甲型流感病毒自然温度敏感株的检查和基因损害定位

甲型流感病毒的温度敏感株(ts株)为一条件致死性突变株。由于ts突变可发生于许多基因,故该突变系统可用于遗传分析研究,以了解病毒的基因结构与功能。本文证明鸡胚滴定法用于检查流感病毒ts性状时,与组织培养蚀斑法等效。从12株老甲型病毒中未发现ts株。从1979年2月以后分离的6株新甲型病毒中共发现2株ts株。从1968～1978年分离的23株甲     

A型流感病毒株核蛋白基因的克隆与重组质粒的构建

目的克隆A型流感病毒株Swine/Henan/703/2001(H3N2)的核蛋白(NP)基因序列并构建重组质粒。方法采用逆转录聚合酶链式反应技术从病毒株基因组中扩增出编码核蛋白的基因序列,克隆至pGEM-TEasy载体,经蓝白筛选、菌落PCR及酶切鉴定挑取阳性克隆并测序。结果利用RT-PCR扩增到目的基因片段,并将其克隆至T载体。结论成功构建重组质粒pGEM-TEasy-NP,为NP相关功能及流感疫苗的进一步研究奠定实验基础。     

核、膜蛋白的基因能抑制禽类流感病毒及其重组株的繁殖

对人流感病毒A/Udorn/72(H_3N_2)株与禽类流感病毒A/Mallard/NY/78/(H_2N_2)重组后的重组株分析表明,仅含禽类病毒的核蛋白(NP)或膜蛋白(M)的RNA片段的重组株,在松鼠猴的呼吸道繁殖是受限制的。另外。仅有禽类的RNAl和NS基因的重组株(Clone 12)在松鼠猴的气管内的繁殖也明显受限制,而只具有其中一个基因的Clone 9, Clone 2, 则限制就不明显。由此表明,禽类流感病毒的NP和M基因在宿主范围的繁殖限制中起主要作用,而RNAI和SN基因的结合,同样起着繁殖受限制作用。     

1,844株临床菌株的药物敏感试验

抗菌药物的广泛应用,导致耐药菌株日趋增多。细菌对抗菌药物的敏感试验结果是临床选用有效抗菌药物的重要依据,也是了解细菌对抗菌药物敏感程度的可靠依据。本文就1,844株临床菌株对常用抗菌药物的敏感试验结果报道如下。     

193株金黄色葡萄球菌的抗生素敏感试验

用微量滴定法检测9种抗生素对193株金黄色葡萄球菌的体外抗菌活性。结果表明,来源于不同标本的金葡菌株药敏谱基本相同;对青霉素G、氯霉素和红霉素耐药,噬菌体Ⅰ、Ⅲ群的金葡菌对青霉素G明显对药,而先锋霉素Ⅰ、万古霉素、苯唑青霉素抗菌作用最强。比较了非耐药菌与耐药菌的最小抑茵浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。耐药菌株的MBC则明显增高。     

945株病原菌的药物敏感试验分析

目的：探讨株州地区近年来致病菌的耐药状况。方法：收集我院2002年1～12月，临床送检标本中培养分离的945株病原菌的药物敏感试验资料进行分析。结果：G^ 菌220株，占23．2％，对头孢唑啉、万古霉素等药敏感；对红霉素、阿齐霉素等药耐药率较高；G^-菌517株，占54．7％，对亚胺硫霉素，阿米卡星等药敏感，对哌拉西林、氨苄西林等药耐药率较高。真菌210株，占22.1％。结论：致病菌以G^-菌为主，G^ 菌明显下降；G^-菌对大环内酶类药物普遍耐药。     

197株绿脓单胞菌的药物敏感试验

采用K-B扩散法，选择18种抗菌药物对临床痰标本中分离的197株绿脓假单胞菌（PA）进行药敏测试。结果表明，PA菌对多粘菌素敏感率为100％;头孢噻甲闳肟91.4％，丁胺卡那霉素90.9％，氧哌嗪青霉素90.4％，环西沙星90.4％，先锋必素88.3％，舒普深88％;其次为氧氟沙星79.2％，妥布霉素74.6％，庆大霉素62.5％，再次为头孢胺噻肟、拉氧头孢钠、头孢三嗪、头孢唑肟，其敏感率较差，分别为40.1％、35.5％、32％、15.2％，PA对复方新诺明、氨苄青霉素、先锋霉素V，伊米配能的耐药率均在90％以上。将耐药类型进行分类，其中以6耐-10耐类型最多，占71.55％。本文对合理使用抗生素进行了讨论。     

