CRA/J小鼠局部主动抑制及其对自然流产的预防作用

CBA/J雌鼠与同种异体DBA/2雄鼠交配可出现高发生率的自然流产。流产与滋养层和蜕膜结合位发生坏死(单核细胞浸润通过滋养层)及胚胎中特异性细胞毒活性增强有关。当用BALB/C雄鼠交配时未发生此种高流产率,CBA/J雌鼠与DBA/2雄鼠交配前,用BALB/c鼠脾细胞预先免疫可明显降低流产率,而用DBA/2细胞免疫,则对流产无影响或增加年龄较大雌鼠的流产率。免疫预防流产机制不清,曾观察到BALB/C脾细胞产生的抗-H2~d抗体应答高于DBA/2细胞,而抗-H2~d抗体可被动转移至未免疫CBA/J雌鼠起到保护作用。BALB/c细胞可诱发全身     

免疫同种异体脾细胞对小鼠成活新生仔数的影响

Clark等(1980)描述了小鼠自发流产的动物模型,即CBA/J雌鼠与DBA/2J雄鼠交配后,胎鼠吸收率增加。Chaouat等(1983)发现给雌鼠免疫BALB/c雄鼠脾细胞可减少生殖失败率。这种保护作用与抗体的形成有关,此抗体是特异性地针对由主要组织相容性复合体和次要组织相容性位点所控制的抗原。胎鼠吸收率近来已作为重要的指标,用来评价主动和被动免疫的保护作用。根据暴露子宫腔的形态学特点判断妊娠的结局,吸收的胎鼠较活胎显著性减小并常有出血表现,高吸收率发生在孕10～13天。尽管子宫吸收可依据形态学来确定,但     

流产小鼠子宫胎盘组织中TNF-α mRNA及其蛋白的表达

为揭示流产小鼠子宫胎盘组织中TNF-α及其受体(TNFR Ⅰ)的特征性分布表达方式,并探索对流产起预防作用的免疫措施与TNF-α表达水平之间的关系,将CBA/J雌鼠与DBA/2J雄鼠进行杂交致孕,作为自然流产动物模型;取CBA/J及ICR雌鼠,分别与C57BL/6雄鼠交配,致孕前21天于子宫角注射大鼠脾细胞,受孕15或19天后,腹膜内注射环磷酰胺(CP),作为诱发流产的动物模型;收集流     

妊娠早期阻断协同刺激分子诱导自然流产模型孕鼠脾脏细胞母-胎免疫耐受的研究

目的　探讨阻断协同刺激分子———CD80 和CD86对自然流产模型孕鼠妊娠结局及孕鼠脾脏免疫细胞对父系抗原免疫耐受状态的影响。方法　将雌性小鼠 (CBA/J)分别与BALB/c及DBA/2两种雄性小鼠合笼交配 ,分别建立正常妊娠模型CBA/J×BALB/c( 2 0只 ,对照组 )和自然流产模型CBA/J×DBA/2 ( 2 0只 ,研究组 )。CBA/J小鼠于妊娠第 4天 (着床期 )腹腔分别注射大鼠同型IgG 0 2mg( 10只 ) ,或大鼠抗小鼠CD80 和CD86单克隆抗体 ( 10只 )。妊娠第 9天 ,采用单向混合淋巴细胞反应 ,分析孕鼠脾脏免疫细胞对父系抗原的增殖能力 ,并测定细胞培养上清液中白细胞介素 2(IL 2 )水平 ,以研究脾脏细胞母 胎免疫耐受状态 ;妊娠第 14天观察两组的胚胎吸收率。结果　 ( 1)研究组中 ,腹腔注射大鼠IgG的孕鼠胚胎吸收率为 2 4 3% ,而注射大鼠抗小鼠CD80 和CD86单克隆抗体的孕鼠胚胎吸收率为 9 8% ,两者比较 ,差异有显著性 (P <0 0 5 )。 ( 2 )应用大鼠抗小鼠CD80 和CD86单克隆抗体 ,使妊娠 9d的孕鼠脾脏免疫细胞对父系抗原的增殖能力及IL 2水平显著下降(P <0 0 5 )。结论　孕早期阻断协同刺激分子 ,可诱导产生孕鼠脾脏免疫细胞对父系抗原的免疫耐受 ,从而使自然流产模型孕鼠的妊娠结局达到正常妊娠水平。     

