RhoC基因在肝细胞癌中的表达及其意义

目的探讨RhoC基因与肝细胞癌 (HCC)的发生发展和侵袭转移的关系。方法采用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)在半定量水平检测 2 5例HCC及其相对应的癌旁肝组织和 4例门静脉主干癌栓或肝外转移灶中RhoCmRNA的表达 ;同时采用PCR产物单链构象多态性 (PCR SS CP)银染法检测RhoC基因的突变情况。结果本组 2 5例HCC中RhoCmRNA的表达较癌旁肝组织高 ,其光密度比值分别为 1 8± 1 1和 1 0± 0 7,P <0 0 1,差异有显著意义 ;4例门静脉主干癌栓或肝外转移灶中的RhoCmRNA的表达较相对应的肝内肝癌病灶高 ,其光密度比值分别为 3 3± 0 5和 2 0± 0 7,P <0 0 1,差异有显著意义 ;将 2 5例HCC分为RhoC基因过表达组和高表达组后发现 ,过表达组中肝癌细胞分化较差 ,静脉受侵严重 ,且以结节性肝癌居多 (P <0 0 5 ) ;而 2 5例HCC经PCR SSCP银染法分析未发现异常泳动条带。结论RhoC基因与HCC的发生发展和侵袭转移密切相关 ,且可能是通过表达升高而非突变发挥作用。     

KAI-1基因在肝细胞癌中的表达及其临床意义

为研究KAI-1在肝细胞癌（HCC）中的表达及其与临床病理特征的关系，笔者对48例HCC手术切除的新鲜标本和10例正常肝组织经常规方法应用SABC免疫组化法，以KAI-1单克隆抗体对切片进行染色。检测KAI-1在HCC中的表达及其与临床病理特征的关系。结果显示 KAI-1在HCC癌组织中的阳性率为58.33%，明显低于癌旁及正常肝组织(P<0.05)，KAI-1在有转移与无转移HCC中的评分分别是1.76±1.51和2.90±1.82，前者明显低于后者(P<0.05)，而与其他临床病理特征无显著关系。提示KAI-1在HCC中的表达明显降低，且转移者明显低于不伴转移者。提示KAI-1可能抑制了HCC的发生发展和转移。     

基因NEK9在肝细胞癌组织中的表达效应及其临床意义

目的 研究基因NEK9在肝细胞癌组织中的表达效应,并探讨其表达量与其临床病理参数的关系。方法 收集从2010~2011年我院60例原发性肝细胞癌患者肝癌组织及其配对癌旁组织,并统计分析其临床病理资料;同时采用荧光定量PCR、免疫组化方法检测肝癌组织和癌旁组织中NEK9基因和蛋白的表达水平,分析NEK9的表达量与其相对应临床病理参数之间的关系。结果 相对于癌旁组织,肝细胞癌组织中基因NEK9的表达量在m RNA水平显著高表达(25/30)(P0.05),在蛋白质水平亦呈显著高表达(65%及21.7%)(P0.05);癌组织中NEK9的表达水平与TNM分期、转移和复发等临床病理参数有相关性(P0.05);癌组织中NEK9高表达组患者的术后无瘤生存时间较低表达组明显缩短(P0.05)。结论 原发性肝细胞癌组织中NEK9的高表达与肿瘤大小、TNM分期、转移和复发密切相关,并有可能成为预测肝癌患者预后的生物学标志物。     

TUSC3基因在肝细胞癌中的表达及其临床意义

目的:探讨TUSC3基因在肝细胞癌(HCC)中的表达及临床意义。方法:收集92例行肝切除术且术后病理证实为HCC患者的石蜡组织标本及其临床病理资料,用免疫组化法检测TUSC3在HCC组织及相对应癌旁组织中的表达,分析TUSC3的表达情况与HCC患者临床病理因素的关系;用qRT-PCR及Western blot方法检测20对冷冻HCC及癌旁组织中TUSC3 mRNA与蛋白的表达。结果:92例石蜡组织标本的免疫组化结果显示,56例(60.9%)HCC组织中TUSC3表达下调,癌旁组织中33例(35.9%)TUSC3表达下调,差异有统计学意义(P0.001);TUSC3在HCC组织中的低表达与肿瘤Edmondson分级(P=0.008)、TNM分期(P=0.031)、肿瘤直径有关(P=0.0 2 0)。20对新鲜标本的qRT-PCR与Western blot检测结果显示,肝癌组织中TUSC3的mRNA[(0.99±1.46)vs.(1.96±2.18)]与蛋白[(0.49±0.35)vs.(1.04±0.43)]相对表达量均明显低于癌旁组织(均P0.05)。结论:TUSC3基因在HCC中的表达下调,其低表达可能与HCC的恶性进程密切相关。     

