HPLC法测定麻仁软胶囊中7种成分

目的 建立麻仁软胶囊的质量控制标准,对7种成分进行测定。方法 采用Diamonsil-C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相为甲醇-0.05%磷酸（75∶25）,检测波长254 nm。结果 和厚朴酚在78.48～523.20 ng,厚朴酚在141.60～944.00 ng,芦荟大黄素在43.00～258.00 ng,大黄酸在37.80～226.80 ng,大黄素在58.00～348.00 ng,大黄酚在67.8～406.8 ng,大黄素甲醚在48.00～288.00 ng线性关系良好。结论 该方法准确可靠,可用于麻仁软胶囊的质量控制。     

版纳微型猪近交系TDRP1基因克隆、鉴定及mRNA的组织表达特性

目的 克隆版纳微型猪近交系(BMI)不育和可育公猪TDRP1基因,分析其序列及mRNA表达水平上的差异,预测其蛋白质功能,并检测该基因在可育公猪中的组织表达分布情况.方法 以猪NM_001198925序列为模板,设计特异引物,采用RT-PCR方法结合测序获得TDRP1的cDNA序列并进行生物信息学分析;采用半定量PCR方法检测TDRP1在不育和可育公猪睾丸中的表达规律,分析该基因在可育公猪17种组织中的表达特征.结果 获得了BMI TDRP1基因的编码区序列(GenBank登录号:KJ186786),生物信息学分析表明其编码186个氨基酸,蛋白质相对分子质量(Mw)为20.49 ×10³,等电点(pI)为5.86,无信号肽,有94.1%的概率位于细胞核,含有1个亮氨酸富集的核输出信号.不同物种的氨基酸序列比对表明猪TDRP1与人、恒河猴、小鼠和大鼠等哺乳动物的TDRP1相似性在73%～83.2%之间,其中与人、恒河猴的相似性较高.mRNA表达分析表明,TDRP1在BMI不育和可育公猪睾丸间表达水平差异无显著,在精囊腺和前列腺中高表达,在睾丸和小脑中中度表达,在大脑和肾脏中低表达,在其余组织中不表达.结论 成功克隆了BMI TDRP1基因的全长编码区序列并发现了BMI特有的2个SNP位点;TDRP1基因在BMI不育和可育公猪间序列完全一致,睾丸mRNA表达水平差异无显著性,多组织转录谱分析表明该基因存在明显的组织差异表达现象,在精囊腺和前列腺中有较高表达量,为深入研究TDRP1基因在精子发生方面的作用奠定了基础.     

Miox基因在爪蟾胚胎发育过程中的时间和空间表达谱分析

目的 研究肌醇加氧酶（myo-inositol oxygenase,Miox）基因在物种进化及爪蟾胚胎发育过程中的时间和空间表达的分布特点。方法 利用半定量RT-PCR观察Miox在爪蟾胚胎发育过程中的时间表达模式,利用整体原位杂交方法观察Miox在爪蟾胚胎发育过程中的空间表达模式。结果 RT-PCR结果显示Miox基因在胚胎发育第26期以前都没有表达,至胚胎发育第28期开始有微量表达,随着胚胎的发育其表达量逐渐增高;胚胎发育第40期表达明显升高,第41期时达到最高,第45期时表达有所下降。与胚胎发育第28、34期相比,第40、41、45期表达上调（P<0.05）;与胚胎发育第40期相比,第41期表达上调（P<0.05）;然而,同胚胎发育第41期相比,第45期表达下调（P<0.05）。整体原位杂交方法发现在胚胎发育30期以前均没能检测到Miox在爪蟾任何器官中的表达,从33期开始,Miox在爪蟾前肾有很微弱的表达,且Miox的表达随着发育的进展逐渐升高。整体原位杂交方法结果同RT-PCR结果相类似,直至第39～40期,Miox的表达才明显升高,并且在随后的时期都以同样高的水平表达。另外,Miox基因在爪蟾胚胎发育过程中均仅仅在原肾小管表达。结论 Miox是一个肾脏特异性基因,对于研究肾脏发育可能提供一个特异性标记。     