经阴道注入重组白细胞介素17对正常妊娠CBA/J孕鼠的影响

目的：观察经阴道注入重组白细胞介素17（r IL-17）对正常妊娠CBA/J孕鼠（CBA/J雌鼠×BALB/c雄鼠）妊娠结局的影响,探讨其在诱导母胎免疫排斥中的作用。方法：将6-8周龄清洁级CBA/J（雌）和BALB/c（雄）近交系小鼠分为3组。对照组：正常妊娠模型CBA/J孕鼠未作任何干扰。磷酸盐缓冲液（PBS）组：正常妊娠模型CBA/J孕鼠,于受孕第1天麻醉状态下经阴道注射50μL PBS。r IL-17组：正常妊娠模型CBA/J孕鼠,于受孕第1天麻醉状态下经阴道注射50μL r IL-17。受孕后第14天观察胚胎丢失率。通过实时荧光定量聚合酶链反应（q RT-PCR）方法、蛋白质印迹（Western blotting）方法检测鼠蜕膜转化生长因子β（TGF-β）和IL-10的表达。结果：给予正常妊娠模型孕鼠外源性r IL-17,能引起其胚胎丢失率明显增加,且蜕膜TGF-β和IL-10 m RNA及蛋白的表达均明显降低（P〈0.05）。而对照组与PBS组相比,胚胎丢失率及TGF-β和IL-10 m RNA及蛋白的表达差异均无统计学意义（均P〉0.05）。结论：经阴道注入r IL-17能够引起正常妊娠模型CBA/J孕鼠胚胎丢失率增加,并引起母胎界面免疫耐受细胞因子分泌异常。     

淋巴细胞免疫治疗对小鼠自然流产模型母胎界面CD80~+表达及妊娠结局的影响

目的:评价CBA/J×DBA/2小鼠配对组合作为反复自然流产模型的生殖力特点,及其与母胎交界CD80表达间的关系,并研究淋巴细胞免疫治疗(lymphocyte immunotherapy,LIT)对CD80表达水平的影响。方法:对CBA/J×DBA/2小鼠的生殖力特点进行为期120d的观察,并与生殖力正常的4种对照组进行比较。另计算15对CBA/J×DBA/2小鼠孕13d的胚胎吸收率,并用CD80-FITC和CD45-PE双色流式细胞术检测CD80细胞在母胎交界面的构成比。为了明确CD80~+细胞的身份,检测了CD3、DX5(NK细胞)和MHC-Ⅱ在CD80细胞群中的表达水平。此外,检测LIT组与未治疗组CBA/J×DBA/2小鼠胚胎吸收率和CD80细胞的阳性率。结果:CBA/J×DBA/2小鼠的流产特点是为孕10d左右的反复流产。CBA/J×DBA/2小鼠孕13d的胚胎吸收率显著高于BALB/c×DBA/2小鼠(30.8％±16.6％vs.7.7％±6.7％,P相似文献   

妊娠鼠子宫引流淋巴结内的细胞免疫调节活性

同种异体妊娠是越过主要组织相容屏障而移植成功的天然例证。尽管发育中的胎儿能表达组织相容抗原和胚胎抗原,但母亲免疫系统并未对胎儿进行排斥,对此现象的解释是在围绕胎儿的环境中可能存在局部免疫抑制机理,对比已有很多报道。有些学者证实妊娠鼠子宫中存在免疫调节细胞,抑制母体抗胎儿的免疫应答。另发现同种异体妊娠时,子宫周围淋巴结的体积和重量增加,如果母体在交配前已对胎盘移植抗原耐受,上述改变消失。对此现象有些学者认为引流淋巴结中的细胞反应即代表抑制机理的激活,进而阻止母体对胎儿的免疫损伤,     

