叶下珠对人肝癌细胞的影响

研究叶下珠对人肝癌细胞ＳＭＭＣ７７２１的影响。方法：噻唑蓝还原法和氚标胸腺嘧啶核苷掺入法观察叶下珠提取物对人肝癌细胞ＳＭＭＣ７２２１细胞活性及ＤＮＡ合成的影响。结果；经叶下珠提取物处理后，ＳＭＭＣ７７２１活性明显减弱，＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入率明显降低，ＤＮＡ３合成抑制率与药物剂量成线性关系。     

中药复方AC960对人肝癌细胞p21^ras,bal—2,P^53基因表达调控作 …

目的研究中药复方ＡＣ９６０对人肝癌细胞基因,抑癌基因表达的影响,探讨其抗癌作用机制。方法：ＡＣ９６０灌胃给药后,采集大鼠血清,处理人肝癌细胞ＳＭＭＣ７７２１,＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入法观察细胞增殖,流式细胞仪分析细胞周期和ｐ２１＾ｒａｓ,ｂａｌ－２,Ｐ＾５３基因蛋白表达。结果：ＡＣ９６０具有显著抑制ＳＭＭＣ－７７２１细胞增殖和促进细胞凋亡作用,细胞周期分析,ＤＮＡ直方图上见典型凋亡峰,２４ｈ时为２１．２     

中药复方AC_(960)对人肝癌细胞p21~(ras)、bal-2、P~(53)基因表达调控作用的研究

目的：研究中药复方ＡＣ９６０对人肝癌细胞基因、抑癌基因表达的影响,探讨其抗癌作用机制。方法：ＡＣ９６０灌胃给药后,采集大鼠血清,处理人肝癌细胞ＳＭＭＣ７７２１,３Ｈ－ＴｄＲ掺入法观察细胞增殖,流式细胞仪分析细胞周期和ｐ２１ｒａｓ、ｂａｌ－２、Ｐ５３基因蛋白表达。结果：ＡＣ９６０具有显著抑制 ＳＭＭＣ－７７２１细胞增殖和促进细胞凋亡作用,细胞周期分析,ＤＮＡ直方图上见典型凋亡峰,２４ｈ时为２１．２５％,４８ｈ时为２７．７７％,早期（２４ｈ）Ｓ期细胞比例增加,Ｇ２／Ｍ期减少,后期（４８ｈ）,Ｇｏ／Ｇ１期细胞增多,Ｓ期减少。Ｐ５３、ｂａｌ－２、ｐ２１ｒａｓ在 ＳＭＭＣ－７７２１细胞中都有不同程度表达,ＡＣ９６０处理后,Ｐ５３表达增强,ｂｃｌ－２、ｐ２１ｒａｓ表达降低。结论：抑制癌基因、增强抑癌基因表达,阻断细胞增殖周期,抑制人肝癌细胞增殖,促进癌细胞凋亡可能是ＡＣ９６０抗肝癌主要作用机制。     

丹参对肝癌转移复发防治作用的研究

目的：观察丹参对ＳＭＭＣ－７７２１肝癌细胞株（７７２１细胞）侵袭粘附能力和对裸鼠人肝癌切除术后转移复发的影响。方法：以流式细胞仪测量丹参对７７２１细胞表面细胞间粘附分子－１（ＩＣＡＭ）－１）的表达的影响。经细胞侵袭实验观察央参地ＳＭＶＣ－７７２１细胞侵袭运动能力及对己与纤维连接蛋白（ＦＮ）粘附的７７２１细胞脱落的影响。以ＭＴＴ法测量丹参对７７２１细胞与ＦＮ粘附的影响。以细胞粘附实验观察丹在对７７２     

