细胞周期调控因子与喉癌癌变的相关性研究

目的 :探讨喉癌癌变过程中 Cyclin E、p2 1WAF1 /CIP1和 p5 3表达的临床病理学意义。方法 :用免疫组化检测 2 0例喉正常粘膜、40例喉不典型增生病变和 6 0例喉癌组织中 Cyclin E、p2 1WAF 1 /CIP1和 p5 3的表达。结果 :1Cyclin E阳性表达率在正常组、不典型增生组和喉癌组分别为 5 .0 % (1/ 2 0 )、2 0 .0 % (8/ 40 )、45 .0 % (2 7/ 6 0 ) ,喉癌组与正常组比较 ,其差异有极显著性意义 (P<0 .0 1) ;p2 1WAF1 /CIP1阳性表达率分别为 95 .0 % (19/ 2 0 )、75 .0 % (30 /40 )和 6 3.3% (38/ 6 0 ) ,喉癌组与正常组比较 ,其差异亦有显著性意义 (P<0 .0 5 ) ;p5 3阳性表达率分别为 0 (0 /2 0 )、30 .0 % (12 / 40 )和 6 1.7% (37/ 6 0 ) ,喉癌组与正常组比较 ,其差异有极显著性意义 (P <0 .0 1)。 2 p2 1WAF 1 /CIP1在高、中、低分化的喉癌中阳性表达率逐渐降低 ,其差异有显著性意义 (P <0 .0 5 )。 3 Cyclin E和 p5 3阳性表达显著相关 ,p2 1WAF 1 /CIP1与 p5 3阳性表达无相关性。结论 :1Cyclin E和 p5 3异常表达是喉癌发生中早期分子事件。 2p2 1WAF 1 /CIP1 表达与喉癌细胞分化程度有关。 3细胞周期因子相互调控机制在喉癌发展中起重要作用。     

喉鳞状细胞癌中PTEN和Caspase-3的表达及临床意义

目的 :研究抑癌基因PTEN和半胱氨酸蛋白酶Caspase 3在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义。 方法 :应用免疫组织化学SP法检测 2 0例正常喉组织、6 0例声带不典型增生、2 89例喉癌组织中PTEN ,Caspase 3的表达。结果 :正常喉组织、声带不典型增生、喉癌组织中PTEN阳性表达率分别为 10 0 .0 %、86 .7%、5 8.8% ,三者之间差异具有统计学意义 (均 P <0 .0 5 ) ;Caspase 3阳性表达率分别为 85 .0 %、6 1.7%、4 8.1% ,三者之间差异具有统计学意义 (均P <0 .0 5 )。另外 ,Caspase 3与PTEN在喉癌中的表达具有正相关性 (P <0 .0 1)。结论 :喉鳞状细胞癌中抑癌基因PTEN ,Caspase 3的表达异常可能与喉癌的发生、发展有关。     

人喉鳞状细胞癌中PTEN、PCNA的表达及临床意义

目的　研究抑癌基因PTEN(phosphotaseandtensionhomologdeletedfromchromsome 10 )、增殖细胞核抗原PCNA(proliferatingcellnuclearantigen)在人喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义。 方法　应用免疫组化S -P法检测 10例正常喉组织 ,2 0例癌旁组织和 6 0例喉鳞状细胞癌中抑癌基因PTEN ,增殖细胞核抗原PCNA的表达。结果　 10例正常喉组织和 2 0例癌旁组织均有较强的PTEN蛋白的表达 ,15 % (9/ 6 0 )的喉癌呈PTEN蛋白阴性 ,31.7% (19/ 6 0 )的喉癌呈PTEN蛋白弱阳性 ,5 3.3% (32 / 6 0 )的喉癌呈PTEN蛋白阳性或强阳性 ;PTEN阴性喉癌颈部淋巴结转移率为 77.8% (7/ 9) ;PTEN阳性喉癌颈部淋巴结转移率为 33.3% (17/ 5 1) ,两者之间差异有统计学意义 (P <0 .0 5 )。 83.3% (5 0 / 6 0 )的喉癌呈PCNA阳性表达 ,显著高于正常及癌旁组织 (P <0 .0 1)。晚期、低分化、伴颈部淋巴结转移的喉癌组织中PCNA阳性表达率显著高于早期、高分化、无颈部淋巴结转移的喉癌组织(P <0 .0 1)。结论　抑癌基因PTEN的表达异常可能与喉鳞状细胞癌的发生、发展有关 ;PCNA在喉癌中的表达与其分级、临床分期、淋巴结转移密切相关 ,PCNA可作为喉癌进展的重要参考指标。     