泰山磐石散对复发性流产小鼠母胎界面Th1/Th2细胞因子及妊娠预后的影响

目的:观察泰山磐石散对复发性流产小鼠母胎界面Th1/Th2细胞因子及妊娠预后的影响,为泰山磐石散临床应用提供新的实验依据。方法:采用经典造模方式DBA/2小鼠与CBA/J杂交,获得复发性流产小鼠模型,随机将与DBA/2小鼠合笼的60只CBA/J妊娠小鼠分为模型组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组和阳性对照组;与BALB/C合笼的10只CBA/J孕鼠作为正常妊娠模型。于妊娠14 d后处死孕鼠,观察小鼠胎盘丢失情况,并提取培养胎界母细胞,24 h后收集细胞上清液,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测上清液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素4(IL-4)和IL-10含量。结果:经泰山磐石散治疗后,与模型组比较,复发性流产小鼠胎盘丢失率明显改善,母胎界面细胞上清液中Th1型细胞因子IFN-γ明显降低,Th2型细胞因子IL-4、IL-10明显升高,Th1/Th2免疫调节失衡明显改善,以中药高剂量组改善最为明显。结论:泰山磐石散能改善复发性流产小鼠胎盘丢失情况,其具体机制可能是通过调节Th1/Th2免疫调节平衡实现。     

过继转移FasL基因修饰的树突细胞对小鼠自然流产模型胚胎丢失的影响

目的:观察过继转移FasL基因修饰的树突细胞(DC)对小鼠自然流产模型胚胎丢失的影响,探讨它在诱导妊娠免疫耐受中的作用。方法:构建鼠源FasL(mFasL)真核表达载体pcDNA3.1-mFasL,用电转染法将它转染给DBA/2雄鼠骨髓来源的DC,将转染成功的mFasL-DC于交配前经腹腔注射给CBA/J母鼠。实验动物分为6组:(1)正常妊娠模型组(CBA/J×BALB/c);(2)未添加干预的流产模型组(CBA/J×DBA/2);(3)转输DC培养基(DCCM)的流产模型组;(4)转输单纯DC(DC)的流产模型组;(5)转输转染空质粒DC的流产模型组;(6)转输转染mFasL质粒DC的流产模型组,于妊娠第12~14天观察孕鼠胚胎丢失率。结果:转输mFasL-DC后孕鼠胚胎丢失率明显低于未添加干预或转输DC培养基的流产模型组(P<0.01),与转输单纯DC或带空质粒的DC组相比,其胚胎丢失率也明显下降(P<0.05),它与正常妊娠组相比胚胎丢失率无显著差异(P>0.05);转输单纯DC或空质粒的DC组与未添加干预流产模型组相比胚胎丢失率有所下降,但没有统计学差异;转输DC培养基组与未加干预组之间胚胎丢失率无统计学差异(P>0.05)。结论:过继转移mFasL-DC能诱导妊娠免疫耐受,降低小鼠自然流产模型孕鼠胚胎丢失率。     

母—胎免疫调节的分子机制

母 -胎免疫调节机制的本质即母体免疫系统对胚胎抗原的耐受。这种母体对胚胎抗原的免疫耐受包括重要的母 -胎界面的免疫耐受及母体体循环对胚胎抗原的免疫耐受 ,包括对同种抗原的识别、免疫活性细胞增殖与记忆及免疫效应等三个层次的复杂调节。1　母 -胎界面抗原识别调节机制我们在实验中采用ＣＢＡ/Ｊ×ＤＢＡ/ 2小鼠胚胎作为妊娠失败模型 ;以ＣＢＡ×ＢＡＬＢ/ｃ小鼠胚胎作妊娠成功模型 ,以研究协同刺激分子在母 -胎免疫界面的可能作用。我们的研究结果显示 ,妊娠失败模型的胚胎吸收率为 2 7 8% ;妊娠成功模型的胚胎吸收率为 8 4%。我们从…     

