Study of Androgen and Androgen Receptor in Relation to Insulin Resistance in Polycystic Ovary Syndrome

Polycystic ovary syndrome (PCOS) is the mostcommon endocrinopathies of premonopausal womenwith the incidence rate being5 % to2 1 % [1,2 ] .Thedisorder is characterized by anovulation,hyperandro-genism,hyperinsulinism and obesity.Many studiessuggested that insulin resistance play an importantrole in the pathogenesisof PCOS,butthere wasveryfew investigations about androgen and androgen re-ceptor in relation to insulin resistance.The purposeof this study was to investigate the role of serum an…     

非甾体类雄激素受体拮抗剂的研究进展

研究发现,雄激素受体与前列腺癌的发生存在密切关系。雄激素拮抗疗法成为临床治疗早期前列腺癌的有效手段,近20年来已有多个药物上市（如氟他胺、羟基氟他胺和比卡鲁胺等）,但这些经典的药物在治疗中易产生抗雄激素撤除综合症等问题,因此其应用受到限制。目前,新近研发的非甾体类雄激素受体拮抗剂（如RD162、MDV3100和BMS-641988）活性更强,正进行临床试验,并有望解决过去雄激素受体拮抗剂存在的问题。查阅国内外相关文献,对已上市药物、当前临床研究的药物以及近年发现的小分子雄激素受体抑制剂的研究进展进行综述。     

S578N mutation of the androgen receptor in an adolescent with complete androgen insensitivity syndrome

Androgen insensitivity syndrome （AIS） was first .described by the American gynecologist Morris in 1953 and was mitially described＇in 82 patients, The syndrome was designated testicular feminization syndrome , because the testes produce hormones with estrogen-like actions. Clinical AIS manifestations include the appearance of normal female external genitalia without internal female genital organs.     

慢性再生障碍性贫血患者雄激素及其受体的改变

目的观察慢性再障(CAA)患者血浆雄激素水平和骨髓单个核细胞中雄激素受体的表达,研究雄激素及其受体与CAA病情及治疗反应之间的关系。方法采用放射免疫法测定CAA初发组、CAA治疗组和对照组外周血血浆中的睾酮水平,免疫细胞化学SP法检测三组骨髓单个核细胞(BMMNC)胞浆和胞核内雄激素受体(AR)的阳性表达水平。结果①治疗组外周血血浆睾酮水平显著高于初发组。②CAA初发组BMMNC胞浆和胞核内AR的水平显著低于治疗组和对照组,治疗组AR阳性水平也显著低于对照组。③CAA初发组患者的血浆睾酮含量与其骨髓中的AR水平明显正相关(P<0.05)。④CAA患者骨髓中的AR阳性水平与其外周血中的网织红细胞(RC)百分数正相关(P<0.01),与骨髓非造血细胞百分数负相关(P<0.01)。结论CAA患者发病时BMMNC中AR在胞核和/或胞浆中的表达较正常人减少,因此雄激素刺激骨髓造血的作用减弱。检测CAA发病时AR的表达量可能在CAA的病情监测方面有一定意义。     

内源性雄激素及雄激素受体水平与老年男性冠心病的相关性

目的 探讨内源性雄激素及雄激素受体(AR)水平与老年男性冠心病的相关性.方法 选择冠状动脉造影证实的老年男性冠心病患者237例,对照组59例.所有患者均检测血清中7种内源性性激素水平,包括游离睾酮(FT)、总睾酮(TT)、雌二醇(E2)、黄体生成素(LH)、卵泡雌激素(FSH)、性激素结合球蛋白(SHBG)及脱氢表雄酮(DHEA),并用流式细胞术检测外周血淋巴细胞AR水平.结果 冠心病组FT水平低于对照组[(24.1±22.2)×10-9mmol/L比(34.1±31.8)× 10-9mmol/L,P=0.06],其余激素水平差异均无统计学意义(均P＞0.05).两组AR阳性率也差异无统计学意义(56.3%±24.0%比57.1%±20.8%,P＞0.05).Logistic回归分析显示FT降低冠心病发病风险(OR=0.98,95%CI0.973～0.997,P=0.0049).FT与AR阳性率之间呈正相关,而年龄与FT和AR阳性率呈负相关.结论 内源性雄激素水平减低在老年男性人群的冠心病发病中有独立作用.FT和AR水平下降,可能与老年男性冠状动脉粥样硬化加速进展有关.

