左旋咪唑对日本血吸虫虫卵肉芽肿的影响

用30μg日本血吸虫卵可溶性抗原(SEA)皮下致敏的小鼠,按von Lichtenberg法在尾静脉注入虫卵后不同时期中所形成的虫卵肉芽肿比未致敬小鼠的平均增大40％,且肉芽肿峰值的出现提前。第64天后,上述两组小鼠的虫卵肉芽肿均自然趋小。以每次5mg/kg体重,1日3次,每周连用2天剂量的左旋咪唑给予致敏和未致敏小鼠,在第1～96天内,均可使虫卵肉芽肿受到明显抑制,尤以致敏组为甚;并使致敏组虫卵肉芽肿内的嗜酸粒细胞绝对数减少。     

对日本血吸虫虫卵肉芽肿形成的人工诱发特异性免疫调节

用不同剂量的日本血吸虫虫卵可溶性抗原(SEA)免疫正常小鼠,诱发其对虫卵的特异耐受性,结果显示小鼠经低剂量抗原连续皮下注射后可诱发出一定程度的低量免疫耐受性,使嗣后注入的日本血吸虫卵所引起的虫卵肉芽肿反应减弱,为利用SEA诱发宿主对虫卵肉芽肿应答的免疫耐受性研究提供了新线索。     

单克隆抗体NP28—5B对日本血吸虫卵肉芽肿形成的调节作用

本研究首先应用针对中国大陆株日本血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)中140kD靶抗原的单克隆抗体NP28-5B(lgG_1),经体内被动转移试验表明对虫卵致敏/虫卵攻击的小鼠肺肉芽肿模型中日本血吸虫虫卵肉芽肿形成具显著的抑制或调节作用(抑制率为53％,P<0.002),进一步提供证据表明抗体参与虫卵肉芽肿形成的调节网络,也将为日本血吸虫病抗病免疫和抗病疫苗研究提供重要的分子基础。作者对上述作用机理作了有限探讨。     

经脾注射日本血吸虫虫卵诱发C57BL／6鼠肝脏细胞反应的初步探讨

为探讨日本血吸虫虫卵肉芽肿形成机理和病理作用，本实验改进Ｂｏｔｒｏｓ方法，设虫卵可溶性抗原（ＳＥＡ）致敏组和未致敏组，选用Ｃ５７ＢＬ／６鼠经脾注射虫卵诱发小鼠日本血吸虫肝肉芽肿，并对虫卵诱发的细胞反应进行了观察。结果显示：（１）经脾注射虫卵诱发小鼠肝肉芽肿方法简单、安全、有效；所建模型，特别是致敏组模型在肉芽肿形成机理研究中较有价值。（２）ＳＥＡ致敏可加强日本血吸虫肝肉芽肿形成．（３）抗体或抗原－抗体复合物作用参与日本血吸虫肝肉芽肿形成。（４）虫卵及虫卵肉芽肿均对肝细胞具有一定损伤作用。     

对纯化的日本血吸虫糖蛋白虫卵抗原用于免疫诊断人体血吸虫感染的评价

本文作者曾报道应用Con-A Sepharose 4B吸附分离日本血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)的糖蛋白部份具有生物学活性,并用反复凝胶过滤层析进一步纯化糖蛋白2(gp-2)。发现将该抗原注入感染日本血吸虫鼠的足底,可使致敏鼠在虫卵周围形成肺肉芽肿     

经脾注射日本血吸虫虫卵诱发C57BL／6鼠肝脏细胞反应的初…

为探讨日本血吸虫虫卵肉芽肿形成机理和病理作用，本实验改进Ｂｏｔｒｏｓ方法，设虫卵可溶性抗原（ＳＥＡ）致敏组和未致敏组，选用Ｃ５７ＢＬ／６鼠经脾注射虫诱发小鼠日本血吸虫肝肉芽肿，并对虫卵诱发的细胞反应进行了观察。结果显示：（１）经脾注射虫卵诱发小鼠肝肉芽肿方法简单，安全，有效，所建模型，特别是致敏组模型在肉芽肿形成机理研究中较有价值。（２）ＳＥＡ致敏可加强日本血吸虫肝肉芽肿形成。（２）抗体或抗原抗体     

免疫耐受对日本血吸虫虫卵肉芽肿形成的影响

目的探讨免疫耐受对小鼠肝脏虫卵肉芽肿形成的影响.方法分别用10、100、和1000μg的日本血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)腹腔注射1周龄小鼠,诱导其对虫卵抗原产生免疫耐受性.在感染日本血吸虫尾蚴后42、56、70和84d分批剖杀小鼠,取出肝脏作病理切片测量肉芽肿的大小.结果100～1 000μg SEA可诱导小鼠产生一定程度的免疫耐受性,使虫卵肉芽肿反应减轻.但是随着时间的延长,这种耐受性逐渐减弱或消失.结论SEA诱导的免疫耐受性可以减轻血吸虫感染早期的肝脏肉芽肿反应,但对慢性期的作用较弱.     

