大鼠异体皮瓣移植后不用免疫抑制剂情况下移植物坏死的主要原因

目的 探讨大鼠异体皮瓣移植后不用免疫抑制剂情况下移植物坏死的主要原因.方法 实验分为3组,每组受者均为8只,以股动、静脉为蒂进行下腹部皮瓣移植.A组:以BrownNorway(BN)大鼠为供者,Lewis(LEW)大鼠为受者,移植术后2周内使用免疫抑制剂西罗莫司4mg·kg-1·d-1腹腔注射;B组:以BN大鼠为供者,LEW大鼠为受者,移植后不使用任何药物;C组:为LEW大鼠自体移植对照组,术后不使用任何药物.术后观察各组移植物的大体变化,并取移植物进行病理学检查,比较各组的病理学变化.结果 A组自术后17 d起,陆续出现皮瓣红斑,表皮脱落,真皮及皮下组织则最后坏死;B组受者排斥反应进展迅速,表皮不出现脱落现象,皮瓣直接完全发黑、坏死.C组移植物长期存活,未见排斥反应征象.A、B两组从出现排斥反应迹象到组织完全坏死的时间分别为(16.7±3.0)d和(5.4±1.1)d.病理检查显示:A组表皮组织首先被排斥,真皮和皮下组织由于大量淋巴细胞浸润而坏死.B组则为移植皮瓣真皮下血管网内皮细胞坏死,血管栓塞,皮肤内细胞缺血而坏死.结论 微血管栓塞是大鼠异体皮瓣移植后不应用免疫抑制剂情况下移植物坏死的主要原因.     

近交系大鼠腹部游离皮瓣移植模型的建立及意义

目的:为异体复合组织移植及皮肤移植免疫学研究建立一种可靠、简便而实用的动物模型。方法:以近交系Brown Norway(RT1n)大鼠为供体,Lewis(RT11)大鼠为受体,以股动静脉为血管蒂,进行腹部游离皮瓣异体移植。实验分为2组:急性排斥组(A组)术后不予免疫抑制治疗;免疫抑制组(B组)术后腹腔注射CsA剂量为20mg/kg/天。术后观察移植皮瓣的排斥情况和皮瓣存活时间,并进行组织病理学检查,以此对动物模型的可靠性和实用性进行评价。结果:A组移植皮瓣均在术后(7±1)天发生明显的逐渐加重的急性免疫排斥反应;B组移植皮瓣均可良好存活,存活时间均>100天。组织病理学检查,A组皮瓣有血管炎、毛囊炎及真皮炎症等典型急性排斥反应表现;B组皮瓣均无明显免疫排斥病理学表现。术后IL-2水平与皮瓣表面及病理学检查所见排斥反应程度相一致。结论:近交系大鼠腹部游离皮瓣移植模型是操作更为简易的血管化皮肤移植模型,其免疫排斥的发生易于观察并可稳定控制,是异体皮肤移植免疫学研究的良好动物模型。     

局部转染CTLA-4Ig抑制大鼠异体复合组织移植急性排斥反应的研究

目的：观察腺病毒介导融合基因细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4（cytotoxic T-lymphocyte associated antigen-4,CTLA-4Ig）局部转染大鼠同种异体移植的复合组织对急性排斥反应的抑制作用。方法：以近交系Brown Norway大鼠为供体,Lewis大鼠为受体,采用腹部游离皮瓣作为异体复合组织移植（composite tissue allotransplantation,CTA）模型。将受者分为3组,A组（空白对照组）：异体皮瓣离体保存时不感染腺病毒,只灌注PBS溶液;B组（阴性对照组）：异体皮瓣离体保存时灌注携带增强型绿色荧光蛋白的重组腺病毒（Ad—EGFP）;C组（基因治疗组）：异体皮瓣离体保存时灌注AdCTLA-4Ig。术后观察各组移植皮瓣的排斥情况及存活天数,进行组织病理学检查,并观察CTLA-4Ig在移植组织中的表达情况及对急性排斥反应的抑制作用。结果：①A组、B组皮瓣移植物平均生存时间分别为（7．8±1．5）天和（7．1±1．6）天,C组移植皮瓣平均存活时间为（10．4±2．3）天,C组存活期长于A组和B组,差异有统计学意义（P〈0．01）;②移植皮瓣病理学检查：术后第7天,A组与B组移植皮瓣均发生严重急性排斥反应,而C组排斥反应较A组和B组轻微,但C组术后第11天也表现出严重急性排斥反应;③移植前后血清白细胞介素2（interleukin-2,IL-2）水平：各组移植术后早期发生急性排斥反应时,IL-2均有明显升高,但实验组血清IL-2水平在第3天、第7天时均明显低于两对照组（P〈0．01）。结论：建立了一种新的异体复合组织移植局部基因转染模型,皮瓣灌注AdCTLA-4Ig能获得融合基因在移植复合组织中的表达,局部产生的CTLA-4Ig能抑制急性排斥反应的发生,延长移植物存活时间。     

