PCR在结核病诊断上的应用研究

ＰＣＲ在结核病诊断上的应用研究闫国蕊杨建华祖燕叶德普ＰＣＲ检测技术自１９８９年被列入结核病诊断以来尚有不同的认识，为此我们在研究方法学的基础上来确认ＰＣＲ在结核病诊断上的特异性和敏感性。研究对象为正常健康人５５例；非结核性肺病患者３５例（其中肺炎１３...     

PCR技术在检测结核菌中的应用一261例患儿检测报告

ＰＣＲ技术在检测结核菌中的应用一２６１例患儿检测报告天津市儿童医院儿研所遗传室（３０００７４）刘检妤目前对结核病的早期诊断、及时治疗愈来愈被人们重视，多聚酶链反应（ＰＣＲ）技术以其简单、快速、特异性等优势，进一步为临床广泛应用。下面是我室应用ＰＣＲ技...     

PCR技术在检测活检组织中结核杆菌的应用

ＰＣＲ技术在检测活检组织中结核杆菌的应用潘美华作者单位：安徽医科大学附属医院病理科，合肥２３００２２在临床诊断结核病中，用ＰＣＲ技术检测痰液、血液、脑脊液、胸腹水等样品中的结核杆菌已得到了广泛的应用，但在病理诊断中所遇到的一些组织内结核病变不典型，而...     

应用多重等位基因特异PCR技术进行β地中海贫血的…

在等位基因特异ＰＣＲ及多重ＰＣＲ的基础上建立了多重等位基因特异ＰＣＲ技术（ＭＡＳ－ＰＣＲ），对中国人常见的２８Ａ→Ｇ，ＣＤ１７→０，ＣＤ４１－４２（－４ｂｐ）和ＣＤ７１－７２（＋Ａ）等β地中海贫血基因突变进行检测。应用该技术对２１例β地中海贫血患者或携带者进行诊断和２例高风险胎儿进行产前诊断，诊断结果与ＰＣＲ／ＡＳＯ探针点杂交或ＤＮＡ测序的结果完全一致，证实多重等位基因特异ＰＣＲ技术具有简便、快速     

结核病诊断新法—PCR

结核病诊断新法—ＰＣＲ３０９医院全军结核病中心研究推广的采用ＤＮＡ聚合酶链反应（ＰＣＲ）和核酸探针分子杂交技术，使结核病诊断提高到分子和基因水平，检测时间由过去的一个月左右缩短到２～３ｄ，阳性率比传统技术高２０％～３０％以上。以往常规方法直接检查结核...     

应用多重等位基因特异PCR技术进行β地中海贫血的基因诊断

在等位基因特异ＰＣＲ及多重ＰＣＲ的基础上建立了多重等位基因特异ＰＣＲ技术（ＭＡＳＰＣＲ），对中国人常见的－２８Ａ→Ｇ，ＣＤ１７→０，ＣＤ４１－４２（－４ｂｐ）和ＣＤ７１－７２（＋Ａ）等β地中海贫血基因突变进行检测，应用该技术对２１例β地中海贫血患者或携带者进行基因诊断和２例高风险胎儿进行产前诊断诊断，诊断结果与ＰＣＲ／ＡＳＯ探针点杂交或ＤＮＡ测序的结果完全一致，证实多重等位基因特异ＰＣＲ技术具有简便、快速、可靠和经济等优点。     

应用PCR技术诊断新生儿隐匿型先天性弓形虫病

本文报告用ＰＣＲ的体外基因扩增技术对１１６例弓形虫抗体检测阳性产妇的新生儿脐带血作ＰＣＲ检查，结果ＰＣＲ阳性２９例，阳性率为２５％；同时用ＥＬＩＳＡ法检测脐血中弓形虫特异性抗体ＩｇＧ和ＩｇＭ，阳性率分别为２７．６％和１６．３％，提示应用ＰＣＲ技术检测脐血中弓形虫ＤＮＡ结合ＥＬＩＳＡ进行筛选，可早期诊断新生儿隐匿型先天性弓形虫病，以利于及时治疗，减少减轻隐匿型先天性弓形虫病的后发症，降低其危害。     

聚合酶链反应与结核抗体联合在结核性胸膜炎诊断上？…

目的 评价聚合酶链反应（ＰＣＲ）和结核抗体（ＡＴＡ）联合检测在结核性胸膜炎诊断上的意义。方法 联合应用ＰＣＲ技术和ＡＴＡ检测方法对６１例结核性胸腔积液患者及３４例非结核性胸腔积液患者胸水标本进行检测。结果 ＰＣＲ的敏感性为７０．５％、ＡＴＡ为５５．７％，ＰＣＲ与ＡＴＡ联合应用敏感性可提高为８６．８％。结论 ＰＣＲ与ＡＴＡ联合检测可进一步提高对结核性胸腔积液的诊断。     

