两袖套法减体积大鼠肝移植手术技巧

成人间活体供肝肝移植 (ＬｉｖｉｎｇＤｏｒｎｏｒＬｉｖｅｒＴｒａｎｓ ｐｌａｎｔａｔｉｏｎ ,ＬＤＬＴ)是解决供肝来源不足的有效途径 ,长期以来对最小有效供肝量确定仅限于临床推测[1,2 ] ,研究小肝移植物在受体的存活 ,具有重要的意义。大鼠原位肝移植模型是肝移植实验研究的基础 ,建立小肝移植物大鼠原位肝移植模型具有重要意义 ,本文结合所在移植研究中心大鼠肝移植手术经验 ,就建立小肝移植物大鼠原位肝移植模型手术技巧作探讨。1　材料与方法1.1　材　料供体ＳＤ大鼠 6 0只 ,雌性 ,体重 2 5 0～ 2 80ｇ ,术前常规清洁饲养 ,不禁食…     

双搭桥分流法大鼠自体原位肝移植模型的建立

目的 :探讨大鼠自体原位肝移植模型的建立方法。方法 :分别采用门静脉和下腔静脉双搭桥法建立大鼠自体原位肝移植模型 ,即用自制双头静脉插管和静脉内置管完成门静脉 左肾静脉搭桥、肝后下腔静脉内置管行临时性分流 ,在体持续低温灌洗保存肝脏 ,观察复流后肝脏形态学变化和肝细胞超微结构改变。结果 :本模型手术成功率 94% ,搭桥时间 2 0～ 2 5min ,光镜及透射电镜下肝细胞结构形态无明显变化。结论 :双搭桥分流大鼠自体原位肝移植方法可行 ,能作为肝移植基础理论研究的模型。     

大鼠原位肝移植模型的手术技巧

目的探讨建立稳定的大鼠原位肝移植模型的外科手术技巧,为研究肝脏缺血再灌注损伤提供技术支持。方法110只雄性SD大鼠随机配对后分别作为供体和受体,通过改良Kamada“二袖套”法施行大鼠原位肝移植。结果改良Kamada法建立大鼠原位肝移植模型共52例,7d生存率88.5%,7例长期存活大于100d。结论大鼠原位肝移植模型的建立需要极度的耐心和娴熟的手术技巧,模型的建立有助于研究肝脏缺血再灌注损伤,移植免疫及器官保存。     

大鼠原位肝移植模型的建立和术式改进

目的探讨双袖套法建立稳定大鼠原位肝移植模型及术式改进.方法在Kamada等的袖套法大鼠肝移植模型的基础上改进,施行原位肝移植95例,建立稳定的大鼠原位肝移植模型.结果供体手术时间(33.1±2.4)min,受体手术时间(45.7±2.1)min,无肝期(15.9±1.9)min.手术死亡9例,手术成功率90.5%,其中出血5例,空气栓塞2例,血管扭曲2例.术后1周存活率87.2%,术后1周内死亡的主要原因:术后胆漏和腹腔感染各1例,肝上下腔静脉狭窄2例和肝下下腔静脉血栓1例、胆管梗阻和袖套脱落出血各3例.结论改进的大鼠原位肝移植模型稳定可靠,手术成功率高,为肝移植提供理想的研究手段.高质量完成手术每一步骤,缩短无肝期是手术成功的关键.     

大鼠原位肝移植模型的手术技巧

目的探讨大鼠原位肝移植术中显微外科的最佳操作方法,分析术后死亡原因及远期胆道并发症的预防。方法采用改良的二袖套法行大鼠原位肝移植手术,肝上下腔静脉吻合时保留膈肌环。结果共建立130例大鼠原位肝移植模型,手术成功率91.5%(119/130),7d存活率达83.2%(99/119),3个月生存率77.3%(92/119)。结论应用改良的“二袖套法”建立稳定的大鼠肝移植模型需要轻柔细致的显微手术操作,肝上下腔静脉吻合时保留膈肌环可降低吻合口出血的发生率。     

大鼠原位肝移植手术技巧探讨

目的:探讨建立稳定的大鼠原位肝移植模型的外科技巧. 方法:在Kamada二袖套法基础上,着重对供肝分离、灌注、肝上下腔静脉切取,肝上下腔静脉吻合,袖套和胆道处理等手术方法作了进一步改进. 结果:共建立40例大鼠原位肝移植模型,手术成功率80%,7d存活率达70%. 结论:在娴熟细致的外科操作基础上进一步缩短无肝期,可顺利完成大鼠肝移植模型的建立.     

