压电免疫球蛋白微阵列免疫传感器抗体固定方法的研究

目的构建一种新型压电免疫球蛋白微阵列免疫传感器,探索SPA法在金电极表面进行抗体固定的最佳条件。方法以AT切型、基频10MHz的金膜石英晶体作为换能器,将抗人免疫球蛋白单克隆抗体固定在石英晶体电极表面,根据SPA能通过分子间作用力与Au原子形成稳定的SPA-Au复合物的原理,对抗体进行固定,对SPA固定抗体的最佳温度及时间条件、抗体浓度、pH值等影响因素进行实验研究。结果包被SPA宜于采用低温、长时间的包被方式,进行抗体固定的抗体溶液最佳浓度5mg/ml,pH值7.2。结论采用SPA法在石英晶体表面进行抗体固定操作简单、省时,是压电免疫传感器抗体固定的有效方法。     

适配子型压电石英晶体传感器检测人免疫球蛋白E的实验研究

目的研制适配子型压电子石英晶体传感器阵列与常用的免疫分析方法进行比较,以评价压电石英晶体传感器阵列检测灵敏度、特异性与临床检测的可行性。方法以AT切型、基频10MHz的镀金石英晶体作为换能器,将抗人免疫球蛋白E适配子固定在石英晶体电极表面,用2×5检测池阵列构建新型适配子型压电石英晶体传感器;分别进行标准品及人血清免疫球蛋白E的检测,研究了检测灵敏度、特异性等检测指标。结果该传感器可快速完成检测且无非特异性反应,在检测范围内传感器的响应特性良好,压电晶体频率偏移值与免疫球蛋白浓度呈良好的线性关系;将此免疫传感器用于人血清标本的测定,结果与化学发光法符合(r值=0.9924)。结论研制的传感器阵列具有灵敏度高、特异性好,检测通量高,无需标记,操作简便,能实时在线检测等优点,可用于临床实验诊断,具有较高的临床推广应用价值。     

压电免疫传感器微阵列检测铜绿假单胞菌的实验研究

目的构建一种新型压电铜绿假单胞菌免疫传感器,并对铜绿假单胞菌进行检测,以探索临床应用的可行性.方法在免疫传感器微阵列表面固定铜绿假单胞菌单克隆抗体,对铜绿假单胞菌菌液进行检测,绘制用于检测的标准曲线并进行曲线拟合,并对50例临床标本进行检测,结果与传统分析方法进行对比.结果铜绿假单胞菌菌液的浓度在103～109细胞/ml范围内,菌量与传感器频率的变化之间呈良好的指数线性关系,指数式回归方程为△F=12.6625×C01757,r=0.9949;通过对未知浓度的铜绿假单胞菌菌液进行检测,定量结果与吖啶橙荧光显微镜直接计数法(AODC)的相关系数r为0.973;50例临床标本检测结果与常规培养检测法高度符合(P＞0.05).结论应用压电石英晶体铜绿假单胞菌微阵列免疫传感器能够对铜绿假单胞菌进行的定量和定性分析,该技术应用于检测铜绿假单胞菌具有时间短、结果准确、无需长时间培养等特点,有较高的推广应用价值.     

压电免疫传感器检测乙肝表面抗原的实验研究

目的：研制一种新型、快速的用于检测乙肝表面抗原的压电免疫传感器。方法：采用SPA作载体吸附于压电免疫传感器的金电极表面上，再组装乙肝表面抗原单克隆抗体制成免疫传感器，将其用于临床血样的检测，探索了传感器的组装条件，考察了传感器的响应特性。结果：传感器的检测范围在0．004—0．03mg／ml。结论：该方法重现性和选择性好，易于操作，能快速有效地检测乙肝表面抗原。     

压电免疫传感器再生能力的试验研究

目的采用SPA法在镀金电极表面进行抗体固定,探索压电免疫传感器再生使用的最佳条件.方法对压电免疫传感器的检测时间、特异性,及再生试验的最佳试剂、时间进行实验研究.结果构建的压电免疫传感器检测时间为15min,无交叉反应;NaOH溶液再生10次后,频率响应下降为原有的75%.结论所构建的压电免疫传感器检测时间短,特异性好,可用于临床标本的检测,NaOH溶液用于石英晶体再生的效果较好,极大地降低了使用成本.     

用于液相检测的压电免疫传感器研究

利用聚乙烯亚胺法，将Ｃ２型葡萄球菌肠毒素（ＳＥ）抗体固化在未抛光的压电晶体的金电极上，利用双调式振荡电路制作的振荡器，构建的压电免疫传感器其稳定性、特异性都较好     

新型压电石英晶体免疫传感器抗体固定方法的建立

目的探讨并建立一种高效免疫微阵列传感器抗体固定的方法.方法分别采用普通蛋白A(SPA)法与经巯基取代SPA(自组装SPA)法固定石英晶体微阵列上抗体,并用石英晶体微天平(QCM)分别检测其不同浓度抗体、抗原条件下发生抗原抗体反应,并对其抗体包被量、反应频率漂移、非特异性反应等多项指标进行统计学分析.结果与传统SPA法相比,自组装SPA具有抗体固定量大、反应速度快、频率下降明显、非特异性反应低等优点.结论自组装SPA法具有比普通SPA法包被一致性更高的优点,可以作为新一代免疫传感器的抗体固定方法.     

