肾上腺素能受体激动剂与阻断剂对血管平滑肌细胞增殖和c－fos，c－myc原癌基因表达的影响

目的：研究肾上腺素能受体激动剂与阻断剂对血管平滑肌细胞增殖、ＤＮＡ合成和ｃ－ｆｏｓ，ｃ－ｍｙｃ原癌基因表达的影响．方法：应用细胞培养、￣３Ｈ－胸腺嘧啶核苷掺入和斑点杂交的方法．结果：１～１０μｍｏｌ／Ｌ去甲肾上腺素（ＮＥ）和０．１～１０μｍｏｌ／Ｌ异丙基肾上腺素（ＩＳＯ）可明显促进离体培养的ＳＤ大鼠的主动脉平滑肌细胞增殖、￣３Ｈ－ＴｄＲ掺入和ｃ－ｆｏｓ，ｃ－ｍｙｃ原癌基因表达，并呈剂量依赖效应．该效应可为相应的受体阻断剂Ｐｈｅｎｔｏｌａｍｉｎｅ（１０μｍｏｌ／Ｌ）和Ｐｒｏｐｒａｎｏｌｏｌ（１０μｍｏｌ／Ｌ）所抑制（Ｐ＜０．０５）．结论：肾上腺素能受体激动剂可促进离体培养的大鼠主动脉平滑肌细胞的增殖、ＤＮＡ合成和原癌基因的表达，该效应可被其相应的阻断剂所抑制．     

胰岛素对血管平滑肌细胞增殖及原癌基因c－fos，c－myc异常表达的实验研究

我们观察了不同浓度的胰岛素对体外培养人血管平滑肌细胞增殖的影响，及其该过程中原癌基因ｃ－ｆｏｓ，ｃ－ｍｙｃ的表达。结果表明，胰岛素能促进血管平滑肌细胞（ＳＭＣ）增殖，即：ＳＭＣ数目的增多，ＳＭＣＤＮＡ的合成；胰岛素能促进原癌基因ｃ－ｆｏｓ和ｃ－ｍｙｃ的异常表达；且以上作用均存在着剂量－效应关系。这些结果提示，高胰岛素血症促进动脉粥样硬化（ＡＳ）发生、发展可能是通过促进某些原癌基因异常表达，进而促进ＳＭＣ增殖而实现的。这也许是某些基因治疗ＡＳ的基础。     

原癌基因c－fos和c－jun在血管平滑肌细胞增殖调控中的作用

体外培养大鼠血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ），通过３Ｈ－ＴｄＲ参入实验和ＲＮＡ印迹分析，观察内皮素－１对ＶＳＭＣＤＮＡ合成、原癌基因ｃ－ｆｏｓ与ｃ－ｊｕｎ表达及ｃ－ｊｕｎ反义ＲＮＡ对ＶＳＭＣ增殖的影响。结果表明，内皮素－１作用于ＶＳＭＣ１２小时，３Ｈ－ＴｄＲ参入开始增加，２４小时达到峰值。在内皮素－１作用下，原癌基因ｃ－ｆｏｓ与ｃ－ｊｕｎ的表达活性在３０分钟达到高峰，３／小时后恢复到原来水平。将可合成ｃ－ｊｕｎ反义ＲＮＡ的表达载体导入ＶＳＭＣ，外源性ｃ－ｊｕｎ基因在ＶＳＭＣ中大量表达并显著抑制细胞增殖。本文提示，原癌基因ｃ－ｆｏｓ和ｃ－ｊｕｎ在ＶＳＭＣ增殖调控中起着重要作用。     

胰岛素对血管平滑肌细胞增殖及原癌基因c—fos,c—myc异…

我们观察了不同浓度的胰岛素对体外培养人血管平滑肌细胞增殖的影响，及其该过程原癌基因ｃ－ｆｏｓ，ｃ－ｍｙｃ的表达，结果表明，胰岛素能促进血管平滑肌细胞（ＳＭＣ）增殖，即：ＳＭＣ目的增多，ＳＭＣＤＮＡ的合成，胰岛素能促进原癌基因ｃ－ｆｏｓ和ｃ－ｍｙｃ的异常表达；且以上作用均在着剂量－效应关系，这些结果提示，高胰岛素血症促进动脉粥样硬化（ＡＳ）发生，发展可能是通过促进某些原癌基因异常表达，进而促进ＳＭＣ     