锌指蛋白A20促进同种异体大鼠小体积移植肝再生并抑制急性排斥

目的 探讨锌指蛋白A20对同种异体大鼠30%小体积移植肝再生与排斥及受体存活时间的影响.方法 采用急性排斥组合DA (RT1a)大鼠→Lewis (RT1l)大鼠建立同种异体大鼠30%小体积肝移植模型. 75只大鼠均分为A20腺病毒组(A20组)、对照空腺病毒组(rAdEasy组)及对照生理盐水组(PS组)3组. 供肝切取后采用离体门静脉灌注法转基因干预,肝脏灌洗后移植. 观察受体存活时间及排斥反应,检测移植肝A20表达、肝细胞再生与凋亡、肝血窦内皮细胞(LSECs)中NF-κB活性与ICAM-1 mRNA表达、移植肝浸润单核细胞(LIMCs)总数及自然杀伤(NK)细胞和自然杀伤T(NKT)细胞数以及血清IFN-γ水平. 结果 A20组受体大鼠存活时间长于PS组大鼠和rAdEasy组大鼠(P=0.001 8),而PS组大鼠存活时间又长于rAdEasy组大鼠(P=0.001 8). A20促进小体积移植肝再生,肝移植后4 d A20组大鼠肝细胞BrdU标记指数高于PS组大鼠和rAdEasy组大鼠(P＜0.01); A20组大鼠肝细胞凋亡指数低于PS组大鼠和rAdEasy组大鼠(P＜0.01). 肝移植术后4 d,组织学检测结果显示A20组大鼠移植肝有少量细胞浸润,呈轻度排斥; 而PS 组和rAdEasy组大鼠移植肝有大量细胞浸润,呈重度排斥. A20能抑制移植后早期(1 d) LSECs 中NF-κB活性和 ICAM-1 mRNA 表达. 流式细胞术检测结果显示A20能下调移植肝LIMCs数,包括下调NK和NKT 亚群细胞数,并下调血清IFN-γ水平(P＜0.05). 结论 A20能有效促进同种异体大鼠30%小体积移植肝再生,抑制排斥并延长受体存活时间,其功效可能与抑制LSECs中NF-κB活性、抑制LIMCs浸润及减少NK 细胞和NKT 细胞浸润入肝以及抑制肝细胞凋亡有关.     

他克莫司局部用药在异体复合组织移植中的应用研究

目的:探索在异体复合组织移植后局部应用他克莫司预防免疫排斥的效果。方法:以Lewis鼠和Brown Norway鼠为实验动物,进行腹部游离皮瓣异体移植,其中Brown Norway大鼠为供体,Lewis大鼠为受体。实验分为3组:全身用药组(A组),局部用药组(B组)和空白对照组(C组),在移植术后10天内均先给予腹腔注射环胞素A(20mg/kg/天),此后A组继续全身用药,而B组和C组仅在皮瓣局部分别给予他克莫司涂抹剂或赋形剂氮酮(均为2mg/kg/天)。通过观察皮瓣存活时间,皮瓣组织病理学检查,他克莫司血药浓度和局部组织药物浓度以及全身IL-2的变化,探讨局部应用他克莫司的效果。结果:三组皮瓣平均存活时间分别为:>100天(A组),25天(B组)及17天(C组),〉通过对比和统计学分析可以看出,局部用药可以延长异体皮瓣的存活时间,但是仅靠局部用药仍无法避免排斥反应的发生。结论:局部用药可以延长异体皮瓣的存活时间,但是仅靠局部用药仍无法避免排斥反应的发生。对于异体复合组织移植,局部应用他克莫司可以延长皮瓣的存活时间,但存活时间有限;但是在全身用药的基础上,局部用药可以降低全身用药的剂量,而保证异体皮瓣长期存活。因此,为了减少全身用药所带来的毒副作用,对于异体复合组织移植来说,局部应用他克莫司是一种可行的方案。     

