HDAC2的表达水平评分与胆道闭锁肝纤维化进展及预后的关系

目的探究组蛋白脱乙酰酶(histone deacetylase, HDAC)2在胆道闭锁(biliary atresia, BA)患儿肝组织中表达水平、诊断价值及其与BA肝纤维化进展和预后的关系。方法回顾性分析2019年1月至2021年12月因黄疸在天津市儿童医院普外科行手术治疗的患儿44例, 包括BA患儿34例(BA组)和其他胆汁淤积性肝脏疾病10例(DC组)。使用生物信息学分析HDAC中HDAC1～HDAC11在BA中的表达情况。取BA组和DC组患儿肝组织样本, 通过免疫组织化学染色和实时荧光定量PCR检测HDAC2在两组患儿肝组织中表达水平, 对HDAC2的表达进行评分。使用受试者操作特征(receiver operating characteristic, ROC)曲线评估HDAC2评分对BA的诊断价值。分析BA患儿HDAC2表达与一般临床资料的关系。所有BA患儿在Kasai术后均进行了随访, 记录术后6个月时的黄疸清除率(jaundice clearance rate, JCR)和自体肝生存率(survival with native liver rate, SNL)。采用C...     

CCL25/CCR9在胆道闭锁肝纤维化中的表达及临床意义北大核心CSCD

目的探讨CC趋化因子受体9(CC chemokine receptor 9,CCR9)及其趋化因子配体25(CC chemokine ligand 25,CCL25)在胆道闭锁(biliary atresia,BA)患儿肝纤维化中的表达并评价其临床价值。方法回顾性分析2019年10月至2022年8月在天津市儿童医院普外科进行肝脏手术治疗的35例患儿临床资料,将诊断为胆总管囊肿(choledochal cyst,CC)的8例患儿作为对照组,其余27例BA患儿为BA组。所有患儿手术均留取肝组织样本,同时收集患儿血清样本,采用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清CCL25水平,并绘制受试者操作特征(receiver operator characteristic,ROC)曲线,结合临床生化指标进一步分析血清CCL25对BA患儿的辅助诊断价值。采用免疫组织化学染色和实时荧光定量聚合酶链反应(real time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测肝组织中CCR9的表达水平,并采用Spearman相关分析法分析其与BA患儿肝组织纤维化分级的相关性;分析CCR9对BA患儿肝脏纤维化程度的评估价值。计数资料组间比较用χ^(2)检验或Fisher精确检验;不符合正态分布的计量资料组间比较采用Mann-Whitney U检验和Wilcoxon检验。结果ELISA结果显示,BA组血清CCL25水平310.03(262.03,338.87)pg/ml明显高于CC组244.46(222.70,260.45)pg/ml,差异有统计学意义(P=0.004)。ROC曲线显示,血清CCL25水平诊断BA患儿的曲线下面积为0.829(95%CI:0.683~0.975),临界值为267.12 pg/ml。血清CCL25水平、GGT、TBA联合诊断BA的曲线下面积为0.958。免疫组织化学和qRT-PCR结果显示,BA患儿肝组织中CCR9蛋白表达量[40.29(29.40,65.12)比15.26(8.04,20.15),P<0.001]、CCR9 mRNA表达量[3.88(1.38,7.95)比0.83(0.07,0.95),P=0.0005]均明显高于CC组。与Ⅰ~Ⅱ级肝纤维化比较,Ⅲ~Ⅳ级肝纤维化的CCR9蛋白表达量[51.08(39.36,73.27)比25.93(19.23,38.00),P=0.0022]、CCR9 mRNA表达量[6.63(2.75,9.45)比1.21(1.04,3.57),P=0.0075]明显提高。BA组患儿的CCR9蛋白表达量、mRNA表达量与肝纤维化分级均呈正相关(rs=0.820、rs=0.804,P<0.001)。结论血清CCL25在辅助诊断BA患儿方面具有潜在的临床价值;CCR9在肝组织中的表达与BA患儿肝纤维化程度密切相关,且随着肝纤维化程度加重而增加。     

