在肝炎科研中建立微量固相放射免疫测定法

今年4月,上海市传染病医院免疫病毒研究室与我院微生物学教研组病毒室协作,在肝炎科研中应用国产聚苯乙烯微量板,~(125)Ⅰ或~(131)Ⅰ标记抗体成功地建立了微量固相放射免疫测定法(Micro-solid phase radioimmunoaggay)。这一新技术具有灵敏度高、特异性强、应用范围广和微量快速等优点。其基本原理为将特异抗体吸附于固相载体(聚苯乙烯     

应用微量固相放射免疫测定法(Micro-SPRIA)检测甲型肝炎抗原

自从Feinstone应用免疫电镜法发现甲型肝炎(下称甲肝)抗原以来,有关甲肝的研究进展很快。目前测定甲肝抗原、抗体的方法有补体结合试验、免疫粘附血凝试验(IAHA)及固相放射免疫测定法(Micro-SPRIA)。国内已有免疫电镜及IAHA检测甲肝抗原的报道。最近我们应用国产聚苯乙烯微量细胞毒试验板(4×10孔,上海塑料三厂出品)作为载体,自甲肝患者恢复期血清提取IgG,分别以~(125)Ⅰ或~(131)Ⅰ标记后,对4份甲肝阳性粪便抗原作固相放射免疫测定,获得满意结果。     

酶连接免疫吸附测定法检测血吸虫病血清抗体的报告

酶连接免疫吸附测定法Enzyme—linked immuno-sorbent assay(简称酶标记法,ELISA)是继免疫萤光法(IFA)和放射免疫测定法(RIA)之后的又一免疫学新技术,和IFA、RIA一样同属于一种“技术杂交”产物,具有两重特性。如酶标记法既具有免疫学反应的特异性、敏感性又同时具有酶反应的高度专一性和敏感性,因而能进一步用来提高免疫学的检测水平。酶标记法于1971年始由Van Weemen等介绍和命名。并分别以酶与抗体或抗原结合来检测抗原或抗体获得结果。Engvall等首先创用聚苯乙烯(Polystyrene)为固     

固相免疫放射测定法检查乙型肝炎抗原和抗体

检测乙型肝炎表面抗原(HBsAg)和抗体(抗—HBs)主要用以诊断乙型肝炎和研究乙型肝炎的流行病学,评价药物或疫苗对乙型肝炎的免疫作用,从献血人员或饮食服务人员等健康人群以及胎盘球蛋白等生物制品中检出乙型肝炎抗原携带情况等。目前,检出乙型肝炎抗原、抗体的新方法很多,其中最敏感的有放射免疫测定法和反向被动血凝法。最近,我们经过反复实验初步建立了固相免疫放射测定法,并用以对人血清和胎盘球蛋白进行了抗原(HBsAg)、抗体(抗—HBs)的检测实验。实验结果表明,此法既简便又灵敏,值得推广应用。本文着重介绍固相免疫放射测定法并与反向被动血凝法进行比较。     

固相放射免疫测定血清甲状腺素的临床应用价值

<正> 用放射免疫分析法(RIA)测定血清甲状腺素(T_4)在诊断甲状腺疾病中有重要意义,但以往应用的双抗体法或聚乙二醇(PEG)法,操作比较复杂,流程较长,病人需等候几天才能获得结果。固相放射免疫法Solid—Phase Radioimmunoassay(SPRIA)是近十余年来放射免疫技术的一项新进展,它利用固相抗体(或抗原)作为免疫吸附剂,使其与相应的抗原(或     

放射免疫法在妇产科临床的应用

近年来临床内分泌学进展很快,其主要原因是内分泌测定技术特别是放射免疫测定法(RIA)有了很大发展。1959年Berson.Yalow氏首先用放射线同位素标记胰岛素抗原与胰岛素特异抗体进行免疫反应来测定胰岛素的含量。此法灵敏度高,特异性强,很引人重视。其后相继应用于各种蛋白质多肽激素(促黄体生成素LH、促卵泡生成素FSH、绒毛膜促性腺激素HCG、促肾上腺皮质激素ACTH等)的血中微量测定。最近已用于测定低分子的固醇类激素(雌激素、孕激素、付肾皮质激素),丘脑下部激素,垂体后叶     

