天疱疮患者外周血单一核细胞糖皮质激素受体mRNA的表达

目的 通过检测外周血单一核细胞(PBMC)糖皮质激素受体(GR)mRNA的表达预测天疱疮患者对糖皮质激素(简称激素)治疗的疗效。方法 用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法,对30例天疱疮患者及30例健康对照者PBMCGRα及GRβ的mRNA进行检测。结果 所有天疱疮患者及健康对照者均可检测到GRαmRNA,且天疱疮患者中GRαmRNA的表达水平显著低于正常人对照组(P=0.044),但在激素治疗控制组及未控制组之间,GRαmRNA的表达水平差异无统计学意义。GRβmRNA的检出率:激素治疗未控制组为83%(10/12),激素治疗控制组为17%(3/18),正常人对照组为30%(9/30),GRβmRNA的阳性率在激素治疗控制组与未控制组之间差异有统计学意义(P<0.001)。结论 激素治疗未控制组天疱疮患者PBMC上GRβmRNA表达增加,GRβ在决定天疱疮患者对激素治疗疗效上有一定作用。     

HO-1在银屑病患者皮损及外周血单一核细胞中的表达

目的：检测寻常型银屑病(PV)患者皮损及外周血单一核细胞(PBMC)中血红素氧合酶-1(HO-1)mRNA和蛋白的表达。方法：逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法和免疫组化方法检测20例PV患者和10例正常人皮肤及PBMC中HO-1 mRNA 和蛋白的表达。结果： PV患者及正常对照组皮肤中HO-1mRNA表达相对含量分别为1.32±0.29和0.46±0.10，HO-1的免疫组化评分分别为10.25±2.36和2.65±1.03；患者及对照组PBMC中HO-1mRNA相对含量分别为0.25±0.14和0.22±0.16，HO-1染色阳性细胞的百分比为11.7％±3.44％和10.5％±4.06％，PV皮损中HO-1的mRNA和蛋白表达明显高于正常对照组(P<0.05)，而PV患者外周血PBMC中HO-1 mRNA和蛋白的表达水平与正常对照组差异无显著性(P>0.05)。结论： HO-1可能参与了银屑病皮损的发病过程。     

NF-KB在皮肌炎中的表达及糖皮质激素对其影响

目的探讨NF-KB在皮肌炎患者外周血单一核细胞中的表达及糖皮质激素对其影响。深入阐明皮肌炎的发病及复发机制，为临床治疗及新药开发提供方法和理论依据。方法分别从正常人和皮肌炎患者的外周血中提取单一核细胞，用电泳迁移率改变试验检测不同组别中NF-KB的活性。结果①在皮肌炎患者外周血中NF-KB有所表达。NF-KB在正常人的外周血中未见表达。②糖皮质激素能抑制NF-KB的活性。③复发病人治疗前其外周血中NF-KB的活性比初诊病人高（P〈0．01）。结论①NF-KB活性增强可能是导致皮肌炎炎症反应及复发的重要因素之一。②激素可以一定程度抑制NF-KB活性。     

HAX-1在SLE患者外周血单一核细胞中的表达及其亚细胞定位

目的 检测活动期SLE患者PBMC中抗凋亡基因HAX-1的表达水平，并进行亚细胞定位分析。方法 分别采用半定量PCR以及Western印迹试验从mRNA和蛋白水平上检测活动期SLE患者及正常人对照组PBMC中HAX-1的表达，并通过激光共聚焦显微镜观察HAX-1在SLE患者PBMC中的亚细胞定位。结果 活动期SLE患者PBMC中HAX-1在mRNA水平以及蛋白水平的表达均明显高于健康正常人（P值分别 = 0.000、0.007），且其相对表达水平与SLEDAI之间呈线性正相关；HAX-1在SLE患者PBMC中主要分布于线粒体内及内质网。结论 HAX-1可能通过抗凋亡机制抑制SLE患者体内淋巴细胞凋亡而导致其过度活化，从而参与SLE疾病发生发展过程。     

NF-κB在皮肌炎中的表达及糖皮质激素对其影响

目的探讨NF-κB在皮肌炎患者外周血单一核细胞中的表达及糖皮质激素对其影响。深入阐明皮肌炎的发病及复发机制,为临床治疗及新药开发提供方法和理论依据。方法分别从正常人和皮肌炎患者的外周血中提取单一核细胞,用电泳迁移率改变试验检测不同组别中NF-κB的活性。结果①在皮肌炎患者外周血中NF-κB有所表达。NF-κB在正常人的外周血中未见表达。②糖皮质激素能抑制NF-κB的活性。③复发病人治疗前其外周血中NF-κB的活性比初诊病人高(P<0.01)。结论①NF-κB活性增强可能是导致皮肌炎炎症反应及复发的重要因素之一。②激素可以一定程度抑制NF-κB活性。     

