基因治疗兔颈椎间盘软骨终板钙化的实验研究

目的探讨基因治疗退变颈椎间盘软骨终板钙化的效果。方法选用25只4个月龄新西兰免,分为正常对照组、模型浅层组、模型深层组、基因浅层组、基因深层组,每组5只。除正常对照组外,余建立家兔颈椎动力平衡失调模型组,诱导颈椎间盘退变。术后7个月。基因组将带有转化生长因子β1(TGF-β1)基因的重组质粒DNA注入C2-3、C3-4、C4-5椎间盘中,每个椎间盘用量为20μL。1个月后用耳缘静脉气栓法处死各组动物,切取C4-5椎间盘(包括上、下部分椎体),在形态学上评定颈椎间盘退变程度,测定各组动物颈椎软骨终板钙化层厚度,进行组间比较。结果模型浅层组、模型全层组与正常对照组比较,颈椎软骨终板钙化层明显增厚(P<0.01),而基因组软骨终板钙化明显抑制(P<0.05)。结论软骨终板钙化是颈椎间盘退变的始动因素,二者呈高度正相关。基因治疗退变颈椎间盘对软骨终板钙化有明显的抑制作用。     

中西药与基因治疗家兔退变颈椎间盘对软骨终板钙化影响的研究

目的了解家兔颈椎软骨终板钙化与颈椎间盘退变的关系,探讨抗骨增生胶囊与葡立胶囊联合应用及基因治疗退变颈椎间盘对软骨终板钙化有无抑制作用。方法选用35只4月龄新西兰兔,建立家兔颈椎动力平衡失调模型,诱导颈椎间盘退变（正常对照组不作处理）。术后7个月,药物治疗组（浅层、全层）给予抗骨增生胶囊和葡立胶囊（剂量按体重折算）,灌胃2次／日,连用1个月,基因治疗组则将带有转化生长因子β1（TGF-β1）基因的重组质粒DNA注入C2-3、C4—5椎间盘中（每个椎间盘用量为20μl）。1个月后用耳缘静脉气栓法处死各组动物,切取C4-5椎间盘（包括上、下部分椎体）,在形态学上评定颈椎间盘退变程度,测定各组动物颈椎软骨终板钙化层厚度,进行组间比较。结果模型浅层组、模型全层组与正常对照组比较,颈椎软骨终板钙化层明显增厚,有统计学差异,而抗骨增生胶囊与葡立胶囊联合应用、基因治疗退变颈椎间盘对软骨终板钙化有明显抑制作用（P〈0．05）。结论软骨终板钙化是颈椎间盘退变的始动因素,二者呈高度正相关。抗骨增生胶囊与葡立胶囊联合应用及基因治疗退变颈椎间盘对软骨终板钙化有明显的抑制作用。     

手法干预对实验性家兔退变颈椎间盘组织结构的影响

目的:观察手法干预对实验性家兔退变颈椎间盘组织结构的影响。方法:建立兔颈椎间盘退变模型,25只成年新西兰家兔随机分为正常对照组、模型组、手法预防组、手法治疗组,应用光镜观察手法干预对实验性家兔退变颈椎间盘组织结构的影响。结果:与正常对照组比较,模型组颈椎间盘中软骨下骨内的血窦数目明显减少,髓核中活细胞数目减少、排列紊乱。手法治疗、预防组均能不同程度地延缓软骨下骨内血窦数目及髓核活细胞数目的减少,但不能完全逆转椎间盘的退行性改变,且手法早期干预效果优于晚期干预。结论:手法干预能不同程度地延缓椎间盘组织结构的退行性改变。     

异常应力干预对兔颈软骨终板超微结构影响的实验研究

目的:观察异常应力干预对兔颈软骨终板超微结构的影响。方法:采用屈颈固定的方法,建立实验性兔颈椎间盘退变模型,20只成年新西兰大白兔随机分为正常对照组与模型组,于3个月后处死动物,应用透射电镜观察异常应力对兔颈软骨终板超微结构的影响。结果:正常对照组中软骨终板显示大量呈椭圆形的正常软骨细胞结构,空泡变性细胞少见,胶原纤维排列紧密整齐;模型组中软骨终板显示空泡变性软骨细胞数目增多,出现大量固缩软骨细胞,甚至溶解消失,胶原纤维排列极不规整,甚为松散,出现大量胶原溶解。结论:通过影响软骨终板营养途径,可能是异常应力干预引起或加剧椎间盘退变的主要机制之一。     