组胺受体H1和H4在过敏性炎症中的作用：新型抗组胺药的研究

组胺在过敏性炎症中起关键性作用, 长期以来人们认为组胺释放引起的炎性反应是H₁受体介导的。H₁受体拮抗剂也称为抗组胺药, 用于治疗过敏性反应已很多年。但是在哮喘和慢性瘙痒症的病理状态下组胺的重要性可能被低估。已证明组胺的确在炎症和免疫调节疾病中起作用,特别是H₄受体的发现及其在多种免疫和炎性细胞中的表达,提示应重新评价组胺的作用,预示新型H₄受体拮抗剂将被发现,且H₁,H₄受体拮抗剂在许多炎性反应靶标上可能有协同作用。     

西藏小型猪IGF-1基因在不同生长发育阶段和不同组织器官中的差异表达

目的 测定西藏小型猪的IGF-1基因在不同年龄阶段、不同组织中的表达分布情况,为未来的研究提供基础数据。方法 采用实时荧光定量PCR技术,以GAPDH基因为内参照,检测了IGF-1基因在西藏小型猪不同组织和不同生长阶段间的表达变化。结果 （1）IGF-1基因表达的时序性研究表明在0、0.25、0.5、1、2岁时肌肉组织的表达量最低,在0、0.25、0.5岁时皮肤组织中表达量最高,在0.1、2、3岁时肝组织的表达量最高。（2）IGF-1基因在在7个不同组织中均有表达,0.25岁时其在表达丰度由高到低依次为：皮肤、肺、肝、肾、脾、心脏和肌肉。且在皮肤中的表达量最高且极显著高于其他各组织（P<0.01）。同时在不同年龄阶段的表达中,IGF-1基因0.25岁时在各组织中的表达均达到峰值。结论 西藏小型猪的IGF-1基因的表达呈现出明显的时空特异性。     

解读《神农本草经》7

原文:病在胸膈以上者,先食后服药;病在心腹以下者,先服药而后食;病在四肢、血脉者,宜空腹而在旦;病在骨髓者,宜饱满而在夜。译文:在胸膈以上的疾病,要先吃饭后服药;在心腹以下的疾病,要先服药后吃饭;在四肢、血脉的疾病,应该空腹而且在早晨服药;在骨髓的疾病,应该吃饱而且在夜间服药。解读:服药时间与疗效关系密切,在认真总结前人用药经验的基础     

微型轴流风扇不同流量下的损失对比

以一种电子元件冷却用的单级微型轴流风扇为研究对象,数值模拟研究了该风扇级的流场,分析了设计转速下驼峰曲线右侧4种流量下损失差异的产生原因。研究结果表明:在转子通道内,损失主要发生在泄漏涡通过的区域(I区)、压力侧边界层区域(II区)以及吸力侧边界层区域(III区)。随着流量的增加,I区叶尖涡系的影响范围变小,但涡量强度的最大值Ω₀变大且都发生在叶顶间隙中,相应地在该区域高损失范围变小,但在其中心区域损失系数ζ_pt值变大;II区高涡强范围及其Ω₀值均变大,相应地该区域高损失范围及其ζ_pt值也变大;III区高涡强范围及其Ω₀值变化不大,相应地该区域高损失范围及其ζ_pt值变化也不大。综上可知:在转子通道内损失随着流量的增加而变大。在静子通道内损失随着流量的增加变化较小,所以级环境下全压效率随着流量的增加而减小。     

乙肝相关疾病中乙肝病毒核心启动子区变异频率及发病风险评估

目的 检测乙肝病毒核心启动子(basic core promoter,BCP)区变异位点在乙肝相关疾病中的变异频率,评估乙肝病毒变异在终末期肝病发生中的风险。方法 收集2 093例HBV无症状携带者(asymptomatic HBsAg carrier, ASC)、慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B, CHB)、肝硬化(liver cirrhosis, LC)和肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)患者,应用测序法检测HBV位点变异;运用病例对照研究方法,以ASC组为对照,研究乙肝病毒核心启动子区的变异与乙肝相关疾病发生间的关系。应用非条件Logistic回归法分析校正年龄和性别后HBV变异在CHB、LC和HCC发生中的风险。结果 HCC组中除T1768A变异外,其余变异位点的变异频率均大于30%,而在ASC组中无变异位点的变异频率超过30%;7个变异位点在4组人群中变异频率均逐渐增高(P_trend<0.001);除T1768A位点外,其余变异在CHB、LC和HCC组中的校正比值比(adjusted odds ratio, AOR)均逐渐增加,A1762T/G1764A双突变在HCC发生中的AOR为13.91(95%CI 9.66～20.03);HBV BCP区位点累积变异频率在乙肝相关疾病进展过程逐渐递增(P_trend<0.001)。结论 随着HBV BCP区变异在HBV相关肝病进展过程中逐渐累加,终末期肝病的发病风险增加;HBV BCP区变异可作为早期预测HBV相关终末期肝病发生的潜在分子标记物。     

