骨肉瘤基因治疗及载体系统研究现状

近年来,有关骨肉瘤基因治疗的研究在基因治疗方法、基因载体、载体导入途径等方面取得了较大进展。骨肉瘤的基因治疗主要有免疫基因治疗、反义基因治疗、抑基因治疗、自杀基因治疗及联合基因治疗等。基因载体包括病毒载体和非病毒载体。     

骨肉瘤基因治疗研究进展

随着骨肉瘤发生机制研究不断深入,骨肉瘤基因治疗技术得到很大发展.目前常用的骨肉瘤基因治疗策略有反义基因治疗、抑癌基因治疗、免疫基因治疗、自杀基因治疗、抗血管生成基因治疗、联合基因治疗等方法.该文就骨肉瘤基因治疗研究进展作一综述.     

稳定表达野生型p53基因人骨肉瘤细胞株的建立与鉴定

目的建立稳定表达外源性野生型p53基因的人骨肉瘤细胞株(U-2 OS),为进一步研究野生型p53基因在骨肉瘤自杀基因治疗中的协同作用提供体外实验模型建立与鉴定的方法。方法利用分子生物学基因克隆技术将人类野生型p53基因cDNA片段插入到表达载体pIRES-EGFP中,得到重组质粒pIRES-EGFP-p53,并通过PCR、酶切电泳等方法进行质粒鉴定;然后用该重组质粒转化大肠杆菌BL21细胞,转化菌落经PCR扩增后,将提取的质粒DNA用脂质体介导的转染方法导入U-2 OS细胞中,经荧光显微镜下人工筛选得到稳定转染的骨肉瘤细胞系。结果成功地构建出包含有野生型p53 cDNA片段的重组质粒pIRES-EGFP-p53,通过PCR、酶切电泳等方法鉴定质粒大小和位点均符合实验设计;并将该重组质粒成功导入人骨肉瘤细胞株U-2 OS细胞中,经荧光显微镜下人工筛选得到稳定转染的骨肉瘤细胞系,命名为U-2-p53 OS。转染后的骨肉瘤细胞出现散在的凋亡现象。结论利用基因转染技术,建立了稳定表达外源性野生型p53基因的人骨肉瘤U-2-p53 OS细胞系,为进一步研究野生型p53基因在骨肉瘤自杀基因治疗中的协同作用奠定了基础。     

TK基因治疗肿瘤的研究现状

自杀基因治疗法是肿瘤基因治疗中的重要方法。该法采用药物敏感基因转染肿瘤细胞，导致肿瘤细胞死亡，友；达刍杀伤肿瘤细胞的目的。目前研究最多的自杀基因是TK基因。本文就TK基因在肿瘤基因治疗，的研究现状作一简单终述。TK基因治疗肿瘤具有广阔的前景，随着研究的深入，TK基因治疗将成为人类攻克肿瘤的有效方法。     

自杀基因疗法治疗黑色素瘤的研究进展

综述了自杀基因疗法的种类及作用机制,以及自杀基因联合疗法治疗黑色素瘤的研究现状.目前治疗黑色素瘤的自杀基因疗法主要有双自杀基因治疗、自杀基因疗法联合免疫治疗、自杀基因联合细胞因子治疗以及中药联合自杀基因治疗,中药联合自杀基因疗法治疗黑色素瘤展示着较好的应用前景.     

胃肿瘤基因治疗研究

胃癌的基因治疗作为一种新的治疗手段,近年倍受重视,在动物实验中取得了可喜的成果。胃癌发病的分子基础是设计基因治疗靶点的依据。胃癌基因治疗的研究主要集中在抑癌基因基因治疗、“自杀”基因基因治疗、反义基因治疗、核酶基因转染治疗、基因免疫治疗等。本文就这些方面的进展做一概述。     

骨肉瘤基因治疗研究进展

骨肉瘤是一种临床常见恶性骨肿瘤,约占所有骨肿瘤的20%。其恶性程度高,好发于青少年,易复发和转移,预后较差。随着分子生物学理论和技术水平的提高,尤其是肿瘤分子生物学的发展,骨肉瘤的发生机制在分子水平有了一定的认识。目前,人们针对骨肉瘤及其肺转移已研究开展了免疫基因治疗、反义基因治疗、抑癌基因治疗、自杀基因治疗及其联合基因治疗或联合其他方法的治疗等诸多基辅前景的肿瘤基因治疗方法,现综述如下。一、基因治疗方法1.免疫基因治疗:随着分子免疫学的发展及对肿瘤免疫认识的深入,人们认识到肿瘤细胞的免疫原性低,不能给机体免疫…     

