大鼠小肠移植早期应用趋化因子受体拮抗剂抑制移植物急性排斥反应

目的探讨趋化因子受体拮抗剂(MetRANTES)在小肠移植早期应用对排斥反应的免疫抑制作用及其与他克莫司的协同效应。方法SD大鼠为供者,Wistar大鼠为受者,建立异基因节段性异位小肠移植模型。移植后将大鼠分为4组,每组24只。第1组为对照组,移植前后不作任何处理;第2组为MetRANTES组,小肠移植后(0～7d)腹腔注射MetRANTES200μg/d;第3组为小剂量他克莫司(FK506)组,小肠移植后(0～7d)腹腔注射FK5060.5mg·kg-1·d-1;第4组为MetRANTES联合FK506组,2种药物的应用方法与第2、3组相同。观察移植大鼠的一般状况和存活时间以及免疫细胞浸润情况,并于移植术后3、5、7d分别取各组大鼠移植肠标本(n=6)进行组织病理学检查,采用免疫荧光染色和激光扫描共聚焦显微镜技术对移植肠RANTES和CD4 、CD8 、CD25 T淋巴细胞的表达进行连续定量测定。结果第1～4组大鼠平均存活时间分别为(7.37±1.19)d、(22.32±8.60)d、(23.64±6.58)d和(30.55±4.18)d,第2、3、4组大鼠与第1组相比,存活时间明显延长(P<0.01);第4组大鼠存活时间更长,与第2、3组比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。第1组全部死于急性排斥反应及感染,组织病理学检查显示移植后第3、5、7d分别符合轻、中、重度排斥反应。第2、3、4组病理学检查无明显排斥反应征象。第1组大鼠的移植肠RANTES表达在术后各时段均显著高于其他3组(P<0.01),其动态变化与急性排斥反应的进程呈正相关;第2组和第4组大鼠移植肠RANTES、CD4 、CD8 和CD25 T细胞的表达均明显低于第1组(P<0.01)。结论MetRANTES能明显抑制小肠移植急性排斥反应,有效保护移植肠功能,显著延长移植物的存活时间,并可增强小剂量他克莫司的免疫抑制作用。     

急性排斥反应时Fractalkine及其受体在移植心脏中的表达

目的　探讨急性排斥反应过程中Fractalkine(FKN)及其受体CX3CR1在移植心脏局部表达的意义及环孢素A(CsA)对它们的影响。　方法　施行大鼠异位心脏移植术 ,移植大鼠分为 3组 ,每组 45只 ,对照组 5只。SD大鼠间的移植为同系移植组 (A组 ) ,Wistar至SD大鼠的移植分为未用CsA干预组 (B组 )及CsA干预组 (C组 ) ,健康SD大鼠为对照组。采用RT PCR方法检测排斥反应中移植心脏局部FKNmRNA的表达水平 ,免疫组化方法检测FKN和CX3CR1的蛋白表达水平。　结果FKNmRNA与蛋白在A组各时间点和对照组均呈低水平表达 ;在B组的表达变化与急性排斥反应的进程相关 ,术后第 7天FKNmRNA表达上调至峰值 (0 8± 0 2 6) ;C组应用CsA后 ,FKNmRNA表达峰值显著低于B组 (t=2 3 90 ,P <0 0 5 )。FKN和CX3CR1蛋白分别定位于移植心脏血管内皮细胞及间质浸润的单个核细胞中。　结论　急性排斥反应过程中 ,FKN及其受体CX3CR1表达上调 ,与移植物间质单个核细胞浸润密切相关 ;抑制FKN CX3CR1通路的活化可能是CsA发挥作用的又一分子免疫学机制     

