大鼠子宫内膜抗菌成分的初步分析

作者以１％乙酸冲洗ＳＤ大鼠子宫内膜，获得子宫内膜酸溶性提取物，利用琼脂糖弥散法和电泳凝胶琼脂糠弥散法抗菌试验发现，子宫内膜提取物有三条主蛋白带对致病性大肠杆菌ＭＬ３５Ｐ耐药株有强抗菌活性。本实验的结果提示子宫内膜合成一类抗菌多肽，可能在子宫抗菌机制中发挥重要作用。     

人大颗粒淋巴细胞抗生素肽的部分纯化

为探讨人大颗粒淋巴细胞抗菌分子的抗菌活性，采用制备性酸性尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳对人大颗粒淋巴细胞浆颗粒酸溶性提取物的抗菌组分ＨＬＰ－１，ＨＬＰ－２，ＨＬＰ－３进行分离纯化。结果：Ｔｒｉｃｉｎｅ－ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析显示，ＨＬＰ－２，ＨＬＰ－２均多肽混合物，其分子量范围分别是５．６－１３ｋｄ和５．６－８．８ＫＤ；ｈｌｐ－３Ｏ －７ｋｄ的单一多肽。     

人大颗粒淋巴细胞抗生素肽的部分纯化

为探讨人大颗粒淋巴细胞抗菌分子的抗菌活性，采用制备性酸性尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳对人大颗粒淋巴细胞胞浆颗粒酸溶性提取物的抗菌组分ＨＬＰ１、ＨＬＰ２、ＨＬＰ３进行分离纯化。结果：ＴｒｉｃｉｎｅＳＤＳＰＡＧＥ分析显示，ＨＬＰ１、ＨＬＰ２均为多肽混合物，其分子量范围分别是５６～１３ｋｄ和５６～８８ｋｄ；ＨＬＰ３为一７ｋｄ的单一多肽。琼脂糖弥散法和电泳凝胶琼脂糖弥散法抗菌试验显示，ＨＬＰ１、ＨＬＰ２、ＨＬＰ３对致病性大肠杆菌ＭＬ３５Ｐ氨苄青霉素耐药株、金葡球菌ＡＴＣＣ２５９２３株、绿脓杆菌ＡＴＣＣ２７８５３株均有很强的杀菌作用。提示人大颗粒淋巴细胞存在的小分子抗菌多肽可能在人天然免疫的抗感染防御机制中发挥了重要作用     

大鼠子宫内膜慢性缺血引起子宫内膜端粒酶和c-kit表达减少

目的观察大鼠子宫内膜慢性缺血后子宫内膜厚度、子宫内膜腺体数目的变化、同时检测端粒酶(TERT)、POU5f1、c-kit和caspase3的表达。方法实验组通过结扎8周龄SD大鼠双侧子宫动脉构建慢性子宫内膜缺血性损伤模型(实验组),对照组为假手术组。通过阴道细胞涂片判定性周期。3个月过后,于发情期处死SD大鼠,取子宫内膜组织HE染色比较实验组和对照组子宫内膜厚度、腺体数量;免疫组织化学技术检测端粒酶和caspase3的表达;荧光定量PCR检测c-kit、POU5f1和caspase3的表达;Western blot检测端粒酶、c-kit和caspase3的表达情况。结果和对照组比较,模型组内膜厚度(502±148)、腔上皮厚度(17.20±4.98)、腺上皮厚度(9.17±1.96)、内膜腺体数目(18.9±4.8)以及内膜腺体体积分数(0.15±0.02)和对照组内膜厚度(800±130)、腔上皮厚度(29.46±9.27)、腺上皮厚度(15.68±2.50)、内膜腺体数目(30±5.5)以及内膜腺体体积分数(0.40±0.16)比较均显著降低(P<0.05);模型组c-kit mRNA和蛋白表达水平[(0.23±0.01)、(0.31±0.13)]较对照组[(1.00±0.06)、(0.75±0.09)]显著降低(P<0.05);模型组caspase3 mRNA和蛋白表达水平[(1.43±0.22)、(0.67±0.23)]明显高于对照组[(1.00±0.16)、(0.40±0.08),P<0.05],端粒酶蛋白表达水平(0.64±0.19)明显低于对照组[(0.87±0.12),P<0.05]。结论子宫内膜慢性缺血以及子宫内膜慢性缺血引起的端粒酶和c-kit表达下调,caspase3表达增加可能是薄型子宫内膜发病的一个因素。     