Kasai手术前特异性超声征象评估胆道闭锁肝纤维化的价值北大核心CSCD

目的探讨胆道闭锁(biliary atresia,BA)特异性超声征象与肝纤维化评分的相关性,为Kasai手术前多模态超声评估肝纤维化程度提供依据。方法回顾性分析2020年2月至2022年9月在南京医科大学附属儿童医院经手术确诊为BA并行Kasai手术67例患儿的临床资料,其中男26例,女41例。术前1周内均行BA相关的超声检查,检查年龄为(50.57±18.53)d,范围在17~95 d。术后对肝脏病理标本进行Metavir纤维化评分。Pearson分析和Spearman分析法分析超声检查年龄、肝门部三角索带征(triangular cord sign,TC)厚度、胆囊最大截面积(maximum area of the gallbladder,MAG)、肝脏硬度值(liver stiffness measurement,LSM)、肝纤维化评分间的相关性。绘制受试者操作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线评估TC厚度、MAG、LSM诊断BA肝纤维化程度的效能。结果所有患儿都存在一定程度的肝纤维化,4例(6.0%,4/67)1分,38例(56.7%,38/67)2分,18例(26.9%,18/67)3分,7例(10.4%,7/67)4分。超声检查年龄、TC厚度和LSM在不同纤维化评分患儿间有差异,并且和肝纤维化评分呈正相关。LSM和TC厚度诊断肝纤维化程度的ROC曲线下面积分别为0.783和0.731。相关性分析显示,超声检查年龄、LSM、TC厚度三者之间存在正相关性。结论BA术前超声检查年龄、LSM、TC厚度及肝纤维化评分间均存在不同程度的正相关性。术前特异性超声征象可以对BA肝纤维化程度进行评估,为判断病情提供参考。     

胆道闭锁肝脏CX3CR1^(+)T淋巴细胞的比例与肝纤维化及预后的相关性研究北大核心CSCD

Objective: To explore the frequencies of CX3CR1 expressing T lymphocytes (CX3CR1+ T cell) in different liver diseases in children and to examine the relationship between proportion of CX3CR1-expressing T cells in liver and liver function parameters, fibrosis score and prognosis of children with biliary atresia (BA). Methods: From January 2019 to June 2020, liver biopsies were harvested from BA children undergoing Kasai Procedure. And liver biopsies from children with choledochal cyst (CC), portal hypertension (PH) and neonatal cholestasis were set as controls. Liver fibrosis (LF) scores were performed on 24 liver specimens of BA children. The infiltrating T lymphocyte subpopulations in liver were analyzed by flow cytometry. The expression differences were examined for T lymphocyte subsets in liver of children with different diseases. Spearman's test was utilized for examining the correlation between the proportion of CX3CR1+ CD8+ T lymphocytes in liver of BA children, liver function parameters and LF score. During a follow-up period of 2 years, the proportion of T lymphocytes expressing CX3CR1 in liver was compared between children with good and poor prognosis. Results: The proportion of CD69- CX3CR1+ CD8+ T lymphocytes in liver of BA group was (7.91±8.81)%. It was lower than that of CC children (21.53±13.85)% and PH children (13.82±7.75)% and the difference was statistically significant (P<0.001, P=0.016). The proportion of CD69- CX3CR1+ CD4+ T lymphocytes in liver of BA group was (3.96±5.39)%. It was lower than that of CC children (8.76±9.16)% and PH children (7.68±5.98)% and the difference was statistically significant (P=0.020, P=0.003). The proportion of CX3CR1+ CD8+ T lymphocytes in liver of BA children were correlated negatively with the levels of gamma-glutamyl transpeptidase (GGT) and direct bilirubin (P=0.002, P=0.048). LF score was correlated negatively with the proportions of CX3CR1+ CD8+ T and CX3CR1+ Ki67+ CD8+ T lymphocytes in liver (P=0.025, P=0.030). The proportion of CX3CR1+ T lymphocytes in liver of children with good prognosis was higher than that of counterparts with poor prognosis (P<0.05). Conclusions: Proportion of CX3CR1+ CD4+ T and CX3CR1+ CD8+ T cells in liver may be an important prognostic predicator of BA children through maintaining immune homeostasis of liver and inhibiting LF. © 2023 Authors. All rights reserved.     