原发性肝癌的自杀基因治疗

原发性肝癌恶性程度高 ,预后差 ,多数病例发现时已届晚期而无法行手术切除。随着分子生物学的飞速发展 ,肝癌的基因治疗有望成为肝癌综合治疗中一个重要的方面 ,治疗策略有免疫基因治疗、自杀基因治疗、基因置换或补充、反义核苷酸技术等[1] 。其中自杀基因是近年来研究的热点之一。1　自杀基因的作用机理病毒和细菌等原核生物含有一类基因 ,其编码的酶能将原来无毒的药物前体转化为具有细胞毒性的代谢物而杀伤宿主细胞 ,这类基因称为“自杀基因”。将这类基因用基因工程技术构建在一定的表达载体上 ,并导入肿瘤细胞 ,使其对相应的药物前体…     

自杀基因联合中医药疗法治疗肿瘤的设想

自杀基因疗法是一种具有良好应用前景的肿瘤治疗新措施。但如何有效提高疗效是目前仍须解决的关键性问题。由于免疫机制在自杀基因疗法旁杀伤效应中的重要作用，激活荷瘤机体的免疫功能，改善自杀基因抗肿瘤作用的炎症免疫微环境，是提高肿瘤自杀基因疗法疗效的主要策略。中医中药在调节机体免疫状态方面具有肯定的作用，与其他方法比较具有明显优势。因而，将自杀基因疗法与中医中药联合应用，有可能起到提高肿瘤自杀基因疗法疗效，防止肿瘤复发的作用。提出了自杀基因联合中医药疗法治疗肿瘤的新设想，为肿瘤基因治疗提供了一种新的思路和模式。     

应用反义转化生长因子基因进行骨肉瘤基因治疗的研究

目的探讨反义转化生长因子β1基因治疗骨肉瘤的价值。方法用转基因技术将反义转化生长因子基因导入骨肉瘤细胞LM-8,构建转基因细胞株。用骨肉瘤细胞株LM8皮下注射C3H雄性小鼠建立小鼠骨肉瘤移植瘤模型。应用裸反义转化生长因子基因、灭活的转基因骨肉瘤细胞分原位和异位进行治疗。结果两种治疗措施都可表现出抑瘤作用,以灭活的转基因骨肉瘤细胞治疗效果最佳,原位治疗效果优于异位治疗。结论反义转化生长因子基因对小鼠移植性骨肉瘤有较好的实验治疗效果,为人骨肉瘤进行反义转化生长因子基因治疗提供了一定的依据。     

脑胶质瘤自杀基因疗法研究进展

自杀基因疗法是近年来备受关注的一种治疗胶质瘤的方法，可分为单自杀基因疗法和融合基因疗法．本对这两种自杀基因疗法的原理及其在治疗胶质瘤中的运用进行综述，并介绍了其临床运用和进一步发展方向．胶质瘤(gnoma)是中枢神经系统最常见的恶性肿瘤，其传统治疗以手术为主，辅以放疗、化疗等辅助治疗，疗效欠佳．基因治疗(gene therapy)作为治疗胶质瘤的一种新的辅助手段，逐渐受到人们的重视和关注．自杀基因疗法(suicide genetherapy)是众多基因治疗策略中疗效最明显的一种，也是最有前途的治疗策略之一.本就近年来胶质瘤自杀基因疗法研究进展作一综述。     

肝癌的基因治疗近况

肝癌是一种恶性程度极高及预后极差的恶性肿瘤 ,尽管目前肝癌的治疗方法较多 ,但仍未能从根本上改善病人的预后。随着肿瘤分子生物学和免疫学理论及技术的发展 ,在一定程度上阐明了肝癌的发生、发展及演变过程。研究表明 ,肝癌是由多基因突变引起的 ,故用基因工程的手段进行肝癌的基因治疗 ,是目前医学界研究的热点。现有关文献综述如下。1　自杀基因治疗　　自杀基因治疗就是通过基因转染技术使目的基因选择性表达在肿瘤细胞内 ,方能准确地杀伤肿瘤的细胞 ,保护正常组织 ,减少毒副作用。目前已发现和克隆出多种自杀基因 ,其中研究最为深入…     

CD-UPRT融合自杀基因治疗肺癌的研究进程

随着肿瘤基因研究,广泛运用自杀基因（suicide gene）用于各种恶性肿瘤治疗,CD（cytosine deaminase）、TK（thymidine kinase）等自杀基因治疗人类多种恶性肿瘤已取得了令人瞩目的成绩。     

融合自杀基因对骨肉瘤细胞作用的实验研究

目的观察单纯疱疹病毒-胸苷激酶/胞嘧啶脱氨酶融合自杀基因（HSV TK/CD）对骨肉瘤细胞增殖的影响。方法将含TK/CD的重组腺病毒载体感染人骨肉瘤细胞系MG 63细胞,测定感染效率后,分别给予不同浓度的前体药物和不同感染复数的自杀基因重组腺病毒,计算瘤细胞增殖抑制率,MTT法测定细胞存活率,并用流式细胞术和Hochest 33342 染色法分析杀伤机制。结果含自杀基因的重组腺病毒成功感染MG 63细胞;不同感染复数和不同前体药物浓度下,融合自杀基因系统对瘤细胞的杀伤作用明显强于单基因和双基因相加的作用 (P＜0.05);其杀伤机制为致细胞坏死和细胞凋亡。结论融合自杀基因HSV TK/CD对骨肉瘤细胞系MG 63细胞的生长有明显的抑制作用。     