Abstract：

Objective To investigate the correlation of endogenous androgen and androgen receptor (AR) level with coronary artery diseases (CAD) in elderly males and elucidate the potential mechanism of gender difference in the prevalence of CAD. Methods A total of 296 male patients from different centers were divided into the CAD group ( n = 237 ) and the control group ( n = 59 ) according to the results of coronary angiography. Their mean ages were 68.6 ± 6. 8 and 66. 2 ± 6. 5 years old respectively. The serum levels of FT (free testosterone), TT (total testosterone), E2 (estradiol), LH (luteinizing hormone), FSH ( follicle-stimulating hormone ), SHBG ( sex hormone-binding globulin ) and DHEA (dehydroepiandrosterone) were measured in all participants. And the androgen receptors of peripheral lymphocytes were assessed by flow cytometry. Results The serum level of FT was lower in the CAD group than that in the control group[(24. 1 ±22. 2) × 10-9 mmol/L vs( 34. 1 ±31.8) × 10-9 mmol/l, P =0. 06]. But two groups showed no statistic differences in the levels of TT, E2 , LH, FSH, SHBG, DHEA and lymphocyte AR (56. 3% ± 24. 00 vs 57.1% ± 20. 8% ). As demonstrated by the logistic regression analysis, the level of FT was negatively correlated with the CAD risk ( OR = 0. 98, P = 0. 0049 ) and positively correlated with the peripheral lymphocyte AR level. However age was negatively correlated with the levels of FT and AR. Conclusion The deficiency of endogenous androgen contributes to a high prevalence of CAD in elderly males. The age-related decreases of FT and AR impair the physiological functions of androgen so as to accelerate the progression of coronary atherosclerosis.     

雄激素受体反义RNA对前列腺癌细胞雄激素受体表达的抑制作用研究

目的 观测雄激素受体（AR）反义RNA逆转录病毒表达载体在前列腺癌细胞中的表达及其对AR表达的影响。方法 将AR反义RNA逆转录病毒表达载体导入前列腺癌细胞株LNCaP，PCR检测AR目的片段在重组LNCaP细胞基因组中的存在，RT－PCR检测AR反义RNA表达和AR mRNA水平，Western blot检测AR蛋白表达水平。结果 PCR在LNCaP^as-AR基因组DNA中扩增出了AR目的片段，表明AR目的片段整合到了细胞基因组。RT－PCR证实LNCaP^as-AR有AR反义RNA表达，且其AR mRNA水平较LNCaP和空载体转染的LNCaP^Neo显著下调（P＜0.05)，Western blot证实LNCaP^as-AR细胞AR蛋白含量显著下降（P＜0.05)。结论 AR反义RNA可抑制前列腺癌细胞AR表达。     

雄激素对大鼠前列腺组织中AQP9水通道蛋白表达的影响

[目的]探讨AQP9水通道蛋白在大鼠前列腺组织中的表达以及雄激素对前列腺AQP9表达的影响。[方法]使用20只8周龄去势大鼠模型,应用定量PCR以及免疫组织化学染色方法检测AQP 9 mRNA和蛋白在大鼠前列腺组织中的表达以及雄激素对大鼠前列腺AQP9表达的影响。[结果]正常大鼠前列腺组织中AQP9 mRNA和蛋白均有所表达（AQP9/β-actin 2.259±0.453）,去势可减少大鼠前列腺中AQP9的表达（0.422±0.048）,睾酮注射可恢复AQP9在前列腺组织中的表达（2.098±0.507）。[结论]大鼠前列腺组织中AQP9的表达受雄激素的调控。     