青蒿水提物对小鼠生殖功能及胎鼠生殖发育的影响

目的:观察青蒿水提物对雌性小鼠生殖功能及胚胎发育的影响。方法:80只健康昆明种雌小鼠随机分成4组,实验组连续14 d分别腹腔给予青蒿水提物20 mg/kg(低剂量组)、100 mg/kg(中剂量组)和500 mg/kg(高剂量组),对照组以等量生理盐水代替,然后与雄鼠合笼,同组内一半雌鼠继续给药至交配成功后14 d处死;另一半雌鼠在受精后继续给药35 d,自然分娩,检测青蒿水提物对各组母鼠生育能力和胎仔生长发育的影响。结果:高剂量组青蒿水提物可以使孕鼠的胎仔数以及仔鼠平均体质量、胎盘质量下降,吸收胚胎数增加;但对雌鼠的交配指数、生育指数、活产指数及对出生仔鼠的存活指数、生长指数均无明显影响(P>0.05)。结论:青蒿水提物对孕鼠胚胎有影响,但对雌鼠的其它生殖功能无明显毒性作用。     

干预CD86协同刺激信号对母胎界面Th1/Th2型细胞因子转录调控及妊娠结局的影响

目的探讨干预CD86协同刺激信号对母胎界面Th1/Th2型细胞因子转录调控及妊娠结局的影响。方法:将正常妊娠模型(CBA/J×BALB/c)和自然流产模型(CBA/J×DBA/2J)CBA孕鼠均分为两组:对照组(各10只)于孕d 4、d 6、d 8腹腔注射大鼠IgG;干预组(各10只)于孕d 4、d 6、d 8腹腔注射大鼠抗小鼠CD86 mAb。孕d 9竞争性半定量RT-PCR测定各组母胎界面组织中Th1型(IL-12、IFN-γ)/Th2型(IL-4、IL-10)细胞因子转录水平;孕d 12比较两种模型各组的胚胎吸收率。结果:正常妊娠模型中,干预CD86协同刺激信号对母胎界面Th1/Th2型细胞因子转录水平及妊娠预后均无显著影响(P>0.05)。自然流产模型中,干预CD86协同刺激信号能够升调节母胎界面局部Th2型而降调节Th1型细胞因子转录水平,并显著改善其妊娠预后(P<0.05)。结论:于孕早期干预CD86协同刺激信号能够调控母胎界面局部Th1/Th2型细胞因子转录,形成维持正常妊娠所需的Th2型免疫偏倚,诱导母胎免疫耐受。     

寿胎丸对复发性流产小鼠蜕膜组织中螺旋动脉改变及怀孕结局的影响

目的：通过观察寿胎丸对复发性流产（RSA）小鼠蜕膜组织子宫螺旋动脉改变及怀孕结局的影响,探讨其保胎的作用机制。方法：以CBA/J雌鼠×BALB/c雄鼠建立正常怀孕小鼠模型（12只）,CBA/J雌鼠×DBA/2雄鼠建立RSA小鼠模型（43只）,RSA小鼠按怀孕先后顺序随机分为RSA模型对照组（11只）、寿胎丸低剂量组（11只）、寿胎丸中剂量组（11只）及寿胎丸高剂量组（10只）,于孕第4～9天灌胃给药,孕14 d处死孕鼠,计数吸收胚胎数,计算各组胚胎吸收率,光镜下观察各组蜕膜组织中螺旋动脉生理性改变的发生率,并测量螺旋动脉的管腔直径及管壁厚度,透射电镜下观察蜕膜组织中螺旋动脉超微结构。结果：RSA模型对照组胚胎吸收率高于正常怀孕模型组（29.49% vs. 4.55%,χ2=18.887,P=0.000）。寿胎丸低、中、高剂量组的胚胎吸收率比RSA模型对照组均降低（均P＜0.05）。RSA模型对照组蜕膜组织中子宫螺旋动脉生理性转变率低于正常怀孕模型组（11.90% vs. 44.68%, χ2=11.522,P=0.001）。RSA模型对照组蜕膜组织中子宫螺旋动脉平均管腔直径及管壁厚度均低于正常怀孕模型组（P＜0.05）。寿胎丸高剂量组子宫螺旋动脉生理性转变发生率增高,管腔扩张,管壁厚度变薄（均P＜0.05）。结论：寿胎丸可能通过促进RAS小鼠蜕膜组织中子宫螺旋动脉生理性重铸发挥保胎作用。     