原癌基因c—fos和c—jun在血管平滑肌细胞增殖调控中的作用

体外培养大鼠血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）。通过＾３Ｈ－ＴｄＲ参入实验和ＲＮＡ印迹分析，观察内皮素－１对ＶＳＭＣＤＮＡ合成，原癌基因ｃ－ｆｏｓ与ｃ－ｊｕｎ表达及ｃ－ｊｕｎ反义ＲＮＡ对ＶＳＭＣ增殖的影响，结果表明，内皮素－１作用于ＶＳＭＣ１２小时，＾Ｈ－ＴｒＲ参入开始增加，２４小时达到峰值，在内皮素－１作用下，原癌基因ｃ－ｆｏｓ与ｃ－ｊｕｎ的表达活性的３０分钟达到高峰３小时后恢复到原来水平，将可合成ｃ－     

原癌基因c—myc与肿瘤

原癌基因ｃ－ｍｙｃ是ｍｙｃ家族的重要成员，它编码细胞核内磷酸化蛋白质。ｃ－ｍｙｃ基因在维持正常细胞功能活中起重要作用，参与细胞的增殖，分化及凋亡过程。ｃ－ｍｙｃ与人类肿瘤有密切关系，在许多肿瘤组织中均可以检测到原癌基因ｃ－ｍｙｃ及其蛋白表达产的的异常。而且体外实验证实ｃ－ｍｙｃ基因可与其他癌基因协同转化多种细胞。     

生物素标记核酸探针检测白血病患者c—myc原癌基因的表达水平

用两种方法制备生物素ｃ－ｍｙｃ癌基因探针，通过ＲＮＡ－ＤＮＡ斑点杂交技术，检测了白血病３０例和２种白血病细胞株中ｃ－ｍｙｃ原癌基因的ＲＮＡ表达水平，结果显示，白血病细胞株，急性白血病和慢性粒细胞性白血病急性变患者的ｃ－ｍｙｃ的ＲＮＡ表达水平明显高于正常人和患其它血液病的患者，提示ｃ－ｍｙｃＲＮＡ水平的判定可提供一些有意义的临床信息，同时探讨了生物素和光敏生物素标记核酸探针的优越性。     

乳腺癌原癌基因c—erbB—2扩增与过度表达

目的;探讨原癌基因ｃ－ｅｒｂＢ－２扩增与过表达在乳腺癌的临床意义。方法：应用原位杂交和免疫组化对８１例乳腺癌原癌基因ｃ－ｅｒｂＢ－２扩增与过表达进行检测。结果：在８１例乳腺癌中,３７例显示ｃ－ｅｒｂＢ－２基因扩增,２４例显示ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白过表达,基因扩增与蛋白过度表达呈显著相关关系（Ｐ〈０．０５）。基因扩增与过表达均与乳腺癌病理分级,肿瘤大小,临床分期及淋巴结转移呈正相关。结论：ｃ－ｅｒｂＢ     

致敏豚鼠气道及肺组织c—myc基因的表达与哮喘发病的关系

研究原癌基因在哮喘发病中的作用。方法以卵蛋白致敏诱发豚鼠哮喘建立实验模型。用分子杂交技术分别观察正常及哮喘发作后ｃ－ｍｙｃ在豚鼠气道及肺组织中的表达水平。结果：原癌基因ｃ－ｍｙｃ在豚鼠哮喘发作后即刻表达增强，且呈时间依赖关系，并可被糖皮质激素部分抑制。     

急性非淋巴细胞白血病细胞中原癌基因c—myc的表达

研究急性非淋巴细胞白血病细胞中原癌基因ｃ－ｍｙｃ的表达及临床意义。方法采用蛋白质免疫印渍和单克隆抗体免疫细胞化学染色方法检测３０例ＡＮＬＬ细胞中原癌基因ｃ－ｍｙｃ的表达。结果１９例表达阳性，阳性率为６３％。ＡＮＬＬ中白血病细胞的阳性细胞百分率为２９％－９６％，ｃ－ｍｙｃ在不同病人的白血病细胞中表达水平不一样；ｃ－ｍｙｃ的表达和患者骨髓中白血病细胞百分率显著相关，和患者年龄，性别，外周血白细胞计数。     

生物素标记核酸探针检测白血病患者c－myc原癌基因的表达水平

用两种方法制备生物素ｃ－ｍｙｃ癌基因探针，通过ＲＮＡ－ＤＮＡ斑点杂交技术，检测了白血病３０例和２种白血病细胞株中ｃ－ｍｙｃ原癌基因的ＲＮＡ表达水平。结果显示，白血病细胞株、急性白血病和慢性粒细胞性白血病急性变患者的ｃ－ｍｙｃ的ＲＮＡ表达水平明显高于正常人和患其它血液病的患者，提示ｃ－ｍｙｃＲＮＡ水平的判定可提供一些有意义的临床信息；同时探讨了生物素和光敏生物素标记核酸探针的优越性。     