MACC1和C-MET蛋白在肝细胞癌组织中的表达研究

目的 探讨MACC1和C-MET蛋白在肝细胞癌组织中的表达及意义.方法 采用免疫组化和Western blot检测51例肝细胞癌组织、相应癌旁组织和13例正常肝脏组织中MACC1和C-MET蛋白的表达情况,同时对患者进行随访,并分析患者生存率与临床病理资料间的关系.结果 MACC1和C-MET蛋白在肝细胞癌组织中总的阳性表达率分别为80.4％和76.5％,相对表达量分别为0.645±0.047和0.504±0.023,均明显高于相应癌旁组织及正常肝脏组织(分别F=173.308,252.817,均P=0.000),且两者表达呈正相关(r=0.870,P=0.001);MACC1和C-MET蛋白表达阳性患者的3年生存率明显低于阴性患者(分别x2 =3.934,4.439,均P＜0.05),两者的阳性率及表达量均与肝细胞癌的TNM分期、门脉癌栓、病理分型及包膜侵犯显著相关(P＜0.05). 结论 MACC1和C-MET的异常表达与肝细胞癌的恶性进展相关,MACC1有作为进展期肝癌预后的独立分子指标和肝癌治疗新靶点的潜在价值.     

趋化因子VCC-1在肝细胞癌中的表达及其意义

目的 研究趋化因子VCC-1在肝细胞癌中的表达及其临床意义.方法 采用RT-PCR法检测8种肝细胞癌细胞株、10例正常肝脏组织标本、42例肝癌组织及癌旁组织中的VCC-1的mRNA表达情况,并结合临床资料探讨VCC-1的临床意义.结果 肝细胞癌细胞株中,SUN398的VCC-1表达量最高,Hep3B和Huh7几乎不表达,SUN387、SUN449、SUN423、HepG2、PLC5的表达介于两者之间.42例肝癌患者标本中,癌组织及癌旁组织同时存在表达,癌组织高于癌旁组织26例(61％,14.9±7.6倍),癌旁组织高于癌组织16例(39％,6.9±5.4倍).癌组织表达上调(P＜0.01).VCC-1的表达水平与肿瘤分化程度、直径有关(P＜0.05).在10例正常肝脏标本中,8例无表达,2例微表达,其表达水平低于癌细胞株、肝癌组织及癌旁组织(P＜0.01),而复发的3例标本均有癌组织高表达(20.1±2.3倍).有癌栓的8例标本中,5例出现癌组织VCC-1高表达(17.3±4.5倍),3例低表达.结论 VCC-1表达升高可能与肝细胞癌的发生发展有关,并有可能成为肝细胞癌的治疗靶点.     

BC047440基因在肝细胞癌中的表达及其意义

目的:探讨肝癌相关的新基因BC047440在肝细胞癌(HCC)中的表达及其病理学意义。方法：采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)半定量检测36例HCC及其相应的癌旁肝组织中BC047440 mRNA的表达，并将该基因在HCC中的表达分为过高表达组及较高表达组，分析其与肿瘤病理变化的关系。〖KG(*8〗结果：36例HCC中BC047440基因mRNA的表达较癌旁肝组织高,其平均光密度比值分别为0.2594±0.0928和0.0942±0.0443,差异有极显著性意义（P<0.01）;过高表达组与较高表达组相比较，前者肝癌直径较大，门静脉受侵较严重，差异有显著性（P<0.05）。结论：BC047440基因与HCC的发生、发展和侵袭转移有关。     