吡喹酮对血吸虫卵肉芽肿与肝纤维化作用的研究I吡喹酮对小鼠肺部血吸虫卵肉芽肿的影响

 目的探讨吡喹酮对小鼠肺部血吸虫卵肉芽肿的影响。方法48只小鼠均分4组，A组：虫卵致敏组，先于小鼠腹壁皮下注入新鲜日本血吸虫卵，10 d后由尾静脉注入虫卵；B组：毗喹酮短期应用组，致敏方法同A组，于尾静脉注入虫卵前ld起灌服吡喹酮300 mg/(kg．d)，连续3 d;C组：吡喹酮持续应用组，致敏方法同A组，于尾静脉注入虫卵前ld起灌服吡喹酮75 mg/kg，1日2次，连续5d，停药2d，反复用药至剖检；D组：第29天起应用吡喹酮组，服法同C组。各组均在尾静脉注射虫卵后7、14、28、56 d分别剖杀3只，取肺组织切片、染色，在每组小鼠肺连续切片内选含毛蚴的肉芽肿25～30个，测其面积计算平均值。结果在第7、14天和第28天时，C组的虫卵肉芽肿面积较小，与A组叱较，差异有统计学意义；B组的虫卵肉芽肿面积比A组略小，但差异无统计学意义；至第56天时，B、C组与D组的虫卵肉芽肿面积均较小，与A组比较，差异均有统计学意义。结论吡喹酮能够抑制血吸虫卵肉芽肿。         

吡喹酮对血吸虫卵肉芽肿与肝纤维化作用的研究Ⅰ吡喹酮对小鼠肺部血吸虫卵肉芽肿的影响

目的探讨吡喹酮对小鼠肺部血吸虫卵肉芽肿的影响。方法48只小鼠均分4组,A组：虫卵致敏组,先于小鼠腹壁皮下注入新鲜日本血吸虫卵,10d后由尾静脉注入虫卵;B组：吡喹酮短期应用组,致敏方法同A组,于尾静脉注入虫卵前1d起灌服吡喹酮300mg/（kg.d）,连续3d;C组：吡喹酮持续应用组,致敏方法同A组,于尾静脉注入虫卵前1d起灌服吡喹酮75mg/kg,1日2次,连续5d,停药2d,反复用药至剖检;D组：第29天起应用吡喹酮组,服法同C组。各组均在尾静脉注射虫卵后7、14、28、56d分别剖杀3只,取肺组织切片、染色,在每组小鼠肺连续切片内选含毛蚴的肉芽肿25～30个,测其面积计算平均值。结果在第7、14天和第28天时,C组的虫卵肉芽肿面积较小,与A组比较,差异有统计学意义;B组的虫卵肉芽肿面积比A组略小,但差异无统计学意义;至第56天时,B、C组与D组的虫卵肉芽肿面积均较小,与A组比较,差异均有统计学意义。结论吡喹酮能够抑制血吸虫卵肉芽肿。     

免疫耐受对日本血吸虫虫卵肉芽肿形成的影响

目的 探讨免疫耐受对小鼠肝脏虫卵肉芽肿形成的影响。方法 分别用10、100、和1000μg的日本血吸虫可溶性虫卵抗原（SEA）腹腔注射1周龄小鼠,诱导其对虫卵抗原产生免疫耐受性。在感染日本血吸虫尾蚴后42、56、70和84d分批剖杀小鼠,取出肝脏作病理切片测量肉芽肿的大小。结果 100－1000μg SEA可诱导小鼠产生一定程度的免疫耐受性,使虫卵肉芽肿反应减轻。但是随着时间的延长,这种耐受性逐渐减弱或消失。结论 SEA诱导的免疫耐受性可以减轻血吸虫感染早期的肝脏肉芽肿反应,但对慢性期的作用较弱。     

