γ-线对小鼠细胞遗传学的影响及重组人超氧化物歧化酶抗放作用的研究

研究γ－射线对小鼠遗传学的影响及重组人超氧化物歧化酶抗放作用。方法：实验用甲基纤维素缩集法计算淋巴细胞微核率，活体秋水内素法进行骨髓染色体畸变率分析。     

重组人铜锌超氧化物歧化酶对电离辐射损伤小鼠免疫细胞的影响(论著)

目的：探讨电离辐射对免疫细胞的影响及重组人铜锌超氧化物歧化酶（ｒｈＣｕＺｎＳＯＤ）的抗辐射作用。方法：观察６０Ｃｏγ射线５～７Ｇｙ照射前后不同时段给予ｒｈＣｕＺｎＳＯＤ对小鼠免疫细胞的影响。结果：电离辐射对小鼠免疫细胞有明显的损伤作用。与照射对照组比较，ｒｈＣｕＺｎＳＯＤ可减轻电离辐射对小鼠免疫细胞的影响，其作用包括增强脾Ｔ淋巴细胞对刀豆蛋白Ａ诱导的增殖反应，提高脾自然杀伤细胞的活性，升高全脾淋巴细胞及外周血白细胞和淋巴细胞的数量。辐射前后给药组的效果优于辐射前或辐射后给药组。结论：ｒｈＣｕＺｎＳＯＤ对防止免疫细胞的辐射损伤有一定作用。     

重组人铜锌超氧化物歧化酶对小鼠抗氧化酶和免疫细胞的辐射防护作用

目的探讨重组人铜锌超氧化物歧化酶（ｒｈＣｕＺｎ－ＳＯＤ）的辐射防护作用。方法观察６０Ｃｏγ射线５～７Ｇｙ照射对小鼠体内抗氧化酶和免疫细胞的影响，以及给予ｒｈＣｕＺｎ－ＳＯＤ后的抗放效应。结果与照射对照组比较，ｒｈＣｕＺｎ－ＳＯＤ可明显减轻受照小鼠血液和肝细胞浆中总超氧化物歧化酶（Ｔ－ＳＯＤ）、铜锌超氧化物歧化酶（ＣｕＺｎ－ＳＯＤ）、谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）、过氧化氢酶（ＣＡＴ）的活性下降的程度。ｒｈＣｕＺｎ－ＳＯＤ亦可明显增强受照小鼠脾Ｔ淋巴细胞对刀豆蛋白Ａ的增殖反应和自然杀伤细胞的活性；提高小鼠全脾淋巴细胞、外周血白细胞和相对淋巴细胞计数；以及延长了３０天平均生存时间。不同给药方法中，辐射前后给药组的效果优于辐射前或辐射后给药组。结论抗氧化酶活性的降低和氧自由基作用的增强可能是电离辐射引起机体过氧化损伤，导致组织细胞功能异常的重要原因。ｒｈＣｕＺｎ－ＳＯＤ对小鼠抗氧化酶和免疫细胞以及整体均具有辐射防护作用，可能主要由于其直接清除氧自由基的功能，其次通过这种保护功能也促进其他抗氧化酶发挥了一定的协同作用。     