nm23-H1基因mRNA在人肝细胞癌中的表达

目的　研究人肝细胞癌中肿瘤转移抑制基因ｎｍ２３Ｈ１ 的ｍＲＮＡ表达状况,并探讨其表达水平与肿瘤各项临床病理指标间的相关性。方法　应用半定量ＲＴＰＣＲ 方法检测分析人肝细胞癌组织、相应癌旁肝组织中ｎｍ２３Ｈ１ 的ｍＲＮＡ表达。结果　１５ 例肝癌及癌旁肝组织ＲＴＰＣＲ结果均为阳性,未见ｎｍ２３Ｈ１ 基因表达缺失或较大变异;肝癌组织中ｎｍ２３Ｈ１ ｍＲＮＡ表达水平明显高于相应癌旁组织（ Ｐ＝ ０－０３５）;ＡＦＰ阳性组ｎｍ２３Ｈ１ ｍＲＮＡ表达水平明显高于ＡＦＰ阴性组（ Ｐ＝０－００５） 。结论　人肝细胞癌中ｎｍ２３Ｈ１ 基因ｍＲＮＡ的异常表达可能与肿瘤的恶性生物学特征密切相关。     

抑癌基因PLAGL1在人肝细胞癌中的表达及其意义

目的 探讨抑癌基因PLAGL1在人肝细胞癌和癌旁组织中的表达及其意义.方法 随机选取肝细胞癌(HCC)30例和远离癌组织的癌旁组织30例,免疫组织化学分析PLAGL1蛋白表达,分析其意义.培养正常肝细胞株L02和肝癌细胞株HepG2细胞,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测其PLAGL1 mRNA表达水平.探讨与肝癌细胞组织中PLAGL1蛋白表达相关性.结果 PLAGL1蛋白在癌旁组织中表达明显强于肝细胞癌组织,2例(7%)肝细胞癌组织中PLAGL1表达成阳性,27例(90%)癌旁组织中表达成阳性,两组之间PLAGL1的表达水平差异有统计学意义(χ2=38.44,P<0.05).RT-PCR结果显示PLAGL1 mRNA在L02细胞中明显高于HepG2细胞.结论 PLAGL1蛋白的表达下调可能与肝细胞癌的发生和发展相关,PLAGL1蛋白表达下降与PLAGL1 mRNA下调相平行.     

环氧合酶-2表达上调与人肝细胞癌新生血管生成的关系

目的探讨环氧合酶-2(COX-2)表达上调与人肝细胞癌(HCC)新生血管生成的关系。方法采用免疫组化法和逆转录-聚合酶链反应法检测8 0例肝癌组织中COX-2,VEGF,bFGF,Ang-2和CD 3 4的表达情况;用W eidner分析法计算CD 3 4标记的平均微血管密度(MVD)。结果COX-2,VEGF,bFGF和Ang-2在HCC中表达率分别为7 5.0%,6 2.5 0%,6 0.0%和6 1.2 5%。VEGF,bFGF和Ang-2在COX-2强阳性组的免疫染色积分分别是5.9 8±1.1 6,4.5 7±0.2 6和5.8 7±0.1 2;而在COX-2中弱阳性组的积分分别是3.3 0±0.2 2,2.6 1±0.1 6和2.6 3±0.1 3;VEGF,bFGF和Ang-2在COX-2强阳性组的表达率分别是1 0 0.0%(9 5/9 5),9 4.2 9%(3 3/3 5)和9 7.1 4%(3 4/3 5),而在中弱阳性组分别是6 0.0%(1 5/2 5),6 0.0%(1 5/2 5)和6 0.0%(1 5/2 5)。两组的新生血管生成差异有显著性(P<0.0 1);COX-2与VEGF,bFGF和Ang-2表达呈明显正相关性(r分别为0.8 5 7,0.706,0.9 0 1;P分别<0.0 1)。MVD在COX-2强阳性组和中弱阳性组分别为7 3.1 8±1 2.4 3和33.42±7.52(P<0.0 1),COX-2与MVD呈正相关(r=0.8 1 2,P<0.0 1)。结论COX-2高表达与HCC血管生成密切相关。     

乳腺钙化组织中骨桥蛋白的表达及其临床意义

目的 检测骨桥蛋白（osteopontin protein,OPN）mRNA在含钙化灶乳腺组织中的表达,及其在乳腺癌转移发生发展中的意义.方法 采用RT-PCR法检测128例乳腺病变组织及相应癌旁乳腺组织和9例乳癌转移淋巴结中骨桥蛋白mRNA的表达.结果 骨桥蛋白mRNA表达在含钙化灶乳腺癌组织及转移淋巴结组织中表达最高,良性钙化灶乳腺组织次之,而在癌旁乳腺组织及良性无钙化病变组织中表达最低,差异有显著意义（P＜0.05）.结论 骨桥蛋白的表达与乳腺癌组织钙化有关,并可能与乳腺癌的发生有关,检测其表达水平,可望能指导临床治疗,评判患者预后.     