MMP-7、APRI与胆道闭锁肝纤维化的相关性分析北大核心CSCD

目的探讨胆道闭锁(biliary atresia,BA)患儿的术前实验室检查结果与肝纤维化程度的相关性,拟建立更好的评估肝纤维化的无创预测模型。方法回顾性分析2021年4月至2023年4月在浙江大学医学院附属儿童医院新生儿外科就诊的100例BA患儿的临床资料。采用Mann-Whitney U检验或Kruskal-Wallis H检验比较不同Ohkuma's肝纤维化分级和不同胆管增生分级患儿间各术前实验室指标的差异。根据多元logistic回归分析方法建立整合模型,各实验室指标同时绘制受试者操作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线,比较其对肝纤维化程度的预测效能。结果BA患儿Kasai手术年龄、血清基质金属蛋白酶-7(matrix metalloproteinase-7,MMP-7)、丙氨酸转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、天冬氨酸转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、直接胆红素(direct bilirubin,DBil)、间接胆红素(indirect bilirubin,IBil)、前白蛋白(prealbumin,PAB)、天冬氨酸转氨酶/血小板比值指数(aspartate aminotransferase to platelet ratio index,APRI)在不同肝纤维化分级及不同胆管增生分级患儿间差异有统计学意义(均P<0.05)。肝纤维化分级越高,胆管增生分级普遍越高(P<0.001)。整合模型的ROC曲线下面积为0.876(95%CI:0.806,0.945),敏感性为68.3%,特异性为93.2%,准确性为83.0%,阳性预测值为87.5%,阴性预测值为80.9%,高于各实验室指标的单独预测效能。结论Kasai手术年龄、MMP-7、APRI与BA患儿肝纤维化分级、胆管增生分级相关。多实验室指标的创新整合模型对于无创预测BA肝纤维化程度具有良好的诊断效能和准确度。     

胆道闭锁肝纤维化研究现状及未来发展趋势北大核心CSCD

胆道闭锁(biliary atresia,BA)是引起新生儿胆汁淤积的常见病因,Kasai手术可重建胆汁流出通道、缓解胆汁淤积引起的肝脏损伤;但部分患儿术后肝纤维化仍在进行性加重,最终需肝移植挽救生命[1]。BA肝纤维化相较于其他新生儿胆汁淤积性肝硬化,发病机制更为独特与复杂,病情进展快,临床上尚无有效治疗手段[2]。本文将从发病机制、严重程度评估、治疗等方面对BA肝纤维化研究现状进行述评,并探讨未来发展方向。     

胆道闭锁肝纤维化病变中平滑肌肌动蛋白表达的研究

目的 本研究通过检测平滑肌肌动蛋白(α-SMA)在胆道闭锁(BA)肝组织和肝外胆系的表达,探讨肝纤维化过程与临床预后的关系.方法 采用免疫组化染色方法对2005年7月至2006年5月本院21例BA肝组织、肝门纤维块进行CD68和α-SMA染色;对照组为5例胆汁淤积和10例胆总管囊肿.选用LEICA-DM研究级生物显微镜,QWIN软件环境下测量抗体阳性细胞面积百分比和平均光密度,随访19例BA术后3个月直接胆红素下降比率.同时对21例BA肝组织纤维化分级,并与α-SMA表达量进行相关分析.结果 α-SMA在BA肝纤维块高度表达于胆管上皮、胆管周围的胶原纤维;α-SMA阳性表达量和表达强度明显高于对照组,其表达量与表达强度呈线性正相关(r=0.549,P=0.022);CD68在BA肝组织表达较对照组明显增强,但肝门纤维块鲜有表达.α-SMA表达量与肝脏纤维化分级呈正相关(P=0.02);α-SMA阳性表达面积百分比与术后3个月直接胆红素下降率呈负相关(r=-0.653,P=0.029),但肝组织CD68表达与α-SMA阳性表达相关性不明显(r=0.444,P=0.057).结论 α-SMA的表达可能是肝脏纤维化的早期标志,SMA的阳性表达量与术后3个月胆红素消退呈显著负相关,预示BA肝内外胆管系统纤维化,乃至肝硬化,提示可能临床预后不佳.     