大鼠“二袖套法”原位肝移植模型的手术体会

目的：建立稳定的大鼠原位肝移植模型。方法：选用健康雄性Wistar大鼠,参考Kamada建立的＂二袖套法＂原位肝移植模型,并加以改良,统计手术各步骤时间以及受体的生存率情况。结果：共进行移植手术86例。供体手术时间为（29.0±0.8）min,受体手术时间为（42.0±0.7）min,无肝期为（15.0±0.3）min。受体术后24h、1周、1个月和3个月的生存率为分别94.2%、91.7%、88.3%、83.7%。结论：改良＂二袖套法＂原位肝移植模型是器官移植基础研究的稳定的动物模型,重视供体的准备是手术成功的关键。     

大鼠原位肝移植模型的手术操作技巧探讨

目的:探讨建立稳定大鼠原位肝移植模型的手术操作技巧。方法:采用二袖套法行大鼠原位肝移植,供体经腹主动脉进行肝脏冷灌注,肝上下腔静脉采用手缝合法进行吻合;门静脉和肝下下腔静脉用袖套法吻合;胆总管采用单管内支架胆管端端吻合。结果:大鼠原位肝移植52例,手术成功45例(86.5%),1周内存活43例(82.7%),1个月内存活36例(69.2%),供体手术时间(30.6±4.0)min,受体手术时间(46.0±5.5)min,无肝期为(20.0±2.5)min。结论:大鼠原位肝移植模型稳定可靠,可为肝移植提供理想的研究手段;良好的肝脏灌注,改进的肝上下腔静脉吻合法可以缩短无肝期,提高大鼠肝移植的生存率。     

动脉化双袖套法大鼠原位肝移植模型制作

目的:建立动脉化双袖套法大鼠原位肝移植模型制作方法并对动脉化大鼠原位肝移植模型的地位进行探讨。方法:用Brown-Norway(BN)大鼠制作动脉化双袖套法大鼠原位肝移植模型。结果:动脉化和非动脉化组手术成功率分别为93.8%、95.8%,肝功能无显著性差异(P>0.05)。结论:动脉化模型可以最大限度地保护肝脏的组织学结构,但非动脉化模型也是安全可靠的,且相对简便、省时,是肝移植排斥的基础研究的合适工具。     

大鼠原位肝移植模型技术的若干改进

目的大鼠原位肝移植的模型技术的改进.方法采用远交系SD和远交系Wistar大鼠,用二袖套法（门静脉和肝下下腔静脉）建立大鼠原位肝移植模型,正式实验60次.结果术中尾静脉建立输液通路,改进了供肝的修剪和受体肝上腔静脉的阻断与吻合方法,修肝平均时间8 min,受体无肝期平均21 min,手术成功率达85%.结论改进的大鼠原位肝移植术操作简便,手术成功率较高,可做为肝移植实验可靠、稳定的动物模型.     

对DA－Lewis大鼠肝移植模型建立的探讨

[摘要]目的 探讨近交系大鼠肝移植的手术技巧,建立稳定的急性排斥模型。方法 DA大鼠做为供体,雄性Lewis大鼠做为受体,采用改良后的Kamada“二袖套管法”,建立大鼠原位肝移植模型。观察术后存活情况,并对其生存时间进行统计分析。结果 60例大鼠肝移植手术中,供体手术时间(30±8)min,修肝时间(15±2)min,受体手术时间（60±7）min,无肝期时间（21±3）min,手术成功率88.3％。术后4至5天开始出现黄疸,精神差,睁眼困难,反应迟钝,并于术后11天内全部死亡。结论 根据近交系大鼠自身结构特点,对大鼠原位肝移植模型建立方法进行了改进,取得了一定的成效。DA-Lewis为稳定、可靠的大鼠肝移植急性排斥模型,是研究肝移植排斥反应及免疫耐受的理想动物模型。     

拉咪夫定联合小剂量高价人乙肝免疫球蛋白预防肝移植术后乙肝病毒再感染21例临床报道

目的 探讨拉咪夫定联合小剂量高价人乙肝免疫球蛋白方案预防肝移植术后乙肝病毒再感染的临床疗效.方法 回顾性研究21例乙肝病毒相关终末期肝病患者行肝移植术后联合应用拉咪夫定、小剂量高价人乙肝免疫球蛋白的临床资料,分析总结该方案对预防肝移植术后乙肝病毒再感染的疗效.结果 2例肝移植术后发生乙肝病毒再感染,其余19例病毒标志物检查为阴性.结论 拉咪夫定联合小剂量高价人乙肝免疫球蛋白方案可经济、有效地预防乙肝病毒相关终末期肝病肝移植术后乙肝病毒再感染.     