124株埃尔托弧菌的药物敏感试验

国内外有关埃尔托弧菌的药敏试验之文献报告较多,但本区材料尚缺。因此,我们选取埃尔托弧菌124株对十七种抗菌西药和二十二种中草药进行了药敏试验。现将初步结果报告如下,以供防治工作参考。     

63株伤寒沙门氏菌的药物敏感试验分析

近年来,伤寒杆菌的耐药谱已发生变化,如1985年我省安顺市伤寒流行,分离所获菌株中,98.5％耐氯霉素,1986年湖北仙桃伤寒流行中,耐氯霉素菌株亦高达86.8％。为了解贵阳地区伤寒菌株的耐药情况,我们收集了63株伤寒杆菌,检测了其对8种抗菌药物的耐药情况,现将结果报告于后。一、材料与方法: (一)标本及培养:自1986年3月15日至1987年3月15日我科接受诊断为“伤寒”及“发热原因”的血液标本共398份,     

登革病毒中国株E基因重组的生物信息学分析

罗替戈汀为选择性多巴胺D1/D2/D3受体激动剂,其透皮贴剂是第一个非麦角类多巴胺受体激动剂贴剂。罗替戈汀贴剂24 h有效,能对帕金森病人持续提供多巴胺能刺激,目前获得FDA和EMA批准上市。对罗替戈汀贴剂研究情况进行简要综述。     

福州2009-2014年甲型H1N1流感病毒株HA基因进化分析

目的:分析福州地区2009-2014年甲型H1N1流感病毒株的HA基因序列和遗传特征。方法:采集流感样病例的咽拭子标本,用MDCK细胞培养法和Real-time RT-PCR法对6株分别来自2009-2014年的病毒株进行病毒分离、鉴定,HA基因片段通过RT-PCR法进行扩增后克隆到p MD18-T载体上,并测定6株病毒株的HA基因序列。通过生物软件Bio Edit对该分离株和Gen Bank中相关毒株的序列进行基因进化树分析。结果:6株分离株的HA基因推导氨基酸序列与参考株A/California/04/2009相比,2009-2014年HA1区氨基酸发生了突变,主要是位于136、145、188、189、192和193位点。结论:近几年,福州地区H1N1流感的HA基因序列与世界流行的病毒参考株具有高度同源性,并多处氨基酸发生替换而产生抗原性漂移。     

B型流感病毒广州株的分离及血凝素基因进化分析

[摘要] 目的 了解B型流感病毒广州分离株的分子流行病学背景和中国大陆地区该病毒的流行情况。方法 从疑似流感患儿身上取样,经荧光定量RT-PCR检测证实为B型流感病毒;应用RT-PCR方法扩增出该株病毒的HA片段,将该片段克隆到T克隆载体测序后进行序列分析;从Genbank中提取中国内地不同时间的HA基因序列和国际代表株序列,应用系统发育分析软件建立HA基因的系统发育树并进行进化分析。结果 软件分析表明广州株HA片段长1 882bp,编码584个氨基酸,新分离的B型流感病毒广州株在分类上属于Yamagata系;从80年代末期开始,中国内地流行的B型流感病毒分别属于Victoria系或者Yamagata系,90年代和00年代同时存在Victoria系和Yamagata系的流行。结论 广州地区07年存在B型流感病毒Yamagata系的流行,中国大陆地区90年代和00年代Victoria系和Yamagata系B型流感病毒的流行比例相当,时间规律不明显。     

55株痢疾杆菌的菌群分布及药物敏感试验

目的了解海南省人民医院近年分离痢疾杆菌种群分布及对药物的敏感情况。方法对2001—2002年海南省人民医院就诊的腹泻患者粪便标本进行痢疾杆菌分离，以生化试验和血清学试验进行菌株分型和对药物敏感测试。结果共分离55株痢疾杆菌，生化及血清分型鉴定，福氏志贺氏菌（B群）为绝对优势菌，占98．2％。鲍氏志贺氏菌（C群），占1．8％，痢疾志贺氏菌（A群）及宋内氏志贺氏菌（D群）未检到；药敏显示对左氧氟沙星、头孢哌酮、丁胺卡那、头孢曲松、痢特灵的耐药率较低，分别为0、3．6％、5．4％、9．0％、14．5％，庆大、卡那次之，分别为22．0％、27．2％，氨苄青霉素、氯霉素、哌拉西林有较高的耐药率，分别为74．5％、56．3％、32．7％。结论分离的痢疾杆菌对左氧氟沙星、头孢哌酮、丁胺卡那、头孢曲松、痢特灵等敏感性较高，可为临床合理使用抗生素提供参考。     

