用原位杂交技术探讨EB病毒受体（EBVR／CR2）在鼻咽癌发病中…

本文经原位杂交技术检测发现部分人胚鼻咽上皮细胞、鼻咽癌细胞株及高分化鼻咽癌中均有很强的Ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒｒ病毒受体（ＥＢＶＲ／ＣＲ２）的病毒结合区ＳＣＲ１和ＳＣＲ２的表达，而低分化鼻咽癌中未检测到其表达，提示ＳＣＲ１和ＳＣＲ２的表达与ＥＢＶ的复制有关，ＥＢＶＲ／ＣＲ，可以介导ＥＢＶ感染鼻咽上皮细胞导致鼻咽癌的发生 。     

EB病毒DNA在正常全鼻咽组织及鼻咽癌中的表现

作者应用原位核酸杂交技术，采用ＥＢ病毒ＢａｍＨＩ－Ｗ片段为探针，检测了湘南地区正常鼻咽粘膜、鼻咽低分化鳞癌和未分化癌，高分化和中分化鳞癌，颈淋巴结转移性低分化鳞癌，颈淋巴结其它部位转移癌及鼻咽临近区恶性肿瘤标本。ＥＢＶＤＮＡ阳性例数分别为０／１０个，２４／２６个，２／７个，６／６个，０／４个和４／２４个。同时，对上述病例进行血清ＥＢ病毒壳抗原免疫球蛋白Ａ抗体检测，低分化鳞癌和未分化癌阳性例数为２３／２６个，与ＥＢＶＤＮＡ检测结果一致，经统计学处理，两者具相关性。实验结果表明：（１）湘南地区鼻咽癌的发生中ＥＢＶ感染起非常重要作用，ＥＢ病毒与鼻咽低分化鳞癌及未分化癌关系密切。（２）血清ＥＢＶ壳抗原ＩｇＡ抗体检测可作为对鼻咽癌早期诊断的有效监测指标。（３）在颈部原发灶不明的转移癌中有ＥＢＶＤＮＡ片段的检出，对确定鼻咽癌的诊断具有一定的价值。     

鼻咽癌病人多项免疫功能及EB病毒PCR检测的综合研究

为进一步了解ＥＢ病毒与鼻咽癌的关系,全面综合调查鼻咽癌病人的免疫功能,应用ＰＣＲ方法检测鼻咽病人组织块ＥＢ病毒ＤＮＡ,并对处国咽癌病人血清中ＥＢ病毒（ＥＢＶ－ＶＣＡ／ＩｇＡ）抗体、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性、脂质过氧化物降解产物（ＭＤＡ）及数种微量元素含量进行测定。结果：从鼻咽癌病人鼻咽部活检组织中成功地检测出ＥＢ病毒ＤＮＡ片断。进一步证实了ＥＢ病毒与鼻咽癌的发生有密切关系。并对鼻咽癌病人血清Ｖ     

非鼻咽部T细胞淋巴瘤与EB病毒的相关性

探讨ＥＢ病毒感染与非鼻咽部Ｔ细胞淋巴瘤的关系。用单克隆抗体ＵＣＨＬ－１，Ｌ２６及ＥＢ病毒编码的潜在膜蛋白－１，免疫组化染色确定肿瘤的免疫表型及ＥＢ病毒转化蛋白的表达。采用原位杂交方法检测ＥＢＶ编码的ＥＢＥＲＳ。结果；２１例非鼻咽部Ｔ细胞淋巴瘤ＥＢＥＲＳ５例阳性，其中结内淋巴瘤３例，肺和胃肠淋巴瘤各１例。阳性细胞约占肿瘤细胞的１０％－７０％。５例ＥＢＥＲｓ阳性病例中仅１例表达ＬＭＰ－１，为结内淋巴瘤     

EB病毒受体的放射配基结合分析

用３Ｈ－ＴｄＲ标记爱波斯坦－巴尔病毒（ＥＢＶ）进行结合饱和实验和竞争性抑制实验检测３种类型细胞的ＥＢＶ受体。结果表明，Ｂ淋巴细胞性白血病细胞系Ｒａｊｉ细胞存在高低两种亲和性ＥＢＶ结合位点，其Ｋｄ１＝１．２５×１０（－１３）ｍｏｌ／Ｌ，Ｂ（ｍａｘ）１＝９．８９病毒粒子／细胞；Ｋｄ２＝２．８０×１０（－１２）ｍｏｌ／Ｌ，Ｂ（ｍａｘ）２＝１７０．３５病毒粒子／细胞，而ＥＢＶ不与红白血病细胞系Ｋ５６２细胞结合。上皮细胞性低分化鼻咽癌细胞系ＣＮＥ－２Ｚ细胞也表达ＥＢＶ受体，其Ｋｄ＝６．１７×１０（－１３）ｍｏｌ／Ｌ，Ｂ（ｍａｘ）＝１０．２４病毒粒子／细胞。ＥＢＶ及α干扰素均能阻止３Ｈ－ＥＢＶ与Ｒａｊｉ细胞或ＣＮＥ－２Ｚ细胞的特异性结合。     

