STAT3\PCNA在胎盘组织中的表达及与胎盘老化的相关性研究

目的 分析凋亡相关蛋白STAT3及增殖蛋白PCNA在胎盘发育过程中的表达及功能,探讨二者与胎盘老化的相关性.方法 采用免疫组织化学方法分别检测妊娠不同阶段胎盘组织及老化胎盘组织中STAT3和PCNA蛋白的表达.结果 ①STAT3、PCNA在细胞滋养细胞中表达,在合体滋养细胞中不表达;②STAT3的表达强度在早期和晚期妊娠组间差异有极显著性.③PCNA表达强度在妊娠早、晚期组间差异有极显著性;中、晚期组间差异有显著性;④ STAT3及PCNA表达在正常妊娠各组间有显著正相关性;在老化组无相关性.结论 ①PCNA在妊娠早、中期高度表达与滋养细胞的高度增殖状态及旺盛的功能相关;②STAT3在妊娠早、中期表达量较高,可能通过抑制滋养细胞的凋亡而维持滋养细胞功能,进而维持妊娠;③胎盘老化可能与STAT3的表达失活有关;④正常妊娠各组STAT3与PCNA表达呈显著正相关,说明STAT3可能通过抑制滋养细胞的凋亡而影响细胞的增殖,从而使得细胞滋养细胞保持增殖与凋亡的平衡状态,保证胎盘功能的正常运行.     

重度子痫前期患者胎盘滋养细胞凋亡现象的研究

目的:分析重度子痫前期患者胎盘滋养细胞凋亡特征,探讨滋养细胞凋亡现象与子痫前期病因及病理生理学之间的关系.方法:采用电镜扫描、原位细胞凋亡标记(TUNEL)及流式细胞仪技术,以正常妊娠妇女胎盘滋养细胞为对照,检测重度子痫前期患者胎盘组织中的滋养细胞凋亡.结果:①电镜下,重度子痫前期患者胎盘滋养细胞的超微结构均存在细胞核形态不规则、核膜固缩、异染色质异常分布、细胞质内线粒体基质变深、嵴模糊或排列紊乱、滋养细胞空泡化等凋亡形态学变化;②TUNEL法检测发现,重度子痫前期患者胎盘组织中存在较多凋亡滋养细胞,而正常胎盘组织中少见凋亡滋养细胞;③正常胎盘滋养细胞流式细胞检测图中凋亡细胞峰(Apo峰)不明显,重度子痫前期患者胎盘滋养细胞的流式细胞检测图中均存在较明显的亚二倍体DNA含量细胞峰(Apo峰).结论:重度子痫前期患者胎盘存在滋养细胞凋亡特征,可能与子痫前期的发生发展密切相关.     

胎盘细胞凋亡和自噬与妊娠高血压疾病

目前妊娠高血压疾病的病因及发病机制未完全明确。近年来,研究发现胎盘细胞凋亡和自噬在妊娠高血压疾病的发病中起重要作用。胎盘细胞凋亡和自噬的变化贯穿妊娠高血压疾病发病的多个方面。胎盘细胞凋亡和自噬失衡,可能为妊娠高血压疾病的病因之一。现就胎盘细胞凋亡和自噬对妊娠高血压疾病发生、发展的影响予以综述。     

妊娠高血压综合征胎盘组织中细胞凋亡的观察

目的: 观察妊娠高血压综合征(妊高征)胎盘组织中的细胞凋亡现象,探讨胎盘细胞凋亡在妊高征发生发展中的作用. 方法: 选取妊高征患者胎盘组织及正常晚孕胎盘组织各16例,用光镜、电镜及TUNEL法观察计数细胞凋亡现象. 结果: 在晚孕胎盘组织中可观察到凋亡细胞,妊高征组细胞凋亡发生率的中位数及四分位数范围为0.37%(0.15%～0.49%),正常对照组为0.12%(0.08%～0.19%). 二者之间有显著性差异 (P<0.05). 结论: 妊高征胎盘组织中细胞凋亡增多,可能在妊高征发生发展过程中有重要作用.     