压电免疫传感器两种抗体固定方法的比较研究

目的比较压电免疫传感器两种抗体固定方法的优劣,选择压电免疫传感器抗体敏感膜固定的最佳方法. 方法分别采用巯基化方法和蛋白A(SPA)固定法将抗人胰岛素单克隆抗体固定在压电免疫传感器金膜电极表面,比较不同抗体工作浓度、不同浓度标准溶液反应条件下抗体固定量、一致性以及传感器响应能力如频率变化、反应时间、检测线性范围以及反应非特异性等. 结果两种固定方法制备的压电免疫传感器其检测灵敏度、反应时间相当,但巯基化固定方法抗体固定量大、一致性好、检测线性范围较宽、非特异反应低. 结论抗体巯基化法制备的压电免疫传感器具有检测范围宽、非特异反应低等优点,是免疫传感器抗体敏感膜制备的理想方法.     

基于HRP-DAB信号放大系统的压电石英晶体DNA传感器微阵列检测表皮葡萄球菌的研究

目的在已构建的压电压电石英晶体DNA传感器检测系统中引入HRP-DAB生物信号放大系统,提高传感器的检测灵敏度,并基于该系统建立一种表皮葡萄球菌快速检测方法。方法采用自组装技术在压电石英晶体DNA传感器上固定针对表皮葡萄球菌的寡核苷酸探针,将掺入生物素(biotin)-dUTP的表皮葡萄球菌靶DNA与之进行杂交反应,加入HRP-链亲和素(streptavidin)、DAB工作液,观察反应频率变化;对35份表皮葡萄球菌感染的临床标本进行检测,并与传统培养法进行比较。结果该压电石英晶体DNA传感器微阵列检测表皮葡萄球菌的灵敏度为95.5%,特异度为84.6%,正确诊断指数为0.801,检出限为2×102CFU/ml,与血培养法差异无统计学意义(P>0.05)。结论基于HRP-DAB信号放大系统的压电石英晶体DNA传感器微阵列,有效的提高了压电石英晶体传感器检测的灵敏度,可用于临床病原菌感染的快速检测,具有较高的临床推广价值。     

压电石英晶体传感器阵列检测尿微量白蛋白的实验研究

目的探讨并建立压电石英晶体免疫传感器检测尿液微量白蛋白的方法。方法采用葡萄球菌A蛋白(SPA)法固定石英晶体微阵列上单克隆抗白蛋白抗体,并用石英晶体微天平(QCM)检测样品反应频率漂移量;优化传感器检测条件并运用回收实验,天内、天间重复试验来验证其准确度与精密度,并将免疫比浊法作为参比方法进行方法学比较。结果该传感器平台的非特异性反应低(FS<20Hz),线性范围广(0.01~40mg/L),灵敏度达到5μg/L,准确度高(CV<10%),精密度试验总体CV<10%,并且具有检测时间短(<10 min)等优点,与传统的免疫比浊法具有可比性。结论采用压电石英晶体免疫传感器法检测尿液微量白蛋白,是一种可行的检测方法,可应用于临床检测并为诊断早期肾损伤提供帮助。     

压电免疫传感器的研究现状及应用前景

在介绍了压电石英晶体免疫传感器基本原理的基础上，归纳了其灵敏度高、特异性高、交叉反应低等特点及其在生物医学工程中的应用，并对其用于检测肌钙蛋白I（cTnI）的可行性进行了简要评述；指出该技术无需任何标记和分离步骤，仪器简单、操作方便，并可快速检测和精确定量，具有十分广阔的应用前景。     

肝移植术后感染菌群分布及耐药性

目的 探讨肝移植术后感染的病原菌分布及耐药性分析。方法 对医院肝移植患者术后送检的各类标本中分离出的156株病原菌的分布及耐药性进行回顾性分析。结果 68例肝移植手术术后感染的发生率为67．6％，其主要病原菌分别为肺炎克雷伯菌（17．3％）、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（14．1％）、白色念珠菌（11．0％）和铜绿假单胞菌（11．0％），病原菌具有多重耐药与高耐药性的特点，碳青酶烯类、糖肽类抗菌药物仍分别是革兰阴性杆菌与革兰阳性球菌最有效抗菌药物。结论 感染是肝移植术后的主要并发症之一，有效地预防、早期确诊和治疗是控制感染的关键。     

微阵列技术在毒理学研究中的应用

毒理基因组学是一门研究与环境因素所致健康危险性有关的人类基因组的新学科。这是毒理学和基因组技术结合所产生的一门新的学科分技。微阵列技术即基因芯片技术包括芯片制备、待检样品制备、探针杂交、检测和数据处理。微阵列技术在毒理学主要应用于可疑毒物的鉴定、作用机制的研究、剂量-反应关系的评价、化学混合物中交互反应的鉴定、暴露的生物标记和易感性的生物标记。例如微阵列技术已用于研究人膀胱癌的生物标记以及氯化镉、苯并（a）芘和三氯乙烯相关基因调控的指纹。还介绍了一种全自动、多用途、新型的分子生物学工作站NanoChip分子生物系统。     

丙种球蛋白治疗早产儿呼吸机相关性肺炎疗效观察

探讨静脉丙种球蛋白治疗早产儿呼吸机相关性肺炎的疗效 ,采用随机对照的方法 ,将 110例确诊为呼吸机相关性肺炎的早产儿分为两组。对其中 5 4例患儿给予静脉滴注丙种球蛋白 4 0 0 m g/ kg/ d,连用 3d。结果显示 ,加用丙种球蛋白的治疗组患儿死亡率为 2 3.2 % ,对照组为 39.9%。统计学分析χ2 =4 .0 7,P<0 .0 5 ,有显著性意义。提示应用静脉丙种球蛋白治疗早产儿呼吸机相关性肺炎疗效确切