缝隙连接蛋白43和E-钙黏附素表达与喉癌生物学行为关系的研究

目的　研究缝隙连接蛋白基因 4 3(connexin4 3,Cx4 3)和E 钙黏附素 (E cadherin ,E cad)在喉癌组织中的表达与其生物学行为的关系 ,探讨喉癌发生、发展的机制。方法　应用免疫组织化学PicTureTM二步法 ,检测有 5年以上随访资料的 6 0例喉癌组织和 10例癌周正常喉组织中Cx4 3和E cad的表达 ,结果进行统计学处理。结果　Cx4 3和E cad蛋白主要定位于细胞膜上 ,10例癌周正常喉黏膜组织均呈阳性表达。 6 0例喉癌患者中 ,70 0 % (4 2 / 6 0例 )的喉癌Cx4 3呈阳性表达 ,按喉癌的临床分期、颈部淋巴结转移、喉癌复发情况分组差异有显著性意义 (χ2 =5 11、6 4 1、3 86 ,P值均 <0 0 5 ) ,与喉癌的组织学分级差异有极显著性 (χ2 =15 0 9,P <0 0 1) ,与喉癌患者的生存期无统计学意义 (χ2 =2 6 5 ,P >0 0 5 ) ;4 1 7% (2 5 / 6 0例 )的喉癌组织中E cad表达减低 ,按喉癌的临床分期、喉癌复发情况分组及生存期分组差异有显著性意义 (χ2 =6 0 9、5 35、5 14 ,P值均 <0 0 5 ) ,与喉癌的组织学分级、颈部淋巴结转移差异有极显著性意义 (χ2 =15 0 7、6 6 5 ,P均值 <0 0 1)。同一标本中Cx4 3和E cad基因表达有显著的相关性和一致性 (r=0 6 3,P <0 0 0 0 1)。结论　喉癌存在Cx4 3和E cad基因的失活及蛋     

黏着斑激酶在喉癌中的表达及临床意义

目的 :探讨黏着斑激酶 (FAK)在喉癌及癌旁组织中的表达及其与喉癌的临床分期、生存率、转移等生物学行为的关系。方法 :应用免疫组织化学法检测 10 0例喉癌及 6 0例癌旁组织石蜡标本中FAK的表达水平。结果 :FAK在喉癌中的表达明显高于癌旁组织 (P <0 .0 5 ) ;Ⅲ、Ⅳ期表达较Ⅰ、Ⅱ期高 (P <0 .0 5 ) ;FAK表达较强阳性和强阳性者 3、5年生存率分别为 76 .9%(5 0 /6 5 )和 6 1.5 %(4 0 / 6 5 ) ,而阴性和弱阳性者 3、5年生存率分别为 97.1%(34/ 35 )和 88.6 %(31/ 35 ) ,其差异均有统计学意义 (P <0 .0 1)。结论 :FAK的表达可作为了解喉癌肿瘤细胞生物学行为、转移及预后判断的一种较有价值的病理指标。     