EB病毒与原发性鼻咽部B细胞性淋巴瘤有关与继发性者无关

目的：对１９ 例鼻咽部Ｂ细胞性恶性淋巴瘤与ＥＢ 病毒（ＥｐｓｔｅｉｎＢａｒｒ ｖｉｒｕｓ,ＥＢＶ） 感染的相关性进行研究。方法：利用免疫组织化学及原位杂交方法对ＥＢＶ 进行检测,并用免疫组化及原位杂交双染法标记肿瘤细胞,以鉴定ＥＢＶ阳性的细胞为Ｂ淋巴瘤细胞。结果：ＥＢＶ 编码的小ｍ ＲＮＡ探针（ＥＢＥＲ） 原位杂交显示,８ 例原发性鼻咽部Ｂ细胞性恶性淋巴瘤中３ 例绝大多数肿瘤细胞呈阳性表达,１ 例潜在性膜蛋白１（ｌａｔｅｎｔ ｍｅｍｂｒａｎｅ ｐｒｏｔｅｉｎ １,ＬＭＰ１）阳性。而１１ 例继发性鼻咽部Ｂ细胞性恶性淋巴瘤ＥＢＥＲ全部为阴性。全部病例进行了ＬＭＰ１ 检测,除１ 例原发者,全部阴性。利用ＥＢＥＲＩＳＨ（ＥＢＥＲ原位杂交） 和免疫组化ＣＤ 标记物进行双标记染色证实,ＥＢＥＲ 和ＬＭＰ１阳性细胞为ＣＤ２０ 阳性,ＣＤ４５ＲＯ 阴性。鼻咽部原发性Ｂ细胞性恶性淋巴瘤ＥＢＶ 表达４／８ ,而继发者为０／１１。结论：ＥＢＶ 与鼻咽部原发性Ｂ细胞恶性淋巴瘤有较高的相关性,而与继发性者无关。     

应用重组抗原检测鼻咽癌血清EBVTK抗体

应用重组抗原检测鼻咽癌血清ＥＢＶＴＫ抗体①陈尚武１，②黄迪２马涧泉１（中山医科大学１生化教研室２肿瘤研究所；广州，５１００８９）主题词鼻咽肿瘤／诊断；疱疹病毒４型，人；抗体，病毒／诊断应用；胸苷激酶／诊断应用中图号Ｒ７３９．６３鼻咽癌（ＮＰＣ）是我...     

鼻咽癌及鼻咽部粘膜中EB病毒DNA的检测

目的 检测鼻咽部粘膜及鼻咽中的ＥＢＶ ＤＮＡ片段,作为癌前病变的确立和癌变风险的评估指标。方法 用ＰＣＲ扩增ＥＢＶ的Ｂａｍ ＨＩＷ片段。结果 鼻咽癌中阳性率为８７．９％（１０２／１１６）,颈淋巴结转移灶６６．６％（２／３）,鼻咽癌放疗后鼻咽生炎７５．６％（２８／３７）,鼻咽粘膜不典型增生７１．１％（１５／２１）,鼻咽粘膜慢性炎和正常鼻咽粘膜上皮分别为２１％及２０％。结论：ＥＢＶ感染在鼻咽癌发生过程     

丙型肝炎病毒包膜蛋白基因片段的克隆与表达

应用ＲＴ－ＰＣＲ和基因重组技术，从湖南地区丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染者血清中克隆了ＨＣＶ包膜蛋白基因片段（Ｅ１，Ｅ２／ＮＳ１）经与已知基因型的ＨＣＶ－１，ＨＣＶ－Ｊ，ＨＣＶ－Ｊ６和ＨＣＶ－Ｊ８进行核苷酸序列的比较分析，这些基因片段属１ｂ型ＨＣＶ基因。将克隆基因重组于表达质粒ＰＭＡＬ－ＣＲＩ中，在大肠杆菌内进行高效表达，获得了融合蛋白ＭＢＰ－Ｅ１，ＭＢＰ－Ｅ２／ＮＳ１，经ＷｅｓｔｅｍＢｌｏｔ分析证实     