热休克蛋白47的表达与胆道闭锁肝纤维化及预后的相关性研究

目的 研究热休克蛋白47的表达与胆道闭锁患儿肝脏纤维化程度及预后的相关性.方法 选择30例胆道闭锁、10例胆汁淤积症和10例胆总管囊肿患儿入组,分别取肝脏组织以及外周血,通过RT-PCR、Western-blot、ELISA以及病理切片来评估不同水平HSP47的表达情况及其与肝脏纤维化相关性.结果 三组HSP47在mRNA水平(0.915±0.730比0.066±0.037比0.314±0.150,P＜0.05)、蛋白水平(3.061 81±0.504 763比1.358 018±0.373 174比1.23649±0.350 173,P＜0.05)以及血清水平(63.38±17.11比57.87±14.83比45.78±11.23,P＜0.05)的表达胆道闭锁组均比胆汁淤积组以及胆总管囊肿组高,差异有统计学意义,且不同水平表达具有一致性(mRNA比蛋白水平:r=0.836,P＜0.05;蛋白水平比血清水平:r=0.989,P＜0.01;mRNA比血清水平:r=0.883,P＜0.05).胆道闭锁血清HSP47的表达与肝脏组织光镜下纤维化程度呈正相关关系(r=0.669,P＜0.01).结论 肝脏组织HSP47的表达与血清HSP47的表达水平具有一致性,能够评估肝脏纤维化程度;血清HSP47的高表达可能作为胆道闭锁预后不良的一个监测指标.     

胆道闭锁基质金属蛋白酶-1和转化生长因子β1与肝纤维化关系的研究

目的研究胆道闭锁肝组织MMP-1、TIMP-11和TGF-β_1的表达与肝纤维化的关系,探讨胆道闭锁肝纤维化机制。方法利用免疫组化法(S-P法)检测33例胆道闭锁肝组织中MMP-1、TIMP-1、TGF-β_1蛋白的表达,通过图像分析技术进行定量研究。结果胆道闭锁肝组织中MMP-1、TIMP-1、TGF-β_1蛋白均有不同程度表达,以肝细胞胞浆、胞膜表达最为明显。TGF-β_1、TIMP-1蛋白在肝组织中的阳性表达随肝纤维化程度的加重而增强,有正的相关性;MMP-1蛋白在肝组织中的表达,随肝纤维化程度的加重无明显变化,无相关性;TGF-β_1蛋白表达与TIMP-1间有相关性,与MMP-1间无相关性。TGF-β_1、TIMP-1在胆道闭锁肝组织的表达强度明显高于对照组(P<0.01),MMP-1在两组间的表达差异无显著性意义(P>0.05)。结论MMP-1、TIMP-1、TGF-β_1与胆道闭锁肝纤维化的发生、发展有密切联系,TGF-β_1与TIMP-1有协同表达和调控作用,通过抑制肝组织TIMP-1、TGF-β_1蛋白表达,或促进MMP-1的表达,可成为抑制胆道闭锁肝纤维化的有效方法。     

Hedgehog通路在胆道闭锁肝纤维化中的研究进展

胆道闭锁(biliary atresia,BA)是一种罕见且严重的新生儿胆汁淤积症,其特征为进行性的毛细胆管纤维梗阻性疾病。近期研究发现,Hedgehog信号通路不仅在胚胎的形态形成、生长控制、肝胆发育中起着关键作用,还参与BA肌成纤维细胞的积累和肝纤维化的发生过程。本文通过检索文献,对Hedgehog信号通路的组成以...     