近交系大鼠后肢移植模型的建立及意义

目的:介绍异体复合组织移植研究中操作难度较大的大鼠后肢移植模型的建立方法,操作体会及此动物模型在复合组织移植中的意义。方法:以近交系BrownNorway(RT1n)大鼠为供体,Lewis(RT11)大鼠为受体,吻合股动、静脉为供血血管,进行近交系大鼠后肢异体移植。实验分为2组:急性排斥组(A组)术后不予免疫抑制治疗;免疫抑制组(B组)术后腹腔注射FK506剂量为1mg/kg/天。术后观察移植肢体的排斥情况及其存活时间,并取皮肤进行组织病理学检查,以此对动物模型的可靠性和实用性进行评价。结果:A组移植皮瓣均在术后(4±1)天发生明显的逐渐加重的急性免疫排斥反应;B组移植肢体均可良好存活,存活时间均>100天。皮肤组织病理学检查上,A组有血管炎、毛囊炎及真皮炎症等典型急性排斥反应表现;B组均无明显免疫排斥病理学表现。术后IL-2水平与肢体外观表现及病理学检查所见排斥反应程度相一致。结论:近交系大鼠后肢移植模型是得到广泛承认的复合组织移植模型,也是最具挑战性的动物模型之一,完善近交系大鼠后肢移植模型的建立方法,使模型不断规范化,对复合组织异体移植研究的发展具有重要意义。     

新生猪Sertoli细胞与大鼠胰岛细胞联合移植延长大鼠移植胰岛的存活时间

目的 探讨新生猪Sertoli细胞(NPSCs)与大鼠胰岛细胞联合移植对延长大鼠同种异体胰岛移植物存活时间的作用及其主要的机制.方法 将糖尿病Wistar大鼠随机分为3组.(1)单纯移植组(n=6):单纯移植1500个胰岛当量(IEQ)的SD大鼠胰岛细胞至糖尿病大鼠的左肾包膜下;(2)分侧移植组(n=4):将1500个IEQ的SD大鼠胰岛细胞移植到糖尿病大鼠的左肾包膜下,同时将1×10~7个NPSCs移植到糖尿病大鼠的右肾包膜下;(3)混合移植组(n=6):将1500个IEQ的SD大鼠胰岛细胞和1×10~7个NPSCs混合移植到糖尿病大鼠的左肾包膜下.移植后每天监测各组的血糖水平,以了解移植物的存活时间;移植后发生排斥反应时获取移植物标本,行HE和免疫组织化学染色,观察移植物中CD3~+T淋巴细胞浸润情况及细胞凋亡调控基因(Bcl-2)和血红素氧合酶1(HO-1)基因的表达水平.结果 单纯移植组、分侧移植组和混合移植组胰岛移植物存活时间分别为(5.7±1.0)d、(5.3±0.5)d和(16.3±1.4)d,混合移植组存活时间较其他两组显著延长(P<0.05).单纯移植组移植区可见大量淋巴细胞浸润,主要为CD3+T淋巴细胞;混合移植组移植区Bcl-2基因呈高表达;各组移植区HO-1基因均有表达,差异不明显.结论 NPSCs与大鼠胰岛细胞联合移植可以延长大鼠同种异体胰岛移植物的存活时间,其机制可能与NPSCs抑制移植物淋巴细胞浸润、促进Bcl-2基因高表达的局部免疫调节作用有关.     