联合检测多基因在乳腺癌组织中的表达及其临床意义

乳腺癌是女性中最常见的恶性肿瘤，在全球范围内其发病率有逐渐增高的趋势。在我国发病率也逐年增高。目前，对乳腺癌有了进一步的认识，治疗方法也日趋完善。但是目前对乳腺癌的易患人群(high-risk patient with breast canser)的研究却重视不够。只有加强对乳腺癌易患人群的研究，降低这类人群患乳腺癌的风险，才能降低乳腺癌发病率，真正做到预防为主。     

肝细胞凋亡与肝储备功能的关系

摘要：目的:探讨肝细胞凋亡对评价肝储备功能的意义。方法:54例肝切除手术患者，包括（1）对照组：肝血管瘤10例；（2）肝病组：肝癌32例和肝内胆管结石12例，肝病组中肝硬化24例（肝硬化组），无肝硬化20例（非肝硬化组）。术中取肝组织检测肝硬化和细胞凋亡。依据细胞凋亡指数（AI）在肝硬化组总体均数的95％可信区间下限值分2组： AI<0.0381组和AI≥0.0381组。分析AI与肝硬化和术后肝功能恢复情况的关系。结果:肝病组AI明显高于对照组（P=0.000）。肝病组中肝硬化组AI(0.046±0.022)显著高于非肝硬化组(0.026±0.021)（P<0.05）。AI预测术后肝功能恢复情况的符合率（准确度）为79.55%，Child分级的符合率为59.09%，差异有显著性（P=0.0194及P=0.0285）。结论:肝细胞AI可作为反映肝功能损害的一个敏感指标；检测肝细胞凋亡水平较可靠地反映肝功能变化和储备能力。     

9 Survivin反义寡核苷酸对人肝癌细胞的抑制作用

目的:探讨survivin反义寡核苷酸（ASODN）对人肝癌细胞HepG2的抑制作用。方法:采用免疫组织化学法检测肝细胞癌（HCC）组织中survivin的表达。采用脂质体介导survivin ASODN体外转染人肝癌细胞株HepG2，Western blot检测细胞survivin蛋白的表达，FCM检测细胞的凋亡率，观察细胞在软琼脂中的集落形成能力。建立人肝癌裸鼠皮下移植瘤模型，观察survivin ASODN的体内抑癌作用。 结果:（1）肝癌组织中survivin表达阳性率为75.8％(25/33)，明显高于癌旁组织和正常肝组织(P<0.01);（2）survivin ASODN体外转染可明显下调HepG2细胞survivin蛋白表达，ASODN组HepG2细胞凋亡率明显高于空白对照组和SODN组(P<0.01)，ASODN组HepG2细胞在软琼脂中形成的集落数目明显少于空白对照组和SODN组(P<0.01);（3）ASODN组瘤体生长速度较空白对照组和SODN组明显减慢(P<0.01)，ASODN组瘤体重量较空白对照组和SODN组明显减轻(P<0.05)。结论:Survivin在HCC组织中高表达;survivin ASODN可以诱导HepG2细胞凋亡，在体外实验和动物实验中对HepG2细胞生长都有抑制作用。     

难控性甲状腺功能亢进症围手术期的处理

目的探讨难控性甲状腺功能亢进症（甲亢）围手术期的处理方法,降低严重并发症的发生。方法回顾分析经药物治疗效果欠佳甚至甲亢难以控制而接受手术治疗的21例甲亢患者的临床资料,分析出手术期的处理措施和经验。结果21例中,13例甲亢症状较重,单一的药物治疗不能控制,需加大药物剂量或多种药物联合应用,不能减量或停用抗甲状腺素药物。待甲状腺功能（甲功）相对正常后加用卢戈液至少2心后实行手术。8例因出现严重药物不良反应而不能坚持服药,在T3,T4水平高于正常的情况下直接加用卢戈液口服,在术前3～5d改为复方碘剂持续静脉滴注。所有患者接受双侧甲状腺大部切除术。手术顺利,无甲亢危象发生,均痊愈出院。3例失访。18例在门诊随诊,随访时间为1～7年,平均3．5年。18例无复发,其中3例术后甲状腺功能偏低,需少量补充甲状腺素片。结论针对不同患者给于个性化准备、术后及时处理甲亢危象前期表现是这类患者取得手术成功的关键。对甲功难于控制到正常者,围手术期给予碘剂持续静脉点滴是一种有效的措施。     