吡喹酮治疗对血吸虫感染小鼠免疫病理变化的影响

目的 :阐明吡喹酮治疗对血吸虫感染宿主免疫病理的影响。方法 :应用免疫组织化学和图像分析技术 ,观察日本血吸虫感染小鼠在吡喹酮治疗后肝组织内可溶性虫卵抗原 ( SEA)及抗体水平和虫卵肉芽肿的变化。结果 :治疗后 5wk,与对照组相比 ,治疗组减虫率为 98.3% ,平均肝重量和体积均显著减小 ,治愈小鼠的肝表面结节明显减少 ,组织内沉积的虫卵已钙化 ,部分虫卵肉芽肿已呈纤维疤痕样改变 ,对照组肝内仍可见慢性和少量急性虫卵肉芽肿。治疗组肝组织内抗原水平下降 ,而其抗体水平不受影响 ,肝内虫卵肉芽肿的平均直径和面积均较对照组显著缩小 ( P<0 .0 1)。结论 :吡喹酮治疗可使肝组织内 SEA水平下降 ,从而抑制了虫卵肉芽肿的病变 ,但不能逆转已形成的虫卵肉芽肿病变。     

感染日本血吸虫动物组织内不同时期免疫物质的定位研究

家兔和小鼠在感染日本血吸虫后4周起,在肝、肠组织内即存有虫卵抗原;感染后8～16周抗原水平达高峰;16周后抗原水平渐趋下降。家兔和小鼠在感染后6周起,均于肝组织内测出了IgG抗体;感染后8～16周抗体达高峰;20周后抗体水平下降,肝组织内虫卵肉芽肿病变也减弱。组织内虫卵抗原和抗体的动态变化与组织内虫卵肉芽肿病变程度密切相关,表明血吸虫卵抗原是肝组织虫卵肉芽肿病变的致病因子。肝组织内抗体水平的消长,也与感染动物组织内血吸虫虫卵肉芽肿病变相关。     

日本血吸虫卵源性抗原诱导的抗肉芽肿病变保护性免疫调节机制的研究

日本血吸虫卵源性组分抗原ＳｊＲ４７可诱导小鼠产生明显的抗虫卵肉芽肿病变保护性免疫力。本文对免疫小鼠脾Ｔ淋巴细胞亚群表型动态和抗体免疫应答进行了研究,结果显示ＳｊＲ４７免疫小鼠的ＣＤ４＋和ＣＤ８＋Ｔ细胞水平,在感染后早期（４ｗｋ）升高,随后下降,至感染后８ｗｋ时,ＣＤ４＋和ＣＤ８＋Ｔ细胞比值＜１．００,呈免疫抑制现象。ＳｊＲ４７免疫小鼠感染后０～１２ｗｋ时血清抗ＳｊＲ４７抗体（ＩｇＧ）水平显著高于抗ＳＥＡ抗体水平,也显著高于同时期的佐剂和感染对照组小鼠抗ＳｊＲ４７抗体水平（Ｐ＜０．０１）,进一步测定小鼠血清特异性抗体ＩｇＧ及其亚类表明,ＳｊＲ４７免疫小鼠的ＩｇＧ１水平升高非常显著。实验结果表明,ＳｊＲ４７免疫小鼠后诱导的抗虫卵肉芽肿病变保护性免疫力与细胞免疫及体液免疫均密切相关,其中ＩｇＧ１抗体可能起着重要作用。     

小鼠日本血吸虫肝虫卵肉芽肿模型的建立

本文报告应用腹腔注射SEA致敏C57BL/6小鼠,继之经脾脏攻击注射虫卵的方法,建立了小鼠日本血吸虫肝虫卵肉芽肿模型,并与自然感染模型作比较.结果证明,SEA致敏组小鼠肝虫卵肉芽肿发生率为100%.其肉芽肿的形态、细胞组成、转化发展过程及单虫卵肉芽肿的直径和面积均与自然感染模型相似.本实验表明经脾脏注射虫卵及SEA致敏建立小鼠日本血吸虫肝虫卵肉芽肿模型是一种良好的肉芽肿实验动物模型.     

益肾蠲痹丸及雷公藤对日本血吸虫虫卵肉芽肿的影响

对感染15条日本血吸虫尾蚴的雌性小鼠.分别于感染后25d及45d起喂服益肾蠲痹丸和雷公藤.结果表明益肾蠲痹丸对虫卵肉芽肿发展具明显抑制作用,肉芽肿平均直径和肉芽肿内嗜酸粒细胞均明显减少.雷公藤对急性期虫卵肉芽肿可有促进发展作用,而对慢性期虫卵肉芽肿则有抑制作用.     