血清急性期蛋白EB病毒IgA／VCA，IgA／EA抗体测定在鼻咽癌诊断中的应用

测定１９０例鼻咽癌（ＮＰＣ）患者血清中急性期蛋白（ＡＰＰＳ）包括：唾液酸（ＳＡ）．α＿１－抗胰蛋白酶（α＿１－ＡＴ），α＿１－酸性糖蛋白（ａα＿１－ＡＧＰ），触珠蛋白（ＨＰ），铁传递蛋白（ＴＦ）和前清蛋白（ＰＡ）及ＥＢ病毒（ＥＢＶ）ＩｇＡ／ＶＣＡ，ＩｇＡ／ＥＡ抗体，并评价ＡＰＰＳ和ＥＢＶＩｇＡ／ＶＣＡ，ＩｇＡ／ＥＡ抗体对鼻咽癌的诊断价值。。将ＡＰＰＳ测定值经逐步判别分析统计学处理，求得判别函数，用以对ＮＰＣ进行判别诊断。结果发现：ＮＰＣ治疗前组ＡＮＰＳＥＢＶＩｇＡ／ＶＣＡ，ＩｇＡ／ＥＡ与临床病理诊断的符合率分别为８１．８８％和５６．５７％，而治疗后未复发组两者的符合率分别为８０．９５％和３３．３３％。结果表明：对ＮＰＣ的诊断和随访ＡＰＰＳ优于ＥＢＶＩｇＡ／ＶＣＡ，ＩｇＡ／ＥＡ抗体。     

不育男性精浆抗流行性腮腺炎病毒抗体测定结果分析

目的观察流行性腮腺炎病毒抗体在男性生殖道分泌液中的分布状况,探讨其对男性生殖功能的影响。方法采用微孔板酶联免疫吸附法(ELISA)对30例生育男性和110例不育症患者精浆中抗流行性腮腺炎病毒抗体免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)进行了检测。结果不育症患者精浆中腮腺炎病毒IgG阳性者61例(55.5%),抗体平均水平为367 U/ml;IgM阳性者9例(8.2%),抗体平均水平为56U/ml;IgG和IgM同时阳性者4例(3.6%);生育组仅6例(20.0%)IgG呈现阳性,抗体平均水平为148 U/ml,明显低于不育症者。不育症组IgG阳性率以无精子症组最高,IgM阳性率以少精子症组最高。精浆中IgG在精子活动力正常组和不良组、精浆AsAb阳性组和AsAb阴性组之间存在显著性差异(P<0.05)。IgM在WBC精液组和非WBC精液组、精浆AsAb阳性组和AsAb阴性组之间存在显著性差异(P<0.05或P<0.01)。IgG和IgM同时阳性在WBC精液组和非WBC精液组之间存在显著性差异(P<0.05)。结论精浆中腮腺炎病毒IgG阳性率与精子密度呈正相关。男性感染腮腺炎病毒所致的睾丸炎,可以引起精子数量严重减少或无精子症,并且可以影响精子的活动力,对以后生育功能可能带来不良的影响。     

煮沸处理对毛蚶中甲型肝炎病毒存活的影响

本实验的目的在于了解毛蚶被污染了甲型肝炎病毒后经通常煮沸食用的方法能否全部杀灭病毒。由于病毒主要积聚在贝类的消化系统,本实验人工接种10~5TCID_(50)的甲型肝炎病毒于活毛蚶的胃肠区,经过煮沸5、10、15、20、25、30和45min的处理后,测定毛蚶中甲型肝炎病毒的存活情况。毛蚶中甲型肝炎病毒的提取采用经改良的Johnson方法。病毒检测采用SL_7细胞,培养4至5周后用间接免疫荧光法检测感染细胞中的甲型肝炎病毒抗原。结果表明,煮沸45min后毛蚶中小部分病毒仍能存活,尽管此时接种标本的8管细胞中只有2管阳性,阳性细胞所占百分比仅为3.8％。     

乙型肝炎病毒感染DNA聚合酶的检测

应用氚标核苷酸标记被检者血清中HBVDNA聚合酶-P(DNA-P)活性,结果表明,此项检测比目前临床上肝炎病毒5项检测敏感,对乙型肝炎的临床诊断有重要意义。     

人聚合白蛋白受体对小儿ASC的检测意义

本文对50例小儿ASC(无症状HBsAg携带者)及小儿HB(乙肝)进行PHSA—R(人聚合白蛋白受体)及其它HBV感染标志检测。结果表明小儿ASC在流行病学及临床方面的危害性超过小儿HB并且PHSA—R的检测更能准确的反应HBV的传染性与其他HBV标志呈明显正相关。     