柴胡皂甙对肝细胞增殖及基质合成的实验研究

目的研究柴胡皂甙对原代培养肝细胞（ＨＣ）增殖及合成细胞外基质（ＥＣＭ）的作用，为进一步阐明柴胡皂甙防治肝损伤和抗肝纤维化的机理提供实验依据。方法电镜观察、免疫细胞化学及图像分析仪检测ＨＣ内Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原和纤维粘连蛋白（ＦＮ）含量，流式细胞仪测定ＨＣ内的ＤＮＡ含量和３Ｈ－脯氨酸掺入量未检测ＨＣ内胶原蛋白总量。结果ＴＫＣｎｃｍ各组对细胞损伤得到改善，各实验组ＨＣ内３Ｈ－脯氨酸掺入量均明显升高，各治疗组ＨＣ内ＤＮＡ含量显著升高，而３Ｈ－脯氨酸掺入量均呈现降低趋势。ＨＣ内Ｉ型胶原含量明显减少，其余各组基质成分含量呈下降趋势。结论柴胡皂甙对肝细胞具有保护作用；表现为与相应实验组ＨＣ内ＤＮＡ含量内呈上升趋势；胶原蛋白总量及Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原和ＦＮ含量及其合成受到抑制，从而抑制了ＨＣ对ＥＣＭ的合成     

阿魏酸钠对氧化LDL所致兔主动脉平滑肌细胞增殖的影响

目的：以氧化低密度脂蛋白处理培养的兔主动脉平滑肌细胞（ＳＭＣ）致细胞增殖,观察阿魏酸钠（ＳＦ）对ＳＭＣ增殖的影响。方法：应用硫代巴比妥酸比色法测定脂质过氧化物（ＬＰＯ）水平,氚胸腺嘧啶核苷（^３Ｈ-ＴｄＲ）掺入实验观察ＳＭＣ的ＤＮＡ合成。结果：ＳＦ能明显降低培养液中ＬＰＯ水平的升高,并呈剂量依赖性地减少ＳＭＣ^３Ｈ-ＴｄＲ的掺入量。结论：ＳＦ能明显抑制ＳＭＣ增殖,其作用机制可能与抗脂质过氧化有关。     

鲨鱼软骨制剂诱导人肝癌细胞凋亡及p21WAF1和PCNA表达调控的研究

目的：探讨鲨鱼软骨制剂（ＳＣＰ）能否诱导ＳＭＭＣ７７２１细胞凋亡及其机制。方法：以不同浓度ＳＣＰ加入体外培养的ＳＭＭＣ７７２１细胞中,用ＭＴＴ比色法,荧光显微镜,琼脂糖凝胶电泳和免疫细胞化学方法,观察ＳＭＭＣ７７２１细胞形态学,生化和基因表达的变化。结果：ＳＣＰ明显抑制ＳＭＭＣ７７２１细胞生长,ＩＣ５０值为１ｍｇ／ｍＬ,荧光显微镜下可见典型的凋亡细胞的形态学改变;琼脂糖凝胶电泳呈现梯状条带（ＤＮＡ     

滋补肝肾,益气活血方药对血管平滑肌细胞增殖及相关基因表 …

目的：采用血清药理学方法研究滋补肝肾、益气活血方药对内皮素（ＥＴ）诱导的自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）和ＷＫＹ大鼠血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）增殖及相关基因表达的影响。方法：采用＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入实验检测ＶＳＭＣ增殖状态,Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交,反转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测中药血甭中ＶＳＭＣ诱导一氧化氮合酶基因和ＥＴ－诱导和ｃ－ｊｕｎ、增殖细胞怕（ＰＣＮＡ）基因表达活性的影响。结果：中导型一氧     

青心酮对猪肺动脉平滑肌细胞增生的抑制作用

在培养的肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭＣ）内加入青心酮（３．４－ＤＨＡＰ）（６．２５×１０－５Ｍ－１０－３Ｍ／Ｌ）注射液，用结晶紫染色法，３Ｈ－ＴｄＲ掺入以及用ＳＰ免疫细胞化学检测ＰＣＮＡ表达，观察对肺动脉平滑肌细胞增殖的影响，结果表明青心酮对１０％小牛血清引起的ＰＡＳＭＣ增生的作用与异搏定（６．２５×１０－６－１０－４Ｍ／Ｌ）相似，呈剂量依赖性抑制细胞增殖。提示青心酮可用于慢性肺动脉高压肺血管改建的防治。     