重组人铜锌超氧化物歧化酶对小鼠骨髓造血粒─巨系祖细胞的辐射防护作用

目的：探讨重组人铜锌超氧化物歧化酶（ｒｈＣｕＺｎＳＯＤ）的辐射防护作用及其机理。方法：通过γ线辐射损伤小鼠的体内和体外实验，观察了ｒｈＣｕＺｎＳＯＤ和聚乙二醇修饰的ｒｈＣｕＺｎＳＯＤ（ＰＥＧ－ｒｈＣｕＺｎＳＯＤ）对小鼠骨髓造血粒－巨系祖细胞克隆产生率（ＣＦＵ－ＧＭ）的影响。结果：体内实验，小鼠整体照射，静脉给药，以上两种酶（２５`０～３００ｍｇ／ｋｇ）均能非常显著地提高ＣＦＵ－ＧＭ的数量。其中以照射前后联合给药效果最好。而单纯照射前给药，ｒｈＣｕＺｎＳＯＤ仅在照前１小时给药效果较好；ＰＥＧ－ｒｈＣｕＺｎＳＯＤ则在照前３小时或照前１小时给药都有较好的效果。体外实验，小鼠离体细胞照射并给药，未见ｒｈＣｕＺｎ－ＳＯＤ对ＣＦＵ－ＧＭ的影响。结论：以上两种酶对小鼠骨髓ＣＦＵ－ＧＭ有良好的辐射防护作用，其机理可能是通过机体防御系统作用的间接途径实现的。ＰＥＧ－ｒｈＣｕＺｎＳＯＤ的生物半衰期较长，可增加给药时机，因而具有更大的实用价值。     

抗放利对电离辐射诱导人外周血淋巴细胞遗传损伤的保护作用

目的 探讨2,2-二甲基四氢噻唑盐酸盐（抗放利）对辐射诱导人外周血淋巴细胞遗传损伤的防护作用。方法 采集健康人外周血,分为健康对照组、单纯照射组和抗放利防护组。照射剂量为2 Gy。抗放利防护组分0.2、0.5、1、2 mmol/L 4个浓度组,于照前30 min给药。通过染色体畸变分析、微核及单细胞凝胶电泳检测,观察抗放利对辐射致人外周血淋巴细胞遗传损伤的防护作用。结果 各浓度抗放利防护组与单纯照射组比较,染色体畸变率（t=5.34~25.48,P<0.05）、微核细胞率（t=5.18~29.44,P<0.05）与微核率（t=4.67~12.04,P<0.05）、彗星细胞尾长（t=16.18~19.64,P<0.05）、 尾矩（t=11.79~13.01,P<0.05）和Olive尾矩（t=12.44~14.88,P<0.05）、 尾部DNA含量（t=12.05~17.30,P<0.05）均明显降低。两个高浓度防护组（1、2 mmol/L）分别与两个低浓度防护组（0.2、0.5 mmol/L）比较,Olive尾矩明显降低（t=5.67~16.56,P<0.05）。2 mmol/L防护组与其余各防护组相比,微核率和微核细胞率明显降低（t=4.23~5.57,P<0.05）。结论 抗放利对辐射诱导人外周血淋巴细胞遗传损伤具有防护作用。     

长效重组人超氧化物歧化酶的研制及其辐射防护作用

选用无毒、无免疫原性的高分子化合物聚乙二醇(PEG)为修饰剂,以活性酯法制备出PEG- 重组人超氧化物歧化酶(PEG-rh SOD)共价结合物.修饰酶的生物半衰期为15h,比修饰前延长了90倍,对酸、碱、热的耐受力明显高于修饰前.用照射小鼠的活存率评价了PEG-rhSOD的辐射防护作用.小鼠受8.5Gy γ射线照射前1h腹腔注射30万U/kg PEG-rh SOD,可提高活存率42%,与未修饰的rhSOD相比,活存率提高14%.实验仍在进行中.     

啤酒与乙醇对γ射线诱发小鼠骨髓细胞染色体畸变的影响

目的 观察啤酒及乙醇对不同剂量γ射线照射小鼠所诱发的骨髓细胞染色体畸变的影响.方法 雄性健康BALB/c小鼠,随机分成对照组、啤酒组和乙醇稀释液组,分别用1 ml灭菌生理盐水、啤酒及乙醇稀释液灌胃.30 min后给予不同剂量γ射线1次全身照射.照射后24 h颈椎离断法处死动物(处死前4 h按4 μg/g体重腹腔注射秋水仙胺),立即取双侧股骨,进行骨髓细胞常规染色体制片、染色.每一剂量点选取5个个体进行染色体畸变观察.每只动物镜检分析100个细胞分裂相.结果 啤酒组及乙醇稀释液组染色体畸变率在照射剂量达0.5 Gy以上时明显降低(P＜0.05或P＜0.01),其中啤酒组的下降比乙醇稀释液组更明显.结论 啤酒中除乙醇以外的其他成份(如酚类化合物等)也发挥了降低染色体畸变的作用.     