癌胚抗原时间分辨荧光免疫测定法

本文报告用时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)技术定量检测癌胚抗原(CEA)方法。一、材料和方法: 1.E_u~(3+)标记抗体制备:方法同作者前文报告。 2.固相抗体制备:以聚苯乙烯微量滴定条为固相载体。取两株经纯化抗CEA McAb IgG C_6和C_7按3:7混合,用0.1ml/L PH9.6碳酸盐缓冲液配成25ug/ml。每孔加200ul,4℃包被24小时。 3.测定方法:固相抗体微量滴定条孔中加CEA标准或待测样品50ul/孔,补加50mmol/L PH     

酶联免疫吸附试验影响HBsAg常见因素与对策

<正>酶联免疫吸附试验(enayme liked immunosorbent assay ELISA)是一种常用的固相酶免疫测定法。ELISA的基本原理是:使抗原(或抗体)结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性;使抗原(或抗体)于某种酶联结成酶标抗原(或抗体)     

非放射性标记免疫法测定性激素水平

性激素测定法,国内外一般均采用放射免疫测定法(RIA),而用非放射性标记免疫法如磁分离酶联免疫测定法,目前国内已有 应用.磁分离酶联免疫技术是80年代中期瑞士Serono诊断中心发明的一种非同位素免疫检测先进技术,称为磁性抗体免疫技术 (MAIA).该技术在游离型标记抗体和标记抗原.抗体复合物分离中具有完全和快速的优点.我们采用Biochem Immunosystems公司的产品,P(孕酮)、T(睾酮)和PRL(催乳素)试剂盒,用 SEROZYME-Ⅱ酶联免疫测定仪,测定了50例标本性激素P、T、 PRL的值,同时用放射免疫法(RIA)测定,结果经统计学处理,对磁分离酶联免疫测定,即MAIA法进行探讨.     

固相免疫放射测定法检查乙型肝炎抗原及抗体

<正> 目前检出乙型肝炎抗原(HBsAg)及抗体(抗HBs)的新方法较多,主要应用于诊断乙型肝炎;研究乙型肝炎的流行病学;评价药物或疫苗对乙型肝炎的免疫作用,从献血人员或饮食服务人员等健康人群以及胎盘球蛋白等生物制品中,检测乙型肝炎抗原携带情况等。检查乙型肝炎最敏感的方法有放射免疫测定法和反向被动血凝法。我们初步建立了固相免疫放射测定法,并对218份血清及32份胎盘球蛋白进行测定,实践证明此法既简便又灵敏,值得推广应用。本文着重介绍固相免疫放射测定法并与反向被动血凝法做了比较。     

酶标记抗体法检测乙型肝炎表面抗原的初步结果

目前国内检测乙型肝炎表面抗原方法一般采用对流电泳、反向间接血凝或放射免疫自显影等方法。由于有的不够敏感或需要特殊设备,操作过于复杂,故目前不能满足基层医疗单位推广应用。近年来建立起固相免疫酶法,其原理是使抗原和抗体在支持物——如琼脂糖珠(Sepharose—4B)上相互作用,然后用酶标记抗体处理,最后用酶的底物显     

丙肝抗体新型检测法及应用

建立灵敏的检测抗丙型肝炎病毒抗体(抗HCV)方法,对于丙型肝炎(HC)的流行病调查和丙肝诊断,具有重要意义。本文采用新型的时间分辨免疫荧光分析法(TRIFMA)检测丙肝抗体,方法具有灵敏度高,标记方便、标记物稳定、可大量检测样品等优点。用0.1MP~H7.5PBS对丙肝抗原作1:100稀释,包被于预处理的微量滴定条孔壁,用0.05MP~H7.8PBS作为封闭液,制备固相抗原;用0.25MP~H8.5CBS溶解免抗人IgG抗体(RAHIgG).在双功能螯合剂DTPAA存在下与33mM     

建立恙虫病立克次体抗原特异性SPRIA实验方法的研究

固相放射免疫分析(Solid Phase Radioimmunoassay,简称SPRIA)是放射免疫分析技术中的一种,是由Catt等于1967年首先创立的。他们使用塑料为固相载体,将抗体吸附于表面,使分析系统中不溶性固相结合物与液相中游离的抗原分开,无须加分离剂或其他处理,因而不但具有其他放射免疫     