瓜蒌注射液对兔主动脉平滑肌细胞增殖的影响

观察瓜蒌注射液对培养的兔主动脉平滑肌细胞（ＳＭＣ）增殖的影响。采用液闪法测定平滑肌细胞（ＳＭＣ）氚－胸腺嘧啶核苷掺入量,同时检测培养液中超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、脂质过氧化物（ＬＰＯ）、前列环素（ＰＧＩ２）及环磷酸腺苷的含量。结果：瓜蒌注射液能抑制ＳＭＣ的＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入量,其作用呈剂量依赖关系;增加ＳＯＤ活性,降低ＬＰＯ,升高ＰＧＩ２和ｃＡＭＰ水平（Ｐ均〈０．０５￣０．０１）。提示：瓜蒌注射液     

告达庭诱导人肝癌细胞SMMC7721凋亡的作用

目的：观察Caudatin体外对人肝癌细胞SMMC7721的作用。方法：采用MTT法测定不同浓度的Caudatin作用于SMMC7721细胞24，48和72h对其生长的抑制作用。用流式细胞仪以PI单染检测细胞周期、以Annexin V／PI双染检测细胞凋亡，比色法测定Caspase-3酶活力。结果：Caudatin体外能抑制人肝癌细胞SMMC7721的增殖并呈明显的时间和剂量依赖性。Caudatin体外能诱导SMMC7721细胞凋亡，并使细胞周期阻滞于G0／G1期。Caspase-3的酶活力随着Caudatin体外作用时间的延长先升高并于8h达到最大，再随时间的变化而降低。结论：Caudatin体外能显著抑制人肝癌细胞SMMC7721的生长，其抗肿瘤作用可能与其抑制肿瘤细胞增殖、阻滞细胞周期于G0／G1期，并通过激活Caspase-3诱导肿癌细胞凋亡有关。     

熊果酸对人肝癌SMMC-7721细胞增殖作用的实验研究

目的:评定熊果酸对肝癌细胞SMMC-7721的增殖作用,流式细胞术研究对肝癌细胞凋亡的影响。方法:将不同浓度的熊果酸分别与人肝癌细胞SMMC-7721共同培养24,72 h后,采用中性红染色法测定吸光度(A),评定熊果酸对肝癌细胞的增殖作用,流式细胞术研究其对肝癌细胞的凋亡。结果:熊果酸对SMMC-7721细胞增殖有明显的抑制作用(P<0.05或P<0.01),呈时间-剂量依赖关系,24 h和72 h半数抑制浓度(IC50)分别为12.59,8.32μg·mL-1;对肝癌细胞凋亡率为14.07%,药物浓度与凋亡率呈正相关。结论:熊果酸对肝癌细胞SMMC-7721增殖有明显抑制作用,该抑制作用可能与诱导肝癌细胞凋亡有关。     

白藜芦醇致敏TRAIL诱导人肝癌细胞凋亡及其相关机制的研究

目的研究白藜芦醇对TRAIL诱导肝癌细胞SMMC-7721凋亡的影响及其机制。方法培养人肝癌细胞株SMMC-7721,分为对照组、TRAIL干预组、Res+TRAIL干预组,进行DNA末端原位标记(TUNEL)染色法作凋亡分析;Western Blot检测白藜芦醇对SMMC-7721细胞Survivn表达的影响。结果对照组SMMC-7721细胞的凋亡指数为(1.78±0.49)%,TRAIL干预组凋亡指数为(9.86±0.53)%,Res+TRAIL干预组中25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L浓度Ros凋亡指数分别为(11.30±0.80)%,(20.89±0.69)%和(27.78±1.88)%。除Res+TRAIL干预组(25μmol/L)与TRAIL干预组比较无显著性差异(P0.05),其余各组之间比较差异均有统计学意义(P均0.05)。Western Blot测定结果显示:25μmol/L Ros处理组Survivin/β-actin的值与对照组相比无统计学差异(P0.05);50μmol/L和100μmol/L Res处理组Survivin/β-actin的值较对照组显著降低(P0.01);100μmol/L Res处理组Survivin/β-actin的值较50μmol/L显著降低(P0.01)。结论 TRAIL对SMMC-7721细胞有凋亡诱导作用;Res对TRAIL诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡有致敏作用,并且这种作用呈剂量依赖关系;其分子机制可能与下调凋亡抑制因子Survivin的表达有关。     