长效重组人超氧化物歧化酶的研制及其辐射防护作用研究

选用无毒、无免疫原性的高分子化合物聚乙二醇（ＰＥＧ）为修饰剂，以活性酯法制备出ＰＥＧ－重组人超氧化物歧化酶（ＰＥＧ－ｒｈＳＯＤ）共价结合物。修饰酶的生物半衰期为１５ｈ，比修饰前延长了９０倍，对酸、硷、热的耐受力明显高于修饰前。用照射小鼠活存率评价了ＰＥＧ－ｒｈＳＯＤ的辐射防护作用。小鼠受８．５Ｇｖｒ射线照射前１ｈ腹腔注射３０万Ｕ／ｋｇＰＥＧ－ｒｈＳＯＤ，可提高活存率４２％，与未修饰的ｒｈＳＯＤ相比，活存率提高１４％。     

人基因工程重组超氧化物歧化酶对小鼠骨髓造血干细胞的辐射防护作用

目的：骨髓造血干细胞（ｈｅｍｏｐｏｉｅｔｉｃｓｔｅｍｃｅｌｌ，ＨＳＣ）损伤所致的造血抑制是急性骨髓型放射病死亡的重要原因之一，本实验旨在观察人基因工程重组超氧化物歧化酶（ｒｈＳＯＤ）对ＨＳＣ有无辐射防护作用以及化学修饰对ｒｈＳＯＤ抗辐射作用的影响。方法：实验用照射小鼠的外源性脾结节（ＣＦＵ－Ｓ）形成法。组间比较用ｔ检验。结果：ｒｈＳＯＤ和ＰＥＧ－ＳＯＤ均能明显提高ＣＦＵ－Ｓ形成数，其中ｒｈＳＯＤ在照射前１小时给药效果好，而ＰＥＧ－ＳＯＤ在照射前２～３小时给药作用更为明显。结论：ｒｈＳＯＤ具有对骨髓造血于细胞的辐射防护作用，化学修饰后ＳＯＤ的血浆半衰期延长而使药物作用持续时间延长。     

重组人铜锌超氧化物歧化酶对辐射损伤小鼠免疫细胞的影响

为评价重组人铜锌超氧化物歧化酶(rhCuZnSOD)的抗辐射应用价值,并探索其最佳给药时间,本研究观察了受r线照射前后不同时段给药对小鼠免疫细胞及有关指标的影响.结果显示:rhCuZnSOD可增强受照小鼠刀豆蛋白A诱导的脾T淋巴细胞的增殖反应,提高受照小鼠自然杀伤细胞的活性,并可升高受照小鼠脾淋巴细胞、血白细胞和相对淋巴细胞计数,延长受照小鼠30天平均生存时间及降低30天平均死亡率.其中以辐射前后联合用药的防御和治疗效果最好.本研究结果表明:rhCuZnSOD作为抗辐射药物具有一定的实用价值.     

一例亚急性放射病患者的生物剂量估算及 细胞遗传学随访观察

目的对一起^192Ir源辐射事故致亚急性放射病患者进行细胞遗传学动态观察，并估算受照剂量。方法对患者照后2d、1．5年和2．5年的外周血样本进行常规染色体畸变（CA）分析和微核（MN）检测，根据双＋环（d＋r）畸变频率，用G函数方法估算累积受照剂量。结果剂量估算结果与用物理方法估算的剂量接近，与临床表现基本相符；照后1．5年和2．5年，双着丝粒体（dic）明显减少，无着丝粒断片（ace）和MN减少不明显。结论用G函数方法估算迁延性受照者的累积受照剂量基本可反映实际辐射损伤程度；亚急性放射病患者CA和MN的衰减速度可能较急性放射病缓慢。     