胆道闭锁形态学研究及诊治进展北大核心CSCD

胆道闭锁是以炎症、纤维化及肝外胆道闭塞为特征的一种进行性的炎性胆道疾病.作为新生儿期的特发病,胆道闭锁的诊治有其特殊性,肝脏及肝内外胆道的组织形态学研究作为提高临床诊治水平的突破口,一直以来都是小儿外科领域的研究热点和难点.现从形态学角度加深对这一疾病的认识,并了解近年来国内外同道在胆道闭锁诊治方面的研究进展.     

胆道闭锁诊疗流程（草案）北大核心CSCD

一、概述胆道闭锁（biliary atresia,BA）是新生儿及婴儿期最常见的严重肝脏疾病之一,以肝内、外胆管进行性炎症和纤维化为特征,导致胆汁淤积及进行性肝纤维化和肝硬化。临床上根据胆管闭塞范围分为三个基本类型：①I型,胆总管闭锁,约占5％～10％,肝管未闭锁;②Ⅱ型,肝管闭锁。     

Hedgehog信号通路在胆道闭锁肝纤维化中的表达及机制研究

目的:探讨Hedgehog信号通路和上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)在胆道闭锁(biliary atresia, BA)肝纤维化进展中的作用,为BA肝纤维化发生机制提供实验依据。方法:选取2019年1月至2020年1月天津市儿童医院普外科12例BA患儿肝组...     

腹腔镜Kasai手术治疗胆道闭锁合并肝右动脉变异北大核心CSCD

目的探讨腹腔镜Kasai手术治疗小儿胆道闭锁合并肝右动脉变异的治疗效果。方法收集2014年1月至2021年8月在淮安妇幼保健院行腹腔镜Kasai手术的8例胆道闭锁合并肝右动脉变异的Ⅲ型胆道闭锁患儿的临床资料,其中男5例,女3例;入院时平均年龄78.1 d;平均体重5.9 kg。手术采用四孔法,在变异肝右动脉和门静脉右支之间游离胆总管,牵拉至肝门。游离并切除肝门纤维块,完成腹腔镜Kasai手术。随访并观察患儿治疗效果。结果所有患儿均经腹腔镜手术,无特殊手术并发症。平均手术时间为235 min,平均出血量为12.8 ml,术后平均随访时间为32.1个月。6例患儿术后4个月内总胆红素降至正常。另外2例患儿胆红素术后显著下降,但由于并发胆管炎再次升高,持续观察中并使用抗生素、熊去氧胆酸和激素治疗。结论对于胆道闭锁合并肝右动脉变异患儿,腹腔镜Kasai手术可安全实施,应注意在变异肝右动脉和右门静脉支之间充分游离胆总管。     

胆道闭锁肝纤维化与自体肝生存关系的研究进展

胆道闭锁是婴儿期最严重的肝胆系统疾病之一。肝门-空肠吻合术(Kasai手术)是治疗胆道闭锁的主要手段,但术后自体肝长期生存效果不佳,大部分患儿需要通过肝移植来挽救生命。肝纤维化是影响胆道闭锁患儿自体肝生存的重要因素之一,其发生机制复杂,涉及多种信号通路及细胞因子的调控。Kasai手术后胆汁引流不畅、胆管炎发作都会导致肝纤维化进展,进而发生肝硬化。在完善早期诊断、早期手术、通畅引流胆汁及控制胆管炎的同时,还应积极应对患儿肝纤维化的持续进展,以期达到自体肝的长期生存。     