输注供鼠骨髓间充质干细胞延长肾移植大鼠的存活时间

目的 探讨在同种大鼠肾移植中输注供者骨髓间充质干细胞(MSC)对急性排斥反应的影响以及延长受鼠存活时间的作用.方法 取Wistar大鼠骨髓,分离和培养其MSC.以Wistar 大鼠为供者,Lewis大鼠为受者,建立同种大鼠肾移植模型.根据受鼠处理方式的不同,分为低剂量MSC组、高剂量MSC组、CsA组及对照组,低剂量MSC组和高剂量MSC组于移植前后分别多次输注1×106个和t×107个供者MSC,CsA组于术后2d开始腹腔内注入CsA 0.5 mg·kg-1 ·d-1,以腹腔内注射PBS作为对照.移植后,比较各组受鼠的存活时间,观察各组移植肾功能及移植肾组织病理学改变.结果 低剂量MSC组、高剂量MSC组、CsA组及对照组受鼠的存活时间分别为(21.7±7.2)d、(31.2±14.3)d、(34.9±15.7)d及(9.0±2.3)d;低剂量MSC组、高剂量MSC组和CsA组存活时间均明显长于对照组(P＜0.01),而低剂量MSC组存活时间明显短于高剂量MSC组和CsA组(P＜0.05).术后第4天,高剂量MSC组和CsA组移植肾组织形态和结构基本正常;对照组移植肾组织则表现出典型的急性排斥反应,出现广泛间质性浸润,肾小管炎症和片状坏死、出血,肾小球炎症浸润严重;而与对照组相比,低剂量MSC组急性排斥反应的病理表现则要明显减轻.结论 同种肾移植大鼠输注供者MSC后,可以达到有效的免疫调节作用,并且可明显延长大鼠的存活时间,呈MSC剂量依赖性.     

大鼠小肠移植早期应用趋化因子受体拮抗剂抑制移植物急性排斥反应

目的探讨趋化因子受体拮抗剂(MetRANTES)在小肠移植早期应用对排斥反应的免疫抑制作用及其与他克莫司的协同效应。方法SD大鼠为供者,Wistar大鼠为受者,建立异基因节段性异位小肠移植模型。移植后将大鼠分为4组,每组24只。第1组为对照组,移植前后不作任何处理;第2组为MetRANTES组,小肠移植后(0～7d)腹腔注射MetRANTES200μg/d;第3组为小剂量他克莫司(FK506)组,小肠移植后(0～7d)腹腔注射FK5060.5mg·kg-1·d-1;第4组为MetRANTES联合FK506组,2种药物的应用方法与第2、3组相同。观察移植大鼠的一般状况和存活时间以及免疫细胞浸润情况,并于移植术后3、5、7d分别取各组大鼠移植肠标本(n=6)进行组织病理学检查,采用免疫荧光染色和激光扫描共聚焦显微镜技术对移植肠RANTES和CD4 、CD8 、CD25 T淋巴细胞的表达进行连续定量测定。结果第1～4组大鼠平均存活时间分别为(7.37±1.19)d、(22.32±8.60)d、(23.64±6.58)d和(30.55±4.18)d,第2、3、4组大鼠与第1组相比,存活时间明显延长(P<0.01);第4组大鼠存活时间更长,与第2、3组比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。第1组全部死于急性排斥反应及感染,组织病理学检查显示移植后第3、5、7d分别符合轻、中、重度排斥反应。第2、3、4组病理学检查无明显排斥反应征象。第1组大鼠的移植肠RANTES表达在术后各时段均显著高于其他3组(P<0.01),其动态变化与急性排斥反应的进程呈正相关;第2组和第4组大鼠移植肠RANTES、CD4 、CD8 和CD25 T细胞的表达均明显低于第1组(P<0.01)。结论MetRANTES能明显抑制小肠移植急性排斥反应,有效保护移植肠功能,显著延长移植物的存活时间,并可增强小剂量他克莫司的免疫抑制作用。     

肝硬化大鼠原位肝移植模型的制作及术后排斥反应的观察

目的 制备肝硬化大鼠的原位肝移植模型,观察术后排斥反应发生情况,为进行其它研究创建一个平台.方法 以皮下注射CCl4联合饮用苯巴比妥钠和乙醇溶液的方法制备大鼠肝硬化模型,应用改良的"二袖套"法建立大鼠原位肝移植模型,同系移植者的供、受者均为SD大鼠(SD实验组),以接受肝移植的正常SD大鼠为对照(SD对照组);同种移植者的供者为Lewis大鼠,受者为BN大鼠(BN实验组),以接受肝移植的正常BN大鼠为对照(BN对照组).术后观察受者的存活情况以及移植肝的组织学变化.结果 肝硬化大鼠门静脉压力为(182.0±10.7)mm H2O,显著高于正常大鼠的(70.8±5.5)mm H2O(P＜0.01),移植后7 d降至(82.7±10.7)mm H2O.同种移植组术后5～12 d,移植肝组织中均可见中、重度急性排斥反应病理改变.同系移植者存活时间中位数均＞100 d;同种移植者中,BN对照组和BN实验组受者肝移植后存活时间中位数均为10 d.结论 以Lewis大鼠为供者、肝硬化BN大鼠为受者制备的肝移植模型术后排斥反应的发生率较高,可作为肝移植后排斥反应相关研究的平台.     