大鼠脑损伤时神经细胞c—fos,c—jun和c—myc基因表达变化

目的 观察大鼠脑损伤不同时间皮质神经细胞早期快反应基因ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｊｕｎ、ｃ－ｍｙｃ表达变化。方法 应用 Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交、原位杂交和免疫组织化学方法检测皮质神经细胞中ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｊｕｎ、ｃ－ｍｙｃ的表达。结果 脑损伤后１５ｍｉｎ,伤测皮质神经细胞出现上述３种基因ｍＲＮＡ的表达,随时间的延长,表达逐渐增加,于伤后３ｈ达高峰并持续至伤后２５ｈ伤后,伤后７２ｈ恢复至对照水平ｃ－ｆｏｓ、ｃ－     

脂质体介导c—myc反义核酸对HL—60细胞作用的研究

原癌基因ｃ－ｍｙｃ参与调控细胞的增殖、分化和凋亡过程,在白血病细胞株ＨＬ－６０ 中有很高的表达。ｃ－ｍｙｃ通过扩增活化或基因重排而异常激活,在白血病的发生和发展中可能起着重要的作用。　目的　通过脂质体介导ｃ－ｍｙｃ反义核酸转染ＨＬ－６０ 细胞,观察其抑制细胞生长增殖、促进分化、诱导凋亡,降低ｃ－ｍｙｃｍ ＲＮＡ 和蛋白表达水平,探讨反义核酸的抗肿瘤作用机制。　方法　ＨＬ－６０ 细胞在３７℃、５％ＣＯ２ 条件下,培养于１０％ 小牛血清１６４０ 培养液中,细胞接种密度为４×１０７／Ｌ,反义核酸终浓度为１μｍ ｏｌ／Ｌ,反义核酸与脂质体比例为１ μｍ ｏｌ（６．５ μｇ）∶１０ μｇ,无血清转染６ ｈ。实验同时设置空白组、无义组、反义组、脂质体组、脂质体无义组等对照组。连续培养４ 天。通过锥虫蓝拒染实验测定细胞的生长能力;ＮＢＴ还原实验和瑞特－姬姆萨染色测定细胞的分化能力;免疫细胞化学染色检测ｃ－ｍｙｃ蛋白表达;ＲＴ－ＰＣＲ法检测ｃ－ｍｙｃ ｍ ＲＮＡ 水平;吖啶橙／溴化乙锭染色观察凋亡细胞形态;流式细胞仪检测凋亡率;ＤＮＡ抽提及电泳观察凋亡细胞ＤＮＡ降解片段的形成。　结果　脂质体转染ｃ－ｍｙｃ反义核酸的作用：（１）抑制ＨＬ－６０     

c—met癌基因与乳腺癌血管生成的相关性研究

目的 探讨原癌基因ｃ－ｍｅｔ在乳腺癌血管生成中的作用及其临床意义。为寻求抗人乳腺癌血管生成药物提供依据。方法 应用ＳＰ免疫组化和计算机图像分析技术。对８０例乳腺癌、２０例乳腺纤维腺瘤的微血管密度和ｃ－ｍｅｔ蛋白表达进行定量测定。结果 乳腺癌组织微血管计数、ｃ－ｍｅｔ阳性表达与组织学分级、淋巴结转移、肿瘤分期显著相关（Ｐ〈０．０１）。高微血管计数与ｃ－ｍｅｔ阳性表达显著相关（Ｐ〈０．０１）。结论 原癌基因ｃ－ｍｅｔ激活参与调控乳腺癌的肿瘤血管生成，是一重要的预后因素。     

三种反义c—mycRNA稳定表达对血管平没肌细胞生长,增殖的影响

目的 研究反义基因在细胞中持续、稳定表达对平滑肌细胞生长增殖的影响。方法 将分别载有ｃ－ｍｙｃ第１、２和３外显子反义片段的三种重组逆转录病毒表达载体ａＭ１、ａＭ２和ａＭ３导入大鼠主动脉平滑肌细胞（ＳＭＣ）,并于持续筛选后１个月进行稳定表达检测。结果 ａＭ１和ａＭ２能持续抑制靶细胞Ｍｙｃ蛋白表达（分别为对照表达量的５９．７％和８１．３％）、增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）表达９分别为对照表达量的５２．４％和５１．９％）,抑制靶细胞的生长增殖活性并以ａＭ２作用最强（抑制率达到３０％）,同时,ａＭ２还有一定的延长细胞周期和减少ＤＮＡ合成的作用,而ａＭ３作用相反。另外,与瞬时表达相比,外源基因在靶细胞中的作用并非一成不变,而基因转染操作对细胞的影响会随着细胞的代偿逐渐减少并在短期内消失。结论 对ｃ－ｍｙｃ中不同区域进行反义封     