喉癌中maspin与p53表达的相关性

目的 观察喉癌中maspin和p53蛋白的表达,探讨maspin和p53在喉癌发生、发展中的作用。方法 采用免疫组化法检测78例喉鳞癌组织中maspin和p53蛋白。结果 在喉癌中maspin阳性表达率为55.1%(43/78),maspin表达下降与病理分化程度低、淋巴结转移有关。p53阳性表达率为58.9%(46/78)。在maspin阳性表达的43例喉癌中,p53阳性表达率为79.1%,maspin阴性表达的喉癌中,p53阳性表达率为34.3%,差异有统计学意义(P<0.05)。Spearman等级相关分析显示,maspin在喉癌组织中的表达与p53呈负相关性,有统计学意义(rs=-0.381, P=0.006)。结论 maspin在喉癌的发生发展中起一定抑制作用。喉癌中maspin表达与p53表达呈负相关,maspin可能是p53的效应基因。     

miR-181b-5P和EPB41L3蛋白在喉癌中的表达及临床意义

目的 miR-181b-5P和红细胞膜蛋白配体4.1样3(EPB41L3)目前在喉癌中表达关系及作用机制尚不明确。论文主要通过研究miR-181b-5P、EPB41L3蛋白在喉癌组织及癌旁正常组织中表达水平并进行相关性分析,探讨miR-181b-5P靶向调控EPB41L3对喉癌组织增殖、侵袭及转移的影响。 方法 通过生物信息学数据库预测miR-181b-5P在喉癌中的表达情况,采用实时荧光定量PCR技术测定喉癌及癌旁正常组织中miR-181b-5P的表达量。预测miR-181b-5p的靶基因并进行生物信息学分析,EPB41L3蛋白的相对表达由免疫组化SP法测定。 结果 喉癌组织中miR-181b-5P的表达明显较癌旁正常组织高(P<0.001),且在有无淋巴结转移间有显著差异(P=0.027 3)。EPB41L3蛋白在喉癌组织的表达明显较癌旁正常组织低(P<0.001)。EPB41L3蛋白在喉癌中的阳性表达率于不同病理分化程度、临床分期及有无淋巴结转移中差异具有统计学意义(P<0.05)。miR-181b-5p及EPB41L3蛋白在喉癌组织中的表达呈负相关(r=-0.420 8,P=0.002 3)。 结论 miR-181b-5P可能通过负性调控EPB41L3的表达,影响喉癌组织的增殖、侵袭、转移,研究可为喉癌的临床靶向治疗提供新的思路。     

HSP70,Bcl-2和PCNA在鼻咽癌中的表达及其意义

目的　探讨HSP70 ,Bcl 2和PCNA在鼻咽癌中的表达及临床意义。方法　用免疫组化S P法分别检测HSP70 ,Bcl 2和PCNA在 6 0例鼻咽癌组织中的表达。结果　①HSP70 ,Bcl 2和PCNA在鼻咽癌组织中的阳性表达率分别为 70 % (4 2 / 6 0 )、6 5 % (39/ 6 0 )和 86 .7% (5 2 / 6 0 )。②HSP70表达阳性和阴性病人的预后组间无统计学意义 (P >0 .0 5 ) ;Bcl 2、PCNA表达阳性和阴性病人以及不同临床时期 (Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ )病人的生存状态比较有统计学意义 (P <0 .0 5 )。③鼻咽癌组织中HSP70和Bcl 2的表达一致率为 75 % (4 5 / 6 0 ) ,存在统计学意义 (P <0 .0 5 ) ,PCNA与Bcl 2、HSP70间无显著相关。④HSP70、PCNA阳性表达在鼻咽癌不同临床时期 (Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ )比较有统计学意义 (P <0 .0 5 )。结论　HSP70表达与鼻咽癌临床分期相关 ,但可能并不直接反映预后 ;Bcl 2、PCNA表达在鼻咽癌预后评估中有一定意义。     

p16、COX-2在喉癌组织中的表达及相关性研究

目的 研究喉癌组织中抑癌基因p16及环氧化酶-2(COX-2)的表达,探讨p16、COX-2在喉癌发生发展中的作用及两者之间的关系.方法 采用免疫组织化学方法检测50例喉癌组织中p16、Cox-2的表达情况.结果 50例喉癌标本中喉癌中p16蛋白表达的阳性率为56.0%,正常喉黏膜中阳性表达率为80.0%,p16蛋白在喉鳞癌组织中的阳性表达率明显低于正常喉黏膜组织(P<0.05),有统计学意义.随着临床分期的进展及组织学分化程度的降低,p16蛋白表达进一步降低.COX-2在喉癌组织中高表达,阳性表达率为62.0%,正常组织阳性率为24%,患者的不同临床分期的表达差异有统计学意义(P<0.05).p16与COX-2之间存在负相关性.结论 两者的联合检测对估计喉癌的恶性度,判断预后有FINDINGS REPORT定意义.     