温度敏感变种细胞ts22及其回复株的初步鉴定

本文从Balb/3T3的温度敏感变种ts 22中分离出一株自发回复株ts 22 R,其自发回复频率小于10~(-7)。测定变种ts 22和回复株ts 22 R细胞的DNA、RNA和蛋白质合成的结果表明:变种ts22是一种DNA合成缺失的温度敏感细胞,而其回复株ts 22 R已不再具有温度敏感的特性。     

188株肺炎克雷伯菌的抗菌药物敏感试验分析

目的了解肺炎克雷伯菌的耐药情况及其相关因素，为临床用药提供借鉴。方法分析188株克雷伯氏菌对8种抗生素的耐药率及其与发病前用药史、住院时间、是否ICU病人的关系。结果188株肺炎克雷伯菌对头孢呋新、哌拉西林、头孢噻酚、头孢他定耐药率均在50％以上，β内酰胺酶抑制剂复合抗生素耐药率仅27．6％，对亚胺培南耐药率最低，仅2．6％。病前有用药史、住院时间≥15d者分离菌株的耐药率较高；ICU病人与非ICU病人对第三代头孢菌素的耐药率有非常显著的差异（P〈0．01）。结论要解决肺炎克雷伯菌的耐药问题，关键是合理应用抗生素。目前提倡选用碳青霉烯类抗生素及酶抑制剂复合抗生素。     

138株金黄色葡萄球菌药物敏感性试验及β-内酰胺酶三种测定方法比较

于1987—1988年间我院分离出138株金黄色葡萄球菌,并用三种方法测定了β-内酰胺酶。发现碘测定法优于微生物法和淀粉碘纸条法。碘测定法简便、省时、经济,尤适用于基层医院。测定结果显示,产酶菌株高达93.4％。产酶株较非产酶株耐药程度高。作者认为,测定β-内酰胺酶对指导临床用药有一定意义。     

用重组PCR技术缺失突变人单核细胞趋化蛋白-1基因

目的：用重组PCR技术对人单核细胞趋化蛋白-1(hμMCP-1)基因cDNA进行缺失突变，构建其突变体-7NDcDNA。方法：根据hμMCP-1基因缺失突变前后的两段基因分别设计两对含有酶切位点的引物，以pBluescdpt-hμMCP-1为模板，进行重组PCR反应，将PCR产物与T载体连接进行TA克隆，酶切鉴定并测序确定其长度为342bp，继之将目的基因克隆入pcDNA3．1真核表达载体。结果：成功构建hμMCP-1cDNA突变体-7ND的真核细胞表达载体，测序结果表明，该突变体N端第2至8位氨基酸缺失。结论：重组PCR技术是十分有效、可靠的基因缺失突变方法。     

53株志贺氏菌感染的分离与药物敏感试验

目的 对临床分离的５３株志贺氏菌进行鉴定及药物敏感试验。为临床合理选择抗菌药物提供参考依据。方法 ＳＳ平板分离培养,用经典生化鉴定方法,Ｋ－Ｂ法做药物敏感试验。结果 共检出５３株志贺氏菌,均为福氏志贺氏菌,痢特灵,庆大霉素,卡那霉素均出现５０％左右的耐药率。结论 随着抗生素的广泛使用,志贺氏菌耐药性逐年上升,应引起临床重视。     

对102株痢疾杆菌的菌型分析及药物敏感试验

对于痢疾杆菌的菌型分析国内各地报道很多,这对追踪传染源,分析传播途径,研究菌群菌型在人群中的分布及变化规律等方面有着重要意义。为了摸清我矿区痢疾菌型变化规律,我科于1984年7月对本矿区痢疾菌型分布情况进行了调查,并与1982年菌型菌群分布情况作了比较,现将结果报告如下。材料与方法一、菌株来源本次所分全部菌株均来自本院肠道门诊患者粪便中,标本性状为脓血便或粘液便。二、分型血清菌型分析所用志贺氏菌属分型血清19种购于长春生物所,批号83—1,失效期85—4,1ml;18种购于北京生物所,批号84—1、失效期86—5,2ml。