深低温保存导致胎儿角膜细胞凋亡的初步研究

目的:研究新鲜和深低温保存后的胎儿角膜的细胞凋亡情况。方法:应用TUNEL法对20例新鲜及深低温保存后胎儿角膜进行了细胞凋亡的研究。结果:凋亡的角膜细胞全为细胞核着色。新鲜角膜中平均每高倍视野可见凋亡细胞0.817±0.612个,经冷冻保存后的角膜每高倍视野可见凋亡细胞平均为7.483±2.490个,经统计学处理P<0.05,差异有显著性。结论:新鲜胎儿角膜可见极少量凋亡细胞。胎儿角膜经深低温冷冻保存后,凋亡细胞数量显著增加。降温-复温损伤可能与细胞凋亡有关。     

Fas/FasL系统及其在角膜病中的研究进展

Fas分子及其配体FasL作为细胞凋亡相关基因产物 ,以其基本功能在多种生理病理过程中发挥重要作用。现已发现它们在包括眼部在内的多处免疫赦免部位都有基础性表达。在角膜 ,Fas系统的基础性表达是维持角膜免疫赦免状态的重要机制之一 ,它们与其他调节因子相互协调与制约 ,共同影响甚至决定着某些角膜疾病的发生及其转归。充分掌握Fas系统的功能与特性 ,将有助于我们揭示某些疾病的发生机制并制定临床防治方案。     

层粘连蛋白对体外角膜上皮细胞凋亡的保护

目的 观察层粘连蛋白（ＬＮ）对离体角膜上皮细胞存亡的影响,以寻找预防角膜上皮细胞凋亡的途径。方法 应用流式细胞仪（ＦＡＣＳｔａｒ＾ｐｈｉｓ）检测凋亡细胞的亚２倍体ＤＮＡ的方法,对基础培养的与ＬＮ共育的以及阻断ＬＮ受体的后的兔角膜上皮细胞的凋亡情况进行了对比观察及分析。结果 基础培养的第６代角膜上皮细胞出现明显的细胞凋亡;与ＬＮ共育的角膜上皮细胞凋亡不明显;阻断ＬＮ受体后,角膜上皮细胞显著的凋亡现象     

深低温保存角膜穿透性移植术后角膜神经再生的研究

深低温保存角膜穿透性移植术后角膜神经再生的研究鲍连云王传富杨湘娟深低温保存角膜穿透性移植术后角膜神经再生的研究@鲍连云@王传富@杨湘娟...     

深低温保存角膜内皮细胞的酶组织化学观察

对深低温(-196℃)保存40和140天的兔角膜及26天到611天的人角膜内皮细臌的酶活性做了测定。发现琥珀酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶和乳酸脱氢酶活性较强,酸性磷酸酶活性中等,ATP酶和5′-核苷酸酶活性较低,均与对照组相似。未测到碱性磷酸酶、磷酸化酶和葡萄糖-6-磷酸酶。     

深低温保存角膜穿透性移植治疗重症感染性角膜病的观察

目的 探讨深低温保存角膜穿透性角膜移植治疗重症感染性角膜病的疗效。方法 对3例(3只眼)重症感染性角膜病患者采用深低温保存的角膜进行穿透性角膜移植术。结果 3例术后植片透明，无排斥反应发生，亦无感染复发等。结论 对于重症感染性角膜病患者，急诊应用深低温保存角膜行穿透性角膜移植术，是保存眼球的较好治疗方法。     

简易法深低温保存角膜的实验和临床评价

自1986年3月以来,用自制的“QL生物降温仪”对简易法深低温保存角膜进行了系统研究,应用光镜、电镜、酶组织化学、动物实验和临床穿透性角膜移植及非接触式角膜内皮显微镜检测结果证明,深低温保存角膜组织结构完整、功能良好、临床移植效果满意。     

维生素A缺乏兔干眼病模型角膜上皮细胞凋亡及相关蛋白表达的关系

目的 探讨维生素A缺乏兔干眼病模型角膜上皮细胞凋亡与相关蛋白表达的关系.方法 制作维生素A缺乏兔干眼病模型,采用原位末端标记及免疫组织化学法,对兔模型组及对照组各12只24眼角膜上皮细胞中的凋亡细胞及Fas、FasL、Bax和bcl-2等相关蛋白的表达进行检测.结果 兔干眼病模型组每高倍视野角膜上皮细胞凋亡数为4.69±1.06,对照组为0.25±0.13,差异有统计学意义(P＜0.01).模型组角膜上皮细胞中,每1 000个细胞阳性蛋白表达的细胞数分别为Fas 207.67±56.17、FasL 228.33 4±61.09、Bax 175.03±43.23,均明显高于对照组Fas 64.45±37.23、FasL68.35±35.88、Bax47.77±29.32(P＜0.01),与凋亡细胞数呈正相关(r:0.87,0.94,0.90);bcl-2阳性表达的细胞数为56.19±36.67,明显低于对照组190.83±52.07(P＜0.01),与凋亡细胞数呈负相关(r=-0.81).结论 维生素A缺乏兔角膜组织上皮细胞Fas、FasL及Bax增加及bcl-2的减少均可促进细胞凋亡.     