ssp411基因敲除小鼠生育表型的初步研究

目的对ssp411基因的生育功能进行初步研究。方法利用PB转座子插入建立小鼠模型ssp411基因敲除小鼠各基因型之间交配后,检查雌鼠生殖道是否见栓。记录出生小鼠的窝仔数,性别,出生20 d仔鼠体质量、基因型等数据;记录出生后90 d雄仔鼠的睾丸重量,进行组织形态学研究,并对附睾尾精子进行活力分析。结果 ssp411缺陷型雌鼠可以正常生育,而雄鼠无自然生育能力。ssp411基因敲除雄鼠能够与母鼠自然交配形成阴道栓,但是没有子代出生,且在交配后母鼠输卵管壶腹部未见精子。睾丸的组织形态学研究和睾丸称量结果表明,ssp411蛋白缺失可以影响精子的生成。ssp411基因敲除雄鼠的附睾精子活力也明显差于对照组。结论 ssp411基因缺陷不影响雌性生殖,但影响雄鼠的精子生成功能,造成少弱精子症,并引起雄性不育。     

干预CD86协同刺激信号在诱导母胎界面Th2型免疫偏倚中的作用

目的 :探讨干预CD86协同刺激信号在诱导母胎界面局部形成Th2型免疫偏倚中的作用。方法 :将正常妊娠模型 (CBA×BALB/c)和自然流产模型 (CBA×DBA/ 2 )CBA孕鼠均分为两组 ,于孕第 4、6、8天 ,对照组腹腔注射大鼠IgG ,实验组腹腔注射大鼠抗小鼠CD86mAb ;孕第 9天 ,ELISA测定母胎界面组织培养上清中Th1型 (IFN γ、TNF α) /Th2型(IL 4、IL 10 )细胞因子表达水平 ,并计算IL 4 /IFN γ、IL 10 /IFN γ比值 ;孕第 12天比较两种模型各组的胚胎吸收率。结果 :正常妊娠模型中 ,干预CD86协同刺激信号对母胎界面原有的Th2型免疫偏离及妊娠预后均无显著影响。自然流产模型中 ,干预CD86协同刺激信号能够诱导母胎界面局部形成Th2型免疫偏倚并显著改善其妊娠预后。结论 :于孕早期 ,干预CD86协同刺激信号能够改善母胎界面局部细胞因子微环境 ,形成维持正常妊娠所需的Th2型免疫偏倚 ,诱导母胎免疫耐受     

人类白细胞抗原-G与母胎耐受

妊娠过程中 ,带有父源性人类白细胞抗原 (ＨＬＡ)的胎儿 ,直接接触富含免疫活性细胞的母体蜕膜 ,理应受到母体免疫系统识别 ,产生以细胞免疫为主的免疫应答而遭到母体的排斥。但事实相反 ,母体对胎儿形成免疫耐受 ,大多数胎儿在母体子宫内安然生长近 10个月 ,直至分娩。母胎耐受现象的维持涉及诸多因素 ,如胎盘ＨＬＡ的表达、辅助性Ｔ淋巴细胞 (Ｔｈ)Ｔｈ1/Ｔｈ2 平衡、ＣＤ95及其配体的相互作用、各种细胞因子和整合素的作用等。其中ＨＬＡ Ｇ诱导母胎耐受是目前关注的热点[1] 。ＨＬＡ Ｇ通过多种途径诱导母胎耐受 ,阐明ＨＬＡ Ｇ在母胎耐…     