卡氏肺孢子虫病的诊断及其进展

卡氏肺孢子虫病诊断方面的研究表明，辅助诊断方法缺乏特异性，在确定病人是否有肺感染，感染的程度及疗效的考核上都有一定作用。但ＰＣ感染的最后确诊主要靠病原体检测。取材方法：对于肺感染者应以导痰为首选，其次是ＢＡＬ和ＴＢＬＢ。儿童可采用经皮穿刺肺吸引的方法取材。在前述方法无法实施的紧急情况下，才考虑开胸肺活检。肺外感染者可在病变局部穿刺取材。制片法：可用穿刺物或肺组织等做直接涂片，印片，或悬液滴片等简捷方法，也可采用组织切片。染色方法：常用Ｇｉｅｍｓａ、初检、ＴＢＯ或ＧＭＳ法进一步确诊。ＩＦ可提高检出率。ＰＣＲ技术检测孢子虫病更敏感和特异，有操作简便，易于推广应用等优点。     

PCR与单克隆抗体ELESA夹心法快速诊断结核病的研究

应用聚合酶性反应（ＰＣＲ）技术建立的扩增结核杆菌复合体特异重复序列ＩＳ９８６基因的方法和用单克隆抗体ＴＢ１５－Ｃ３经ＥＬＩＳＡ夹心法检测结核杆菌特异性抗原决定簇，对１０种抗酸杆菌，２种普通菌进行了检测．ＰＣＲ仅对结核杆菌复合体扩增出２４５ｈｐ特异性条带，ＥＬＩＳＡ检测除人型结核杆菌、ＢＣＧ阳性外，还与鸟型及瘰疬分枝杆菌反应阳性．ＰＣＲ检测人型结核杆菌的敏感性为１ｐｇ，相当于１３个左右细菌，ＥＬＩＳＡ检测的被感性为１５ｎｇ／ｍｌ．应用ＰＣＲ及ＥＬＩＳＡ检测了９６份结核临床标本．ＰＣＲ的检出率高于抗酸染色涂片的阳性率（Ｐ＜０．０５），ＰＣＲ的检出率虽高于细菌培养的阳性率，但相差不显著（Ｐ＞０．０５）．ＥＬＩＳＡ检测阳性率明显高于抗酸染色涂片、细菌培养和ＰＣＲ的阳性率（Ｐ＜０．００１）．ＥＬＩＳＡ的假阳性率高于ＰＣＲ的假阳性率，但相差不显著（Ｐ＞０．０５）．研究表明，ＰＣＲ及ＥＬＩＳＡ均是特异、敏感、快速的诊断结核病的方法．但在使用中又各自有其特点．     

应用套式聚合酶链反应检测孕妇弓形体感染

本文应用套式聚合酶链反应（ＮＰＣＲ）对孕妇外周血Ｔｏｘｏ－ＤＮＡ进行检测，结果阳性率为１．０４％（３／２８９），其中１例ＮＰＣ生者终上妊娠后其羊水、胎儿脑组织ＮＰＣＲ呈阴性，胎儿肺组织呈阳性。对ＮＰＣＲ阳性病例应用ＰＣＲ检测均为阴性。孕妇弓形体感染常导致先天性弓形体感染综合征，胎儿降生及后天发育不良，故对孕妇弓形体感染进行监测，对优生优育具有重要意义，而ＮＰＣＲ为有力的检测手段。     

应用MAS PCR技术诊断β地中海贫血

本文应用多重等位基因特异ＰＣＲ技术，对４种常见的β地贫进行基因诊断，成功地对２例β患者进行基因诊断和１例β地贫高危胎儿进行产前诊断。结果表明多重等位基因特异ＰＣＲ人有简便、快速、准确和经济等优点，利于推广应用。     

应用聚合酶链反应快速诊断结核性脓肿

应用聚合酶链反应快速诊断结核性脓肿浙江金华市中心医院（３２１０００）赵美芳，单小云结核杆菌感染在发展中国家仍是一种常见病，近年来在我国的发病率又有回升趋势。聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术为结核病诊断提供了极有价值的实验依据，以其特有的敏感、快速、准确弥补...     