Prolonged ischemia increases severity of rejection in skin flap allotransplantation in rats

To investigate the relationship between ischemic time and rejection against allotransplants, vascularized cutaneous flaps from the groin of Brown Norway rats were transplanted to Lewis rats. The ischemic time was set at 1 hour and 6 hours for comparison. Cycrosporine A was used as the immunosuppressant. The results showed more severe rejection in the 6 hours ischemic time group in vivo, and in vitro examination using mixed lymphocyte reaction assay also demonstrated a greater antidonor response in 6 hours‐ischemic group than that in 1 hour‐group. Immunohistochemical study demonstrated more MHC class II antigen expression in 6 hours‐ischemic group than in 1 hour‐group. These results suggest that longer ischemic time induces more severe rejection against allo‐transplanted tissue compared with the shorter one through an upregulation of MHC class II antigen. It is expected that these findings contribute to the studies for investigating the mechanism of rejection against the allo‐transplants. © 2010 Wiley‐Liss, Inc. Microsurgery 2010.     

记忆性CD4+T淋巴细胞对小鼠腹腔移植心脏排斥反应的影响

目的 探讨记忆性CD4+T淋巴细胞对来自同一抗原特异性移植心脏急性排斥反应的影响.方法 将C57BL/6小鼠的皮肤移植给Balb/c小鼠,使其致敏,3个月后,取受者的脾脏,应用小鼠记忆性CD4+T淋巴细胞纯化试剂盒纯化记忆性CD4+T淋巴细胞.同时取未进行皮肤移植的Balb/c小鼠,同法获取非致敏CD4+T淋巴细胞.以C57BL/6小鼠为供者,正常Balb/c小鼠为受者,行腹腔心脏移植,移植前3周,实验组受者经阴茎背静脉注射记忆性CD4+T淋巴细胞;非致敏对照组受者经阴茎背静脉注射非致敏CD4+T淋巴细胞;空白对照组不注射任何T淋巴细胞.各组均于移植前1 d、移植当天及移植后1 d给予环孢素A.术后记录移植心脏存活时间;取移植心脏,进行病理学观察.结果 实验组、非致敏对照组和空白对照组移植心脏存活时间分别为(8.5±1.5)d、(25.7±5.5)d和(21.2±9.2)d,实验组明显短于另两组(P<0.05).移植心脏急性排斥反应的病理学分级,实验组为3.43±0.68,非致敏对照组为1.29±0.46,空白对照组为1.31±0.49,实验组病理学分级明显高于非致敏对照组和空白对照组(P<(0.05).结论 当记忆性CIN+T淋巴细胞再次接触同一抗原特异性的移植心脏时,可促进急性排斥反应的发生,且对常规剂量的环孢素A不敏感.     

SDF-1/CXCR4在肝移植急性排斥反应中的表达

目的 通过检测基质细胞衍生因子-1(stromal-dirived factors-1,SDF-1)的受体CXCR4在移植肝脏急性排斥反应中的表达,探讨其在肝移植急性排斥反应中的作用机制.方法 根据Banff病理分级将原位肝移植术后肝穿刺活检标本分成4组,应用RT-PCR方法 半定量分析各组标本中CXCR4的mRNA水平.结果 对照组和未排斥组肝穿标本大多呈现CXCR4的轻、中度表达;排斥组肝穿标本CXCR4高度表达的例数较多,而且随着排斥程度的加重,肝穿标本CXCR4表达的相对R值呈现递增趋势.结论 CXCR4在人类肝移植急性排斥反应中起着重要作用,通过各种生物学手段抑制CXCR4在移植肝脏中的表达有可能成为防治急性排斥反应有效途径.     

Macrophage depletion prevents anti-graft antibody production and results in long-term survival in xenotransplantation

Liposome-encapsulated dichloromethylene diphosphonate (clodronate) is known to deplete macrophages. We examined the effect of clodronate on xenoreactive antibody production and xenograft rejection. Hamster cardiac grafts were transplanted into Lewis rats. Clodronate (4 mL/kg) was injected intravenously on the day before transplantation. In some groups, cyclosporine A (CsA) at a dose of 15 mg/kg was given daily intramuscularly until the end of each experiment. Untreated Lewis rats rejected the grafts at 2 and 3 days after transplantation. Neither CsA treatment alone nor clodronate treatment alone prolonged graft survival. Five of 7 Lewis recipients treated with clodronate and CsA did not reject hamster hearts for 100 days. Antibody production in the CsA plus clodronate-treated group was suppressed compared with control groups.     