骨肉瘤基因治疗新进展

本文回顾了近年来骨肉瘤基因治疗的一些新进展,详细全面的阐述了基因治疗的多种方法,介绍了多个骨肉瘤基因治疗的试验研究和临床试验结果,提出了基因治疗已经成为骨肉瘤治疗中新型的、不可取代以及有良好前景治疗方式的新观念。     

肝癌细胞的基因修饰治疗研究进展

肝癌的基因治疗是肿瘤基因治疗的研究热点之一,其治疗方案包括:肝癌的抑癌基因治疗,肝癌的反义基因治疗,肝癌的自杀基因治疗和肝癌的免疫基因治疗。利用导入肝癌细胞的各种基因干扰或破坏肝癌细胞的代谢,从而杀死肝癌细胞,这称为肝癌细胞的基因修饰,本文就这方面研究进展作一综述。一、抑癌基因抑癌基因包括Rb、P53、P16、P21、myc、nm23等。人们在抑癌基因疗法研究中开展了两方面工作:一是利用抑癌基因疗法治疗已发生的肿瘤;二     

肿瘤基因治疗的研究进展

基因治疗是指将外源正常基因通过基因转移技术导入靶细胞,纠正或补偿因基因缺陷和异常引起的疾病,以达到治疗目的的一种生物治疗方法。本文从自杀基因、基因沉默、抑癌基因、免疫基因、抑制血管生成基因等几方面综述了近几年肿瘤基因治疗的研究和发展现状。自杀基因治疗系统包括HSV-tkGCV系统、H19 RNA、hTERT等,HSV-tkGCV系统是自杀基因治疗系统研究最多的一种,TK基因是药敏基因,肿瘤细胞转染该基因后,对前体药物丙氧鸟苷(GCV)或无环鸟苷(ACV)变得敏感而能被杀死。RNA干扰是基因沉默治疗的主要方式,通过沉默肿瘤相关基因IDO2、DUSP6、IGF1R、ORAOV1等基因可以明显抑制肿瘤生长。抑癌基因激活或过表达可以抑制肿瘤生长,p53和PTEN是两个最有意义的抑癌基因,重组腺病毒p53和PTEN可以显著抑制肿瘤生长。免疫基因治疗是将细胞因子或共刺激分子基因导入肿瘤细胞或体细胞内,通过激发或调动机体免疫功能来控制或杀伤肿瘤细胞,常用的免疫效应细胞有TIL、CTL、LAK、NK等,可供选择的目的基因有肿瘤坏死因子、白介素、集落刺激因子、干扰素、趋化因子等。抑制血管生成基因可以通过抑制肿瘤新生血管的生成,来阻止肿瘤生长和侵袭,VEGF-Trap、PEDF、ES通过腺病毒导入肿瘤可以显著抑制肿瘤生长。目前肿瘤基因治疗在特异性、安全性和靶向性方面依然存在亟需解决的问题。      

逆转录病毒介导的HSV-TK基因对人骨肉瘤细胞的杀伤作用

目的 探讨骨肉瘤基因治疗的可行性。方法 采用逆转录病毒介导的HSV-TK基因转移和GCV治疗的方法进行研究。结果 成功构建含HyTK基因的重组逆转录病毒载体DORHyTK;采用DOTAP将其转入PA317细胞中进行包装,筛选,并进行病毒滴度测定。收获病毒上清体外感染骨肉瘤细胞株OS732和SAOS-2。分别用PCR和RNA斑点杂交的方法证明假病毒中不含有复制活性病毒,HSV-TK基因已整合到宿主细胞基因组中,并获得表达,MTT比色法测定结果显示GCV对OS732TK和SAOS-2TK细胞均有明显的杀伤作用。且前者强于后者,旁观者效应在高细胞密度接种条件下强于低细胞密度,在SAOS-2细胞中的作用强于OS732。结论 HSV-TK/GCV基因治疗系统可为骨肉瘤的治疗提供新途径。     

肝癌自杀基因治疗最新进展

自杀基因治疗是指利用基因工程技术将某些细菌或病毒基因(目的基因)与载体相结合,并导入肿瘤细胞中,在一定条件下目的基因持续高效表达,从而杀伤肿瘤细胞,所以又称为“病毒导向酶解药物前体疗法。这些病毒或细菌的基因表达产物(酶)能导致受体细胞的死亡,因此将这些基因称为自杀基因。本文就肝癌自杀基因治疗的最新进展作一综述。     

自杀基因及其旁观者效应治疗肿瘤研究进展

近年来 ,肿瘤基因治疗已得到长足的发展。其中国内外对自杀基因疗法研究较多 ,研究发现自杀基因还有一种独特的效应 ,称之为旁观者效应。1　自杀基因病毒和细菌等原核生物含有一类基因 ,其编码的酶能将原来无毒的或微毒的药物前体转化具有细胞毒性的代谢物而杀伤宿主细胞 ,这类