分子影像标记物叶酸受体α在胰腺癌中的表达及意义

目的    观察叶酸受体α（folate receptor alpha,FOLR1）在胰腺癌中的表达水平,为叶酸受体α靶向性分子显像技术的建立提供依据。方法    采用免疫印迹和免疫组织化学法检测叶酸受体α在胰腺癌、正常胰腺、癌旁和慢性胰腺炎症组织的表达,并评价其表达水平与胰腺癌临床病理学指标的关系。结果    叶酸受体α在94.7％（72/76）的胰腺癌中阳性表达,且表达水平与肿瘤转移相关,而在正常胰腺中无表达。结论    以叶酸受体α为靶点的分子影像技术在胰腺癌的诊断中可能具有良好的应用价值。     

唐氏综合征细胞黏附分子在APP转基因小鼠海马中的表达变化及其意义

目的  观察唐氏综合征细胞黏附分子（DSCAM）在淀粉样前蛋白（APP）转基因小鼠海马中的表达变化规律,探讨其意义。方法  选择月龄分别为1、3、6和12个月的APP转基因和野生型小鼠,应用免疫组织化学法对脑切片进行染色,观察DSCAM在APP转基因小鼠脑中的表达,应用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测该蛋白在海马中表达量的变化规律,野生型小鼠做对照。结果  DSCAM主要在APP转基因小鼠大脑皮层、海马的锥体细胞中表达。在两组小鼠中,DSCAM在海马中的表达水平随年龄增长而下降（P <0.05）。DSCAM在APP转基因小鼠海马中的表达量明显高于同龄野生型小鼠（P <0.05）。结论  DSCAM在APP转基因小鼠海马内的过度表达可能在APP小鼠的学习和记忆能力下降中扮演重要角色。

     

Gadd45α、NF-κB在胃癌中表达情况及其相关性研究

目的  通过分析Gadd45α、NF-κB在不同幽门螺杆菌（HP）感染状态胃癌中的差异表达来探讨两者表达的相关性及其对胃癌发生的意义。方法  随机选取本院70例胃癌石蜡标本及56例相应癌旁正常组织标本来检测Gadd45α、NF-κB蛋白的表达情况;分析Gadd45α蛋白与NF-κB在胃癌中表达的相关性。结果  NF-κB在HP+胃癌、HP-胃癌、HP+癌旁组织中的阳性表达率分别为82.5%、53.33%和26.32%,Gadd45α蛋白在HP+胃癌、HP-胃癌、HP+癌旁组织中的阳性表达率分别为77.5%、46.67%和34.21%,经过χ2检验比较阳性表达的差异有统计学意义（P <0.05）。Gadd45α与NF-κB在胃癌中表达呈正相关（P <0.05）。结论  NF-κB、Gadd45α蛋白在胃癌组织中高表达,且Gadd45α与NF-κB蛋白两者在胃癌中的表达呈正相关。

     

HPLC-MS法测定大鼠注射丹红注射液后血浆中3种酚酸类成分

目的 建立定量测定大鼠注射丹红注射液后血浆中迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B的方法。方法 采用HPLC-MS法,Diamonsil（钻石）C¹⁸（250 mm×4.6 mm,5 μm）色谱柱,乙腈-0.4%甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min,MS检测器选用正离子模式。结果 迷迭香酸在0.45～100.0 μg/mL（r²＝0.996 5）线性关系良好,回收率在85.0%～101.4%,日内、日间精密度的RSD＜8%;紫草酸在0.45～100.0 μg/mL（r²＝0.995 9）线性关系良好,回收率在84.4%～93.94%,日内、日间精密度的RSD＜9%;丹酚酸B在0.7～200.0 μg/mL（r²＝0.998 9）线性关系良好,回收率在80.0%～97.4%,日内、日间精密度的RSD＜5%。结论 所建立的方法灵敏度好、准确率高,可用于丹红注射液中酚酸类成分药动学研究。     