HSV-sr39TK-GCv/ACV系统抑制小鼠异基因骨髓移植后移植物抗宿主病

目的 研究突变型单纯疱疹病毒胸苷激酶一更昔洛韦/阿昔洛韦(HSV-sr39TK-GCV/ACV)系统对小鼠异基因骨髓移植后移植物抗宿主病(GVHD)的影响.方法 采用改良的磷酸钙沉淀法,以携带HSv-sr39TK基因的慢病毒感染C57BL/6小鼠的脾淋巴细胞.制得sr39TK+T淋巴细胞.以C57BL/6小鼠为供者,Balb/c小鼠为受者进行骨髓移植,受者移植前接受60>Coγ射线照射.实验分6组进行:(1)GCV组共30只小鼠,均于骨髓移植的同时输注sr39TK+T淋巴细胞.其中10只于骨髓移植当天至第6天腹腔注射GCV 0.5 mg/d,10只于骨髓移植后第7～13天腹腔注射GCV0.5 mg/d,10只于骨髓移植后第12～18天腹腔注射GCV 0.5 nag/d;(2)ACV组共30只小鼠,骨髓移植与sr9TK+T淋巴细胞输注同GCV组,其中10只于骨髓移植当天至第6天腹腔注射ACV 0.5mg/d,10只于骨髓移植后第7～13天腹腔注射ACV 0.5 mg/d,10只于骨髓移植后第12～18天腹腔注射ACV 0.5 mg/d;(3)移植对照组仅行骨髓移植;(4)脾细胞对照组行骨髓移植和脾淋巴细胞输注;(5)GCV对照组在脾细胞对照组的基础上于骨髓移植后第7～13天腹腔注射GCV 0.5 mg/d.(6)sr39TK对照组行骨髓移植和sr9TK+T淋巴细胞输注.观察各组受者的存活时间、GVHD的发生情况及程度.结果 GCV对照组、sr9TK对照组、睥细胞对照组和移植对照组小鼠均于骨髓移植后19 d内死亡.GCV组移植当天用药者、第7天用药者和第12天用药者的存活时间分别为(36.70±5.20)d、(40.30±4.69)d和(27.10±4.85)d.ACV组移植当天用药者、第7天用药者和第12天用药者的存活时间分别为(36.50±5.26)d、(46.20±3.61)d和(30.90±5.21)d.GCV组和ACV组受者的存活时间均长于4个对照组(P<0.01),GCV组和ACV组中第7天用药者的存活时间和5(1 d存活率优于其它各时间用药者,差异有统计学意义(P<0.05),而ACV组第7天用药者又明显优于GCV组第7天用药者(P<0.05).4个对照组小鼠移植后10～12 d均开始出现Ⅲ～Ⅳ级GVHD.GCV组和ACV组死亡小鼠可见Ⅱ～Ⅳ级GVHD.而该两组中长期存活受者仅有Ⅰ～Ⅱ级GVHD.结论 HSV-sr9TK-GCV/ACV系统对小鼠异基因骨髓移植后的GVHD有一定的抑制作用;ACV的效果优于GCV;移植后7 d时应用ACV的效果较佳.     

Limited effectiveness of FK506 administration for ongoing rejection in heterotopic rat heart transplantation

A comparison was made of the histological findings for myocardial tissue of heterotopic transplanted rat hearts administered with FK506. ACI rats were used as donors and Lewis rats as recipients. FK506 was used for 6 days except for group I (control group). Group II received 0.32 mg/kg/day of FK506 from the day of operation while group III was given the same dosage from the 4th day after transplantation. Group IV was given 1.28 mg/kg/day of the agent from the day of grafting and group V received the same dose from the 4th postoperative day. The graft survival time was longer for all groups given FK506, but was significantly longer only for groups administered with FK506 from the day of operation. Histological studies performed 10 and 20 days after transplantation showed that a moderate rejection was seen in about half of the grafts receiving FK506 from the 4th day after grafting. An ultra-structural study of these cases showed that infiltrating large lymphocytes still remained in the interstitial tissues and that the cytoplasmic organelles of the myocytes had been focally destroyed. These results suggest that, although FK506 suppressed any further rejection, the effect might be limited and the myocardial changes of the cardiac graft might persist even after administration for ongoing rejection.This work was supported by a Ministry of Education Grant (A) 03770873.     

