原发性肝癌患者红细胞免疫粘附肿瘤细胞能力与红细胞CR1基因型及活性相关性分析

目的　研究原发性肝癌患者红细胞免疫粘附肿瘤细胞能力与红细胞ＣＲ１ 基因组密度多态性及活性的相关性。方法　采用ＰＣＲ 和Ｈｉｎｄ Ⅲ酶切技术测定红细胞ＣＲ１ 基因组密度多态性变化,同时用ＥＬＩＳＡ 和肿瘤红细胞花环试验测定红细胞ＣＲ１ 活性,并进行比较。结果　原发性肝癌患者红细胞ＣＲ１ 基因型点突变比率（４３－６ ％ ） 明显上升,与正常人（２０ ％ ） 相比,差异有显著性（ Ｐ＜０－０５） ;原发性肝癌患者３ 种ＣＲ１ 基因型的红细胞ＣＲ１ 活性都明显低于正常人（ Ｐ＜ ０－０１ 或 Ｐ＜０－０５） 。活性变化也不同。结论　原发性肝癌患者红细胞ＣＲ１ 活性及免疫粘附肿瘤细胞能力下降可分为三种不同类型,即原发型、获得型和混合型。     

肺癌患者红细胞CR1基因密度型分布与红细胞免疫变化的研究

目的检测３２例肺癌患者红细胞ＣＲ１基因密度型分布、红细胞免疫粘附肿瘤细胞功能及ＳＯＤ酶活性、β－内啡肽含量。方法ＰＣＲ法检测红细胞ＣＲ１基因密度多态性；红细胞花环法检测红细胞免疫粘附肿瘤细胞能力；放免法测定ＳＯＤ酶活性；ＲＩＡ法测定β－内啡肽含量。结果经与３１例正常人比较显示：肺癌患者ＣＲ１基因密度多态性分布与正常人不一致（χ２＝３．１９，Ｐ＜０．０５）；红细胞免疫功能及ＳＯＤ酶活性较正常人明显降低（Ｐ＜０．０１）；β－内啡肽较正常人明显升高（Ｐ＜０．０１）。同时还发现肺癌患者的红细胞粘附肿瘤细胞功能与ＳＯＤ酶活性呈正相关（ｒ＝０．３９．Ｐ＜０．０５）。结论肺癌患者红细胞免疫功能低下；ＳＯＤ酶活性降低；β－内啡肽含量升高有部分与红细胞ＣＲ１基因密度型改变有关     

肿瘤患者红细胞CR1基因组密度多态性的变化

目的研究恶性肿瘤患者红细胞ＣＲ１基因组密度多态性变化规律。方法采用ＰＣＲ和ＨｉｎｄⅢ酶切技术对恶性肿瘤红细胞ＣＲ１基因组密度多态性变化进行研究。结果１６４例恶性肿瘤患者红细胞ＣＲ１基因突变率４１．５％，明显高于１８９例正常人群（２１％），特别是年轻恶性肿瘤患者红细胞ＣＲ１基因点突变率可达６６．７％（２１例中），明显高于年轻正常人群（１９．８％，９６例）。在恶性肿瘤患者中红细胞ＣＲ１基因ＨＨ型的红细胞ＣＲ１活性高于红细胞ＣＲ１基因ＬＬ型患者，但低于正常人红细胞ＣＲ１活性。结论这些结果表明，红细胞ＣＲ１基因点突变率升高与免疫发病机理有相关性。     

原发性肝癌患者红细胞免疫粘附肿瘤细胞能力与红细 …

目的 研究原发性肝癌患者红细胞免疫粘附肿瘤细胞能力与红细胞ＣＲ１基因组密度多态性及活性的相关性。方法 采用ＰＣＲ和ＨｉｎｄⅢ酶切技术测定红细胞ＣＲ１基因组密度多态性变化，同时用ＥＬＩＳＡ和肿瘤红细胞花环试验测定红细胞ＣＲ１活性，并进行比较。结果 原发性肝癌患者红细胞ＣＲ１基因型点突变比率（４３．６％）明显上升，与正常人（２０％）相比，差异有显著性（Ｐ〈０．０５）；原发性肝癌患者３种ＣＲ１基因型的红     