力学刺激对软骨细胞细胞骨架的影响

目的 探讨不同应力刺激下软骨细胞细胞骨架的荧光强度和形态分布的变化。方法 取新西兰兔关节软骨细胞,分离传代增殖然后将第3代软骨细胞分别给以3组不同的动态（1Hz,500με 1000με 1500με）和静态（0Hz,500με 1000με 1500με）力学刺激分组培养,然后行细胞骨架肌动蛋白（actin）、中间丝波形蛋白（vimentin）、微管（tubulin）的免疫荧光染色,吸光法对标本进行测定,分析荧光强度和细胞骨架分布的变化。结果 软骨细胞在未受到应力刺激时其分布相对分散并显示比较均匀,在力学刺激后,细胞骨架发生的排列和强度均发生了变化。vimentin在动态的力学刺激下荧光强度逐渐增强,Actin先减弱后逐步增强,而Tublin是先增强在减弱再增强。vimentin、actin和tublin的荧光强度在静态的力学刺激下有明显的一致性的变化,随压力的增加其强度明显的下降,其排列疏松变化明显。结论 在力学刺激下,细胞骨架发生的明显的变化,而在各种变化中,其变化和力学刺激的大小和时间和刺激的方式有关系。     

长春瑞滨脂质体与长春瑞滨注射液在荷瘤小鼠体内的药代动力学及组织分布

采用S180荷瘤小鼠模型比较注射用长春瑞滨脂质体(L-NVB)与长春瑞滨注射液(NVB)在体内的药代动力学及其肺、骨髓、肿瘤组织中的分布差异。药代动力学研究显示L-NVB的AUC_0-∞、c_max比市售NVB高,有提高药效的可能;而CL_z降低,MRT延长,提示L-NVB可延长药物在体内的滞留时间,有助于增加扩散到肿瘤组织中的药物分布量;组织分布结果显示两种制剂在肺、骨髓、肿瘤组织中药物浓度变化趋势相似,L-NVB在骨组织的分布显著低于市售NVB(P﹤0.01),而在肿瘤组织的分布显著高于市售NVB(P﹤0.001),该结果提示L-NVB可通过滞留效应和延缓消除等双重因素在肿瘤组织中聚集,提高肿瘤组织中的靶向性,减少和缩短药物在毒性靶器官骨髓中的暴露量和暴露时间,从而降低骨髓毒性,提高疗效,满足临床用药需求。     

蒙花苷溶解度及油水分配系数的研究

目的 测定蒙花苷的溶解度及油水分配系数,为药物成药性评价及剂型设计提供依据。方法 采用HPLC法测定蒙花苷在不同有机溶剂及不同pH值缓冲盐溶液中的平衡溶解度,并测定蒙花苷在高分子材料和表面活性剂中的溶解度;利用Molinspiration软件对蒙花苷的油水分配系数进行预测,并采用摇瓶-HPLC法测定药物在正辛醇-水、正辛醇-缓冲液体系中的表观油水分配系数。结果 蒙花苷在水中的平衡溶解度为0.059 μg/mL,在碱性溶液中的溶解度有所增加;高分子材料和表面活性剂均可增加蒙花苷的溶解度,其中HP-β-CD的增溶作用最强,可增加214.6倍;l g蒙花苷在正辛醇-水、正辛醇-缓冲盐溶液中的P值在0.50～1.04,与计算机预测值0.513一致。结论 蒙花苷不溶于水,脂溶性差,通过添加辅料,其溶解性有所提高。     