活血化瘀中药靶向给药祛除大鼠子宫内膜的初步研究

目的研究子宫腔内靶向应用活血化瘀中药-祛膜止崩液祛除子宫内膜治疗“功血”的有效性。方法选择处于动情前期的成年雌性SD大鼠30只，分为空白组、大剂量组、小剂量组，测量用药前后子宫湿重、子宫指数，并观察子宫内膜的病理变化。结果所用活血化瘀中药-祛膜止崩液能不同程度的破坏成年雌性SD大鼠的子宫内膜，减轻其子宫湿重、子宫指数。结论活血化瘀中药-祛膜止崩液能祛除子宫内膜，使其不能再生，从而从根本上治愈功血。     

大鼠子宫内膜增生动物模型的建立

目的建立大鼠子宫内膜增生的动物模型。方法给大鼠隔日肉内注射雌二醇1 mg/kg,于第45 d、50 d、60 d、70 d分别进行子宫组织病理学检查,直至内膜变厚,呈复层上皮时停药,于停药后第0、3 d、5 d、7 d、14 d、21 d分批观察子宫组织病理学变化情况。结果注射雌二醇第60 d模型成功,子宫内膜变厚,呈复层鳞状上皮,有的或与柱状上皮交替出现,但腺体明显减少,停药后21 d内这种病理改变仍持续。结论隔日肉内注射雌二醇1 mg/kg,连续60 d即可造成大鼠子宫内膜增生动物模型,主要的病理学变化为子宫内膜变厚,呈复层鳞状上皮或与柱状上皮交替。     

子宫内膜增生过长与内膜腺癌细胞核结构成分分析

用体视学方法对正常增殖期子宫内膜、囊腺型和腺瘤型增生过长及高分化内膜腺癌各5例腺上皮细胞核的超微结构进行形态计量分析。结果表明:在子宫内膜细胞癌变过程中最主要的变化为核浆比、核仁体积及常染色质体密度的增大,这些改变可以作为病理学诊断较有意义的参考指标。     

宫腔镜子宫内膜息肉切除术治疗子宫内膜息肉的效果分析

目的：探讨宫腔镜子宫内膜息肉切除术子宫内膜息肉的效果。方法对随机选取该院2012年1月-2014年1月收治的60例子宫内膜息肉患者采用宫腔镜子宫内膜息肉切除术进行治疗,比较两组患者治疗后月经周期的正常率及月经量的变化。结果所有患者手术均顺利完成,手术中无子宫穿孔、TURP综合征、周围脏器损伤、宫腔粘连、空气栓塞、大出血等并发症发生,术后无感染、腹痛等不适。手术后6个月经量评分和月经期均显著少于手术前,差异有统计学意义(P<0.05﹚。该组所有患者至随访结束时,均未复发。结论宫腔镜子宫内膜息肉切除术是治疗子宫内膜息肉的有效方式,可有效地缓解子宫内膜息肉所产生的症状,可以明显改善月经紊乱、降低子宫内膜息肉复发,疗效满意,值得临床推广应用。     