新辅助化疗对结直肠癌的作用

目的探讨短程5-FU/CF方案新辅助化疗对结直肠癌细胞凋亡、增殖和p53表达以及术后并发症和预后的影响。方法分别采用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法（TUNEL）和免疫组化SP法检测68例患者结直肠癌组织的细胞凋亡指数（AI）和ki-67增殖指数（PI）及凋亡相关基因p53的表达,并比较新辅助化疗组和对照组患者术后并发症的发生情况和预后情况。结果新辅助化疗组肿瘤细胞的AI均数为3.56%,明高于对照组的2.29%（P〈0.01）,PI均数为22.60%明显低于对照组的33.60%（P〈0.01）,p53阳性表达率为28.9%（11/38）明显低于对照组的56.7%（17/30）（P〈0.05）。两组中大肠癌细胞的AI与PI均呈负相关（r=-0.790,r=-0.663）（P〈0.01）。两组术后并发症的发生差异无显著性（P〈0.05）。两组的复发转移率和复发转移平均时间差异有显著性（P〈0.05）。结论短程5-FU/CF方案新辅助化疗可以显著诱导结直肠癌细胞凋亡,并抑制其增殖;降低结直肠癌组织p53的阳性表达率,而不增加术后并发症的发生,能延缓和减少结直肠癌术后的复发转移。     

显露喉返神经在甲状腺手术中的意义探讨

目的探讨在甲状腺手术中显露喉返神经的意义。方法回顾性分析因甲状腺疾病行手术治疗的1082例患者的临床资料。结果所有患者均常规解剖并显露喉返神经。手术并发症有喉返神经损伤6例（0．5％），甲状旁腺功能减退3例（0．3％），喉上神经损伤2例（0．2％）。甲状腺手书并发症的发生率与水中是否显露喉返神经有密切关系。结论甲状腺手术中显露喉返神经是降低甲状旁腺、喉上神经和喉返神经损伤的重要措施。     

胆石性胰腺炎的早期手术治疗

目的探讨胆石性胰腺炎（GP）早期手术适应证及相应术式。方法回顾性分析136例采用早期手术治疗GP患者的临床资料。结果（1）梗阻性重型GP患者10例中8例采用早期手术治疗，全部治愈。（2）梗阻性轻型GP患者70例中57例采用早期手术治疗，全部治愈。（3）非梗阻性重型GP患者47例中13例采用单纯早期手术治疗，4例死于早期多脏器衰竭：另3例采用区域动脉灌注联合早期手术治愈。（4）非梗阻性轻型GP患者146例中采用早期手术55例，全部治愈。结论（1）梗阻性GP是早期手术的绝对适应证，胆道解压和胰周引流是其基本术式；（2）非梗阻性重型GP原则上不采用早期手术；（3）非梗阻性轻型GP可采用早期手术治疗。     

急性肿瘤性结肠梗阻的治疗

目的:探讨急性肿瘤性结直肠梗阻的外科处理原则和方法。方法:回顾性分析103例急性肿瘤性结肠梗阻患者的临床资料。结果:全部患者经手术治疗，包括急诊手术80例，其中右半结肠癌25例均行一期切除吻合手术，左半结肠癌45例中一期切除吻合37例，直肠癌10例，均行急诊手术。择期性手术23例。术后发生吻合口瘘3例，肺部感染2例，盆腔感染1例，死亡1例，余均治愈出院。 结论:对于急性肿瘤性结肠梗阻除非有急诊手术指征，应首先采用非手术治疗1～3d，尽可能转为择期性手术；只要恰当掌握适应证，一期肿瘤切除吻合术是比较安全的；对于腹腔污染严重、肠壁穿孔，也应尽可能采用一期切除肿瘤。