补阳还五汤对兔退变椎间盘软骨终板Fas/FasL表达的影响

目的：观察补阳还五汤对兔退变椎间盘软骨终板凋亡基因Fas/FasL表达的影响,探讨其对椎间盘退变的防治作用。方法：参照文献＂异常应力负荷及椎间失稳法＂建立兔腰椎间盘退变模型,并用病理切片确认造模是否成功。将造模后兔随机分成模型组和治疗组,分别予生理盐水和补阳还五汤治疗;治疗后1、2月各处死4只兔取腰4/5椎间盘下位软骨终板,RT-PCR测定其中Fas/FasL的表达水平。结果：造模后2个月,椎间盘病理切片见纤维环结构破坏、髓核突出,证明造模成功。模型组软骨终板内Fas/FasL的表达逐渐增强,治疗组软骨终板内Fas/FasL的表达逐渐减少;与模型的比较具有显著差异（P〈0.05）。结论：补阳还五汤具有防治椎间盘退变的作用,抑制Fas/FasL基因在退变椎间盘软骨终板中的过度表达,抑制软骨终板内细胞凋亡是部分作用机制。     

丹参注射液对退变颈椎间盘影响的实验研究

目的 :观察家兔颈椎间盘退变过程中血液流变学、髓核蛋白多糖、胶原及椎间盘病理的变化和丹参注射液对这些变化的影响。方法 :通过破坏家兔颈推动、静力平衡 ,建立家兔颈椎间盘退变的模型。 6 0只兔子随机分成 3组 ,颈椎间盘退变组 (A) 4 0只 ,分 4个亚组 (A1、A2、A3、A4 ) ,即为造模后 1、3、5、7月组 ,每组各 10只 ;退变加丹参治疗组 (B) 10只 ,造模后饲养 6个月后 ,每日腹腔内注射丹参注射液 2ml ,1个月后处死 ;正常对照组 (C) 10只。通过测定血液流变学、髓核蛋白多糖、胶原的含量 ,比较各组之间的差异 ,在光镜、电镜下观察椎间盘组织的细胞、基质形态及超微结构的变化。结果 :丹参治疗组 (B)家兔全血高切黏度、低切黏度、血沉与A4组比较P <0 0 1,红细胞压积同A4组比较P <0 0 5 ,以上均有显著性差异 ;血浆黏度、血浆纤维蛋白原同A4组比较 (P >0 0 5 ) ,无显著性差异。髓核蛋白多糖、胶原与A4组比较 (P <0 0 1) ,均有显著性差异。结论 :丹参能改善家兔血液流变学和微循环的灌注 ,增加椎间盘髓核的蛋白多糖 ,降低胶原的含量 ,促进组织修复、再生 ,能够延缓和抑制颈椎间盘的退变。     

基于Wnt/β-catenin信号通路探讨按压手法延缓大鼠椎间盘软骨终板退变的机制研究

目的 基于Wnt/β-catenin信号转导通路,探讨按压手法治疗对退变大鼠腰椎间盘软骨终板的作用机制,为腰椎间盘退变相关疾病的治疗与研究提供新的方向。方法 采用大鼠去前肢双足直立的造模方法建立大鼠腰椎间盘退变模型,正常组为对照组,对造模后大鼠分别给予按压手法、假按压连续干预60 d。干预结束后采用HE染色和番红固绿染色观察各组椎间盘组织病理变化,评估按压手法对腰椎间盘退变大鼠的治疗效果,通过Western Blot和实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction, qRT-PCR)技术检测大鼠退变椎间盘软骨终板中Wnt/β-catenin信号通路中关键分子Wnt3a、β-catenin、糖原合酶激酶-3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)及其下游因子基质金属蛋白酶13(matrix metalloproteinase 13,MMP-13)的蛋白和mRNA表达水平变化。结果 病理结果表明,与正常组相比,模型组椎间盘软骨终板结构与界限不清,软骨细胞出现明显肥大,分布广泛,番...     

丹参加玻璃酸钠关节内注射对家兔实验性膝骨性关节炎软骨退变的影响

为探讨预防性关节内注射丹参加玻璃酸钠对骨关节炎软骨退变和细胞凋亡的影响,将成年健康日本大耳白兔37只随机分为4组,A组9只,B组9只,C组10只,D组9只。手术切开右后肢膝关节,搜刮髌上囊前壁,推开髌上囊后壁,切除髌下脂肪垫,缝合关节囊及皮肤后关节穿刺,每组每只动物分别注入0.3 ml的生理盐水(A组)、玻璃酸钠注射液(B组)、丹参注射液(C组)、丹参加玻璃酸钠混合液(各0.15 ml,D组),管形石膏固定患肢于屈膝70~90°位;4周后处死动物,行关节腔大体观察,股骨髁下面关节软骨组织学观察和细胞凋亡检测。结果显示,关节软骨退变计分B、C、D组均小于A组((P<0.01),D组的均值小于B、C组(P>0.05);关节软骨凋亡细胞计数B、C、D组均小于A组(P<0.01),D组的均值小于B、C组(P>0.05)。表明丹参能减轻软骨退变程度、减少软骨凋亡细胞数目,有效预防骨关节炎;丹参加玻璃酸钠与二药单独使用比较,有减轻软骨退变程度、减少软骨凋亡细胞数目的趋势,可以提高预防骨关节炎。     