Characterization of murine Th1 clones specific to egg antigen of Schistosoma japonicum and their interaction with cytokines

T cell clones (B1, B21, B7, A25) specific to the soluble egg antigen (SEA) of Schistosoma japonicum were established from C3H/He mice immunized with SEA. These clones belonged to CD3+, CD4+ and CD8-Th1 cells, showing TCR-gamma delta-, TCR-alpha beta+ and Vbeta10b+. The molecular weights of target antigens recognized by the clones ranged from 51 to 80 kDa. Interleukin-2 (IL-2) and IL-12 could vigorously increase the proliferation response of the T clones to SEA; while IL-10 and transforming growth factor-beta1 (TGF-beta1) strongly inhibited the response. IL-12 activity was detected in the culture supernatant of T clones stimulated with SEA in the presence of APC (antigen presenting cells). This stimulation also upregulated the expression of the IL-12 receptor on the T clones. IL-12 from APC served as a costimulatory factor for the SEA induced proliferation of the T clone cells. Clone B1 was able to induce granuloma formation both in vivo and in vitro. These data provide further insight into the complicated interaction among SEA, T cell and cytokine at a clonal level in S. japonicum infection.     

日本血吸虫感染家兔红细胞上非游离性循环抗原的分离及动态水平研究

采用特定方法成功地从５０和１００条尾蚴感染的家兔红细胞上分离出非游离性循环抗原（ＮＦ－ＣＡｇ），并应用抗ＳＥＡ和ＡＷＡ的多克隆及单克隆抗体进行ＥＬＩＳＡ，对ＮＦ－ＣＡｇ水平的动态进行了观察。结果表明，ＮＦ－ＣＡｇ的水平在感染后８～１０ｗｋ间达高峰，１０ｗｋ后下降到较低水平。提示检测ＮＦ－ＣＡｇ的优势是在感染早期（１０ｗｋ内）。结果还显示，ＮＦ－ＣＡｇ水平与感染程度密切相关。在检测ＮＦ－ＣＡｇ时，特异性的多克隆抗体具有与单克隆抗体相似的检测效果。本文为探索血吸虫循环抗原的新途径和新内容及其归宿问题，提供了重要依据。     

日本血吸虫(中国大陆株)26kDa基因重组蛋白(rSjc26GST)对虫卵肉芽肿形成的影响

用日本血吸虫虫卵肉芽肿的小鼠肺模型进行研究。ＩＣＲ雄性小鼠３２只,分成免疫组和佐剂对照组各１６只,免疫组小鼠经ｒＳｊｃ２６ＧＳＴ免疫。免疫结束后第５天两组小鼠均由尾静脉注射新鲜日本血吸虫虫卵悬液０．２ｍｌ（内含活卵１５００－２０００个）,于注卵后第８天、１６天和２１天分批剖杀小鼠,观察肺部形成的虫卵肉芽肿病变。结果发现免疫鼠肺内肉芽肿大小受到明显抑制,免疫后第８天、１６天、２１天肺肉芽肿平均直径分别为１００．００±１２．６μｍ,１０６．４３±１１．４μｍ,１０５．７０±１１．８μｍ,对照鼠在相应时间分别为１４１．９０±２３．４μｍ,１７６．６７±３４．９μｍ,１９９．５３±２１．７μｍ,抑制率从８天的２９．５％、１６天的３９．８％到２１天的４７．０％逐渐增加,并且免疫组肺相对湿重也较佐剂对照组有所减少,证实ｒＳｊｃ２６ＧＳＴ具有明确的抗肉芽肿病变效应。     

抗日本血吸虫SEA鸡卵黄抗体的制备与鉴定

目的 制备特异性抗日本血吸虫可溶性虫卵抗原（SEA）的鸡卵黄免疫球蛋白（IgY）并检测其特异性、敏感性。 方法 用日本血吸虫SEA经翅膀下静脉和皮下免疫25周龄海兰母鸡4次（首次剂量为60 μg/只，加强剂量为30 μg/只），每次间隔10 d。取免疫前和首次免疫后35 d的鸡蛋卵黄，分别用水稀释法提取IgY，BCA法测定蛋白含量，并进行十二烷基磺酸钠?鄄聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）和蛋白质印迹（Western blotting）分析，ELISA检测纯化后IgY特异性和敏感性。分别提取免疫后不同时间的卵黄抗体，观察抗体效价的变化。 结果 海兰母鸡经SEA首次免疫后35 d，每枚蛋经提纯后可得到约61 mg抗体，经SDS-PAGE和Western blotting分析，纯化的IgY有1条主要蛋白带，相对分子质量（Mr）为130 000，并可被SEA识别。母鸡初次免疫后第10天，经SDS-PAGE和ELISA分析，鸡蛋卵黄内即有抗体产生，初次免疫后31 d效价可达1∶1 600。双抗体夹心ELISA结果显示纯化后的IgY有较高的敏感性，可检测到的SEA达2.4 ng/ml。 结论 制备的抗SEA鸡卵黄抗体的特异性和敏感性均较高。