母—胎界面免疫分子的相互作用以及其对妊娠结局的影响

正常妊娠的情况下,胎儿表达部分父系HLA分子,但不引发母体的明显免疫反应,是由于在母胎界面存在着复杂精细的交流机制,例如多种母体免疫细胞亚群的激活和抑制、蜕膜基质细胞分泌细胞因子参与调控等。这些机制使子宫局部形成耐受性的环境,使胎儿能正常发育。相反的,母胎交流机制障碍也可能导致母体对胎儿产生免疫排斥,从而造成异常妊娠。本文讨论在母—胎界面上发生的蜕膜NK细胞和胎儿滋养层细胞HLA分子的相互作用,解释母胎耐受的产生机制,并讨论母—胎界面免疫机制异常对妊娠结局的影响。     

杀伤细胞抑制性受体在母胎免疫耐受中的调节作用

母胎免疫耐受机理一直是许多免疫学家研究的热点。在一定意义上说 ,妊娠相当于一次成功的同种异体移植 ,胎儿所携带的父系人类白细胞抗原 (ＨＬＡ)刺激母体免疫系统 ,产生各种免疫细胞参与的排斥反应。但实际上母体却对胎儿形成免疫耐受 ,这种免疫调节作用不仅发生于母体全身免疫系统 ,而且也发生在妊娠子宫局部 ,这种局部的免疫调节 ,更直接地影响母胎之间的相互作用。在母胎界面免疫微环境中 ,有多种细胞和细胞因子参与这种免疫调节作用 ,其中自然杀伤 (ＮＫ)细胞 ,通过分泌细胞因子以及表达细胞表面抑制性受体 ,而转导抑制信号 ,在维持母…     

慢性非细菌性前列腺炎对大鼠生育力的影响

目的:探索2种慢性非细菌性前列腺炎对雄性SD大鼠生育力的影响。方法:通过造模的方式,将患有化学性前列腺炎(A组)的雄鼠和慢性自体免疫性前列腺炎(B组),按1∶1与雌鼠合笼交配,检查雄鼠的精子活力、雌鼠受孕率、仔鼠的生长发育和行为活动等指标;并以无前列腺炎的正常雄鼠为阴性对照(C组)进行比较。结果:与C组比,A组的精子活力明显下降且有统计学差异(P<0.05)。雄性大鼠所交配的雌鼠,其妊娠率和产仔数,仔鼠性别比例、外观畸形率及其死亡率,组间无统计学差异。结论:①慢性化学性非细菌性前列腺炎能明显降低雄鼠的精子活力,而慢性自体免疫性非细菌性前列腺炎并不降低雄鼠的精子活力;②两型慢性非细菌性前列腺炎对大鼠的妊娠率和产仔数、仔鼠性别比例、外观畸形率及其死亡率都不产生实质性影响。     

皮下植入睾酮硅胶丸对雄性大鼠生育的控制

作者将装有约12毫克睾酮的2.5厘米长的硅胶管,二端用医用硅胶粘合剂封闭后,植入雄性成熟大鼠的肩骨上部皮下。经过1—2个月后解剖。对交配情况、附生殖器的生化情况以及睾丸的组织学等作了研究。植入一枚睾酮硅胶丸的雄鼠,在1—2个月时,或植入2枚睾酮胶丸一个月的雄鼠,它们附睾中的精子仍有活动能力,交配后雌鼠能正常产仔。植入2枚睾酮硅胶丸二个月的雄鼠,在精母细胞阶段就抑制了精子发育,附睾涂片无精子。间质细胞萎缩,交配后不产仔。将硅胶丸取出后一个月,睾丸组织、附睾中精子的活动能力及生育都恢复正常。