霉酚酸酯预防肾移植术后近期急性排斥反应的观察

目的 :观察霉酚酸酯 (MMF)在预防肾移植术后近期 (3个月 )急性排斥反应 (AR)的情况。方法 :将 112例患者随机分成 2组 ,MMF(2 .0 g/d)组和硫唑嘌呤 (Aza)组。两组患者均同时接受相似剂量的环孢素 A和类固醇激素治疗。结果 :观察 3个月 ,MMF组 6 0例 ,AR发生率为 16 .7% (10 /6 0 ) ,Aza组 5 2例 ,AR发生率为 42 .3%(2 2 /5 2 ) ,两组差异有极显著意义 (P <0 .0 1)。 MMF组 5例出现血白细胞、血小板等不同程度下降 ,3例出现腹泻 ,在 MMF减量或停药后均恢复正常 ,未见有 MMF引起的肝、肾功能异常病例 ;Aza组有 9例出现肝功能损害。结论 :MMF具有预防和减少肾移植术后近期 AR效果 ,MMF的安全性可靠 ,副作用轻且为可逆性。     

小肠移植后急性排斥反应的新进展

小肠功能衰竭病人经全胃肠外营养（TPN）后可长期存活．然而．持续TPN会导致严重的并发症如TPN相关性终末期肝病、静脉通道丧失以及反复性败血症，往往导致病人在半年内死亡。因此，小肠移植成为惟一能够选择的治疗手段。经过近半个世纪的探索，临床小肠移植疗效得到很大改善。迄今最长1例小肠移植病人已存活达17年之久。1985年4月至2003年3月期间。全球61个医学中心共计对923例病人进行了989例次小肠移植，移植小肠1年生存率达64％。但是，与其他实质性脏器移植比较，小肠移植的效果仍不尽如人意。移植后急性排斥的发生率高（57％）是阻碍小肠移植发展的主要因素。本文综述了小肠移植后急性排斥反应的发生机制和免疫抑制方面的新进展。     

趋化因子IP-10及其受体CXCR3在大鼠肝移植急性排斥反应中的作用

目的探讨趋化因子IP-10及其受体CXCR3的表达在大鼠肝移植手术前后的动态变化,分析其与肝移植急性排斥(acute rejection,AR)的关系。方法改良"二袖套"法建立大鼠原位肝移植模型和急性排斥模型,分为4组:手术创伤组,肝移植无排斥组,肝移植急性排斥组,FK506组。ELISA法检测血清IP-10表达。流式细胞仪检测外周血淋巴细胞CXCR3的表达,用Cellquest软件分析阳性细胞百分率。半定量RT-PCR检测各组第7天肝脏组织CXCR3-mRNA的表达。结果①各组大鼠手术后外周血趋化因子IP-10及其受体CXCR3表达明显升高;②AR组在术后第5天起IP-10及其受体CXCR3表达均高于各对照组(P0.01);③AR组大鼠在移植后第7天,外周血IP-10和CXCR3的表达随着AR组RAI积分的升高而逐步升高,相关系数分别为0.89和0.92(P0.05)。结论血清中趋化因子IP-10及其受体CXCR3的高表达与AR密切相关,有望成为诊断AR较特异、敏感的指标。     

诱导型一氧化氮合酶抑制剂防治大鼠腹主动脉移植术后慢性排斥反应

目的研究移植物慢性排斥反应血管变化的机制,评价新型诱导型一氧化氮合酶(iNOS)抑制剂(FR260330)防治大鼠腹主动脉移植术后慢性排斥反应的作用。方法供者为ACI大鼠,受者为Lewis大鼠。采用原位腹主动脉移植,移植后2周和12周时分别处死受者,取其移植腹主动脉,用光学显微镜及计算机图像分析系统分析腹主动脉内膜、平滑肌及外膜的面积及内膜/内膜 中层比例。并以α肌动蛋白(αactin)免疫组织化学法进行内膜、中层细胞成份分析。术后分别单独或联合应用FR260330和他克莫司(FK506)抗排斥反应。结果移植后用iNOS抑制剂组3个月时血管内膜/内膜 中层比例明显小于不用药对照组;移植后不用药对照组及用FK506组的血管中层细胞均出现不同程度破坏;用iNOS抑制剂组的血管内膜比用FK506组更光滑,破坏情况也较少。结论iNOS抑制剂对慢性排斥反应有抑制作用。     