重组人催乳素对大鼠子宫内膜异位模型作用的初步研究

【目的】初步了解重组人催乳素（rhPRL）对子宫内膜异位症（EM）的治疗作用。【方法】先建立大鼠EM模型50只，将建模成功大鼠随机分为6组：实验1组10例，实验2组10例，实验3组10例，Danazol对照组10例，生理盐水对照组6例，空白对照组4例。然后用不同浓度的rhPRL（每日分别为200μg／kg、100μg／kg、50μg／kg）给实验大鼠腹腔内注射，Danazol对照组每日灌喂Danazol（80mg／kg）；生理盐水对照组以与实验组等量的生理盐水腹腔内注射：空白对照组不加干预。观察指标：肉眼观察EM模型的消长及粘连情况，用流式细胞术测定CD3、CD4、CD8T淋巴细胞，用ELISA法测量血清中IL-2、IL-4的含量，大鼠阴道涂片，观察动情周期的变化。【结果】建模后60％的大鼠动情周期发生了改变。用rhPRL治疗后大鼠动情周期全部呈抑制状态，显示出rhPRL对性腺功能抑制。用rhPRL治疗后，异位病灶缩小，粘连受到明显的抑制，与Danazol相比无明显差异（P〉0．05），与生理盐水及空白组有显著差异（P〈0．05）。用rhPRL治疗后CD4／CD8比值升高，与生理盐水及空白对照组相比有显著差异（P〈0．05）。用rhPRL治疗后，大鼠体内白细胞介素IL-4水平下降，而IL-2却明显升高，与生理盐水及空白对照组相比均有显著差异（P〈0．05）。【结论】重组人催乳素对大鼠EM模型的生长及粘连有抑制作用，可能是通过对性腺功能的抑制及免疫功能的调节而发挥其作用。     

重组人催乳素对大鼠子宫内膜异位模型作用的初步研究

 【目的】初步了解重组人催乳素（rhPRL）对子宫内膜异位症（EM）的治疗作用。【方法】先建立大鼠EM模型50只，将建模成功大鼠随机分为6组：实验1组10例，实验2组10例，实验3组10例，Danazol对照组10例，生理盐水对照组6例，空白对照组4例。然后用不同浓度的rhPRL（每日分别为200μg／kg、100μg／kg、50μg／kg）给实验大鼠腹腔内注射，Danazol对照组每日灌喂Danazol（80mg／kg）；生理盐水对照组以与实验组等量的生理盐水腹腔内注射：空白对照组不加干预。观察指标：肉眼观察EM模型的消长及粘连情况，用流式细胞术测定CD3、CD4、CD8T淋巴细胞，用ELISA法测量血清中IL-2、IL-4的含量，大鼠阴道涂片，观察动情周期的变化。【结果】建模后60％的大鼠动情周期发生了改变。用rhPRL治疗后大鼠动情周期全部呈抑制状态，显示出rhPRL对性腺功能抑制。用rhPRL治疗后，异位病灶缩小，粘连受到明显的抑制，与Danazol相比无明显差异（P〉0．05），与生理盐水及空白组有显著差异（P〈0．05）。用rhPRL治疗后CD4／CD8比值升高，与生理盐水及空白对照组相比有显著差异（P〈0．05）。用rhPRL治疗后，大鼠体内白细胞介素IL-4水平下降，而IL-2却明显升高，与生理盐水及空白对照组相比均有显著差异（P〈0．05）。【结论】重组人催乳素对大鼠EM模型的生长及粘连有抑制作用，可能是通过对性腺功能的抑制及免疫功能的调节而发挥其作用。     

人膀胱粘膜抗菌蛋白研究

作者以１％乙酸冲洗正常成年男性膀胱，获得其粘膜酸溶性提取物。ＡＵ－ＰＡＧＥ电泳分析表明，该酸溶性提取物有十余条主蛋白带，但未出现常见的内源性抗菌多肽溶菌酶及防御素条带。以敏感的溶菌酶定量法例得溶菌酶仅占酸溶性提取物蛋白质总量的０．２２％。采用琼脂糖弥散法杀菌试验发现该酸溶性提取物对致病性大肠杆菌ＭＬ－３５Ｐ耐药株具杀菌活性；进一步以电泳凝胶琼脂糖弥散法杀菌试验分析，结果显示该酸溶性提取物中有一条主蛋白带有较强的杀菌活性，称之为人膀胱抗菌蛋白（ＨＢＰ），它约占酸溶性提取物蛋白质总量的４％。本文结果提示，人膀胱粘膜存在有抗菌性蛋白，这可能是正常泌尿道抗细菌感染的分子基础。     