低氧、紫外线对小鼠微核率的影响

本文采用小鼠淋巴细胞微核测定技术,对不同海拔高度(平原(46m)、中度海拔(2260m)、特高海拔(模拟6000m)、不同紫外线强度(大、小剂量)照射和减压6000m加紫外线照射的NIH系小白鼠进行了微核测定。结果表明:随着低氧程度的加重和紫外线照射强度的增加,都可使小鼠微核率显著增高;而且低氧加紫外线双重因素作用对小鼠微核率的影响具有协同作用。说明强烈的紫外线和低氧可诱发机体染色体畸变,且二者似科有协同致畸作用。揭示我们不能轻视高原紫外线对机体的损伤,应加强综合防护。     

3-环戊醚雌二醇对人染色体放射损伤防护作用的研究

本文以染色体畸变为观察指标,对人口服3-环戊醚雌二醇(CE_2)24h后的抗放作用进行了实验研究。21名正常人服药24h后,照射其离体血的实验说明,该药对血液系统在服药后24h仍有一定的保护作用。对20名放疗病人的观察说明,服药组的双着丝粒(dic)产额(5.2％)明显低于对照组(18.3％)。根据dic产额推算出对照组病人全身血液的平均受照剂量是1.55Gy,而CE_2服药组只有0.75Gy。因此在本实验条件下,CE_2有降低0.8Gy生物效应的防护作用。文中对所得结果作了简要的讨论。     

人基因工程重组超氧化物歧化酶对骨髓造血干细胞的辐射防护作用

用照射小鼠的骨髓造血干细胞(CFU-S)外源性脾结节形成法,评价人基因工程重组SOD(rhSOD),聚乙二醇(PEG)修饰的长半衰期重组SOD(PEG-SOD)对CFU-S的辐射防护作用.结果显示:rhSOD和PEG-SOD均能明显提高CFU-S产率,其中rh SOD在照射前1h给药效果好,而PEG-SOD在照射前2～3h给药作用更为明显,化学修饰后SOD血浆半衰期延长,将使给药时机及药物作用持续时间得到改善.     

重组人p53腺病毒注射液对人淋巴瘤细胞的作用及辐射敏感性的影响

目的 探讨重组人p53腺病毒注射液对人淋巴瘤细胞的抑制作用及其辐射增敏性。方法 利用四氮唑盐(MTT)比色法分析重组人p53腺病毒注射液、放射治疗以及两者联合应用对人淋巴瘤细胞Raji 和Daudi的抑制作用;通过蛋白质的Western印迹分析法(Western blotting)分析淋巴瘤细胞内P53蛋白的表达;应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测淋巴瘤细胞内p53基因的mRNA表达。结果 MTT结果显示重组人p53腺病毒注射液对人淋巴瘤细胞具有一定的抑制作用,但抑制作用不显著,Raji 及Daudi 细胞最大剂量的抑制率分别为27.5%±4.1%和28.1%±1.6%,也未见明显的辐射增敏效应。Western blotting和RT-PCR结果表明,外源性P53蛋白和p53基因的mRNA均有所表达,但未见高效表达和明显的辐射增敏性。结论 重组人p53腺病毒注射液对人淋巴瘤细胞的抑制作用及辐射增敏性不显著。     

黄蘑多糖对小鼠骨髓细胞染色体的辐射防护作用

黄蘑是真菌的一种，主要产于长白山地区。它不仅味道鲜美、营养丰富，还具有疏风活络、强筋健骨之功效。据报道从黄蘑中提取的有效成分黄蘑多糖[polysaccharides of mushroom(Huangmo),PM]对小鼠体内接种的人肿瘤细胞有较强的抑制作用。但迄今为止，对PM辐射防护作用的研究国内外报道尚少。本研究用PM作为辐射防护剂对不同剂量X射线照射的小鼠所诱发的骨髓细胞染色体畸变进行了观察，并就其对辐射损伤体细胞的保护作用进行了初步的探讨。     