近系大鼠小肠移植模型排斥反应的研究

目的　动态观察近交系大鼠BN→F3 44组合模型小肠移植排斥反应的发生规律 ,探讨该模型对小肠移植排斥反应的研究价值。方法　选用近交系大鼠F3 44(RT1l)和BN (RT1n) ,根据改良Monchik法建立异位全小肠移植模型。实验分为同系移植组 (F3 44→F3 44,ITX 组 )和同种移植组 (BN→F3 44,ATX 组 ) ,每组供、受体大鼠各 8只。结果　 (1)ITX 组大鼠平均生存期 3 0d以上 ,ATX 组平均存活 12d。 (2 )ITX 组术后各时点的大体观察无明显差异 ,而移植小肠病理组织学术后 3d呈非特异性炎症反应表现 ,术后 0 ,5 ,7,9d与正常小肠的组织学特征基本相同。 (3 )ATX 组在术后 5 ,7,9d的大体表现与组织病理改变分别符合轻、中、重度排斥反应的诊断标准。结论　近交系大鼠BN→F3 44组合模型轻、中、重三个层次排斥反应特点鲜明 ,适用于小肠移植排斥反应免疫机制的研究。     

大鼠肺移植排斥反应中细胞胀亡的发生及其意义

目的探讨移植肺中是否有细胞胀亡发生及其可能的临床意义。方法将26对SD 大鼠进行左侧单肺移植。利用透射电镜及病理学等技术,检测移植肺及对照肺组织中胀亡细胞数、丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)含量,分析细胞胀亡在肺移植中的生物学作用。结果移植肺组织中主要是Ⅱ型肺泡上皮细胞发生胀亡,细胞胀亡指数与MDA含量呈正相关性,与SOD含量呈负相关性;受鼠移植肺较健侧肺、空白对照肺及阴性对照肺组织中存在更多的胀亡细胞。结论细胞胀亡在肺移植排斥反应的发生发展过程中可能起重要作用。     

盐酸沙格雷酯治疗慢性下肢动脉缺血的疗效观察

目的 评价盐酸沙格雷酯治疗慢性下肢动脉缺血的临床疗效.方法 选择未施行血管移植或血管旁路搭桥手术或(和)介入治疗的动脉粥样硬化、血栓闭塞性脉管炎、糖尿病足伴有下肢间歇性跛行、冷感、疼痛、溃疡等缺血症状的患者892例为治疗对象.盐酸沙格雷酯剂量为100 mg/次,3次/d,疗程为8周.观察用药前后的症状改善程度、综合疗效以及药物不良反应.结果 间歇性跛行、冷感、疼痛、溃疡的改善率分别为96.9％、97.1％、89.0％和86.9％,3种疾病总有效率(显效+良好)83.5％.81例(9.1％)有轻度不良反应,7例皮疹,21例轻度恶心,53例胃部不适,对症治疗后可缓解,不需停药.结论 盐酸沙格雷酯治疗慢性下肢动脉缺血性疾病是一种安全、有效的药物.     

Effect of sarpogrelate hydrochloride,a 5-hydroxytryptamine2 receptor antagonist,on allograft arteriosclerosis after aortic transplantation in rats

BackgroundSarpogrelate hydrochloride, a 5-hydroxytryptamine₂ receptor antagonist, is known to prevent serotonin-induced neointimal hyperplasia. We examined the effect of this agent on allograft arteriosclerosis in a rat model of aortic transplantation.MethodsRats were given an aortic isograft or allograft and oral administration of either saline vehicle alone or 20 mg/kg daily of sarpogrelate for 8 weeks. The grafts were then harvested, and the lumen diameter and the thickness of the intima and media were measured. Comparisons were made between measurement results in isografts and allografts from rats treated and not treated with sarpogrelate. Immunohistochemistry assessments were used to detect expression of serotonin in graft specimens.ResultsFor both allografts and isografts, significantly less intimal thickening was observed in specimens from rats given sarpogrelate compared with rats given saline. Sarpogrelate had no effect on medial thickening in either graft type. Serotonin was detected in allografts from rats given saline alone but not in allografts from rats given sarpogrelate or in isografts.ConclusionsSarpogrelate hydrochloride may mitigate arteriosclerosis in allografts. Platelet aggregation and serotonin may be correlated with intimal thickening associated with chronic rejection.     