苦参碱诱导SMMC-7721细胞分化过程中侵袭转移相关指标的实验研究

目的：研究苦参碱诱导人肝癌SMMC-7721细胞分化过程中对其侵袭转移能力的抑制作用。方法：SMMC-7721细胞体外培养，0．5g/L、0．8g/L、1．0g/L浓度的苦参碱分别处理细胞，通过生长曲线测定、细胞形态观察、细胞粘附试验、运动试验、侵袭试验全面观察苦参碱对该细胞株的生长增殖、形态变化、侵袭转移等各方面的诱导分化作用。结果：经0．8g/L和1．0g/L浓度的苦参碱处理后，SMMC-7721细胞的生长增殖明显减缓，恶性细胞形态逐渐向成熟细胞分化，肿瘤细胞与FN的粘附力、细胞穿膜运动力、对基底膜的降解力等侵袭转移相关指标均受到显著抑制。结论：苦参碱是一种较好的诱导分化剂，不仅抑制细胞的生长增殖，诱导细胞形态分化，而且从细胞的粘附、运动、降解等多环节全面抑制SMMC-7721细胞的侵袭转移能力。     

不同中医治法对不同肝癌细胞株的作用比较

目的 :比较不同中医治法对不同肝癌细胞株增殖的抑制作用。方法 :将不同治法的中药常规水煎醇沉后 ,采用不同浓度中药制剂直接加入培养液的给药方式 ,以MTT法测定人原发性肝癌SMMC772 1细胞株、Bel74 0 2细胞株细胞的增殖情况。结果 :①清热解毒法对两种不同人肝癌细胞株增殖的抑制作用都很明显 ,且随用药剂量的增大 ,呈量效关系 ;②活血化瘀法对SMMC772 1细胞株增殖也有较好抑制作用 ,而对Bel74 0 2细胞株增殖却作用不明显 ;③健脾理气法对SMMC772 1细胞株增殖无抑制作用 ,而对Bel74 0 2细胞株增殖却有较好作用 ;④清热解毒法与其它两治法配伍后 ,其对SMMC772 1细胞株增殖的抑制作用都不如单一清热解毒法。结论 :清热解毒法对不同肝癌细胞株增殖具有较强的抑制作用 ,支持临床大剂量使用这类中药 ,活血化瘀法与健脾理气法具有选择性的抑制作用 ,说明临床辨证论治的重要性     

波罗蜜属药用植物单体化合物ACR-2 ACR-3抗肿瘤作用的实验研究

目的:采用Alamar blue法及MTT法观察波罗蜜属药用植物单体化合物(ACR-2、ACR-3)对人肝癌细胞(SMMC-7721)和胃腺癌细胞(SGC-7901)增殖的影响。方法:用Alamar blue法和传统MTT法检测ACR-2、ACR-3对细胞SMMC-7721、SGC-7901的增殖抑制作用。结果:ACR-2作用于细胞SMMC-7721和细胞SGC-7901的IC50(mmol/L)分别为0.013和0.059;ACR-3作用于细胞SMMC-7721和细胞SGC-7901的IC50(mmol/L)分别为0.029和0.169。其中ACR-2、ACR-3对细胞SMMC-7721的增殖抑制作用最强,对细胞SGC-7901也表现出较强的增殖抑制作用。时量曲线检测结果显示:ACR-2、ACR-3对细胞SMMC-7721、SGC-7901的增殖抑制作用具有时间和剂量依赖性,其增殖抑制作用以48h时最强。结论:波罗蜜属药用植物单体化合物ACR-2、ACR-3对人肝癌细胞SMMC-7721、胃腺癌细胞SGC-7901有明显的增殖抑制作用,且有时间和剂量依赖性。     