湖北汉族人群对乙肝凤苗免疫应答能力与HLA—DRB1等位基因相？…

目的 分析ＨＬＡ－ＤＲＢ１等位基因型别与个体乙肝疫苗免疫应答水平的相关性。方法 对３７名湖北汉族健康自愿者进行ＨＢＶ血源型疫苗标准全程接种，共３次（０，１，６月 ），末次接种后８周用酶免疫法（ＥＩＡ）检测血清抗－ＨＢｓ抗体水平；同时，对全部受试     

湖北汉族人群对乙肝疫苗免疫应答的水平与HLA-I类分子多态性的相关研究

目的：探讨人群对乙肝疫苗免疫应答与ＨＬＡ遗传多态性的相关性。方法：对５２名湖北汉族健康自愿者进行ＨＢＶ血源疫苗标准全程接种,共３次（第０、１、６月）,末次接种后８ｗ用酶免疫法（ＥＩＡ）检测血清抗ＨＢｓ抗体水平：Ｓ／Ｎ≥２１为应答者;Ｓ／Ｎ＜２１为无应答者。同时对受试者进行ＨＬＡＩ类抗原多态性检测。结果：应答者４２人（８１０％）,无应答者１０人（１９０％）;无应答者与ＨＬＡＢ３９具有显著相关性,ＲＲ＝１７５,χ２＝５２２,Ｐ＜００５,而与ＨＬＡＢ６２呈负相关,χ２＝６４１,Ｐ＜００５。结论：在湖北汉族人群中,ＨＬＡＢ３９表型阳性个体对乙肝疫苗免疫应答水平明显低于其他个体,而ＨＬＡＢ６２表型阳性个体明显高于其他个体。     

甲状腺乳头状腺癌中EGFR、nm23-H1和p53蛋白的表达

目的：探讨 Ｅ Ｇ Ｆ Ｒ、ｎｍ２３ Ｈ１ 及ｐ５３ 蛋白在甲状腺乳头状腺癌中的表达及其与淋巴结转移的关系。方法：应用免疫组化 Ａ Ｂ Ｃ 法检测３６ 例有颈淋巴结转移的甲状腺乳头状腺癌的原发灶与转移灶和４０ 例无转移的甲状腺乳头状腺癌中 Ｅ Ｇ Ｆ Ｒ、ｎｍ２３ Ｈ１ 及ｐ５３ 蛋白的表达。结果：７６ 例甲状腺乳头状腺癌的 Ｅ Ｇ Ｆ Ｒ、ｎｍ２３ Ｈ１ 及ｐ５３ 蛋白的阳性表达率分别为５５３ ％ 、６０５ ％ 和１１８ ％ ;但有转移的甲状腺乳头状腺癌的 Ｅ Ｇ Ｆ Ｒ 阳性表达率高于无转移者（ Ｐ＜ ００５） ,且转移灶的 Ｅ Ｇ Ｆ Ｒ 阳性率明显高于其原发灶（ Ｐ＜ ００５） ;有转移的甲状腺乳头状腺癌的ｎ ｍ２３ Ｈ１ 阳性率低于无转移癌者（ Ｐ＜ ００１） ;甲状腺乳头状腺癌中 Ｅ Ｇ Ｆ Ｒ 的阳性表达与ｎ ｍ２３ Ｈ１ 的表达有负相关（ Ｐ＜ ００１） 。结论：甲状腺乳头状腺癌 Ｅ Ｇ Ｆ Ｒ 的过表达,ｎｍ２３ Ｈ１ 的低表达,二者表达的失平衡是其易于淋巴结转移的原因之一, Ｅ Ｇ Ｆ Ｒ,ｎｍ２３ Ｈ１ 联用可作为甲状腺乳头状腺癌淋巴结转移的评价指标。     

中国汉族乳腺癌中BRCA1基因的杂合性丢失和微卫星不稳定性

目的探讨中国汉族妇女乳腺癌与乳腺癌基因１的关系。方法对ＢＲＣＡ１区域内的４个微卫星多态位点，应用聚合酶链式反应（ＰＣＲ）－聚丙烯酰胺尿素凝胶电泳（ＰＡＵＧＥ）－ＤＮＡ银染方法，对上海市５０例乳腺癌患者进行了ＢＲＣＡ１有关微卫星的ＬＯＨ和ＭＳＩ研究。结果患者中ＬＯＨ的发生率为５８％，ＭＳＩ的发生率为４６％；对患者进行临床分组，发现病期越晚ＬＯＨ率越高，ＭＳＩ与临床分期的关系不很确定。结论提示中国汉族人的乳腺癌的发生同与ＢＲＣＡ１基因相连锁的微卫星ＤＮＡ有关，因而也可能与ＢＲＣＡ１基因的突变有关。     

