转化人胚肌腱细胞的体外培养及生物学特性研究

目的 研究经ｐｔｓＡ５８Ｈ质粒转化的人胚肌腱细胞的生物学特性,探讨细胞生长特性与体外培养条件改变的关系,方法 取人胚肌腱细胞和经ｐｔｓＡ５８Ｈ质粒转化的人胚肌腱细胞,进行体外培养,对细胞进行形态学,超微结构及一般特征的观察。在不同培养条件下进行生长曲线绘制,平板克隆实验和软琼脂培养以及免疫组织化学法胶原染色,结果 在正常培养条件下,人胚肌腱细胞和转经人胚肌腱细胞的生长性状几乎无差异,且冻存复苏并不     

人胚肋软骨静止区细胞的体外培养及生物学特性研究

目的：研究体外培养的人胚肋软骨静止区细胞的生物学特性及分化规律，为组织工程生长板的研究提供种子细胞。方法：采用Ⅱ型胶原酶消化的方法获取人胚肋软骨静止区细胞．观察细胞形态学变化；测定细胞生长曲线；借助特殊染色、免疫荧光染色的方法了解糖胺聚糖、碱性磷酸酶、Ⅱ型胶原酶的合成情况。结果：贴壁后细胞呈多角形，从第6代开始绝大多数细胞转变为成纤维细胞状，细胞培养至第2代开始分泌大量Ⅱ型胶原。结论：体外单层培养的人胚肋软骨静止区细胞具有正常的生长增殖与分化能力，可分化至成熟期软骨细胞。     

人胚腱细胞体外培养及生物学特性研究

应用显微外科手术剥除人胚肌腱外膜组织外，经过胰蛋白酶及胶原酶分步消化分离出人胚腱细胞，使用含２０％新生小牛血清的Ｆ－１２培养液将其传代培养１５代后全部冻存。该细胞贴壁生长，具有接触抑制的性质。细胞群体倍增时间大致为４天与细胞有丝分裂高峰时间相符。在传代培养过程中探索了体外培养的腱细胞生长的最适宜条件。通过冻存后复苏的细胞继续培养发现，冻存对其生长、形态、遗传学等特征无明显影响。本研究测定了培养细胞     

组织工程人工肌腱的实验研究

目的 为构建组织工程肌腱积累经验。方法 应用显微外科技术剥除人胚肌腱外膜组织后,经过胰蛋白酶及胶原酶分步消化分离出人胚腱细胞,使用Ｆ１２培养液将其传代培养。该细胞贴壁生长,接触抑制的性质。细胞群体倍增时间大致为４ｄ。通过冻存后复苏的细胞继续培养后发现,冻存对其生长、形态、遗传学等特征无明显影响。经测定培养细胞分泌的羟脯氨酸含量,证实培养的人胚腱细胞与体内腱细胞同样具有合成胶原的能力,并且这种能力不     

人胚肋软骨静止区细胞的体外培养及生物学特性研究

目的:研究体外培养的人胚肋软骨静止区细胞的生物学特性及分化规律,为组织工程生长板的研究提供种子细胞.方法:采用Ⅱ型胶原酶消化的方法获取人胚肋软骨静止区细胞,观察细胞形态学变化;测定细胞生长曲线;借助特殊染色、免疫荧光染色的方法了解糖胺聚糖、碱性磷酸酶、Ⅱ型胶原酶的合成情况.结果:贴壁后细胞呈多角形,从第6代开始绝大多数细胞转变为成纤维细胞状,细胞培养至第2代开始分泌大量Ⅱ型胶原.结论:体外单层培养的人胚肋软骨静止区细胞具有正常的生长增殖与分化能力,可分化至成熟期软骨细胞.     

ptsA58H质粒转染人胚腱细胞的增殖特性及端粒酶活性分析

目的 分析体外长期传代ptsA58H质粒转染人胚腱细胞的增殖能力及端粒酶活性。方法 选用连续传代培养的第40代、第70代、第75代转化人胚腱细胞,免疫组化染色观察细胞分泌胶原类型,比较细胞生长曲线,并行染色体核型分析,流式细胞术检测细胞增殖周期,提取细胞总RNA,RT－PCR二步法检测细胞我端粒酶逆转录酶mRNA表达。结果 转化人胚腱细胞传代至70代以后,细胞形态发生改变,出现复制哀老现象。细胞具有正常分泌Ⅰ型胶原的能力,转化人胚腱细胞染色体呈异倍性（2n=94）。转化人胚腱细胞无人端粒酶逆转录酶mRNA特异扩增带,无端粒酶活性表达。结论 单纯SV40转染不能使人胚腱细胞永生化,同时也说明转化人胚腱细胞无恶性转化倾向。     

腱细胞与人工材料体外联合培养的形态学观察

目的：为了探索肌腱细胞与人工材料是否有可能复合形成新型有活性的人工肌腱，特设计了本项研究。方法：取第４代腱细胞，复苏后分别加入碳纤维编织带、涤纶编织带及几丁质编织带联合培养，在倒置显微镜及透射电镜下观察形态学改变及细胞与材料的相容性。结果：腱细胞与碳纤维有良好的相容性。腱细胞沿碳纤维生长、繁殖，并合成胶原。腱细胞与涤纶的相容性较差，在几丁质上无细胞附着。结论：腱细胞与碳纤维联合培养后，保持了腱细胞的形态特征，与碳纤维的相容性最好。有可能成为一种新型有活性的人工肌腱材料     

兔腱细胞体外培养及其生物学特性的研究

了解腱细胞的生长，形态，合成胶原的能力及冻存对腱细胞的生长的影响。方法：应用显微外科技术剥除兔屈肌腱外膜组织后，经胰蛋白酶及胶原酶分步消化分离出腱细胞。细胞经含２０％新生小牛血清的Ｆ－１２培养液传代培养６代后全部冻存。腱细胞合成的胶原型以免疫组织化学法进行鉴定。     

异体腱细胞的分离培养与鉴定

异体腱细胞的分离培养与鉴定康庆林，田万成，王爱民如何最大限度激发腱细胞参与肌腱愈合是解决肌腱粘连的关键。体外培养是研究腱细胞生物学特征的重要手段，国外早在７０年代就进行了动物腱细胞培养，但有关异体腱细胞培养报道较少，我们成功地用贴块法培养了异体腱细胞...     

兔肌腱细胞与成纤维细胞生物学特性研究

为了研究在体外培养条件下，肌腱细胞与成纤维细胞的生物特性，按Ｈｅｎｄｅｒｓｏｎ方法作兔肌腱细胞与皮肤成纤维细胞体外培养，观察细胞形态、贴壁时间及延展时间。采用免疫组织化学的方法对细胞合成胶原的类型进行了测定。结果表明：两种细胞未贴壁前均呈圆形，贴壁后呈梭形或多角形。成纤维细胞的贴壁时间、延展时间较肌腱细胞快；贴壁后细胞群体的排列方向，肌腱细胞群体排列趋于一致、规则，成纤维细胞排列呈不规则。肌腱细胞合成Ⅰ型胶原，成纤维细胞合成Ⅰ和Ⅲ型胶原。根据细胞的贴壁时间、延展时间、排列方向及合成胶原类型，可以区分肌腱细胞及成纤维细胞。