缺血性室颤和再灌注室颤发生率的比较研究

为探讨缺血性室颤和再灌注室颤的发生率究竟谁高谁低，作者在麻醉后的在体猪心上共进行了１２７次不同程度、不同时间的缺血及缺血后再灌注实验。结果共发生室颤１３次，室颤发生率为１０．２％，其中缺血性室颤１１次，占８５％，再灌注室颤２次，占１５％。此结果表明，在本实验条件下，室颤主要由缺血引起，再灌注室颤只占１５％。本实验中，２例缺血性室颤在未充分恢复再灌前，直流电除颤失败，而在恢复再灌后，所有室颤皆经直流电除颤恢复窦性心律，提示充分恢复再灌对电击除颤治疗可能是有益的。     

血液流变学因素对缺血心肌冠脉流量的影响

选用长白猪８只于麻醉下开胸，于在体猪心上探讨心肌缺血时冠脉仍保留有部分扩张储备，而未被充分利用的机理。实验结果表明：降低左冠状动脉前降支（ＬＡＤ）内压至４．６７ｋＰａ时，由ＬＡＤ分别输入腺苷、山莨菪碱、生理盐水（２ｍｌ／ｍｉｎ），皆能诱发出明显的ＬＡＤ流量增加（Ｐ＜０．０５）。在维持ＬＡＤ内压不变，并持续分别输入上述三种溶液的同时，从ＬＡＤ远端取血测血液流变学指标，结果显示，输入生理盐水和山莨菪碱使红细胞压积降低，血浆粘度和全血粘度下降；心肌缺血时，冠脉内输注药物所诱发出的“冠脉扩张储备”部分是由于此种给药方式所引起的血液稀释及血液粘度下降的结果。它提示在冠脉狭窄时，血液粘度对狭窄远端的心肌血供可能是一个相当重要的因素，降低血液粘度可能并不亚于扩血管药物的作用。     

脑挫伤区及其远离部位脑组织中纤维蛋白的免疫组化观察

作者应用免疫组化ＰＡＰ法对诊断确切，死亡时间明确的１１例脑挫伤标本，包括挫伤局部及远离部位脑组织进行染色观察，结果发现：所有脑挫伤局部均有纤维蛋白形成；在挫伤远离部位、脑基底部、小脑、脑干等处的组织细胞和部分血管内及血管周围亦有纤维蛋白形成；在整个暴力传导通路上的脑组织细胞均有损伤。因此，作者认为脑挫伤应视为脑弥漫性损伤，不宜仅视为局部损伤。在脑组织细胞及血管内观察到纤维蛋白可作为脑挫伤的诊断指标之一。对单独存在的脑干损伤，用ＨＥ染色及纤维蛋白的免疫组化染色对比观察，可明显提高其诊断率。     

切应力作用下脐静脉内皮细胞的流变特性

用流室法研究人工培养脐静脉内皮细胞在切应力作用下的变形特性。对脐静脉内皮细胞分别施加０．６、３．８及７．５Ｐａ的切应力，作用１２小时。通过实时显微观测和计算机图象分析，结果证明切应力为３．８或７．５Ｐａ，作用１２小时后内皮细胞被拉长，长轴与流场方向一致；并且内皮细胞的拉长与定向程度、切应力大小及其作用时间的长短有关。     

硝苯吡啶使缺血心肌倒置T波迅速恢复直立的实验观察

作者在猪的心肌缺血模型上发现，硝苯吡啶可使缺血所致的Ｔ波倒置迅速恢复直立。麻醉在体猪心，缩窄左冠状动脉前时间支（ＬＡＤ）至冠脉内压４．６７ｋＰａ，经ＬＡＤ插管分别输入腺苷或硝苯吡啶，在持续９分钟缺血期间，两组间的心率、左心室舒张末压、左心室发展压、冠脉流量、冠脉灌注压皆相似，且腺苷组的冠脉流量还略高。但腺苷并未使缺血所致的Ｔ波倒置改善，而硝苯吡啶却使倒置的Ｔ波迅速恢复直立，作者并对该改变的相关因素和机理进行了讨论。     