γδT细胞表达共刺激分子及协同信号通路的研究进展

根据T细胞受体的不同,人体T淋巴细胞分为αβT细胞和γδT细胞。近年αβT细胞共刺激信号在调节T细胞活化及耐受方面的研究取得了重要的进展,而在γδT细胞相关的研究较少。明确这些共刺激分子及其信号通路在γδT细胞免疫应答的不同阶段发挥的不同正向负向调节作用,将为病毒感染、肿瘤、自身免疫性疾病、移植后排斥等疾病的治疗提供新的前景。     

荆芥内酯大鼠在体胃肠吸收动力学研究

目的 研究荆芥内酯在大鼠胃肠道的吸收。方法 应用大鼠在体胃肠吸收模型,采用酚红标记法校正肠循环液的体积,HPLC法测定不同时间点胃肠循环液中荆芥内酯的质量浓度。结果 不同质量浓度（1.84、3.68、7.36 μg/mL）的荆芥内酯在大鼠胃部每小时吸收率分别为（19.47±0.69）%、（21.66±1.92）%、（26.51±1.25）%;在大鼠肠道的吸收速率常数（K_a）分别为（0.203±0.007）、（0.159±0.011）、（0.134±0.012）h^?1,各组之间差异均显著（P＜0.05）。结论 荆芥内酯在大鼠胃部的吸收可能为被动转运,在肠道的吸收可能为主动转运。     

金丝桃苷油水分配系数及大鼠在体肠吸收动力学研究

目的 测定金丝桃苷的油水分配系数,并考察金丝桃苷的大鼠在体肠吸收情况。方法 采用经典摇瓶法测定金丝桃苷的油水分配系数;采用大鼠在体肠吸收模型研究金丝桃苷的肠吸收情况,考察其在小肠各段的吸收情况及药物浓度对吸收的影响。结果 在正辛醇-水体系中,金丝桃苷的油水分配系数log P为0.43;在正辛醇-缓冲液体系中,油水分配系数随pH值的升高而逐渐降低。质量浓度为5、10、20 μg/mL的金丝桃苷在大鼠肠道内均有较好的吸收,在不同质量浓度下金丝桃苷吸收不具有显著性差异（P＞0.05）。结论 应用摇瓶法能准确测定金丝桃苷的油水分配系数,由此推测的体内吸收情况通过大鼠肠灌流试验得到验证。     

负压封闭引流治疗糖尿病足效果评价

目的 评价负压封闭引流技术(VSD)治疗糖尿病足效果。方法 收集2012年1月至2015年1月安徽医科大学第二附属医院56例糖尿病足住院患者,按照治疗方法分为VSD组和传统治疗组,比较两组病例治疗前的基本特征以及治疗后在创基准备时间、抗生素使用时间、血糖平稳时间、愈合时间、住院时间、换药次数、治愈率以及复发率方面的差异。结果 VSD患者在血糖恢复平稳时间、抗生素使用时间、创基准备时间、创伤愈合时间、住院时间方面短于传统治疗组差异均有统计学意义(P<0.05);在换药次数上,VSD组少于传统治疗组,差异均有统计学意义(P<0.05);在一次植皮存活率方面,VSD组高于传统治疗组;在溃疡复发率方面,VSD组低于传统治疗组,差异均有统计学意义(P<0.05)。但在溃疡治愈率方面,两组差异无统计学意义(P>0.05)。结论 VSD在糖尿病足溃疡的治疗中能刺激创面肉芽生长,明显缩短治疗时间,效果显著优于传统治疗法。     

THIEC改性三聚氰胺甲醛树脂泡沫的制备及其性能表征

以表面活性剂水溶液为液相介质、空气为气相介质,采用高速摄像机研究表面活性剂对二次雾化破裂性质的影响,重点阐述了破裂形变特征上的变化。研究结果表明:在形变特征方面,临界胶束浓度(CMC)对二次雾化袋状破裂形态有着重要影响,除了最大液滴直径形变率(d_f,m/d₀)基本不变,保持在1.64左右外,最大液环直径形变率(d_r,m/d₀)、最大轴向生长率(l_m/d₀)、最大径向生长率(h_m/d₀)和长宽比(l_m/h_m)等在表面活性剂质量分数小于CMC时均变化迅速,但在表面活性剂质量分数大于CMC后变化趋于平缓,d_r,m/d₀稳定在4.16左右,l_m/d₀稳定在6.36左右,l_m/h_m稳定在1.53左右。