原位肝移植治疗重型肝炎的疗效分析

目的分析运用肝移植术治疗重型肝炎的临床疗效。方法2002年9月~2004年10月间,本中心施行肝移植术治疗重型肝炎病人37例,回顾性分析所有患者的临床和随访资料。结果全组37例重型肝炎病人术后1年生存率为83.8%;围手术期死亡6例,死亡率16.2%,死亡原因中4例为多脏器功能衰竭,1例为原发性移植肝功能不良合并肾功能衰竭,1例为术后4月脑梗死合并严重肺部感染。术后并发症中主要有急性肾功能衰竭12例(32.4%),其中2例行血液滤过治疗;肺部感染14例(37.8%),其中2例行气管切开;胆道狭窄和急性排斥反应各2例(各占5.4%)。结论肝移植是治疗重型肝炎的有效方法。但必须正确把握手术时机,加强术后监管和围手术期处理。     

大鼠移植肝再灌注损伤过程中肝细胞凋亡及其调控基因表达变化

目的 研究移植肝缺血冷保存再灌流损伤过程中肝细胞凋亡变化情况及凋亡调控基因Bcl-2,FasL的表达变化.方法 将72只SD大鼠分为假手术组及移植组,移植组建立原位肝移植模型,以4℃乳酸林格氏液为基液对供肝灌注并冷保存4 h后置人受体,于移植后1,6,24h处死大鼠取样,检测血清中AST、ALT水平,采用TUNEL法检测移植肝肝细胞凋亡情况,流式细胞仪检测凋亡相关基因Bcl-2,FasL蛋白的表达.结果 再灌注后移植组AST、ALT显著高于假手术组.与假手术组相比,移植组各时点肝细胞凋亡指数明显升高,肝组织中Bcl-2表达减少,FasL表达量增加(P<0.01),以再灌注后6h变化最为显著.结论 移植术后移植肝缺血-再灌注损伤过程中肝细胞凋亡加重,于冉灌注早期达到高峰,这可能与抗凋亡基因Bcl-2的表达减少,促凋亡基因FasL表达增加有关.     

单中心连续203例肝移植临床疗效分析

目的探讨进一步提高肝移植疗效的措施。方法回顾性分析复旦大学附属中山医院2001年4月至2004年10月连续203例肝移植的临床资料。肝移植患者包括肝细胞癌142例、肝炎后肝硬化36例、暴发性肝功能衰竭7例、Wilson病6例以及其他终末期肝脏疾病12例。其中,尸体供肝移植199例,包括2例减体积肝移植、1例劈裂式肝移植;活体供肝移植4例。采用Cox多元回归分析确定影响肝癌肝移植预后的危险因素。结果203例肝移植患者术后1年、2年生存率分别为85．0％和82.4％。总的排斥反应发生率为12．3％。142例肝癌肝移植患者中有20例复发(复发率14.1％),1年、2年生存率分别为80.2％和78,4％,1年、2年无瘤生存率分别为85．3％和80．3％。多元回归分析显示肿瘤直径和门静脉癌栓是影响无瘤生存率的独立预后因素。结论肝移植是我国治疗各种终末期肝脏疾病的有效手段,同时可使部分肝癌患者获得治愈或延长生命的机会。     

肝移植受者生存质量研究

目的探讨原位肝移植对终末期肝病患者生存质量的影响.方法以消化系统疾病生存质量指数为肝移植受者生存质量评价指标,调查2000年5月至2002年12月间完成的43例术前意识清楚、具有中学以上文化程度且对调查问卷表理解无困难、术后无并发症的良性肝病患者.测定时间为术前、出院时、出院后3月.结果出院时,肝移植受者生存质量较术前提高,其中病人生理功能、精神、心理状态、症状学表现较术前有较大的改善(P＜0.01),而生活、社会活动能力与术前改变不大(P＞0.05).出院3个月时,生存质量明显好于在院期间(P＜0.01),尤其是其生活、社会活动能力有较大提高(P＜0.01).结论肝移植能够明显改善终末期肝病患者生存质量.     