他克莫司与新型免疫抑制剂FK778或FK779联合应用预防大鼠心脏移植排斥反应

目的 评价他克莫司（FK506）与FK778或FK779联合应用预防大鼠心脏移植排斥反应的效果。方法 大鼠异位心脏移植后单独应用FK506、FK778和FK779进行免疫抑制治疗，并设联合用药组。结果 单独用药组与不用药对照组相比，移植心脏存活时间明显延长，FK779组尤其显著；联合用药组移植心脏存活时间不但比对照组明显延长，而且明显长于各药同剂量单用组，FK506与FK779合用组尤其显著。结论 FK506、FK778和FK779均有很强的免疫抑制效应，FK506与FK778或FK779联合应用具有较强的协同效应。     

氯化钆抑制大鼠肝移植急性排斥反应的机理

目的　探讨氯化钆抑制大鼠肝移植急性排斥反应的机理。方法分别采用健康雄性Wistar和SD大鼠作为供、受者。随机分为A组(假手术对照):SD大鼠10只,开腹后不作任何处理,关腹结束手术;B组(氯化钆预处理 肝移植):受者1 5只,供者在移植前进行氯化钆预处理2 d,再获取供肝移植给受者;C组(生理盐水预处理 肝移植):受者15只,供者用生理盐水代替氯化钆预处理,其余处理同B组。分别检测各组的术后生存率、肝功能、肝脏病理组织学、肝组织和胆汁中细胞因子表达、枯否氏细胞核转录因子κB(NF-κB)以及细胞膜表面分子的表达情况。结果(1)B组术后1个月生存率明显高于C组(P<0.01)。(2)B组术后肝功能逐渐恢复正常,C组肝功能进行性恶化;B组肝组织病理学改变轻微,C组出现典型急性排斥改变。(3)B组肝组织和胆汁中γ-干扰素(IFN-γ)和白细胞介素2 (IL-2)较A组明显降低(P<0.05),IL-10较A组明显升高(P<0.05),IL-4无明显变化;C组出现与之相反的变化。(4)C组枯否氏细胞NF-κB活性明显高于A、B两组(P<0.01)。(5)B组枯否氏细胞膜表面主要组织相容性抗原复合物(MHC)、CD80、CD86分子明显低于A组(P<0.05),C组高表达上述膜表面分子。结论氯化钆能够有效地抑制枯否氏细胞的免疫活性,从而抑制大鼠同种肝移植后急性排斥反应的发生。     

环孢菌素A抑制大鼠同种心脏移植急性排斥反应中趋化因子受体CCR5表达的研究

目的观察大鼠同种心脏移植急性排斥反应中趋化因子受体CCID的表达及环孢菌素A（CsA）的抑制作用。方法分两组建立同种大鼠颈部心脏移植模型：对照组（n=25）和新山地明组（CsA组，n=25），各5例观察移植心脏存活时间。于移植术后第1、5、7、14天分别取移植心组织各5例，逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测移植心组织内趋化因子受体CCR5mRNA不同时间点的表达水平，免疫组织化学方法检测移植心组织内趋化因子受体CCR5分子的表达差异。结果对照组移植心存活时间为（11．6±1．5）d，CsA组移植心存活时间为（22．4±5．1）d，两组问移植心存活时间差异有统计学意义（P〈0．01）。急性排斥组和CsA处理组大鼠移植心脏在术后第5、7、14天都可检测到趋化因子受体CCR5mRNA阳性表达，但CsA处理组趋化因子受体CCRSmRNA的表达明显弱于急性排斥组。同样急性排斥组和CsA处理组大鼠移植心脏在术后第5、7、14天都可检测到趋化因子受体CCR5分子的表达，CsA处理组趋化因子受体CCR5分子的表达相对较弱。结论趋化因子受体CCR5在早期移植免疫事件中具有重要的作用，CsA能部分抑制趋化因子受体CCR5的表达，并与移植物存活时间延长有一定的关系。     