手法对颈椎间盘退变的实验与临床研究进展

手法治疗颈椎病及颈椎间盘突出症具有良好的治疗效果,但是相关治疗机制仍不明确,本文拟从颈椎间盘退变模型的构建、手法的作用机制、手法延缓颈椎间盘退变的实验及临床研究进展作一综述。     

Galectin-3在人类椎间盘软骨终板标本中的表达变化与意义

目的 探讨Galectin-3(半乳糖凝集素3)在椎间盘软骨终板标本中的表达变化与意义.方法 收集自新疆维吾尔自治区中医医院因椎间盘退变性疾病行腰椎后路手术的患者,按照椎间盘退变程度不同分为ModicⅠ组、ModicⅡ组及ModicⅢ组,共3组.通过苏木素—伊红检测椎间盘软骨终板的病理变化,免疫组化、实时荧光定量PCR...     

推拿对异常应力下兔颈椎间盘蛋白多糖变化的影响

为观察中医推拿手法对异常应力环境下兔颈椎间盘基质蛋白多糖变化的影响 ,将 32只家兔随机分为对照组、模型组和治疗组 ,后两组家兔每天 1次保持颈椎低头屈曲 4 5°位 5小时 ,治疗组分别于造模开始及造模 2个月后施以推拿手法。取C5～ 6椎间盘生化测定椎间盘的蛋白多糖总量、硫酸软骨素和硫酸角质素比值及透明质酸含量 ,比较各组间可能存在的差异。结果显示 ,对照组蛋白多糖总量和成分含量均无显著变化 ,模型组和治疗组蛋白多糖总量及硫酸软骨素和硫酸角质素比值明显下降 ,治疗组家兔颈椎间盘蛋白多糖含量明显高于模型组 ,但各成分含量无明显差异。表明推拿手法能够一定程度减少异常应力环境下颈椎间盘中蛋白多糖的丢失 ,其作用的机制可能与抑制蛋白多糖降解有关。     

局部注射脱钙狗骨粉对兔实验性骨折愈合的促进作用

采用２４只雄性新西兰大白兔,手术造成双侧桡骨中段３ｍｍ缺损的骨折模型。左侧断端注射脱钙骨粉,右侧注射生理盐水作为对照,于治疗后第２、４、６周分３批处死,取标本进行Ｘ线摄片评分,组织学观察及形态计量学研究,结果显示,实验组Ｘ线片评分明 显高于对照组（Ｐ〈０．０５）;实验组断端血肿机化快,软骨骨痴出现早,骨化提前,早期形成大量新的小梁骨,血管形成丰富,细胞活性增强,不同时期骨痴中纤维组织,软骨组织,骨     

中药对家兔实验性膝关节骨性关节炎氧自由基代谢的影响

为探讨中药对骨性关节炎氧自由基代谢的影响 ,采用 Hulth方法复制出家兔膝骨关节炎模型并随机分为模型组、芬必得组和中药逐痹汤组。均于治疗 1个月后测定红细胞超氧化物歧化酶 (SOD)活性及血清脂质过氧化物 (L PO)含量 ,并做统计学分析。结果显示逐痹汤组动物的 SOD活性显著高于其他两组 ,而 L PO含量显著低于其他两组 (P<0 .0 1) ,模型组与芬必得组无显著性差异 (P>0 .0 5 )。认为逐痹汤可显著提高 SOD的活性 ,降低 L PO含量 ,从而起到延缓关节软骨的退变 ,促进软骨修复的作用     

手法对兔膝骨性关节炎软骨细胞DNA氧化性损伤的防治作用

为研究手法对膝关节骨性关节炎治疗的作用机制,采用新西兰兔进行动物造模而形成膝关节骨性关节炎模型,随机将实验动物分为手法组、施沛特组和对照组并进行实验。8周后取动物右膝关节软骨进行DNA提取,并采用LCMS2010型液-质联用仪检测标本中8-羟基脱氧鸟苷含量。结果显示,施沛特组含量最少,手法组次之,对照组最多。提示手法治疗可能对减轻氧自由基对软骨细胞DNA的损伤有一定的作用。     

大推拿手法对腰椎间盘突出症的功能及相关肌群的影响

观察大推拿手法对腰椎间盘突出症患者的功能厦相关肌群电位的影响，为进一步治疗腰椎间盘突出症和探讨其发病机制提供依据．93例患者进行大推拿手法治疗，3个疗程后评定疗效，并检测相关肌群的电生理．计量资料采用t检验，计数资料采用卡方检验。结果显示93例患者治疗前后的腰部活动功能改变有显著差异（t=-5．021，P〈0．01），相关肌群电生理改变（t=2．253，P〈0.05）差异明显。进一步证明大推拿手法对腰椎间盘突出症患者的腰部功能覆相关肌群的改变有明显的改善作用，也提示腰椎间盘突出与其相关肌群的电位变化密切相关。     