大鼠屏状核神经元中雄激素与雌激素受体的表达

目的:研究雄激素受体(androgenreceptor,AR)与雌激素受体(estrogenreceptor,ER)在大鼠屏状核神经元中的表达及生物学意义。方法:取80只性成熟期Wistar大鼠,雌雄各半。随机分为A、B、C、D、E、F、G、H、I、J组。用免疫组织化学染色方法检测AR、ER在屏状核神经元中的表达,四格表确切概率法行χ2检验分析。结果:AR在大鼠屏状核神经元中的阳性表达率,在D组(去势雄性雄激素干预)与F组(去势雄性)、H组(正常雄性雄激素干预)与J组(正常雄性)、F组与J组、G组(正常雌性雄激素干预)与I组(正常雌性)、F组与E组(去势雌性)之间差异有统计学意义(P<0.05);余各组间差异无统计学意义(P>0.05)。ER在大鼠屏状核神经元中的阳性表达率,在E组与I组、E组与A组(去势雌性雌激素干预)、G组与I组之间差异有统计学意义(P<0.05);余各组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:(1)鼠脑屏状核神经元中AR、ER均有表达;(2)大鼠屏状核为雌、雄激素的靶组织之一,雌、雄激素可能通过其受体作用于屏状核神经元而发挥其生物学效应;(3)雌、雄激素对ER、AR表达的影响在雌、雄两性可能有不同之处;(4)屏状核可能在对性冲动的唤醒及性行为中起着重要的内分泌作用。     

晚期前列腺癌的间歇雄激素阻断治疗

目的：了解间歇雄激素阻断（IAD）方法对晚期前列腺癌的治疗作用。方法：回顾性分析21例晚期前列腺癌病人，应用药物诺雷德去势加氟他胺（甲组）或康士得IAD方法（乙组）治疗的结果。结果：21例患者经IAD治疗后，绝大多数取得了较好的疗效。甲组3年生存率为72．7％，乙组为80．0％，总3年生存率为76．2％。治疗间歇中减少了抗激素药物的应用，从而明显减少了潮红、体重增加及忧郁等内分泌治疗的副作用。结论：IAD治疗能推迟雄激素依赖性前列腺癌细胞向非依赖性细胞的转化，同时减少药物用量和毒副作用，明显改善患者的生活质量并降低治疗费用。     

前列腺癌相关雄激素受体突变体的促细胞增殖效应

目的评价前列腺癌相关雄激素受体突变体(mtAR)对细胞生长的促进作用。方法利用三种腺病毒表达载体:野生型雄激素受体(Ad-wtAR);一个被广泛研究的前列腺癌(CaP)相关的mtAR(Ad-mtAR,T877A);以及作为对照的腺病毒载体,我们评价并比较了野生型AR及mtAR的促细胞生长效应。结果相对于被野生型或者对照的腺病毒转染的LNCaP、PC3细胞,转染mtAR的LNCaP、PC3细胞无论有无合成的雄激素(R1881)存在的情况下均显示出更强的细胞增殖作用。并且,用腺病毒载体转染T877A的LNCaP和PC3细胞显示了对R1881更强的反应性。结论这些发现提出了崭新的关于mtAR在CaP细胞中作用的细胞生物学方面的见解,并且表明mtAR(T877A)可能为前列腺癌病程的进展提供了选择性的细胞生长的便利。     

Metabolism of adrenal androgen and its impacts on prostate cancer after castration

With the extensive utilization of PSA, digital rectum examination and transrectal ultrasound for screening in the aging population, the diagnosis of prostate cancer in China has markedly increased during the past years, particularly in developed regions. It was reported that the prevalence of prostate cancer in Shanghai city from 1973 to 1975 was 1.6/100 000 persons and rose to 7.7/100 000 persons by 2000.     

雄激素对再生障碍性贫血患者端粒长度影响的研究#br#

［摘要］ 目的探讨雄激素对再生障碍性贫血（aplastic anemia，AA）患者端粒长度的影响以及端粒在AA发病机制中的作用。 方法依据临床诊断标准收集AA患者30例，分为环孢素A（cyclosporin A，CsA）+雄激素组和CsA组各15例。应用核酸提取仪及核酸提取试剂盒提取外周血基因组DNA；采用实时荧光定量PCR检测外周血白细胞端粒相对长度，并与15例健康对照组进行比较。 结果AA患者基线端粒长度相对T/S比率低于对照组（P＜0.05）。治疗后,CsA组端粒长度相对T/S比率波动降低，CsA+雄激素组端粒长度相对T/S比率逐渐升高，CsA+雄激素组端粒长度相对T/S比率高于CsA组，其组间、时点间、组间·时点间交互作用差异均有统计学意义（P＜0.05）。治疗后12个月时CsA+雄激素组血液学改善率高于CsA组（P＜0.05）。 结论雄激素可以调节AA患者端粒长度，雄激素治疗后AA患者端粒长度增加。雄激素在治疗AA伴端粒功能障碍方面是有效的，可以获得有临床意义的血液学改善。     