p27、p53和Bcl－2蛋白在喉癌和切缘组织中的表达

目的研究p27、p53和Bcl-2在喉鳞状细胞癌和切缘中的表达及其临床意义。方法用Evision免疫组化两步法检测39例喉鳞状细胞癌和相对应的14例喉癌切缘组织中p27、p53和Bcl-2蛋白的表达情况。结果①39例喉癌组织中p27、p53和Bcl-2的阳性表达率分别为48.7%(19/39)、51.3%(20/39)和7.7%(3/39),且p27、p53和Bcl-2与喉鳞状细胞癌患者的年龄、病理分级、临床分期和预后无明显的相关性;②14例喉癌切缘组织中p27、p53和Bcl-2的阳性表达率分别为57.1%(8/14)、14.3%(2/14)和28.6%(4/14),且切缘中p27、p53和Bcl-2蛋白的表达与喉鳞状细胞癌患者的年龄、病理分级、临床分期无明显的相关性。切缘中p27蛋白的表达与预后相关,而切缘中p53和Bcl-2蛋白的表达与预后无关;③p53蛋白在14例喉癌和喉癌切缘组织中的表达有统计学意义(P=0.001)。Bcl-2蛋白在14例喉癌和切缘组织中的表达有统计学意义(P=0.031);④在喉鳞状细胞癌中p27、p53蛋白的表达无相关性。结论①p27、p53和Bcl-2与喉癌患者的年龄、淋巴结转移、分期等无明显的相关性;②p27在切缘中的表达与预后有一定相关性;③p53、Bcl-2蛋白在喉鳞状细胞癌组织和喉癌切缘中的表达有统计学意义;④在部分喉癌切缘中见p53蛋白表达可能与喉癌术后复发有一定的相关性。Bcl-2可能在分子水平提示正常细胞向喉癌细胞的恶性转化。     

Survivin基因在喉癌组织中的表达

目的探讨Survivin基因在喉癌组织中的表达,并分析与p53基因的表达、微血管形成以及临床病理因素的关系。方法应用免疫组化SP法检测Survivin、p53、CD34蛋白在40例喉癌组织中的表达情况,并与临床病理资料一起进行统计分析。结果Survivin蛋白在正常喉黏膜组织中不表达,40例喉癌组织中23例表达阳性,占57.5%。在P53蛋白表达阳性、阴性的喉癌组织标本中,Survivin蛋白阳性率分别为73.1%(19/26)和28.6%(4/14)(P=0.007)。Survivin蛋白阳性表达的病例中,平均瘤内微血管密度明显高于Survivin蛋白阴性表达的病例(P<0.001)。Survivin蛋白异常表达与喉癌临床分期、病理分级、颈淋巴结病理转移有关。结论Survivin基因在喉癌中存在高表达,并与p53基因突变、肿瘤微血管形成关系密切,Survivin异常表达可能在喉癌发生、发展及转移过程中发挥重要的抗凋亡作用。     

Prognostic value of the expression of p53 and bcl-2 in patients with laryngeal carcinoma

Previous studies have yielded inconsistent results on the prognostic significance of p53 and bcl-2 in head and neck cancer. The aim of this study was the evaluation of p53 and bcl-2 protein expression in laryngeal squamous cell carcinoma and to clarify the relationship between them. All patients with laryngeal carcinoma were treated during the period 1991–1993. In the present study, p53 and bcl-2 expression in paraffin sections from 50 cases of laryngeal squamous cell carcinoma were analysed and correlated with routine clinico-pathological parameters. The expressions of p53 and bcl-2 were examined by immunohistochemical staining. Immunoreactivity for p53 was observed in 45 (90%) of carcinomas and bcl-2 immunoreactivity in 7 (14%). No significant correlation between the p53 or bcl-2 expression and patients’ T- or N-stage, histological grading, or overall survival was found. Received: 2 May 2001 / Accepted: 7 June 2001     

