变化与u-PA基本一致,但在14d时模型组血浆t-PA含量仍较对照组显著降低（P〈0．05）。模型组肺组织PAI-1在第3d开始升高,至7d时最高,14d时仍显著高于其他两组（P〈0．05）,28d时三组之间无明显差异（P〉0．05）;治疗组肺组织PAI-1水平较模型组下降（P〈0．05）,但仍高于对照组（P〈0。05）,至14d时无显著差异（P〉0．05）。模型组血浆PAI-1在第3d开始升高,至7d时最高,显著高于其他两组（P〈0．05）,但14d后三组间无明显差异（P〉0．05）。结论激动素通过抑制肺组织PAI-1生成,使u-PA、t-PA含量升高,减轻了博莱霉素A5所致的大鼠肺纤维化。     

超声二维应变成像技术定量评价心肌梗死后左心室局部收缩功能的改变

目的应用超声二维应变成像技术定量评价心肌梗死后左心室局部收缩功能的改变。方法选取2011年9月至2013年1月在齐鲁医院平邑分院心内科确诊为急性心肌梗死并住院14 d以上的患者36例和健康对照者25例作为研究对象,健康对照者行超声心动图检查,36例患者于住院1 d及14 d均行超声心动图检查。并于心尖四腔心切面分别测量室间隔及左心室侧壁的基底段、中间段、心尖段心内膜下心肌纵向收缩期峰值应变及应变率。结果心肌梗死治疗1 d组与健康对照组、心肌梗死治疗14 d组二维常规超声心动图比较,左心室射血分数显著下降(P<0.05),心肌梗死治疗14 d组与健康对照组比较,左心室射血分数有所下降,但差异无统计学意义(P>0.05);三组间两两比较,健康对照组、心肌梗死治疗14 d组及心肌梗死治疗1 d组室间隔及左心室侧壁基底段、中间段及心尖段心内膜下心肌纵向收缩期峰值应变及应变率依次减低,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论超声二维应变成像技术可定量检测心肌梗死后左心室局部收缩功能的改变并定量评估治疗后效果。     

动态监测血清可溶性髓样细胞触发受体1对脓毒症的诊断及预后评估价值

目的探讨血清可溶性髓样细胞触发受体1（sTREM-1）水平对脓毒症的临床诊断及预后的价值。方法选取58例首诊为全身炎症反应综合征（SIRS）的患者,分为脓毒症组（40例）和非脓毒症组（18例）,另选健康成年人作为对照组（12例）。采用ELISA法动态测定患者1、3、7、14d的血清sTREM-1、IL-6、IL-10的水平。再按28d转归将脓毒症40例分为生存组（27例）和死亡组（13例）,利用APACHEU评分和SOFA评分评估脓毒症的危重程度,并分析sTREM-1与IL-6、IL-10、病情发展及预后的相关性。结果脓毒症组第1d血清sTREM-1、IL-6及IL-10的水平[分别为217．28（136．02-377．01）pg／mL、218．76（123．32-548．58）pg／mL及93．86（54．23-143．10）pg／mL],均显著高于非脓毒症组[分别为55．51（39．50-77．33）og／mL、75．98（34．89-141．03）pg／mL及52．49（45．66-56．72）pg／mL]和正常对照组[分别为43．99（36．28-53．81）pg／mL、46．07（40．23-53．72）pg／mL及49．79（43．31-53．14）pg／mL]（P均〈0．01）。根据ROC曲线分析,sTREM-1对脓毒症和非脓毒症组进行诊断的曲线下面积（AUC）为0．82（95％C1 0．70-0．94）。在入组观察期间的1、3、7d,生存组的血清sTREM．1水平和IL-10水平随时间推移逐渐下降,死亡组sTREM1水平随时间推移呈显著上升趋势,且第14d死亡组的sTREM-1、IL-6、IL-10及IL-6／IL-10比值均显著高于生存组（P〈0．05）。脓毒症患者第1d血清sTREM-1水平与APACHEⅡ评分、SOFA评分、IL-6、IL-10及IL-6／IL-10均呈正相关（r分别为0．624、0．584、0．454、0．407及0．324,P均〈0．05）。Logistic回归分析显示,血清sTREM一1水平可作为脓毒症预后的危险因素,但并非独立的危险因素。结论血清sTREM-1水平有助于脓毒症的诊断,sTREM-1参与脓毒症的全身炎症反应过程,对脓毒症预后评估具有一定价值。     

氟桂嗪对脑梗死患者血清转化生长因子-β1的浓度影响

目的研究氟桂嗪对脑梗死患者血清转化生长因子-β1（Transforming growth factor-betal TGF-β1）的浓度变化影响。方法收集动脉硬化性脑梗死患者60例，随机分成2组，按缺血性脑血管疾病常规治疗，一组治疗中无钙离子拮抗剂治疗，另一组病后第2d始加口服氟桂嗪20mg／d，分2次，连用14d，采用ELISA双抗体夹心酶联免疫吸附法检测患者发病后第1、3、7、14d血清TGF-β1水平动态变化，并与30例健康体检者作对照。结果脑梗死患者血清TGF-β1浓度在第1d均明显低于正常对照组血清TGF-β1水平（P〈0．01），加用氟桂嗪治疗组血清TGF-β1含量在第3、7、14d均明显高于未加氟桂嗪组，有显著差异（P〈0．01）。结论氟桂嗪可能有利于TGF-β1的信号传递，提高脑梗死患者血清TGF-β1水平，有利于抵御脑缺血再灌注造成的脑损伤。