重组人肝活素(HPS)的制备及其对四氯化碳诱导肝细胞损伤的保护作用研究

目的 肝活素(hepassocin,HPS)是一种具有促肝细胞生长,保护肝细胞免于损伤的肝特异性生长因子,研究其保护机制将为肝病的防治机制提供重要的实验依据.方法 通过真核表达系统获得重组人HPS,通过EdU掺入实验检测其活性.用四氯化碳(CCl4)建立肝细胞损伤模型,在此基础上用不同浓度HPS进行处理或干涉内源HPS,检测细胞上清中转氨酶、乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽转移酶的变化.结果 制备的HPS纯度达到95％以上,具有良好的促细胞增殖活性.10％CCl4处理可致肝细胞损伤,HPS处理可显著降低转氨酶及LDH水平,增加SOD及谷胱甘肽转移酶的水平;干涉HPS则显著增加转氨酶及LDH水平,降低SOD及谷胱甘肽转移酶的水平.结论HPS可通过增强肝细胞的抗氧化能力减轻肝细胞损伤.     

香兰素衍生物VND3207对小鼠骨髓细胞遗传损伤的防护效应研究

目的 研究香兰素衍生物4-羟基-3,5-二甲氧基苯甲醛(VND3207)对γ射线整体照射小鼠骨髓细胞遗传损伤的防护作用。方法 BALB/c小鼠按10、50和100 mg/kg不同剂量灌胃给药,1次/d,连续5 d,最后一次给药后2 h, 2 Gy ⁶⁰Co γ射线照射,照射后48 h观察小鼠骨髓嗜多染红细胞微核、染色体畸变和骨髓有丝分裂指数的改变。结果 不同剂量(10、50和100mg/kg)的VND3207均能有效地降低小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率(t=2.40～4.26,P<0.05)和染色体畸变率(t=2.36～3.52,P<0.05),同时提高骨髓有丝分裂指数。药物保护效果与给药剂量呈依赖关系,其中100 mg/kg剂量组的微核率和染色体畸变率与单纯照射组相比,分别降低了65%和50%。结论 VND3207对⁶⁰Co γ射线诱发的小鼠骨髓辐射损伤有良好的保护作用。     

安氟醚麻醉前后对细胞染色体影响的研究

本文观察了安氟醚麻醉前后对人淋巴细胞姐妹染色单体互换(SCE)、染色体畸变(CA)、微核(MN)的影响,与普鲁卡因静脉麻醉对照,结果表明,麻醉前和麻醉后SCE、CA、MN改变无意义,P>0.05,表明安氟醚对人类染色体无损伤作用。     

重组人血管内皮抑素对食管癌细胞的放射增敏作用及其机制

目的 观察重组人血管内皮抑素(rhES)对食管鳞癌KYSE-150细胞的放射敏感性的影响及其机制的初步探讨。方法 将食管鳞癌KYSE-150细胞分为空白对照组、rhES组、X射线照射组和rhES联合X射线照射组。细胞克隆形成法测定细胞存活分数;单击多靶模型拟合细胞存活曲线并计算放射增敏比(SER);流式细胞术检测rhES联合X射线照射对细胞周期及凋亡的影响;反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测Cyclin B₁、Cyclin D₁、Bcl-2、Bax mRNA表达水平,Western blot检测HIF-1α、VEGF、VEGFR蛋白的表达水平。结果 KYSE-150细胞的D₀、D_q、SF₂值随着rhES浓度的增加逐渐减小,当达到D₀照射剂量时,100和200 μg/ml rhES的放射增敏比分别为1.14、1.27;rhES联合X射线照射组与X射线照射组比较,细胞凋亡率增加、凋亡相关基因bax的表达增加、细胞VEGF蛋白及HIF-1α蛋白的表达水平降低(t=7.97、3.02、117.55、7.22,P<0.05)。结论 rhES对体外食管癌细胞具有明显的辐射增敏作用,其机制与其抑制细胞HIF-1α、VEGF蛋白表达以及对细胞凋亡相关基因bax的表达调控、诱导细胞凋亡密切相关。