Low rate of acute lung allograft rejection after the use of daclizumab, an interleukin 2 receptor antibody

BACKGROUND: The incidence and the severity of acute lung allograft rejection has been linked to the development of bronchiolitis obliterans syndrome. Therefore, we investigated the effects of daclizumab, a humanized monoclonal antibody directed against the alpha subunit of the interleukin 2 receptor, in reducing acute rejection after transplantation. METHODS: We retrospectively evaluated 27 patients who received daclizumab as induction immunosuppression and compared them with a historical control group of 34 patients. Both groups received similar immunosuppressive regimens involving tacrolimus, prednisone, and either azathioprine or mycophenolate mofetil. All patients received cytomegalovirus and aspergillus prophylaxis. RESULTS: Twenty-one patients in the control group and 22 patients in the daclizumab group were available for analysis at 6 months after lung transplantation. Ten (48%) patients in the control group had at least grade 2 acute rejection compared with four (18%) in the daclizumab group (P<0.04). The incidence of infection was similar in both groups. One patient in each group developed posttransplant lymphoproliferative disease. CONCLUSION: Therapy with daclizumab resulted in a significant decrease in the incidence of grade 2 or greater acute rejection after lung transplantation compared with historical controls. There seems to be no increase in the incidence of adverse effects in the patients treated with daclizumab.     

Induction of cyclo-oxygenase-2 by acute liver allograft rejection and cytomegalovirus infection in the rat

Cytomegalovirus (CMV) infection has been shown to increase inflammation in rat liver allografts. In-vitro CMV has been shown to transactivate cyclo-oxygenase-2 (COX-2), while COX-2 plays a role in the CMV replication cycle. Our aim was to investigate the expression of COX-2 in liver allograft rejection and concomitant CMV infection. Expression of COX-2 was studied immunohistologically in rat liver allografts with or without rat CMV infection, in isografts, and in normal rat liver. There were small amounts of COX-2-positive mononuclear inflammatory cells in the normal liver and isografts. Acute rejection increased the amount of COX-2-expressing cells in the portal areas only, whereas concomitant CMV infection did this also in the sinusoid area. COX-2 may play a role in CMV infection in vivo as well. The possible role of COX-2 in the association between CMV infection and allograft rejection warrants further study.     

阻断CXC趋化因子受体3途径对同种异体胰岛移植急性排斥反应影响的实验研究

目的研究CXC趋化因子受体3（CXC chemokine receptor 3,CXCR3）反义肽核酸（peptide nucleic acid,PNA）对同种异体胰岛移植急性排斥反应的影响。方法实验模型为小鼠同种异体胰岛移植模型。分为生理盐水对照组,PNA CXCR3组和随机错配PNA组。体外T细胞增殖应答能力通过淋巴细胞增殖反应来评估。应用RT-PCR和Western blot检测CXCR3 mRNA和蛋白表达水平。应用流式细胞仪测定脾CD3^＋T细胞CXCR3表达水平。结果与生理盐水组[（6．72±1．48）d]和随机错配PNA组[（6．54±0．86）d]相比,PNA CXCR3组[（9．70±1．57）d]受体有功能胰岛移植物存活时间明显延长。移植后第7天,PNA CXCR3组CXCR3 mRNA水平（1．06±0．07）同生理盐水对照组（1．98±0．22）和随机PNA组（1．87±0．10）比较明显下调（P〈0．01）。PNA CXCR3组移植物CXCR3蛋白水平以及小鼠淋巴细胞增殖能力与另两组比较明显降低（P〈0．01）。结论PNA CXCR3通过降低T淋巴细胞活性来延长同种异体胰岛移植物存活时间,在抑制同种异体急性排斥反应中具有潜在的治疗效应。     