Role of CXCR3 and CCR5 in allograft rejection

Chemokines are known to participate in allograft rejection by mediating leukocyte trafficking. Despite redundancy in chemokine family, several chemokine-chemokine receptor interactions have proven critical in alloimmune responses. We sought to determine the effect of combined blockade of CXCR3 and CCR5, two critical chemokine receptors, in acute rejection. METHODS: Heterotopic heart transplantation was performed using BALB/c to B6/129 mice deficient in CCR5. Following transplantation these mice were treated with goat anti-CXCR3 serum every other day. In the control group, BALB/c hearts were transplanted in wild type B6/129 recipients and treated with goat serum alone. No immunosuppression was given to either group. Recipient mice were then assessed daily for allograft function by abdominal palpation, and graft survival was confirmed by laparotomy. RESULTS: The donor hearts in the control group were rejected at 6 +/- 1 days posttransplantation. Combined blockade of CXCR3 and CCR5 prolonged allograft survival versus control; all allografts survived to 24 days. In addition, there was a decrease in graft infiltrating CD4 and CD8 lymphocytes in the experimental group at 24 days. CONCLUSION: Combined CXCR3 and CCR5 blockade is effective in prolonging allograft survival in a fully MHC mismatched murine model. Combined chemokine blockade holds promise in control of acute rejection in organ transplantation.     

转化生长因子β1质粒联合反复冻融移植物减轻大鼠神经移植后的排斥反应

目的 探讨局部注射含转化生长因子β1(TGF-β1)基因的质粒联合预先反复冻融处理移植神经对大鼠异体神经移植后排斥反应的影响.方法 SD大鼠分为4组进行实验,每组20只.TGF-β1组大鼠移植Wistar大鼠的冷冻坐骨神经,局部注射含TGF-β1基因的质粒;空质粒组大鼠移植Wistar大鼠的冷冻坐骨神经,注射空质粒;新鲜异体神经移植组大鼠接受Wistar大鼠的新鲜坐骨神经移植,不注射质粒;自体移植组SD大鼠移植自体的冷冻坐骨神经,不注射质粒.移植后用Western印迹法检查移植神经中TGF-β1的表达,并进行混合淋巴细胞反应(MLC),测量运动神经的传导速度.各组移植神经样本分别在光镜和投射电镜下进行观察.结果 TGF-β1组中TGF-β1的表达明显较高.移植后12周时,自体移植组、TGF-β1组、空质粒组和新鲜异体神经移植组的MLC结果(吸光度值)分别为0.312±0.009、0.213±0.006、0.521±0.018和0.928±0.032.TGF-β1组各个时间点的运动神经传导速度均高于空质粒组和新鲜异体神经移植组,TGF-β1组与自体神经移植组相比较,差异无统计学意义(P＞0.05).光镜下可见,TGF-β1组的神经纤维结构破坏不明显.结论 局部注射含TGF-β1基因的质粒联合反复冻融处理异体移植神经可以减轻神经移植后的排斥反应.     

Fractal Analysis of Heart Graft Acute Rejection Microscopic Images

Background

Endomyocardial biopsy to evaluate rejection in the transplanted heart is accepted at the “gold standard.” The complexity of microscopic images suggested using digital methods for precise evaluating of acute rejection episodes with numerical representation. The aim of the present was study to characterize digitally acute rejection of the transplanted heart using complexity/fractal image analysis.

Material and Methods

Biopsy samples harvested form 40 adult recipients after orthotropic heart transplantation were collected and rejection grade was evaluated according to the International Society for Heart and Lung Transplantation (0, 1a, 1b, or 3a) at transverse and longitudinal sections. Fifteen representative digital microscope images from each grade were collected and analyzed after Sobel edge detection and binarization.

Results

Only mean fractal dimension showed a progressive and significant increase and correlation based on rejection grade using longitudinal sections. Lacunarity and number of foreground pixels showed unequivocal results.

Conclusion

Mean fractal diameter could serve as auxiliary digital parameter for grading of acute rejection in the transplanted heart.