雌激素对卵巢切除小鼠骨折愈合影响的实验研究

将卵巢切除后 3个月已经出现明显骨丢失的 balb/ c小鼠用折骨器造成右股骨中段闭合性骨折 ,应用不同剂量的雌激素治疗 ,然后分批处理取出骨痂标本进行组织学检查。结果发现卵巢切除后未用雌激素治疗者骨痂形成较小 ,而应用高剂量雌激素治疗者骨痂发育明显推迟 ,表明补充超生理剂量雌激素对卵巢切除小鼠骨折愈合 (早期 )不利。     

退变椎间盘组织匀浆超氧化歧化酶的变化

为研究退变椎间盘组织匀浆超氧化歧化醇(SOD)的变化，运用静力平衡失调造模方法制造颈椎病椎间盘退变动物模型，通过黄嘌吟氧化醇法测定造模组与正常组的同一节段椎间盘组织匀浆SOD活力值。结果显示模型组动物椎间盘组织匀浆SOD活力值与正常对照组相比有明显降低趋势(P＜0．05)。表明椎间盘组织匀浆SOD活力值与颈椎病椎间盘退变有重要关系。     

脊髓型颈椎病脊髓微循环改变及中药效应观察

为探讨脊髓型颈椎病脊髓微循环改变及中药效应,建立脊髓型颈椎病动物模型,设立对照组分别进行脊髓微血管显影、脊髓血管内皮生长因子表达检测观察.结果显示中药治疗组脊髓微血管显影、脊髓血管内皮生长因子表达优于对照组.提示中药有促进脊髓组织VEGF的表达,促进血管增生,增加脊髓血液供应的作用.     

骨复生对激素性股骨头缺血性坏死家兔血浆一氧化氮的影响

为探讨激素性股骨头缺血坏死家兔血浆中一氧化氮 (NO)的变化及骨复生对其的影响 ,采用给日本大耳白兔大剂量肌肉注射醋酸波尼松龙 8W的方法 ,造成激素性股骨头缺血坏死的病理模型 ,随机分为骨复生组、马氏骨片组、模型对照组与空白对照组。结果显示模型组血浆 NO含量降低 ,与空白对照组相比差异非常显著 (P<0 .0 1)。治疗 4周后 ,骨复生组、马氏骨片组与模型组相比血浆 NO含量升高 (P<0 .0 5 )。两治疗组相比无明显差异 (P>0 .0 5 )。表明激素诱导的股骨头缺血坏死与血管功能障碍、血管内皮受损有关。骨复生具有升高血浆 NO浓度、保护血管内皮、改善微循环、改善血瘀状态、抑制血栓形成 ,而这些作用是其治疗激素性股骨头缺血坏死的可能机制之一     

愈骨合剂促进骨折愈合作用的实验研究

为研究愈骨合剂对骨折的治疗作用. 将36只日本大耳白兔,制成骨折动物模型,随机分为愈骨合剂组、接骨片组和生理盐水组,在第8、16、24、32天,分别进行X线观察、病理组织学检查、周围血细胞分析及血清酶学检测.结果显示X线观察在第16天愈骨合剂组的骨膜反应和骨痂生成均比对照组明显,全部有骨痂生成,其中7只有中等量骨痂生成.第24天,愈骨合剂组骨痂生成继续增多,其中2只骨折线开始模糊.第32天,愈骨合剂组有4只骨折线基本消失,骨痂密度与骨质接近.经Ridit检验,在第32天盐水组R=0.28,接骨片组R=0.52,愈骨合剂组R=0.70.愈骨合剂组与盐水组比较有显著性差异(P＜0.05).病理组织学检查显示,骨折周围血肿等级( )及( ),盐水组共9例,R=0.5008,接骨片组共8例,R=0.4028,愈骨合剂组共9例,R=0.5880;骨痂等级( )及( ),盐水组共4例,R=0.3707,接骨片组共5例,R=0.4630,愈骨合剂组共7例,R=0.6574;软骨骨痂等级( )及( ),盐水组共2例,R=0.3380,接骨片组共5例,R=0.5972,愈骨合剂组共5例,R=0.5648;从R值分析愈骨合剂组比盐水组骨痂生长明显加快.血清酶学检验显示,盐水组用药前后ALP、CK及LDH的升高速度不显著(均为P＞0.1),愈骨合剂组用药前后ALP、CK及LDH的升高速度显著(均为P＜0.01).表明愈骨合剂具有明显促进骨痂形成的作用.