免疫微球的制备和应用

人工合成1μm左右的球形颗粒作为载体,将抗原或抗体结合在此载体上,即成为带有免疫配基的微球。此免疫微球兼有固相化试剂特有的优点和免疫反应的高度专一性。目前,在临床实验室中它的应用主要分三个方面:(1)胶乳疑集反应,用于快速诊断及定量测定。(2)在放射免疫测定中用作固相抗体。(3)免疫微球与细胞表面的抗原或抗体起反应,对细胞进行标记。     

胶体金免疫层析技术在寄生虫检测中的应用

胶体金免疫层析技术（Gold imnmnoehromatography assay,GICA）是一种将胶体金标记技术、免疫检测技术和层析分析技术等多种方法有机结合在一起的固相标记免疫检测技术。它的原理是：以条状纤维层析材料为固相,通过毛细作用使样品溶液在层析条上泳动,并同时使样品中的待测物与层析材料上针对待测物的受体（抗原或抗体）发生高特异性、高亲和性的免疫反应,层析过程中免疫复合物被富集或截留在层析材料的一定区域（检测带）,     

固相放免方法测定IgG类风湿因子

本文报道了用固相放免技术测定IgG类风湿因子的方法和临床测定结果。本法以聚苯乙烯微量细胞培养板为载体,以兔IgG为抗原,以~(125)Ⅰ标记的提纯兔抗人IgG作为抗抗体,检测类风湿因子。30名献血员血清,~(125)Ⅰ标记抗体结合率为0.54～1.74%,平均数为0.90±1.4%。而57例类风湿性关节炎患者为1.39～18.28%,均数为5.57±1.72%,两组比较差别显著(P<0.01)。     

酶联免疫吸附试验检测甲型肝炎抗原

自从应用免疫电镜法(IEM)检测甲型肝炎抗原以来,其他灵敏检测技术如免疫粘附血凝试验(IAHA)、固相放射免疫试验(SPRIA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)等也相继建立,其中以 ELISA 检测甲型和乙型肝炎抗原和抗体较为简便、特异、灵敏。本文介绍ELISA 检测甲型肝炎抗原,并与 IEM 和 SPRIA 进行比较。     

液相酶免疫分析的研究现状

酶联免疫吸附试验(简称 ELISA),又名酶免疫分析(简称 EIA),是 Engvall 等及 VanWeeman 等分别于1971年提出的一种将可溶性抗原或抗体吸附在固相上,利用酶标抗体或抗原定量检测相应的抗原或抗体的方法。本法已应用到免疫学、内分泌学、生物化学、微生物学和寄生虫学等方面。1972年 Ruben-stein 等建立了不需固相载体,可直接从溶液中测定反应结果的均相 EIA。1974年 Voller等以聚苯乙烯微量滴定板为载体,建立了微板法,是当前应用最广的一类 EIA 法。1976年 Belanger 等运用连续双抗体饱和法的原     

固相致敏血球凝聚试验检测肉毒毒素的改进

为了克服ELISA和固相放射免疫(SPRIA)试验中存在的某些问题,Braolburne等1979年利用抗体致敏红血球作为显示剂,设计了固相血球凝聚(SPACE)系统,即先用抗体包被聚苯乙烯血凝滴定板,洗板后加检材(抗原)结合,然后加抗体致敏红血球作用,根据血球凝聚(固相吸附)     

放射免疫分析法原理及操作注意事项

放射免疫分析的原理[1]:就是利用放射性核素标记抗原或抗体,然后与被测的抗体或抗原结合,形成抗原抗体复合物的原理来进行分析的。它又分为两种方法。1竞争性RIA,又称传统RIA主要特点:标记的是抗原。其原理:未知抗原Ag+标记抗原Ag*+已知定量抗体Ab标记抗原与抗体复合物Ag*Ab+未知抗原与抗体复合物Ag Ab+游离标记抗原Ag*(去除)(未知抗原多,标记抗原与定量抗体结合的复合物就少,表现为负相关)。临床上甲胎蛋白(AFP),癌胚抗原(CEA),β2-微球蛋白(β2-MG),铁蛋白(Fer),人绒毛膜促性腺激素β亚单位(HCG-β)等的检测都是竞争性RIA法原…