Fas／FasL系统及其在葡萄膜炎中的意义

Fas是一种具有重要功能的跨膜糖蛋白,为肿瘤坏死因子受体超家族的成员之一,其自然配体为FasL(Fas Ligand)。Fas与FasL或Fas单克隆抗体结合可诱导Fas^ 细胞的凋亡。Fas系统诱导的细胞凋亡可消除自身反应性淋巴细胞,诱导活化T、B细胞凋亡,参与免疫赦免形成,从而维持机体生理平衡和自身免疫耐受。Fas/FasL系统的异常在自身免疫性葡萄膜炎发生中可能起着一定的作用,自身免疫性淋巴细胞对Fas/FasL系统诱导的凋亡有较大抵抗性,这可能是葡萄膜炎慢性化和复发的重要机制之一。     

Fas系统在视网膜母细胞瘤的表达

目的 观察视网膜母细胞瘤（ＲＢ）中Ｆａｓ和Ｆａｓ配体（ＦａｓＬ）的表达特征。方法 应用免疫组化法检测３２例ＲＢ标本中Ｆａｓ和ＦａｓＬ的表达。结果 Ｆａｓ和ＦａｓＬ在ＲＢ中的阳性表达率分别为７０．６％和６５．８％,二者呈正相关（Ｐ〈０．００１）。分化程度低的和经过放疗的表达率明显增高（Ｐ〈０．０５或０．０１）。其表达率与视神经受浸润与否、眼内期或青光眼期无关（Ｐ〉０．０５）。结论 ＲＢ中Ｆａｓ及ＦａｓＬ高表达,分化程度越低表达越强。Ｆａｓ和ＦａｓＬ的表达可作为临床判断ＲＢ恶性程度的指标之一。     

Fas和FasL在鼻息肉组织中的表达

目的探讨Fas和FasL在鼻息肉组织中的表达情况以及这二种凋亡相关蛋白在鼻息肉发病中的关系.方法应用S-P免疫组化法检测35例鼻息肉组织及15例下鼻甲组织中Fas和FasL的表达情况.结果(1)Fas在鼻息肉上皮及腺上皮的表达弱于对照组(P＜0.05),在嗜酸性粒细胞中表达广泛.(2)FasL在鼻息肉上皮及腺上皮的表达强于对照组(P＜O.05),未见FasL在嗜酸性粒细胞中表达.(3)鼻息肉上皮细胞中Fas和FasL蛋白的表达无相关性(P＞0.05).结论(1)Fas和FasL在鼻息肉发生发展中起一定的作用.(2)Fas、FasL在鼻息肉上皮细胞的凋亡过程中各自独立起作用.     

压力对大鼠纯化视网膜神经节细胞中Fas/FasL mRNA表达的影响

目的：通过检测不同压力及时间纯化培养的大鼠视网膜神经节细胞（retinal gangal ,Cells,RGCs)中Fas/FasL mRNA的表达，探讨Fas/FasL在RGCs凋亡中的作用，方法：用SD系大鼠脑源性星型胶质细胞同化培养液双界面法培养羊抗鼠Thy1.1单克隆抗体纯化的SD系大鼠RGCs，分别在0mmHg(对照组）和20，40，60and 80mmHg(1kPa=7.5mmHg)的压力下培养24h及48h后,用免疫组化和原位杂交对RGCs中Fas/FasL及其mRNA的变化进行定性及半定量观察，TUNEL法检测各组织细胞的凋亡，结果：纯化的RGCs培养24h用羊抗鼠FITC－Thy-1.1单克隆抗体进行鉴定阳性，纯度为97％，免疫组化和原位杂交检测Fas/FasL及其mRNA，结果培养24h对照组无表达，20mmHg组有较弱的表达信号，40，60及80mmHg组表达逐渐增强，与对照组比较差异均有显著性（P＜0．05），培养48h对照组弱表达，压力≥20mmHg各组较相同压力培养24h各组表达增强，差异有显著性（P＜0．05），TUNEL法检测细胞凋亡，培养24h对照组未见细胞凋亡。20mmHg见少量细胞凋亡，随着压力的增高细胞凋亡数增多，凋亡指数增高，与对照组相比均有显著性差异，培养48h组压力≥20mmHg各组较相同压力培养24h组凋亡指数增高，差异有显著性（P＜0．05），结论：压力可激活视网膜神经节细胞Fas/FasL mRNA表达，Fas/FasL系统活化参与了青光眼高眼压下视网膜神经节细胞的凋亡。     