小干扰RNA对喉鳞状细胞癌裸鼠移植瘤增殖细胞核抗原及p53蛋白表达的影响

目的：应用小干扰RNA（siRNA）技术抑制裸鼠喉癌皮下移植瘤人端粒酶逆转录酶（hTERT）基因表达,探讨移植瘤中增殖细胞核抗原（PCNA）及p53蛋白表达的变化。方法：根据hTERT cDNA序列构建表达短发夹RNA（shRNA）的、靶向hTERT mRNA的真核表达质粒pshRNA,其载体质粒含荧光素报告基因。建立人喉鳞状细胞癌Hep-2细胞株裸鼠皮下接种模型,将pshRNA转染入荷瘤裸鼠瘤体内,观察肿瘤生长情况。以激光共聚焦显微镜观察质粒在瘤体内的表达;以免疫组织化学SP法检测PCNA及p53蛋白在肿瘤内的表达。结果：所有裸鼠均接种成功,5d后可见皮下肿瘤形成,14d左右肿瘤直径达5～7mm。pshRNA及空质粒载体转染入瘤体后,共聚焦显微镜下见癌组织中有绿色荧光表达。病理学检查发现：pshRNA组肿瘤生长受到抑制,细胞分裂少见,可见大量癌细胞坏死。与注射生理盐水的对照组比较,转染质粒完毕后7d抑瘤率为76．50％,P〈0．01。pshRNA治疗后瘤体内PCNA蛋白表达显著下调（P〈0．05）,p53蛋白表达显著上调（P〈0．05）。结论：靶向hTERT mRNA的shRNA可显著抑制人喉癌裸鼠移植瘤的生长,其机制可能是诱导PCNA下调,促进p53蛋白表达所致。     

环氧化酶-2在喉鳞状细胞癌中的表达及其与微血管密度的关系

目的：检测喉鳞状细胞癌（LSCC）中环氧化酶-2（COX-2）、兔抗人Ⅷ因子（FⅧ）的表达,探讨LSCC中COX-2的表达情况与微血管密度（MVD）的关系。方法：利用免疫组织化学SABC法检测42例LSCC及其癌旁正常组织中COX-2、FⅧ的表达,分析其与LSCC的临床病理、淋巴结转移、MVD等的关系。结果：LSCC组织中COX-2阳性率为71．4％,癌旁正常组织中COX-2的阳性率为19．1％,肿瘤组织中COX-2的表达明显高于癌旁正常组织,差异有统计学意义（P〈0．05）;COX-2在LSCC中的表达与患者的性别、年龄、病变原发部位、分化程度和T分期无关（均P〉0．05）：与病理分期、颈淋巴结转移和MVD密切相关。结论：COX-2在LSCC中的高表达对肿瘤的发生、发展及淋巴结转移起促进作用,COX-2可能是促进肿瘤血管形成的主要因子。     