赖型钩体pCX7探针Southern杂交分析不同血清群型钩体DNA

用赖型０１７株钩体ＤＮＡ基因库中筛选出的重组克隆ｐＣＸ７制备重组质粒，再以￣（３２）Ｐ标记为探针，对１１个血清群的１８株问号钩体、双曲钩体ＰａｔｏｃＩ株和细螺旋体ｉｌｌｉｎｉ３０５５株ＤＮＡＳｏｕｔｈ－ｅｒｎ杂交。放射自显影结果显示：双曲钩体ＰａｔｏｃＩ株和细螺旋体ｉｌｌｉｎｉ３０５５株ＤＮＡ未获杂交阳性区带；ｊａｖａｎｉｃａ（爪哇）、ｍａｎｈａｏ２（曼耗２）和ｒａｎａｒｕｍ（蛙）三个低毒力血清型的问号状钩体ＤＮＡ亦为阴性；１５株问号状钩体ＤＮＡ均出现了杂交信号，而且不同群型钩体ＤＮＡ杂交带型明显不同，赖型钩体０１７株（强毒株）与６０１株（弱毒株）杂交带型也有细微差别。作者认为，以ｐＣＸ７探针进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交可望作为钩体分类和鉴定的工具或参考。     

内毒素对冠状动脉循环的效应

本实验以猪为模型，探讨败血症性休克的主要毒素──内毒素对冠状动脉（冠脉）循环的影响。从静脉输注内毒素，浓度为４ｎｇ／ｍｌ按每分钟０．３ｎｇ／ｋｇ持续输入。该剂量内毒素未引起血压下降，也不损害冠脉的自动调节功能，冠脉流量保持恒定。但当冠脉灌注压降至４．６７ｋＰａ时，内毒素使冠脉流量增加（输注前和后分别为６２．５±２９．２和８９．５±３２．７ｍｌ／ｍｉｎ，Ｐ＜０．０５）。对内毒素增加冠脉流量的可能机理进行了初步探讨。     

赖型钩端螺旋体重组DNApCX7的特异性鉴定和限制性内切酶谱分析

本实验将赖型钩端螺旋体（简称钩体）ＤＮＡ基因库的克隆ｐＣＸ７制备成￣（３２）Ｐ－重组ＤＮＡ探针，对８个不同血清群的１７株问号状钩体、双曲钩体ＰａｔｏｃⅠ株以及细螺旋体３０５５株ＤＮＡ进行打点杂交；同时用１５种ＤＮＡ片断进行限制性内切酶谱分析。结果表明，该重组ＤＮＡ具有问号状钩体种（Ｓｐｅｃｉｅｓ）特异性，但与不同问号状钩体之间的同源性程度有差别；限制性内切酶谱分析发现ｐＣＸ７重组ＤＮＡ片段长约１．７ｋｂ，具有１个Ｂｇ１Ⅱ识别位点和３个ＢｓｔＢ１识别位点。     

血小板激活因子对大鼠肺循环的急性效应

对大鼠肺动脉灌注不同剂量的血小板激活因子（ＰＡＦ）以研究其对大鼠肺循环及心血管功能的急性影响。２０只大鼠分为４组，分别按每公斤体重灌注１００ｎｇ、２００ｎｇ、４００ｎｇ和８００ｎｇ的ＰＡＦ，测量给药前和给药后不同时点的大鼠肺动脉压、体循环压和心输出量。结果显示：给予ＰＡＦ后，肺血管出现收缩反应而形成肺动脉高压，而体循环血压和心输出量则明显降低，其变化程度均呈剂量依赖性。提示ＰＡＦ在肺动脉高压这一病理生理过程中起着一定的作用，灌注ＰＡＦ引起肺血管收缩的原因主要是其直接作用所致。