多发性肌炎/皮肌炎患者外周血单一核细胞中糖皮质激素受体及热休克蛋白90 mRNA的表达

我们应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)对多发性肌炎/皮肌炎(PMDM)患者外周血单一核细胞(PBMC)中糖皮质激素受体与HSP90mRNA的表达水平进行检测,以探讨其表达水平同糖皮质激素疗效的相关性^[1-3]。     

白介素18结合蛋白在银屑病患者外周血单一核细胞中的表达

银屑病的致病机制至今尚未明了,目前大多数人认为Th1细胞介导的细胞免疫在其发病中起着重要作用。白介素18结合蛋白(IL-18BP)有拮抗IL-18功能,抑制干扰素γ(IFN-γ)的产生,以早期Th1细胞因子抑制剂的形式参与Th1反应的调控。我们先前的研究发现银屑病患者血浆中IL-18BPa水平下降,这是否是由于银屑病患者外周血单一核细胞(PBMC)存在分泌IL-18BPa的障碍,我们对此进行了研究。     

转录因子Aiolos基因在SLE患者外周血单一核细胞中的表达

目的 探讨SLE患者外周血单一核细胞（PBMC）中转录因子Aiolos的表达水平。方法 采用Western印迹法分别检测19例SLE活动期患者及13例SLE稳定期患者PBMC中转录因子Aiolos蛋白的表达水平,并以30例健康志愿者作对照。对SLE患者Aiolos蛋白表达水平与SLE疾病活动指数（SLEDAI）进行相关分析。结果 PBMC中转录因子Aiolos蛋白表达相对值正常对照组为0.81 ± 0.09,SLE组为0.56 ± 0.17,两组比较差异有统计学意义（P < 0.01）;SLE活动期组（0.52 ± 0.14）与稳定期组（0.65 ± 0.19）比较,差异有统计学意义（P < 0.05）;SLE患者转录因子Aiolos蛋白的表达与SLEDAI呈显著负相关（r = -0.65,P < 0.01）。结论 SLE患者PBMC中转录因子Aiolos的表达水平显著降低,且与SLE疾病活动指数呈一定相关性。     

转化生长因子-β1 mRNA在银屑病皮损和外周血单一核细胞中的表达

银屑病是一种以表皮角质形成细胞(KC)过度增生为特征的皮肤慢性炎症性疾病。许多细胞因子促进了KC的增生，但转化生长因子β1(TGF—β1)对KC具有抑制生长作用。笔者的前期研究结果显示：TGF—β1在银屑病表皮KC中表达减少或缺失，那么在银屑病皮损损TGF—β1mRNA表达水平如何?患者外周血单一核细胞(peripheral blood mononuclear cells，PBMC)中     

白细胞介素22在玫瑰糠疹患者外周血单一核细胞及血清中的表达

【摘要】 目的 探讨白细胞介素（IL）-22在玫瑰糠疹发病机制中的作用。 方法 荧光实时定量反转录（RT）-PCR检测玫瑰糠疹患者急性期、恢复期及健康对照组PBMC中IL-22mRNA的表达水平。采用酶联免疫吸附试验检测血清中IL-22的水平。 结果 玫瑰糠疹患者急性期、恢复期及健康对照组PBMC中IL-22 mRNA的相对表达量分别为4.15 ± 1.36、2.89 ± 0.91和1.91 ± 0.60,急性期明显高于恢复期（t = 3.61,P ＜ 0.05）,恢复期高于健康对照组（t = 3.84,P ＜ 0.05）。玫瑰糠疹患者急性期、恢复期及健康对照组血清中IL-22水平分别为（36.87 ± 10.63）、（21.44 ± 7.33）和（13.22 ± 4.26） ng/L,急性期明显高于恢复期（t = 5.01,P ＜ 0.05）,恢复期高于健康对照组（t = 4.49,P ＜ 0.05）。血清IL-22水平与玫瑰糠疹病程呈正相关（r = 0.883,P ＜ 0.05）。结论 IL-22在玫瑰糠疹患者外周血及血清中表达明显升高,可能在玫瑰糠疹的发病中起一定作用。     

地塞米松对系统性红斑狼疮阴虚内热证患者外周血单一核细胞基因表达谱的影响

目的 探讨地塞米松对系统性红斑狼疮(SLE)阴虚内热证患者外周血单一核细胞(PBMC)基因表达谱的影响.方法 用地塞米松孵化SLE阴虚内热证患者PBMC,收集孵化后细胞进行PBMC的基因表达谱检测.结果 地塞米松上调85个PBMC基因,下调126个PBMC基因.结论 地塞米松调控SLE阴虚内热证患者PBMC的基因所属功能簇众多,基因编码的功能蛋白分布细胞多个部位,不是所有基因调控结果均有利于SLE缓解,一些基因调控作用对研究地塞米松治疗SLE的机制有帮助.