裂蹄木层孔菌乙酸乙酯萃取物对人肝癌细胞SMMC-7721的抑制作用研究

目的：探讨裂蹄木层孔菌乙酸乙酯萃取物在体外的抗肝癌活性。方法：采用磺酰罗丹明染色法（SRB法）,对人肝癌细胞SMMC-7721进行体外抗肿瘤实验。结果：裂蹄木层孔菌乙酸乙酯萃取物对人肝癌细胞SMMC-7721表现出比较明显的高浓度杀死和中低浓度抑制的效果,且抑制率随萃取物浓度的升高而增大,呈剂量效应关系;其半数抑制浓度（IC50）为21.5μg.mL-1。结论：裂蹄木层孔菌乙酸乙酯萃取物对人肝癌细胞SMMC-7721具有比较明显的抑制作用。     

叶下珠复方对人肝癌HePG_2细胞增殖及细胞信号传导通路的影响

目的观察叶下珠复方药物血清对人肝癌HePG2细胞体外增殖的抑制作用并探讨其机制。方法用叶下珠复方药物血清处理HePG2人肝癌细胞株,MTT法检测该药对肝癌细胞株增殖的抑制作用,用流式细胞仪检测该复方诱导肿瘤细胞凋亡情况。通过RT-PCR检测该药对细胞信号传导和转录激活因子3(STAT3)及其下游靶基因bcl-2的表达。结果叶下珠复方药物血清对HePG2细胞有抑制增殖和促进凋亡作用,该抑制作用与药物呈时间浓度关系。不同浓度的叶下珠复方处理HePG2细胞后bcl-2、stat3的mRNA水平明显下调(P0.05)。结论叶下珠复方在体外能抑制肝癌细胞增殖,促进其凋亡,其机制可能与抑制肿瘤细胞增殖的不同信号通路有关。     

四味肝泰软胶囊对人肝癌细胞株SMMC-7721细胞周期及凋亡影响的初步研究

目的:初步探讨不同浓度四味肝泰软胶囊对人肝癌细胞株SMMC-7721细胞周期及凋亡的影响。方法:采用流式细胞仪PI染色法和Annexin V-EGFP/PI双染法研究不同浓度四味肝泰软胶囊作用于人肝癌细胞株SMMC-7721后细胞周期DNA含量变化及对细胞凋亡率的影响。结果:各浓度四味肝泰软胶囊均可以调节G1/S转换,使肿瘤细胞发生S期阻滞,造成S期细胞堆积,阻断细胞的DNA合成和复制,阻滞肿瘤细胞进入G2/M期,从而起到抑制肿瘤细胞的增殖,诱导SMMC-7721细胞凋亡,且这种诱导效应具有明显的时间-剂量-效应关系。结论:四味肝泰软胶囊对人肝癌细胞株SMMC-7721具有明显的抑制作用,其作用机制可能与抑制肿瘤细胞DNA的合成和诱导细胞凋亡有关。     

Caudatin-2,6-dideoxy-3-O-methy-β-D-cymaropyranoside 1 induced apoptosis through caspase 3-dependent pathway in human hepatoma cell line SMMC7721

Caudatin-2,6-dideoxy-3-O-methy-β-D-cymaropyranoside (CDMC), the C-21 steroidal glycoside recently extracted from the traditional Chinese medicinal plant, the root of Cynanchum auriculatum Royle ex Wight (Asclepiadaceae), has been shown to possess potent antitumor properties. However, the bioactivities of CDMC are still largely unknown, especially the antitumor effect and its mechanism. This study investigated the CDMC antitumor effects on human hepatoma cell line SMMC7721 cells by analysis of cell viability, cell cycle phases and apoptosis. The results showed that CDMC inhibited the growth of SMMC7721 cells in a time- and dose-dependent manner and resulted in cell cycle arrest in G(0)/G(1) phase. Furthermore, CDMC induced SMMC7721 cell apoptosis rather than necrosis through caspase 3 activation, and a caspase 3 inhibitor, Ac-DEVD-CHO, could attenuate the apoptosis induced by CDMC. The results suggested that the anticancer activity of CDMC could be attributed partially to its inhibition of cell proliferation and induction of apoptosis associated with caspase 3 activation.