胆道闭锁患儿肝组织细胞因子及相关基因表达的研究

目的 研究胆道闭锁(BA)患儿肝脏组织中上皮-间充质转化过程中特异性细胞因子的表达及胚胎期发育相关基因的表达激活.旨在探讨BA肝脏纤维化等系列改变的分子机制.方法 取经手术证实为BA患儿的8例肝活检组织(年龄2～3个月),以无消化道疾病尸检婴儿8例肝脏组织做正常对照(年龄0～2个月),RT-PCR半定量法检测胆管上皮细胞特异性因子CK19,纤维化早期指标Ⅰ型胶原蛋白COL1A1,发育相关基因Notch基因受体HES1,TGF-β及其阳性信号分子Smad3的表达水平变化.结果 BA患儿肝脏组织中CK-19,COL1A1、HES1、TGF-β及Smad3等基因表达水平均明显提高,实验组及对照组差异显著.结论 BA患儿肝脏组织胶原组织增生,同时有胆管上皮细胞增生,胚胎期肝脏组织发育相关基因Notch信号通路系统重新激活,TGF-β及其阳性信号分子Smad3在这一过程中发挥作用.     

胆道闭锁病理特征与诊断价值的研究进展北大核心CSCD

胆道闭锁是发生在新生儿的进行性广泛累及肝内外胆管的炎症梗阻性胆道疾病,发病率在1／5000～1／18000。早期手术可以获得相对良好的预后,而其它黄疸性疾病则多需要系统内科治疗。目前,肝活检病理学诊断被认为是胆道闭锁术前诊断的一种可靠标准。有部分学者认为病理检查也是判断预后的重要因素。现就胆道闭锁病理特征与诊断价值的研究进行综述。     

胆道闭锁Kasai术后肝脏纤维化及生化指标变化趋势的横断面研究

目的 研究胆道闭锁患儿Kasai术后肝脏纤维化及生化指标的变化趋势.方法 采用横断面研究方法,对2013年1月至2013年12月于首都医科大学附属北京儿童医院普外科随访的胆道闭锁Kasai术后患儿进行复查资料收集,术后随访时间6个月以上,资料完整的121例纳入研究.按照Kasai术后胆红素降至正常的时间,以术后3个月、6个月为界分为优、良、差三组,获取患儿术时年龄、术前和术后Fibroscan肝脏硬度测量值及生化结果,绘制趋势图并进行统计学分析研究各组患儿Kasai术后肝脏纤维化及生化指标的变化趋势.结果 纳入本研究胆道闭锁患儿共121例,男69例(57.0％),女52例(43.0％);其中优组63例(52.1％),良组34例(28.1％),差组24例(19.8％).三组患儿术时年龄差异无统计学意义.三组患儿Fibroscan肝脏硬度测量值在术后1年内波动进展,1年后趋于稳定;单因素方差分析及秩和检验结果显示优良组差异无统计学意义,优良组与差组患儿Fibroscan肝脏硬度测量值在术后1年内差异均有统计学意义.优良组患儿总胆红素在术后前3个月下降较快,随后缓慢下降,至术后6个月稳定于正常值,而差组患儿总胆红素术后前2个月下降较快,但随后出现较大波动.三组患儿ALT趋势图均在术后1个月出现波峰,优良组术后1～6个月有所下降,但之后持续波动不能稳定,差组持续波动;三组患儿AST术后6个月内有所下降,但之后波动较大不能稳定.三组患儿CGT术后1个月达到最高峰,至术后6个月下降较快,随后逐渐趋于稳定小幅波动.结论 ①胆道闭锁患儿Kasai术后1年内肝脏纤维化波动性进展,自肝存活超过1年者肝纤维化情况进展缓慢趋于稳定,优组患儿在2年后更加稳定;②Kasai术后1个月内胆红素下降最快,3～6个月胆红素可降至正常的患儿,其胆红素水平可维持长期正常;③肝脏炎症、胆管反应、功能损害在术后仍继续进展,术后1个月开始减轻,术后6个月趋于稳定.     

M2BP和M2BPGi在胆道闭锁肝纤维化中的临床意义

目的:本实验旨在进一步验证与评价M2BP与M2BPGi在胆道闭锁（biliary atresia,BA）患儿肝纤维化中的作用。方法:收集2019年9月至2020年11月天津市儿童医院普外科收治的48例行肝相关手术的患儿肝组织标本,患儿按疾病类型分为实验组（BA组）35例,其中男17例,女18例,年龄为60(30, 60...