核转出蛋白对前列腺癌雄激素受体稳定性的调节

目的：探讨位于雄激素受体(androgen receptor, AR)配体结合域中具有出核转运信号肽的核转出蛋白(nuclear export signal of androgen receptor, NESAR)对前列腺癌雄激素受体蛋白表达和稳定性调节的机制。方法：绿色荧光蛋白(green fluorescent protein, GFP)融合蛋白表达载体pEGFP-AR(1-918aa),pEGFP-NESAR(743-817aa),pEGFP-NAR (1-665aa)和pEGFP-NAR-NESAR,及NESAR的赖氨酸突变体（赖氨酸K突变为精氨酸R）pEGFP-NESAR K776R,pEGFP-NESAR K807R和pEGFP-NESAR K776R/K807R,瞬时转染前列腺癌细胞PC3后,采用荧光显微镜、蛋白质免疫印迹和免疫沉淀,检测NESAR对雄激素受体稳定性的调节。结果：在荧光显微镜下,含NESAR的融合蛋白呈胞浆定位,荧光信号强度比不含NESAR的融合蛋白明显减弱,且含NESAR的融合蛋白表达水平显著低于不含NESAR的融合蛋白表达水平。在蛋白合成抑制剂放线菌酮处理下,GFP-NESAR和GFP-NAR-NESAR的半衰期小于6 h,而对照GFP和GFP-NAR的表达相对更稳定,半衰期大于24 h。融合蛋白GFP-NESAR在蛋白酶体抑制剂MG132的处理下,其蛋白表达显著增加,并呈现剂量依赖性,而MG132对GFP蛋白稳定性没有显著影响;在蛋白合成被抑制的情况下,MG132同样显著抑制了GFP-NESAR融合蛋白的降解,且蛋白表达呈剂量依赖性的增加。GFP免疫沉淀的结果显示,GFP-NESAR融合蛋白的泛素化水平明显高于GFP对照。赖氨酸位点K776和K807突变的NESAR的泛素化水平显著降低,且蛋白稳定性提高,赖氨酸位点K776和K807是介导NESAR发生泛素化的关键氨基酸残基。结论：核转出蛋白NESAR具有降解不稳定性,作为多聚泛素化修饰的识别信号,介导了其融合蛋白在前列腺癌细胞中通过泛素-蛋白酶体途径的降解。本研究为AR蛋白水平和/或活性的调控开辟一种新的研究思路,有助于对AR降解分子机制的了解和在前列腺癌产生去势抗性的过程中对AR靶向的密切调控。     

雄激素对脑损伤后星形胶质细胞反应的影响

目的：研究雄激素对脑穿刺损伤后星形胶质细胞（Ａｓｔ）反应性胶质化的影响。方法：通过免疫组化、免疫荧光染色及流式细胞仪计数等方法,观察切除睾丸及补充睾丸酮后脑穿刺损伤鼠伤灶周围ＧＦＡＰ－ＩＲ阳性细胞的形态、数量与比例变化。结果：切除睾丸鼠脑损伤后,伤灶周围反应性胶质比较单纯损伤鼠明显,表现为胞体肥大,突起增粗、延长,ＧＦＡＰ免疫组化染色显著增强。睾丸酮治疗后,Ａｓｔ反应程度虽有减弱,但未能恢复到正常     

输精管结扎鼠睾丸ABP和核雄激素受体的动态变化研究

雄性Wistar大鼠 60只,分为输精管结扎后 3月组(V—3),8月组(V—8),15月组(V—15)及其相应对照组(C—3,C—8,C—15)各10只。血清睾酮(ST),睾丸组织睾酮(TT),睾丸雌激素结合蛋白(ABP)和细胞核雄激素受体(NAR)水平检测结果是:①V—15组TT显著高于C—15组(P<0.01),其余组间比较及ST各组间比较均无显著差异(P>0.05);②ABP的平衡解离常数(Kd值),V—3组高于C—3组(P<0.05),但各组都在1.38～5.26nmol范围内,ABP水平结扎组高于相应对照组(P<0.05);③NAR的平衡解离常数各组间无明显差异(P>0.05),NAR水平对应组间无显著差异,但3个结扎组间比较V—8组最低(P<0.05)。     