Abstract：

Objective To observe the influence of dexamethasone on the gene expression profiling of PBMCs from patients with internal heat due to Yin deficiency-type SLE. Methods The PBMCs from 3 patients with internal heat due to Yin deficiency-type SLE were incubated with dexamethasone of 10-6 g/L for 48 hours followed by the detection of gene expression profiling of PBMCs by a GeneChip. Results The incubation with dexamethasone upregulated the expressions of 85 genes and downregulated those of 126 genes in PBMCs from the SLE patients. Conclusions Dexamethasone can regulate the expressions of numerous clusters of genes in PBMCs from patients with internal heat due to Yin deficiency-type SLE, and functional proteins encoded by these genes are located at various organelles and regions of cells. Not all the results of gene regulation by dexamethasone favor the relief of SLE. To study the regulation of genes may be beneficial to the elucidation of mechanisms underlying the therapeutic effect of dexamethasone on SLE.     

狼疮肾炎患者糖皮质激素受体亚型GRα和GRβ mRNA表达的研究

目的探讨狼疮肾炎患者对糖皮质激素(以下简称激素)治疗反应不同的分子机制.方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测正常对照组(10例)和狼疮肾炎组(28例,其中激素敏感组10例、激素依赖组10例、激素抵抗组8例)外周血单个核细胞(PBMCs)内GRα与GRβmRNA表达水平的变化.结果与正常对照组相比,狼疮肾炎患者三组中GRα mRNA的表达水平均降低,差异有显著性(P＜0.05);GRβmRNA在激素抵抗组中表达明显增高,差异有显著性(P＜0.01),而在激素敏感组、激素依赖组中表达无明显差异(P＞0.05).结论狼疮肾炎患者糖皮质激素受体GRα、GRβmRNA表达水平的变化,导致GRα与GRβ比例失调,使组织细胞对激素的敏感性降低,因此,导致狼疮肾炎的患者对糖皮质激素治疗反应不同,狼疮肾炎患者出现激素抵抗可能与GRβmRNA表达水平增高有关.     

多发性肌炎和皮肌炎患者PBMC表面CD43分子的表达

目的探讨多发性肌炎(PM)和皮肌炎(DM)外周血细胞表面CD43分子的表达及其意义。方法应用双色荧光标记抗体、流式细胞仪对PM/DM患者外周血单个核细胞(PBMCs)和B细胞表面CD43分子的表达进行了检测。结果PM/DM患者PBMCs中CD19 B细胞、CD43 细胞和CD43 CD19 B细胞数量显著高于对照组,PM患者PBMCs中CD43 细胞数量显著高于对照组,DM患者PB-MCs中的CD19 B细胞和CD43 细胞的数量显著高于对照组,但PM和DM患者之间这些指标均无显著性差异。结论PM/DM患者PBMCs中B细胞数量的升高与其自身抗体产生有关,B细胞上CD43分子表达上调对B细胞增殖、分化和抗体分泌类型转换起正性调节作用,是PM/DM自身抗体产生的重要原因。     

SLE患者外周血白细胞B7-H1分子的表达

目的 探讨B7-H1分子在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血白细胞的表达.方法 心用荧光抗体染色技术,经流式细胞仪检测30例SLE患者和20例正常人对照者外周血白细胞表面B7-H1的自然表达水平,同时收集SLE患者的实验室检查指标,并用SLE疾病活动指数(SLEDAI)来判定患者疾病活动程度.结果 活动期SLE组单核细胞、淋巴细胞和粒细胞上B7-H1表达水平均明显高于正常人对照组(P<0.01);SLE患者单核细胞和淋巴细胞B7-H1表达水平与SLEDAI呈正相关(r₁=0.42,P₁<0.05;r₂=0.52,P₂<0.05);抗dsDNA抗体阳性患者组淋巴细胞表面B7-H1分子数较抗dsDNA抗体阴性组明显增高(t=3.20,P<0.01).治疗后SLE患者外周血单核细胞、淋巴细胞和粒细胞B7-H1表达均明显下降,t值分别为10.00、6.75和4.33,P<0.01.结论 活动期SLE患者外周血白细胞B7-H1表达增加,且与SLEDAI成正相关,B7-H1可能与SLE的发病机制有关.     