Fas/FasL抗原在Behcet病患者外周血T淋巴细胞的表达

目的研究Fas/FasL抗原在Behcet病患者外周血T淋巴细胞的表达及其可能的意义。方法采用流式细胞仪(flowcytometry)及三色荧光双标记细胞免疫荧光技术对26例Behcet病患者和43例正常人外周血T淋巴细胞表面Fas和FasL抗原的表达进行检测。结果Behcet病CD4+T细胞Fas表达阳性率为25.70%±7.32%,对照组为14.02%±6.30%,二者有显著性差异(P＜0.01);但CD4+T细胞的FasL表达在2组间无显著性差异。CD8+T细胞Fas表达阳性率为9.47%±6.97%,对照组为3.47%±2.75%,二者有显著性差异(P＜0.01),但FasL表达阳性率二者无显著性差异。结论Behcet病患者外周血CD4+和CD8+T细胞Fas的表达阳性率高于正常对照组,FasL的表达阳性率相对不足,提示这些活化的Fas+T淋巴细胞不能有效地通过Fas/FasL系统介导的凋亡途径被清除,此可能是Behcet病患者体内大量活化的淋巴细胞长期存在和炎症持续存在及复发的重要原因之一。     

Fas和FasL在鼻息肉组织中的表达及意义

目的通过检测Fas和FasL在鼻息肉中的表达,研究细胞凋亡和Fas/FasL系统在鼻息肉发病机制中的作用.方法用免疫组化方法检测Fas和FasL在35例鼻息肉和17例正常下鼻甲组织中的表达.对Fas和FasL阳性细胞的类型、分布特点进行分析.结果1.Fas和FasL在鼻息肉组织中的表达均较正常下鼻甲组织明显增强,差异有显著性.2.Fas在上皮细胞和间质细胞中都有阳性表达,主要表达于息肉表面的上皮细胞和间质内的炎性细胞中.结论1.Fas/FasL系统介导的凋亡在鼻息肉的发病机制中有重要作用,可能是鼻息肉长期保持良性增生的重要因素.2.FasL在鼻息肉上皮细胞中的高表达与上皮细胞的过度增生及Fas/FasL系统的免疫监视作用有关.     

Fas／FasL抗原在葡萄膜炎患者外周血T淋巴细胞上的表达

目的评价和探讨Fas/FasL抗原在葡萄膜炎患者外周血T淋巴细胞上的表达及其可能存在的意义.方法采用流式细胞术(flow cytometry,FCM)及三色荧光双标记细胞免疫荧光染色技术对26例Behcet病、17例Vogt-小柳原田综合征患者、25例特发性前葡萄膜炎患者及43例正常人外周血CD4+T细胞和CD8+T细胞表面Fas和FasL的表达进行检测.结果Behcet病、Vogt-小柳原田综合征和特发性前葡萄膜炎患者CD4+T细胞Fas的表达阳性率分别为(25.70±7.32)%、(19.60±11.02)%、(20.81±7.40)%,均显著高于正常对照组[(14.02±6.30)%],而FasL的表达阳性率与正常对照组比较,差异无显著性意义.Behcet病和Vogt-小柳原田综合征患者CD8+T细胞Fas的表达阳性率分别为(9.47±6.97)%,(6.84±5.53)%,均显著高于正常对照组[(3.47±2.75)%];特发性前葡萄膜炎患者CD8+T细胞Fas的表达阳性率[(5.34±3.08)%]与正常对照组[(3.47±2.75)%]比较,差异无显著性意义.Behcet病和Vogt-小柳原田综合征患者CD8+T细胞FasL的表达阳性率分别为(3.66±2.16)%、(4.05±1.38)%,与正常对照组[(3.09±2.04)%]比较,差异无显著性意义;特发性前葡萄膜炎患者CD8+T细胞FasL的表达阳性率[(1.58±0.93)%]低于正常对照组[(3.09±2.04)%].结论葡萄膜炎患者CD4+T细胞和CD8+T细胞Fas的表达阳性率高于正常对照组,而FasL的表达阳性率相对不足,提示这些活化的Fas+T淋巴细胞不能通过Fas/FasL系统介导的凋亡途径被清除,此可能是葡萄膜炎患者体内大量活化的淋巴细胞长期存在和炎症持续存在及复发的重要原因.