妊娠期肝内胆汁淤积症患者胎盘细胞凋亡的研究

目的 研究妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)患者胎盘细胞凋亡与胆酸水平的关系,初步探讨ICP患者胎儿预后不良的原因.方法 采用原位末端标记法(TUNEL)检测ICP组和正常妊娠组胎盘细胞凋亡指数,免疫组织化学方法检测两组凋亡基因bax、bcl-2和caspase-3的表达水平,通过对细胞凋亡指数和凋亡相关基因的检测,了解胎盘细胞的凋亡情况,探讨ICP患者发生胎儿预后不良是否与胎盘细胞凋亡有关.结果 ICP组胎盘细胞凋亡率明显高于正常妊娠组(P＜0.05),且促进细胞凋亡基因bax、caspaae-3表达增加,抑制细胞凋亡基因bcl-2表达降低;随着胆酸水平的升高,bax/bcl-2比例升高,细胞凋亡增加.结论 ICP患者存在胎盘细胞过度凋亡现象,并与血清胆酸水平有相关性;胎盘细胞过度凋亡使胎盘功能减退,导致胎儿预后不良.     

妊娠期肝内胆汁淤积症胎盘组织中细胞凋亡及caspase-3的表达

目的探讨妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)胎盘组织中细胞凋亡及caspase-3的表达情况。方法以临产前行剖宫产术终止妊娠的ICP患者为ICP组(20例),同期因骨盆、胎位、社会因素等原因临产前行剖宫产术终止妊娠的健康孕妇为对照组(20例)。采用末端脱氧核苷酸转移酶介导、地高辛标记的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)检测胎盘组织中合体滋养细胞、细胞滋养细胞、蜕膜细胞及绒毛间质细胞的凋亡情况,采用免疫组织化学法检测胎盘组织caspase-3蛋白表达水平。结果 ICP组胎盘组织中各细胞的凋亡率指数、caspase-3蛋白阳性表达率均高于对照组(P<0.05)。结论 ICP胎盘组织存在细胞凋亡以及凋亡相关蛋白表达增多的改变,ICP胎盘功能减退与细胞凋亡密切相关,细胞凋亡在ICP疾病的发生、发展中起重要作用。     

妊娠期糖尿病胎盘细胞凋亡及其与围产结局的关系

目的 :研究胎盘细胞凋亡在妊娠期糖尿病发生及其与临床结局的关系 .方法 :对 4 0例妊娠期糖尿病 (GDM )患者和 4 0例正常对照孕妇的胎盘组织进行检测 ,用DNA缺口原位末端标记 (TUNE)技术检测细胞凋亡 ,电镜观察凋亡细胞的超微结构 ,免疫组织化学方法 (S -P)检测促 (抑 )凋亡基因Bax/Bcl- 2表达水平 .结果 :妊娠期糖尿病组胎盘细胞凋亡指数及Bax、Bcl - 2阳性率、Bax/Bcl- 2的比率均高于对照组 (P <0 0 5 ) ,妊娠期糖尿病组胎盘细胞凋亡指数与孕妇血糖值和新生儿体重呈正相关 ,对照组胎盘细胞凋亡指数与孕妇血糖值和新生儿体重无相关 .结论 :妊娠期糖尿病组和对照组胎盘中均有一定量的细胞凋亡和Bax ,Bcl- 2的表达 ,妊娠期糖尿病组胎盘细胞凋亡明显增加 ,Bax/Bcl- 2的比值增加 .胎盘细胞凋亡及其调节基因的表达间具有一致性 ,妊娠期糖尿病胎盘细胞凋亡增多与不利妊娠结局有关     