白介素22及其相关因子在银屑病患者血清及外周血单一核细胞中的表达

目的 探讨白介素（IL）-22及其相关因子IL-23p19、IL-6在寻常性银屑病患者外周血单一核细胞（PBMC）及血清中表达的意义。方法 采用实时定量RT-PCR法检测寻常性银屑病患者及正常人对照者外周血PBMC中IL-22 mRNA、IL-23p19 mRNA及IL-6 mRNA的水平;采用ELISA法检测寻常性银屑病患者及正常人对照者血清和PBMC培养上清中IL-22的分泌水平。结果 银屑病组和正常人对照组PBMC中IL-22 mRNA的相对表达量分别为4.48 ± 2.64和2.35 ± 0.91;IL-23p19 mRNA的相对表达量分别为6.07 ± 4.09和2.61 ± 1.46;IL-6 mRNA的相对表达量分别为3.87 ± 1.49和1.48 ± 0.62;差异均有统计学意义（P < 0.01）。ELISA检测发现,银屑病组和正常人对照组血清中IL-22的水平分别为（86.23 ± 25.58） ng/L和（43.67 ± 14.82） ng/L（P < 0.01）,PBMC培养上清中IL-22的水平分别为（119.11 ± 21.51） ng/L和（57.70 ± 13.17） ng/L（P < 0.01）。结论 寻常性银屑病患者PBMC和血清中过度表达IL-22,提示IL-22可能参与银屑病的发病机制。     

尖锐湿疣患者外周血单一核细胞中干扰素调节因子7和Toll样受体9 mRNA的表达

目的 探讨干扰素调节因子7、Toll样受体9在尖锐湿疣发病中的作用及临床意义。方法 采用逆转录聚合酶链反应检测25例尖锐湿疣患者外周血单一核细胞中干扰素调节因子7、Toll样受体9 mRNA的水平,20例正常人作对照。结果 尖锐湿疣患者外周血单一核细胞中干扰素调节因子7与Toll样受体9 mRNA表达水平均明显高于正常对照组,差异有统计学意义（P值均 < 0.01）。结论 尖锐湿疣患者外周血中干扰素调节因子7、Toll样受体9表达升高。     

SLE患者外周血单一核细胞CD43基因的表达

目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)免疫功能异常与CD43分子基因的关系。方法采用反向聚合酶链反应(RT-PCR)技术,对SLE患者外周血单一核细胞(PBMC)CD43基因的表达进行检测。结果SLE患者与正常人PBMC均检测到CD43基因的表达,且前者的表达水平为0.8662±0.3992,高于后者的0.3451±0.3310,有非常显著性差异(t=7.109,P<0.01)。结论活动期SLE患者PBMC的CD43基因表达水平显著升高,导致淋巴细胞免疫功能异常。     

多发性肌炎和皮肌炎患者外周血单一核细胞Fas、FasL和bcl-2分子的表达

目的：探讨多发性肌炎(PM)／皮肌炎(DM)的外周血单一核细胞(PHMC)活化和凋亡的状态。方法：采用免疫细胞化学方法对PM／DM患者的PBMC上凋亡相关分子Fas、FasL和bcl—2等的表达进行了检测。结果：PM／DM患者PBMC上Fas、FasL和bcl—2分子的表达显著高于正常对照组。结论：PM／DM患者的PBMC存在异常活化和凋亡，与PM／DM的免疫学病理过程有关。     

急性湿疹患者外周血环氧合酶同工酶的研究

探讨两种环氧合酶同工酶（COX－1和COX－2）在急性泛发性湿疹患者外周血单个核细胞中（PBMC）的表达水平及其意义。应用逆转录－聚合酶链反应（RT－PCR）检测了15例急性泛发性湿疹患者和30名健康对照PBMC中COX－1和COX－2mRNA的表达水平。结果表明急性泛发性湿疹患者PBMC中COX－2mRNA的平均表达水平明显高于健康对照组，有非常显著差异（P＜0．01），且与湿疹面积严重度积分（EASI）有正相关性（P＜0．01）；而COX－1的平均表达水平理健康对照组无统计学差异（P＞0．05）。提示急性泛发性湿疹患者PBMC中COX－2mRNA表达增加可能通过诱导前列腺素（PGs）及其代谢产物参与急性泛发性湿疹的发病过程。