肺癌患者红细胞CR1基因密度型分布与红细胞免疫变？…

目的 检测３２例肺癌患者红细胞ＣＲ１基因密度型分布，红细胞免疫粘附肿瘤细胞功能及ＳＯＤ酶活性、β－内啡肽含量。方法 ＰＣＲ法检测红细胞ＣＲ１基因密度多态性，红细胞花环法检测红细胞免疫粘附肿瘤细胞能力；放免法测定ＳＯＤ酶活性；ＲＩＡ法测定β－内啡肽含量。     

分泌抗金黄色葡萄球菌C1型肠毒素杂交瘤细胞系的建立及初步应用

应用常规方法建立了３株稳定分泌抗金黄色葡萄球菌Ｃ１型肠毒素（ＳＥＣ１）单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的小鼠杂交瘤细胞系Ｂ３、Ｃ４和Ｇ８。其中Ｂ３和Ｃ４均为ＩｇＧ１（ｋ），Ｇ８为ＩｇＧ２ａ（ｋ）。Ｂ３和Ｇ８与ＳＥＡ、ＳＥＢ及ＳＥＤ均无交叉反应；Ｃ４虽与ＳＥＡ和ＳＥＤ无交叉反应，但与ＳＥＢ有交叉反应。间接ＥＬＩＳＡ测定小鼠腹水效价为１０－５～１０－８。应用识别不同表位的ＭｃＡｂ建立了双ＭｃＡｂ夹心ＥＬＩＳＡ法检测ＳＥＣ１，敏感性可达１ｎｇ／ｍｌ。     

病毒性肝炎患者白细胞介素－6的检测及其临床意义

应用夹心ＥＬＩＳＡ检测了５６例乙型病毒性肝炎患者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣｓ）白细胞介素－６（ＩＬ－６）的诱生水平。乙型慢性活动性肝炎（ＣＡＨ）、乙型肝炎后肝硬化（ＨＣ）和乙型重型肝炎（ＳＨ）ＰＢＭＣｓ经脂多糖诱导后，ＩＬ－６的诱生水平分别为１２．８４±３．２６ｎｇ／ｍｌ、１１．７９±３．０１ｎｇ／ｍｌ和３８．４２±８．３７ｎｇ／ｍｌ，明显高于正常对照组（Ｐ＜０．０５～０．０１）。ＣＡＨ和ＳＨ患者的ＩＬ－６水平与肝细胞变性坏死，蛋白质合成障碍和患者的预后也有一定的关系。上述结果提示，机体内ＩＬ－６的调节紊乱可能与病毒性肝炎的发病机理有关。     

上呼吸道淋巴瘤的病理,免疫表型及其与EB病毒相关性的研究

目的研究中国北方人上呼吸道淋巴瘤的临床病理学、免疫表型及与ＥＢ病毒的关系。方法应用单克隆抗体ＵＣＨＬ１、Ｌ２６、４ＫＢ５及ＣＳ１４进行免疫组化染色,ＥＢ病毒寡核苷酸探针（ＥＢＥＲ１／２）原位杂交,观察１１２例上呼吸道淋巴瘤的免疫表型及ＥＢ病毒感染情况。结果１１２例上呼吸道淋巴瘤病例中７７例为Ｔ细胞淋巴瘤（６８８％）。３５例为Ｂ细胞淋巴瘤（３１．３％）。ＥＢＶＥＢＥＲ１／２原位杂交１０１例中５４例阳性,各例中阳性细胞占肿瘤细胞的１５０％～８５０％,阳性病例中Ｔ细胞淋巴瘤４８例（８８９％）,Ｂ细胞淋巴瘤６例（１１１％）。结论中国北方人上呼吸道淋巴瘤以Ｔ细胞淋巴瘤为多见,且与ＥＢ病毒有较高的相关性。     

抗磷脂抗体阳性SLE患者HLA DRB1、DQA1、DQB1基因单倍型研究

本文采用ＰＣＲ ＲＦＬＰ技术对抗磷脂抗体阳性（ＡＰＡ＋）ＳＬＥ患者ＨＬＡ ＤＲＢ１、ＤＱＡ１ 和ＤＱＢ１ 基因进行分型研究, 同时以上海地区汉族随机人群作对照, 发现这类病人的ＤＲＢ１＊ ０８０３ ＤＱＡ１＊ ０１０３ ＤＱＢ１ ＊０６０１ 单倍型频率显著增高（ Ｐ＜ ０－０１） 相对危险率为４－４５, 说明该疾病与此单倍型存在着很强的关联。     