妊娠高血压综合征并发症胎盘细胞凋亡的研究

目的 观察妊娠高血压综合征(PIH)并发症患者胎盘细胞凋亡的情况.方法 采用DNA缺口原位标记Tunel s技术.测定50例PIH并发症患者和50例正常妊娠妇女胎盘不同部位细胞凋亡指数,并用电镜的超微结构改变来证实.结果 PIH并发症组胎盘组织绒毛滋养细胞、合体滋养细胞、蜕膜细胞的细胞凋亡指数分别为[6.36 ±2.90%、7.98±4.01%、6.13±3.01%]明显高于对照组[3.46 ±2.48%、5.33±2..76%、4.18±2.35%](t=2.123.t=2.214.t=2.301,P均<0.05),电镜显示PIH并发症患者胎盘滋养细胞与合体滋养细胞均有不同程度的异常形态变化.结论 PIH并发症患者胎盘组织中细胞凋亡增多,可能在PIH并发症的发生发展过程中有重要作用.     

Galectin-3和Bcl-2与胚胎停育研究进展

Galectin-3是半乳糖凝集素家族中的一员,能通过其糖识别域与细胞内糖蛋白、细胞表面分子和细胞外基质蛋白相互作用,参与胚胎着床、胚胎发生和胎盘形成等过程,与妊娠成功建立和维持密切相关。凋亡抑制蛋白Bcl-2与Galectin-3有明显的序列相似性,可能存在共同细胞凋亡通路,在人早孕过程中参与了绒毛滋养层细胞的增殖和分化、子宫内膜蜕膜化的过程,在绒毛的发生、发育、胎盘形成和组织结构改建及功能完善等方面发挥着重要作用。     

TRAIL与胎盘细胞凋亡关系的研究进展

肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体（TNF related apoptosis inducing ligand，TRAIL）是新发现的TNF超家族成员，与FasL和TNFα一样能诱导细胞发生凋亡。细胞凋亡（apoptosis）是多细胞有机体为调控机体发育、维护内环境稳定、由基因控制的细胞主动死亡过程，与机体的正常发育有密切的关系。胎盘是妊娠过程中发展起来的联系母体与胎儿的物质交换器官，对妊娠的维持有着重要作用。细胞增殖、凋亡的平衡是胎盘发挥作用的基础。现将TRAIL与细胞凋亡的研究进展综述如下。     

顺铂对鼠胶质瘤SHG-44细胞的增殖抑制和辐射增敏作用

目的:观察顺铂对鼠胶质瘤SHG-44细胞的抑制及放射增敏作用,并探讨其作用机制。方法:不同浓度紫杉醇(0、0.625μg/ml、1.25μg/ml、2.5μg/ml和5μg/ml)作用于SHG-44细胞,MTT法检测顺铂对SHG-44细胞的增殖抑制作用;克隆形成法检测细胞辐射敏感性变化,流式细胞术检测细胞凋亡百分率变化。结果:顺铂有明显的抑制SHG-44细胞增殖和提高其放射敏感性的作用,顺铂可提高3 Gy、6 Gy照射24 h后SHG-44细胞的凋亡率。结论:顺铂对人胶质瘤SH-44细胞具有杀伤及放射增敏作用。其可能机制是加强射线对肿瘤细胞的诱导凋亡效应,增加其杀伤肿瘤作用。     

胎盘细胞凋亡与妊娠肝内胆汁瘀积症关系的研究

目的 :从胎盘细胞凋亡的表达差异探讨妊娠肝内胆汁瘀积症 (intrahepaticcholestasisofpregnancy ,ICP)围产儿死亡原因。方法 :2 9例妊娠肝内胆汁瘀积症胎盘和 5例正常胎盘 ,分别进行光镜检查、原位细胞凋亡标记实验和 p5 3基因mRNA原位细胞杂交实验。结果 :正常胎盘的细胞凋亡率为 9 11% ,ICP的细胞凋亡率为 2 8 47% ,差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;p5 3基因在ICP胎盘组织中未见阳性表达。结论 :妊娠肝内胆汁瘀积症胎盘组织的细胞凋亡水平明显高于正常胎盘组织 ,ICP围产儿死亡率高的原因可能与其胎盘组织的细胞凋亡水平增加有关 ;ICP胎盘组织的细胞凋亡可能是非 p5 3基因依赖的。     