豚鼠哮喘模型气道中炎症细胞浸润与c—jun表达相关性研究

探讨豚鼠哮喘模型气道中炎症细胞的浸润和活化与原癌基因ｃ－ｊｕｎ表达的关系。应用免疫组织化学技术和肺的组织学检查方法，观察豚鼠哮喘模型致敏原激发后，４，１２，２４ｈ气道中炎症细胞的浸润及炎症细胞内ｃ－ｊｕｎ表达情况。     

大鼠压力超负荷性心肌肥厚早期c—fos mRNA表达的变化

采用核酸分子杂交观察腹主动脉缩窄大鼠心肌肥厚早期左室ｃ－ｆｏｓ原癌基因表达改变。实验结果显示：正常左室仅有少量ｃ－ｆｏｓｍＲＮＡ表达,腹主动脉缩窄后１ｈｃ－ｆｏｓｍＲＮＡ表达明显增加,３ｈ达高峰,１２ｈ明显下降。从而表明在压力超负荷性心肌肥厚模型中早期有ｃ－ｆｏｓ原癌基因的快速短暂表达。     

内源性阿片肽对兔肺动脉平滑肌细胞增殖的抑制作用

目的：观察内源性阿片肽Ｌ－Ｅｎｋ、吗啡对兔肺动脉平滑肌细胞增殖作用的影响并分析其作用机制．方法：离体培养新西兰兔肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭＣ），采用四唑盐比色法（ＭＴＴ）和３Ｈ－ＴｄＲ参入实验观察ＰＡＳＭＣ增殖和ＤＮＡ合成量的变化．结果：Ｌ－Ｅｎｋ对ＰＡＳＭＣ增殖及ＤＮＡ合成有抑制作用且呈剂量依赖效应．Ｌ－Ｅｎｋ（１×１０－３～１×１０－４ｍｏｌ／Ｌ）对ＰＡＳＭＣ的增殖和ＤＮＡ的合成有显著的抑制作用，该作用可被阿片受体阻断剂纳络酮阻断．吗啡对ＰＡＳＭＣ的增殖和ＤＮＡ的合成无显著影响．结论：内源性阿片肽可能主要是通过δ亚型阿片受体对ＰＡＳＭＣ的生长、增殖起抑制作用的，而与μ亚型阿片受体无明显关系．阿片肽类递质抑制ＰＡＳＭＣ增殖作用的可能机制是通过抑制原癌基因ｃ－ｍｙｃ、ｃ－ｆｏｓ的表达从而抑制细胞从Ｇ１进入Ｓ期．     

局灶脑缺血再灌流后c—fos和bcl—2基因的表达

为探讨短暂局灶脑血后不同灌流期即刻早期基因（ＩＥＧｓ）与凋亡抑制基因在同一脑区的表达状况，采用不开颅血管腔内置线法制作 鼠大脑中动脉阻塞（ＭＣＡ０）的局灶缺血再灌流模型，通过免疫组化法观察原癌基因ｃ－ｆｏｓ和ｂｃｌ－２蛋白在缺血３０ｍｉｎ再灌６ｈ和２４ｈ的表达。结果显示：再灌６ｈ，二者在缺血同侧梨状皮层显著表达，而底节区表达很弱；再灌２４ｈ，ｃ－ｆｏｓ蛋白在梨状皮层表达显著减弱；ｂｃｌ－２蛋白表达     

氧化修饰高密度脂蛋白对培养人动脉平滑肌细胞原癌基因c—fo …

动脉平滑肌细胞（ｓｍｏｏｔｈ ｍｕｓｃｌｅ ｃｅｌｌ,ＳＭＣ）的增殖在动脉粥样硬化（ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ,ＡＳ）的形成过程中极其重要利用体外培养的人主动脉ＳＭＣ,观察了天然高密度脂蛋白（Ｎａｔｉｖｅ ｈｉｇｈ ｄｅｎｓｉｔｙ ｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ ＮＨＤＬ）及氧化修饰ＨＤＬ（ＯＸ－ＨＤＬ）对培养的人主动脉ＳＭＣ原癌基因ｃ－ｆｏｓ及ＰＤＧＦ受体基因转录表达的影响。