中国汉人HLA—DQA1基因对类风湿关节炎的遗传易感性研究

用ＰＣＲ－ＰＡＧＥ方法，结合高灵敏的银染色作ＨＬＡ－ＤＱＡ１等位基因分型，研究ＤＱＡ１基因对类风湿关节炎（ＲＡ）的遗传易感性。选择无亲缘关系的广东籍汉族健康者１０６例和５０例ＲＡ患者。发现该方法测的６种ＨＬＡ－ＤＱＡ１等位基因中，ＲＡ组ＤＱＡ１＊０１０１（２７％，ＲＲ＝２．３３４，Ｐ＜０．００５，ＥＦ＝０．１５４）等位基因明显增高；而ＤＱＡ１＊０１０２（１％，ＲＲ＝０．０６８，Ｐ＜０．０１，ＰＦ＝０．５７７）明显下降；ＤＱＡ１的２种纯合子基因型（０１０１／０１０１和０３０１／０３０１）在ＲＡ组明显增高（Ｐ值分别小于０．０２５和０．００５）。上述结果显示：ＨＬＡ－ＤＱＡ１＊０１０１对ＲＡ有遗传易感作用，ＤＱＡ１＊０１０２等位基因有遗传抵抗作用；ＤＱＡ１基因型的检测对预测ＲＡ易感者和判断预后及疗效可能提供理论依据。     

系统性红斑狼疮患者B淋巴细胞EBV-LMP1和ZEBRA的表达研究

目的：探讨ＥＢＶ－ＬＭＰ１和ＺＥＢＲＡ在系统性红斑狼疮患者（ＳＬＥ）的表达情况。方法：间接荧光免疫标记，流式细胞仪检测。结果：ＳＬＥ患者Ｂ淋巴细胞中ＥＢＶ－ＬＭＰ１和ＺＥＢＲＡ的表达显著高于正常对照组（Ｐ＜０．０１）。活动期患者ＣＤ２３＋细胞ＥＢＶ－ＬＭＰ１和ＺＥＢＲＡ的表达率均高于ＣＤ１９＋细胞（Ｐ＜０．０１）。非活动期患者ＣＤ２３＋细胞ＥＢＶ－ＬＭＰ１表达也高于ＣＤ１９＋细胞（Ｐ＜０．０１）。但ＥＢＶ－ＺＥＢＲＡ表达在两亚群间差异没有统计学意义（Ｐ＞０．０５）。结论：朋病毒参与了ＳＬＥ的发病机制，病毒主要以潜伏期状态存在于患者中，病毒复制促进病情发展，检测Ｂ淋巴细胞ＥＢＶ－ＬＭＰ１和ＺＥＢＲＡ的表达率，有助于病情活动指标的判断。     

IgG-RF ELISA定量检测法的建立和应用

本工作以 Ｉｇ Ｇ Ｆｃ 片断为靶抗原, 用自制抗人 Ｉｇ Ｇ Ｆａｂ Ｈ Ｒ Ｐ 标记物为第二抗体, 建立了定量测定血中 Ｉｇ Ｇ Ｒ Ｆ 的 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ。经验证, 本法可测范围为１０ ～２５６０ Ｉ Ｕ／ｍｌ, 批内 Ｃ Ｖ４８ ％ , 批间 Ｃ Ｖ１１７ ％ 。１００ 例健康人血清 Ｉｇ Ｇ Ｒ Ｆ 值为（４１０ ±３４３ ） Ｉ Ｕ／ｍｌ, 以高于珋ｘ ±ｓ 值的上限１１０ Ｉ Ｕ／ｍｌ 为阳性。９９ 例类风湿关节炎（ Ｒ Ａ） 患者血清 Ｉｇ Ｇ Ｒ Ｆ 值为（４３０ ±６０４） Ｉ Ｕ／ｍｌ,阳性率为６１５ ％ 。临床应用提示 Ｉｇ Ｇ Ｒ Ｆ 是判断 Ｒ Ａ 活动性的良好指标之一。     