清胆滋肾汤对ICP大鼠胎盘细胞凋亡调控基因Bax、Bcl-2的影响

目的探讨清胆滋肾汤对雌激素诱导的妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)大鼠胎盘细胞凋亡调控基因Bax、Bc l-2表达的影响。方法运用苯甲酸雌二醇(EB)诱导大鼠ICP,将60只雌性大鼠随机分为正常组、模型组、清胆滋肾汤高、中、低剂量组和熊去氧胆酸(UDCA)组。运用免疫组织化学法检测各组大鼠胎盘细胞凋亡调控基因Bax、Bc l-2的表达。结果模型组Bax的表达明显高于正常组(P<0.01),各治疗组可不同程度地下调Bax的表达(P<0.05或P<0.01);模型组Bc l-2的表达明显低于正常组(P<0.01),各治疗组均能极显著地上调Bc l-2的表达(P<0.01)。结论清胆滋肾汤可能通过抑制ICP孕鼠胎盘细胞的过度凋亡来发挥其治疗作用。     

蛋白芯片技术研究吲哚-3-原醇抗肝纤维化的分子机制

目的:利用高通量蛋白芯片技术,观察吲哚-3-原醇(I3C)对活化肝星状细胞(HSCs)内多种蛋白表达的影响,初步探讨I3C抗肝纤维化作用的分子机制。方法:培养永生化肝星状细胞株HSC-T6,该细胞具有活化的HSC表型,用100μmol/L的I3C处理细胞24h。高通量蛋白芯片技术观察HSC中与细胞周期、DNA损伤修复、细胞凋亡、骨架蛋白和细胞外基质等相关的主要蛋白的表达变化,分析变化达2倍以上的蛋白分子。结果:I3C可抑制炎症过程,减少HSC活化;阻滞细胞周期的进展,抑制HSC增殖;抑制NF-"B相关信号通路,促进HSC凋亡;调节细胞骨架和细胞外基质的合成与分解,减少肝脏胶原沉积。结论:I3C可通过多途径发挥其抗肝纤维化作用。     

结核菌素对肝癌和肺癌肿瘤细胞生长和凋亡的调控作用

目的探讨结核菌素对肝癌和肺癌肿瘤细胞生长和凋亡的调控作用。方法制备不同浓度的结核菌上清液(TB-SN),分别与肿瘤细胞株HePG2(肝癌)和A549(肺癌)进行反应。应用特异性荧光探针LIVE/DEAD Viability/Cytotoxicity试剂盒检测肿瘤细胞的生长情况,应用Vybrant凋亡试剂盒检测肿瘤细胞的凋亡情况。结果与5%TB-SN反应5 d后,HePG2和A549细胞凋亡显著增加;与TB-SN反应后,HePG2和A549细胞生长受到抑制。结论结核菌素可以介导肝癌和肺癌肿瘤细胞的凋亡,并抑制肿瘤细胞的生长。     

PD-L2在人胎盘间充质干细胞上的表达及其生物学意义

目的探讨PD-L2在人胎盘间充质干细胞黏附和迁移过程中的生物学意义。方法应用消化法分离、培养人胎盘间充质干细胞,体外扩增培养3代后用于实验;RT-PCR检测PD-L2在人胎盘间充质干细胞上的表达;应用化学合成的PD-L2 siRNA阻断PD-L2在人胎盘间充质干细胞上的表达;细胞计数法检测人胎盘间充质干细胞的黏附能力;Transwell法检测人胎盘间充质干细胞的迁移能力。结果人胎盘间充质干细胞高表达PD-L2分子,PD-L2 siRNA能有效阻断人胎盘间充质干细胞对PD-L2的表达;细胞计数结果显示,接种后0.5 h阻断组人胎盘间充质干细胞的黏附率与正常对照组相比无显著升高,在接种后1 h和3 h,阻断组人胎盘间充质干细胞的黏附率均明显高于正常对照组;Transwell检测结果显示,与正常对照组相比,在DMEM-LG、含SDF-1α的DMEM-LG、人胎盘间充质干细胞培养上清三种培养条件下,阻断组细胞迁移率均显著降低。结论 PD-L2表达在人胎盘间充质干细胞,且在人胎盘间充质干细胞的黏附和迁移中发挥重要作用。     