间接法原位PCR技术在尖锐湿疣诊断中的应用

本文报道用间接法原位ＰＣＲ技术在尖锐湿疣诊断中的应用。３７例外阴尖锐湿疣组织，以１０％福尔马林固定、常规石蜡切片，间接法原位ＰＣＲ检测ＨＰＶ。结果３２／３７／１１型阳性，阳性率为８６．５％，高于原位杂交法的阳性率（７０．３％）；原位杂交阴性的１１例中有６例原位ＰＣＲ法阳性，表明此法具有很高的敏感性和特异性，对诊断尖锐湿疣有重要的实用价值。     

聚合酶链反应快速诊断结核病的应用研究

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术建立了扩增结核杆菌特异重复序列ＩＳ６１１０部分基因的方法。对９种抗酸分枝杆菌、３种普通菌进行检测，结果仅人型结核杆菌、牛型结核杆菌及ＢＣＧ扩增出１２３ｂｐ特异性条带，ＰＣＲ产物经ＳａｌⅠ酶切后产生７０ｂｐ与５３ｂｐ两个片段。ＰＣＲ检测人型结核杆菌的敏感性达１０ｆｇＤＮＡ或５个菌体。应用ＰＣＲ检测了１０９份结核临床标本，其总阳性率为７２．５％，明显高于抗酸染色涂片（２．８％）与细菌培养（９．２％）的阳性率（Ｐ＜０．００１）。ＰＣＲ的检出率也较ＥＬＩＳＡ法检测抗ＰＰＤ－ＩｇＧ的阳性率（６３．３％）为高，但尚无统计学差异（ｐ＞０．０５），但是ＥＬＩＳＡ检测抗体有１９．０％的假阳性。研究表明，ＰＣＲ是一种特异、敏感、快速诊断结核病的方法。     

原位PCR技术检测石蜡包埋脑组织中人巨细胞病毒DNA

应用原位聚合酶链反应（ＩＳＰＣＲ）技术检测了２５例尸检畸形胎儿石蜡包埋脑组织中人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）ＤＮＡ，并与普通ＰＣＲ及原位杂交（ＩＳＨ）进行了比较。ＩＳＰＣＲ、ＰＣＲ及ＩＳＨ检测阳性率分别为４４％，３６％及２０％。与ＩＳＨ相比较，ＩＳＰＣＲ不仅检出阳性率高，而且信号强度增强。研究结果提示，ＩＳ－ＰＣＲ是诊断ＨＣＭＶ感染的快速、敏感、特异的实用方法。     

聚合酶链反应在小儿支原体肺炎诊断中的应用价值

为探讨ＰＣＲ在小儿支原体肺炎诊断中的实际应用价值，对４７例临床疑诊支原体肺炎的病儿做了咽拭子ＰＣＲ－ＭＰ测定，同时做了血冷凝集试验（ＣＡＴ）。结果：ＰＣＲ－ＭＰ阳性２１例，真阳性１５例，假阴性１例，敏感度为９３．８％。假阳性６例，占检测标本的１２．８％，占检测报告阳性总数的２８．６％，ＣＡＴ阳性１２例。确诊支原体肺炎１６例，其中１５例经ＰＣＲ早期确诊。结论：ＰＣＲ－ＭＰ测定有利于支原体肺炎的早期诊     

妊娠滋养细胞肿瘤与HPV的关系

应用ＰＣＲ技术对滋养细胞肿瘤中的ＨＰＶ进行筛检，结合电镜观察，对尖锐湿疣和正常胎盘组织进行同步研究，作为对照。１材料和方法尖锐湿疣３８例，正常胎盘绒毛３０例，滋养细胞肿瘤８２例。电镜样品常规制备，ＪＥＭ１００ＣＸⅡ透射电镜观察。ＰＣＲ采用医科院基础所...     

肺炎患儿咽拭标本中腺病毒DNA的检测

肺炎患儿咽拭标本中腺病毒ＤＮＡ的检测史金阳，刘兰青，吕绳敏，任舒月，刘庆随着分子生物学诊断技术的发展和应用，出现了核酸杂交［１］及聚合酶链反应（ＰＣＲ）［２］技术。而ＰＣＲ技术的发展和应用大大简化了目的基因片段的制备程序。我们用ＰＣＲ技术制备地高辛标...     

多种方法检测HBV血清标志物结果分析

ＰＣＲ技术直接检测血清中的ＨＢＶ－ＤＮＡ［１］，并与反向间接血凝法（Ｒ－ＩＨＡ）、乳胶凝集法（ＬＡＴ）和酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）检测乙型肝炎血清标志物进行对比观察，以探讨ＰＣＲ技术在乙型肝炎病原诊断中的应用及ＨＢｖ－ＤＮＡ与乙肝五项标志物（ＨＢＶ－ｍ）之间的关系。材料与方法检测对象：１４６例肝炎患者，其中急性肝炎９１例，慢性肝炎４１例，肝炎后肝硬化１１例，重症肝炎３例，均符合１９９０年上海全国病毒性肝炎会议制订的诊断标准。方法：１４６例均用ＰＣＲ技术俭测血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ，用Ｒ－ＩＨＡ检测…