EGR-1、c-erbB-2、ER、PR在乳腺癌中的表达及其相互关系

目的：探讨早期生长反应基因（ＥＧＲ－１）在乳腺癌的表达及其与癌基因ｃ－ｅｒｂＢ－２和ＥＲ、ＰＲ的关系。方法：应用免疫组织化学ＳＡＢＣ法,以ＥＧＲ－１、ｃ－ｅｒｂＢ－２、ＥＲ、ＰＲ抗体标记７５例不同病变的乳腺组织。结果：乳奶性病变可见相对高水平的ＥＧＲ－１表达而乳腺癌ＥＧＲ－１阳性仅１９例（４２．２％）,ＥＧＲ－１表达与乳腺癌淋巴结转移和ＥＲ、ＰＲ表达有关（Ｐ〈０．０５,Ｐ〈０．０１）,与ｃ－ｅｒｂ     

检测血清CYFRA21—1,CEA,CA50及NSE对肺癌诊断的价值

应用放射免疫技术同步检测了２１例肺癌和２５例肺部良性疾病患者的血清ＣＹＦＲＡ２１－１、ＣＥＡ、ＣＡ５０及ＮＳＥ的水平,并分析其灵敏度,特异性,准确率,以探索肺癌辅助诊断的新途径。结果显示：肺癌患者的四种标志物血清水平高于肺部良性疾病患者,有比较显著的差异（Ｐ〈０．０１）。肺癌组ＣＹＦＲＡ２１－１水平９．９４±１０．３６ｎｇ／ｍＬ,非肿瘤组水平２．７２±２．３７ｎｇ／ｍＬ,非肿瘤组水平２．７２±２．     

HBcAg/HBeAg对慢性乙型肝炎患者PBMC中Th1/Th2类细胞应答的影响

目的 探讨ＨＢｃＡｇ／ＨＢｅＡｇ对慢性乙型肝炎患者ＰＢＭＣ中Ｔｈ１／Ｔｈ２类细胞应答的影响。方法 用套式ＰＣＲ法检测６４便慢性ＨＢＶ感染者ＰＢＭＣ中ＨＶＢ ＤＮＡ;分别用ＰＨＡ、ＨＢｃＡｇ和ＨＢｅＡｇ体外培养;ＥＬＩＳＡ法检测ＰＢＭＣ产生Ｔｈ１类细胞因子（ＩＬ－２、ＩＦＮ－γ）和Ｔｈ２类细胞因子（ＩＬ－４、ＩＬ－１０）的含量。结果 表明ＨＢＶ ＤＮＡ阳性组和阴性组相比,无论是在ＰＨＡ还是在ＨＢｃＡ     

MHC基因反义RNA导入造血干/祖细胞的研究

目的：将ＨＬＡＤＲＢ１基因ｃＤＮＡ片段反向插入逆转录病毒质粒ＺＩＰｎｅｏＳＶ（×）ＢａｍＨＩ位点中,构建了ＨＬＡＤＲＢ１基因的逆转录病毒反义ＲＮＡ重组表达载体,用脂质体法导入ＰＡ３１７细胞。方法：用免疫磁珠法分离,富集ＣＤ３４＋脐血造血干／祖细胞。含编码人ＨＬＡＤＲＢ１基因的ｐｃＤＶ１质粒,用ＢａｍＨＩ酶解,回收ＨＬＡＤＲＢ１ｃＤＮＡ片段,将ｃＤＮＡ片段反向插入ｐＺＩＰｎｅｏＳＶ（×）逆转录病毒载体,经扩增、抽提、酶切鉴定,用脂质体将反义ＲＮＡ重组体导入到ＰＡ３１７细胞,用含Ｇ４１８３００μｇ／ｍｌ培养液筛选,获抗性克隆,流式细胞仪检测ＨＬＡＤＲ抗原阳性细胞数。结果：重组质粒转染ＰＡ３１７细胞后,其病毒滴度达１×１０５ＣＦＵ／ｍｌ,脐血造血干／祖细胞经免疫磁珠富集后,ＣＤ３４＋细胞高达８５．０％～９０．０％,导入反义ＲＮＡ的脐血干细胞,其ＨＬＡＤＲ抗原表达从导入前的４５．０％降至２８．０％,抑制率达３８２％,而导入空载体后从５６．０％降至４５．０％,差异不显著。结论：ＨＬＡＤＲ的反义ＲＮＡ能导入脐血干细胞,降低ＨＬＡＤＲ抗原的表达