BRS-3激活对人支气管上皮细胞凋亡的影响

目的:观察BRS-3激活对人支气管上皮细胞凋亡的影响,以探讨BRS-3在气道功能稳态中的生物学作用,进一步拓展对神经源性气道高反应性机制的认识。方法:人支气管上皮细胞常规培养,流式细胞仪检测细胞凋亡。结果:臭氧应激促进支气管上皮细胞凋亡,BRS-3激活可抑制臭氧应激诱导的细胞凋亡。结论:BRS-3激活抑制细胞凋亡,提示BRS-3激活维持应激状态下支气管上皮细胞功能稳态,可能在哮喘等气道高反应性疾病中起保护作用。     

培养基介导的旁观者细胞凋亡的研究进展

国内外很多肿瘤研究都观察到旁观者效应诱导的细胞凋亡的存在,且细胞凋亡是旁观者效应重要的检测终点,对肿瘤治疗的疗效有着重要影响。旁观者效应能引起细胞死亡(包括凋亡)、细胞周期阻滞、基因表达、染色体畸变等生物学变化,有研究结果表明,多种信号转导途径参与了这个过程,包括氧化应激、缝隙连接介导的细胞间通讯。但其确切机制尚不明确。     

Study on Taxol in Inhibiting Human Leukemia Cell Proliferation andInducing Apoptosis

Objective: To explore the effects of Taxol in inhibiting human leukemia k562 cell proliferation and inducing apoptosis in vitro. Methods: Human leukemia K562 cells were treated with Taxol of different concentrations for 12-72 hrs. Cell proliferation was evaluated by MTT assay and morphological changes of apoptosis were examined by microscopy. Cell apoptosis was determined by flow cytometry (FCM) and DNA gel electrophoresis. Results: Growth of K562 cells was inhibited by Taxol with an IC50 value of 0. 84μg/ml. Typical nuclear condensation and apoptosis bodies were observed as early as 24 hrs after a 0.5μg/ml Taxol treatment; Apoptotic rate of the Taxol-treated K562 cells increased from 3.7% to 24.0% in 24 hrs. No DNA ladder was observed by DNA gel electrophoresis. Conclusion: Taxol could inhibit K562 cell growth and induce apoptosis in vitro.     

重组免疫毒素抗c-Met/PE38KDEL对人大肠癌细胞株增殖及凋亡的影响

目的大肠癌是常见的恶性胃肠道肿瘤,近年来发病率有上升趋势。因此亟需探索新的治疗方法。文中观察重组免疫毒素(immunotoxin,IT)抗c-Met/PE38KDEL对大肠癌细胞的增殖抑制作用,为大肠癌的导向治疗奠定基础。方法分别用不同浓度IT处理大肠癌细胞系Colo205及SW480后,CCK-8试剂盒检测24、48 h细胞增殖抑制率;[3H]-亮氨酸掺入法测定IT对细胞5、24 h蛋白合成抑制的影响;caspase试剂盒检测细胞caspase-3、caspase-8活性变化。结果经不同浓度IT作用后,2株大肠癌细胞的增殖率及蛋白合成都有明显的降低,且呈时间和剂量依赖性,当IT浓度为10ng/ml与100ng/ml时,对2株细胞的增殖率及蛋白合成抑制作用较强(P<0.01);caspase活性测定显示,与对照组相比,IT浓度为100 ng/ml时2株细胞caspase-3与caspase-8都有显著增高。结论重组IT抗c-Met/PE 38KDEL对大肠癌细胞株有显著的增殖抑制及诱导凋亡的作用,为大肠癌的靶向治疗提供实验依据。