喉鳞状细胞癌中BAG-1和 p53基因的表达及其临床意义

目的：研究BAG-1和p53基因在喉鳞状细胞癌组织中的表达,探讨BAG-1在喉鳞状细胞癌发生、发展中的作用及与p53的关系。方法：运用免疫组织化学SP技术,检测40例喉鳞状细胞癌组织,27例喉癌旁正常组织及20例声带息肉组织中BAG-1与p53的表达。结果：BAG-1在喉癌中表达阳性率为72．5％,较喉癌旁组织（18．5％）、声带息肉组织（20．0％）高（P〈0．05）,其表达与预后呈负相关（P〈0．05）;p53在喉癌中表达阳性率为65．0％,而在喉癌旁组织和声带息肉组织中均无表达,与在喉癌组织中的表达相比差异有统计学意义（P〈0．05）;其表达与病理分化程度、颈淋巴结转移及预后呈负相关（P〈0．05）;在喉癌组织中BAG-1与p53表达之间未见显著性相关（P〉0．05）。结论：BAG-1和p53基因的过度表达与喉鳞状细胞癌的发生、发展存在一定的关系。BAG-1可作为早期诊断喉癌的一种生物标记,尤其是细胞核BAG-1定位可作为一种不良预后的预测因子;p53表达与喉癌颈淋巴结转移有关,可单独作为喉癌的预后指标。     

Reduced expression of p27 is correlated with progression in precancerous lesions of the larynx

OBJECTIVES: Factors related to malignant transformation of laryngeal precancerous lesions remain largely unknown, so we investigated the relationship between the expression of p27 and precancerous laryngeal lesion. STUDY DESIGN: In this study we investigated the expressions of p27 and p53 protein in 56 cases with laryngeal precancerous or cancer lesions (20 cases of hyperplasia, 19 of dysplasia, and 17 of squamous cell carcinoma), and went on to evaluate the relationship between immunoreactivity of each of them and the histological findings. We also evaluated the correlation between immunoreactivity and proliferative activity with the aid of Ki-67 nuclear antigen staining. METHODS: A retrospective study was performed in 56 cases (20 with epithelial hyperplasia, 19 with epithelial dysplasia and 17 with laryngeal cancer). Immunohistochemistry was performed to investigate expression of p27, p53 protein and Ki-67 nuclear antigen staining, using the avidian-biotin-peroxidase complex technique. RESULTS: p27 immunostaining was observed in 12 out of 20 cases of hyperplasia (60%), six out of 19 cases of dysplasia (31%), and 2/17 (12%) of carcinoma. We found significant association between p27 immunostaining and the histological findings. On the other hand, p53 immunostaining was observed in 6/20 (30%) of hyperplasia, 3/19 (16%) of dysplasia, and 7/17 (41%) of carcinoma. No significant association was found between p53 and the histological findings. CONCLUSIONS: Our results revealed that immunohistochemical assessment of p27 in bioptic samples of laryngeal precancerous lesions might be useful in selective patients who should undergo a more specific follow-up evaluation.     

Prognostic significance of p53/bcl-2 co-expression in patients with laryngeal squamous cell carcinoma

OBJECTIVE: The p53, bcl-2, and bax genes are known to be involved in control of cell cycle progression and regulation of apoptotic cell death. Although they are frequently altered in laryngeal squamous cell carcinoma, their clinical relevance is not yet fully understood. In the present study, individual and combined expressions of these genes were related with patient survival as well as with proliferative and apoptotic activity. DESIGN: Retrospective study. METHODS: Paraffin-embedded tissue sections of 88 laryngeal squamous cell carcinomas that were diagnosed and treated between 1986 and 1996 were investigated for p53, bcl-2, and bax protein expression by immunohistochemistry. Apoptotic cells were visualized using the nick end labeling method. To assess proliferative activity of tumors, mitotic indices were determined. RESULTS: Age of patients, advanced disease (stages HI and IV), high mitotic activity, positive bcl-2 expression, high level of p53 expression, and p53/bcl-2 co-expression were significantly associated with shortened overall survival in univariate analysis. In multivariate analysis, only age and p53/bcl-2 co-expression had independent prognostic value. Other combinations of genes, i.e., bcl-2-to-bax and p53-to-bax ratios, were not associated with patient outcome. A significant positive correlation was found between apoptotic and mitotic activity. However, protein levels of p53, bcl-2, and bax were unrelated to proliferation and apoptosis of tumor cells. CONCLUSIONS: The co-expression of p53/bcl-2 was an independent predictor of patient outcome and had a prognostic value superior to both parameters considered separately. The rate of apoptosis mainly counterbalanced proliferative activity but appeared not to be significantly influenced by p53, bcl-2, and bax.