The enhancing effect of cyclosporine A and sulfasalazine on the prevention of rejection in rat cardiac allografts

Abstract. Sulfasalazine (SASP) has been used for many years as a disease-modifying agent in inflammatory bowel disease and in rheumatoid arthritis. However, its mode of action is not entirely clear. Evidence has been accumulated which indicates that its efficacy is due to an immunomodulatory effect. In the present communication, we report that SASP has an immunomodulatory capacity in an experimental rat cardiac allograft model. A combination of 100 mg/kg per day of SASP given orally until rejection and 10 mg/kg per day of cyclosporine A (CyA) given orally for 10 days resulted in a significantly increased graft survival time as compared to that in animals given CyA alone.     

The enhancing effect of cyclosporine A and sulfasalazine on the prevention of rejection in rat cardiac allografts

Sulfasalazine (SASP) has been used for many years as a disease-modifying agent in inflammatory bowel disease and in rheumatoid arthritis. However, its mode of action is not entirely clear. Evidence has been accumulated which indicates that its efficacy is due to an immunomodulatory effect. In the present communication, we report that SASP has an immunomodulatory capacity in an experimental rat cardiac allograft model. A combination of 100 mg/kg per day of SASP given orally until rejection and 10 mg/kg per day of cyclosporine A (CyA) given orally for 10 days resulted in a significantly increased graft survival time as compared to that in animals given CyA alone.     

骶髓5-HT_(2A)受体对于正常大鼠排尿的影响

目的:探讨骶髓控制尿道外括约肌的Onuf's核中是否存在5-HT2A受体,并观察髓腔内给予该受体的拮抗剂酮舍林对于正常大鼠排尿的影响。方法:体重175~200g的SD雌性大鼠14只,随机分为两组:实验组7只,在脊髓L6~S1节段建立脊髓髓腔内置管模型,给予不同浓度的酮舍林(0.01~0.1mg/kg),得到剂量依赖性曲线后再给予5-HT2A受体激动剂DOI(2,5-dimethoxy-4-iodophenyl)-2-aminopropane hydrochloride(0.1mg/kg)。对照组7只,如上述建立脊髓髓腔内置管模型,在脊髓腔内给予生理盐水。3天后在乌拉坦麻醉下,在实验组和对照组大鼠的膀胱内置管连接压力感受器,分别记录实验组和对照组膀胱内压图(CMG)及排尿量、剩余尿量、膀胱容量。待测压结束后,用4%多聚甲醛进行血管灌注取出L6~S1脊髓做冷冻切片并做免疫组化染色,观察并记录5-HT2A受体在脊髓Onuf's核中不同运动神经元的分布情况。结果:对照组大鼠的排尿是节律性的舒缩活动,排尿效率高,高频震荡波(HFOs)的排列整齐并稳定;实验组大鼠在给予酮舍林后,排尿时HFOs的个数呈剂量依赖性减少,同时这种作用可以完全或部分被DOI所逆转,和对照组相比差异有统计学意义,而排尿量、膀胱容量及排尿效率有减少的趋势,但和对照组相比,差异无统计学意义。免疫组化结果显示在大鼠L6脊髓的背后外侧核(RDLN核)、脊髓前角的Ounf's核的背外侧核(DLN)、腹内侧核(VMN)有不同数量的5-HT2A受体免疫反应阳性产物蓄积。结论:骶髓控制大鼠尿道外括约肌舒缩活动的Onuf's核中存在5-HT2A受体,其拮抗剂酮舍林通过与5-HT2A受体特异性结合可以抑制尿道外括约肌的舒缩活动,但由于正常高位中枢的调节作用和受体数量的限制,不会对正常大鼠的排尿功能造成太大影响。