CVB-IgM抗体测定在诊断儿童病毒性心肌炎中的价值

以柯萨奇Ｂ组病毒（ＣＶＢ）感染的组织细胞为抗原，用间接免疫酶标法测定１０５例病毒性心肌炎（ＶＭＣ）患儿血清ＣＶＢ的ＩｇＭ抗体，与５９例其他病患儿（ＣＯＤ）和６７名健康儿童（ＨＣ）的结果比较，发现：ＶＭＣ组ＩｇＭ的几何平均滴度（ＧＭＴ），女性高于男性，（Ｐ＜０．０５）；且男女都高于ＨＣ组（Ｐ＜０．０１）。与ＣＯＤ相比，女性高于ＣＯＤ组，而男性无统计学意义。男女合并，如以滴度１１０作为ＩｇＭ诊断儿童ＶＭＣ的阳性标准，鉴别ＶＭＣ与ＣＯＤ和ＨＣ的符合率分别为６５．８５％和８３．７２％。表明ＣＶＢ－ＩｇＭ抗体用于儿童ＣＶＢ心肌炎的诊断有一定的参考价值。     

肝癌和癌旁组织中HCV—RNA及其负链的研究

该研究采用ELISA法,对肝癌患者的血清检测HCV—Ab,用Nested-PCR法对患者的血清、肝癌组织和癌旁组织检测HCV-RNA和HCV-RNA负链,探讨肝细胞癌中是否存在HCV-RNA及其复制状态。对照组血清检测HCV-Ab、HCV-RNA1/17阳性。肝癌组16/31 HCV-RNA阳性;癌旁组织15例测到HCV-RNA负链,癌组织只有6例测到负链。结论:血清中抗HCV检测不能完全反映肝内是否曾有HCV感染情况。癌组织和癌旁组织均能检出HCV-RNA,说明肝癌组织中感染着丙型肝炎病毒。肝癌组织中确实存在HCV-RNA负链,说明HCV-RNA能在肝组织内不断地自我复制。     

肾炎肾组织中HBV DNA的检测及其存在意义

应用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹分子杂交和免疫组化技术，检测１８例肾穿刺组织中ＨＢＶ ＤＮＡ和ＨＢＶ相关抗原的阳性情况。结果表明１５全ＢＶ ＤＮＡ阳性，其中８例成人和４例儿童为整合型，另３例儿童为游离型，有１３例ＨＢＶ抗原阳性。除肾小球外，肾小管亦表达ＨＢＶ抗原，提示ＨＢＶ ＤＮＡ在存在状态在成人主要为整合型，在儿童有整合型和游离型。     

肝组织中HDAg和HBcAg的检测及其意义

采用免疫酶染色法检查了２２例丁型肝炎病毒（ＨＤＶ）感染者肝组织连续切片上的ＨＤＡｇ和ＨＢｃＡｇ，同时对照检查了４２例乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）单纯感染者肝组织中的ＨＢｃＡｇ。结果发现ＨＤＡｇ主要存在于细胞核内，阳性细胞散在分布于肝组织中，细胞形态基本正常，少数细胞肿胀。ＨＢＶ合并ＨＤＶ感染者肝组织中的ＨＢｃＡｇ细胞核多呈阳性，细胞浆中较少有ＨＢｃＡｇ的阳性颗粒。在单纯ＨＢＶ感染中，可在其胸核及胞浆中同时查到ＨＢｃＡｇ的阳性颗粒，ＨＢＶ合并ＨＤＶ感染者肝组织中的ＨＢｃＡｇ阳性细胞数为６．６４±３．６０，单纯ＨＢＶ感染者为８．８５±３．７３，两者差异有显著性。对ＨＤＡｇ的表达与血清ＧＰＴ的相关性研究发现，ＨＤＡｇ的阳性细胞数与血清ＧＰＴ水平有相关性（ｒ＝０．４３２）。表明ＨＤＶ合并感染后对ＨＢＶ的复制有抑制作用，ＨＤＶ的细胞毒作用与肝细胞损伤有一定相关性     

新生儿与儿童乙肝和丙肝病毒感染及其防治的前瞻性研究

目的 为了评价新生儿和儿童乙肝病毒（ＨＢＶ）和丙肝病毒（ＨＣＶ）感染的现状以及防治水平，为预防儿童病毒性肝炎，提高儿童保健水平提供参考依据。     

HBV 感染者胃十二指肠粘膜HBV DNA地高辛原位分子杂交研究

目的：探讨HBV在胃十二指肠粘膜的分布,复制,表达及其意义。方法：应用地高辛原位分子杂交法检测62例HBV感染者胃十二指肠粘膜HBVDNA的分布状态,并与血清HBVM,胃十二指肠粘膜HBsAg,HBcAg,肝炎病情程度进行相关分析。结果：62例HBV感染者,27例（43．55％）胃肠粘膜检出HBV DNA,检出率与肝炎病情程度,血清HBsAg,HBeAg无明显相关,与血清HBVDNA,胃肠粘膜HBsAg,HBcAg密切相关,胃肠粘膜HBVDNA的表达表现为4种模式。结论：HBVDNA可在胃肠组织原位复制,其不同的表达模式反映了病毒复制或整合的状态。