雄激素受体功能表位表达载体的构建

目的:构建雄激素受体(AR)功能表位表达载体,为深入研究AR与LRP16体外相互作用机制奠定基础。方法:用真核表达质粒pCMV-AR为模板进行常规PCR扩增,产物纯化后将连入pGEM-T载体,挑取阳性克隆扩增培养后测序并进行酶切鉴定;回收酶切后AR目的片断最终与BamHⅠ/XhoⅠ双酶切的pcDNA3.1( )载体相连接。结果:测序结果表明四个AR功能表位表达载体插入片段与GenBank中报道的序列完全一致。结论:在克隆AR基因的基础上,成功构建了一组雄激素受体AR功能表位表达载体,可以用于AR与LRP16在体外转录翻译方面的研究。     

间歇性雄激素阻断治疗晚期前列腺癌

目的:观察间歇性雄激素阻断治疗晚期前列腺癌患者的周期特点、疗效及副反应.方法:45例晚期前列腺癌行间歇性联合雄激素阻断治疗(LHRH类似物 非甾体类抗雄激素药物),持续用药至少4个月,至血前列腺特异抗原(PSA)降至最低值则停药进入间歇期,当PSA上升至初诊时的50%或大于10 ng/ml,则重新开始治疗.当发展为雄激素抵抗性前列腺癌或临床进展则停止治疗.结果:71.1%(32/45)患者完成第一个治疗周期,最多的已达4周期,间歇期占治疗周期的54%.随着重复治疗次数的增加每个周期发生疾病进展的比例也随之增加(P=0.006)且间歇期缩短(P＞0.05).患者三年进展率为53.1%,中位疾病进展时间为28.5个月,无骨转移患者和有骨转移患者三年进展率分别为23.61%和60.4%.间歇期副反应比治疗期明显减少.结论:间歇性雄激素阻断治疗晚期前列腺癌,间歇期长,疗效较好,副反应少,具有可行性,是一种较好的治疗方法.     

雄激素受体调控基因组表达与去势抵抗性前列腺癌关系探索

目的探索雄激素受体调控基因与前列腺癌发生去势抵抗的关系。方法选取80例经病理检查和临床资料证实并采用内分泌治疗的前列腺癌患者,随访获取发生去势抵抗时间,定量即时聚合酶链锁反应(qRT-PCR)检测确诊时穿刺标本的六个雄激素受体调控基因KLK3(PSA),PMEPA1,NKX3.1,ODC1,AMD1和ERG表达并分析两者之间的关系。结果将六个雄激素受体调控基因相对表达量进行Z分数标准化处理,将所有病例按去势抵抗时间由短向长排列,分析六个基因Z分数及累积强度(CI),发现六个基因的表达情况与患者去势抵抗时间无明显相关性。结论初诊前列腺癌时患者雄激素受体功能与前列腺癌去势抵抗性无直接关系。     

新的潜在的雄激素受体协同抑制因子CMTM1-v17

目的:研究CMTM1-v17(CKLF-like MARVEL transmembrane domain containing family 1-variant 17)在正常前列腺及前列腺癌来源细胞系中的表达,初步探索CMTM1-v17对雄激素受体(androgen receptor,AR)转录活性的影响及其作用机制.方法:用免疫组织化学和免疫细胞化学染色的方法分析CMTM1-v17在正常人前列腺组织和前列腺癌来源细胞系中的表达.用荧光素酶报告系统研究CMTM1-v17对AR转录活性的影响及作用机制.结果:CMTM-v17在正常前列腺和前列腺癌来源的LNCaP,Du145和PC3细胞均有表达.荧光素酶报告系统的结果提示在二氢睾酮(5α-dihydrotestosterone,DHT)存在的情况下,将空载体对照组的荧光强度设为100,超表达1 μg CMTM1-v17后的相对荧光强度仅为70.8,而超表达2 μg CMTM1-v17后的相对荧光强度下降到34.7.当细胞用DHT刺激、同时用组蛋白去乙酰转移酶(histone deacetylase,HDAC)的抑制剂曲古菌素A(trichostatin A, TSA)后,则超表达1 μg CMTM1-v17后的相对荧光强度和超表达2 μg CMTM1-v17后的相对荧光强度分别从70.8和34.7上升至90.9和86.4.结论:CMTM1-v17在正常前列腺中和前列腺癌来源的细胞系中都有较高丰度的表达,它可能是潜在的AR协同抑制因子,并通过募集HDAC发挥其抑制功能.