肝移植治疗Wilson病8例分析

目的探讨Wilson病患者接受肝移植治疗后的效果及预后。方法回顾性分析2002年10月-2008年8月因Wilson病在第二军医大学附属东方肝胆外科医院接受肝移植手术的8例患者的临床资料,其中男3例,女5例,年龄为12～42岁,平均年龄为(22.6±10.3)岁。术前所有患者的血清铜蓝蛋白和血铜水平均低于正常值(血清铜蓝蛋白为200～600mg/L,血铜为11～24.4μmol/L),其中5例术前存在神经病学症状。结果 5例患者接受原位肝移植术,3例接受活体肝移植术。除1例患者于术后1个月死于急性肝脂肪变肝功能衰竭外,其余患者术后肝功能均恢复顺利。术后随访35～124个月,平均随访时间为(79.7±20.3)个月。与术前比较,术后1个月7例存活患者总胆红素水平显著下降(P<0.05),白蛋白、血清铜蓝蛋白水平及血小板计数均显著升高(P值均<0.05);血铜水平有升高趋势,但差异无统计学意义(P>0.05);合并的神经病学症状得到不同程度的改善甚至消失;所有患者术后12个月内K-F环均消失。结论通过全肝移植或活体肝移植术,能改善Wilson病患者铜代谢,并可显著缓解神经病学症状。     

供肝丹参多酚酸盐预处理减轻受体大鼠肝移植术后胆道损伤

目的观察丹参多酚酸盐预处理供肝对受体大鼠肝移植术后胆道损伤的影响,探讨其可能的作用机制。方法根据供体肝脏保存方法,受体大鼠随机分为UW液组、丹参多酚酸盐预处理组(UW液+0.4 mg/ml丹参多酚酸盐)、生理盐水对照组(UW液+等量生理盐水)。大鼠行胆道持续外引流肝动脉化原位肝移植,观察移植术后1、6、24 h胆汁流量及胆汁酸盐分泌量。大鼠行肝动脉化大鼠原位肝移植,移植术后2周检测各组大鼠血清碱性磷酸酶、胆汁酸盐及总胆红素水平,观察胆道并发症发生率;采用实时荧光定量PCR、蛋白印迹法分别检测肝脏移植物内胆汁酸盐输出泵(bile salt export pump,BSEP)基因及蛋白的表达。结果与UW液组及生理盐水对照组相比,丹参多酚酸盐预处理组大鼠术后早期胆汁流量及胆汁酸盐分泌量明显增加(P<0.05);术后2周血清碱性磷酸酶、胆汁酸盐及总胆红素水平明显降低(P<0.05),胆汁淤积等胆道并发症发生率明显降低(P<0.01);肝脏移植物内BSEP mRNA及蛋白表达均升高(P<0.05)。结论UW液内加入丹参多酚酸盐保存供肝可明显减轻受体大鼠肝移植术后胆道损伤,降低术后胆道并发症的发生,可能与其促进移植肝内B...     

血红素加氧酶-1在大鼠原位肝移植急性排斥反应中的作用

目的 探讨血红素加氧酶-1(hemooxygenase-1,HO-1)在大鼠原位肝移植急性排斥反应中的作用.方法 建立大鼠原位肝移植排斥模型后分为3组:对照组(A组),ZnPP组(B组)和CoPP组(C组).3组分别于3、7 d处死,取血及肝脏标本.进行肝功测定(AST、ALT、TBIL、ALB);肝组织HE染色;荧光RT-PCR检测HO-1表达.结果 ①3组肝功能3、7 d时比较有明显的统计学意义(P＜0.05).②HE染色:A组3 d出现I、Ⅱ级为主的排斥反应,7 d时出现Ⅱ级为主的排斥反应;B组3 d出现Ⅱ级为主的排斥反应,7 d时出现Ⅱ、Ⅲ级为主的排斥反应;C组3 d出现排斥反应0～Ⅱ级,以I级为主,7 d时出现排斥反应0～Ⅱ级,以I、Ⅱ级为主.③HO-1在C组表达明显升高,B组不明显,A组介于两组之间.结论 血红素加氧酶-1(HO-1)过表达能减轻急性排斥反应.     

小鼠肝癌原位移植模型的建立及生物学特性

目的:探讨建立小鼠肝癌原位移植模型的可行性,并观察其生物学特性.方法:用肝癌细胞株H22接种于ICR小鼠皮下,建立异位移植模型,然后用此移植瘤组织再接种于小鼠肝内,建立肝原位移植瘤模型.结果:小鼠肝癌原位移植模型成功率为95.6%,自发转移率为81.8%;大量腹水发生率为40.9%,自发消退率为0%.模型平均自然生存期为28 d,约移植14 d后进入快速增殖期.结论:小鼠肝癌原位移植模型成功率高,有高转移、无自发消退现象,可作为研究肝癌转移机制和药物筛选的理想模型.