甘草多糖对H22荷瘤小鼠的免疫调节作用

目的：建立H22荷瘤小鼠模型,观察甘草多糖对模型小鼠脾脏调节性T细胞（regulatory T cell,Treg）及脾淋巴细胞转化率的影响,探讨甘草多糖的免疫调节机制。方法：50只Balb/c小鼠随机分为正常组、模型组、环磷酰胺组、甘草多糖组和甘草多糖加环磷酰胺组。除正常组外,其余各组建立H22荷瘤小鼠模型。造模第2天各组开始给药,正常组和模型组腹腔注射生理盐水,环磷酰胺组腹腔注射环磷酰胺1周,甘草多糖组颈后皮下注射甘草多糖,连续14 d。取脾制备脾单细胞悬液,用流式细胞仪检测脾调节性T细胞,四甲基偶氮唑盐比色法检测脾淋巴细胞转化率。结果：模型组小鼠Treg细胞比例明显高于正常组,甘草多糖组Treg细胞比例低于模型组（P〈0.01）,甘草多糖组脾淋巴细胞转化率明显高于环磷酰胺组。甘草多糖与环磷酰胺无交互作用。结论：甘草多糖可能通过降低荷瘤小鼠Treg细胞的比例及提高脾淋巴细胞转化率而发挥抗肿瘤免疫调节作用。     

顺铂低剂量节律化疗抑制小鼠H22肝癌血管生成观察

目的 探讨顺铂低剂量节律(LDM)化疗对小鼠H22肝癌血管生成的影响,观察其抑瘤效果和毒副作用.方法 昆明小鼠皮下接种H22细胞,随机分为4组(每组12只),节律组A:顺铂0.6 mg/(kg·d)每日腹腔注入,每周5次;节律组B:顺铂1 mg/(kg·d)隔日腹腔注入,每周3次;对照组:生理盐水0.2 mL每日腹腔注入,每周5次,持续2周;最大耐受剂量(MTD)组:顺铂9 mg/(kg·d)一次腹腔注入.每隔2 d测量小鼠体质量及肿瘤直径.接种后第15天处死小鼠称瘤质量,行组织学观察,免疫组化法检测肿瘤内微血管密度(MVD)、血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达.结果 与MTD组相比较,节律组A、节律组B肿瘤生长缓慢,无明显的体质量减小.节律组A、节律组B、MTD组的抑瘤率分别为66.78%、55.56%、39.44%.节律组A、节律组B肿瘤MVD、VEGF、MMP-2表达较对照组、MTD组显著减少(F=9.56、9.38、10.17,q=3.56～6.18,P＜0.05);PCNA指数与对照组比较差异无显著性 (F=11.95,q=0.87,P＞0.05);MTD组PCNA指数较节律组、对照组明显降低,差异有显著性(q=6.18、6.10,P＜0.01).节律组A、节律组B瘤组织可见大量的细胞变性坏死,对照组和MTD组少见.结论 顺铂LDM化疗可显著抑制小鼠H22肿瘤的生长及血管生成,化疗效果好且毒性低;其抗血管生成作用可能与肿瘤内VEGF、MMP-2表达下调有关.     

5-氟尿嘧啶腹腔内缓释化疗对H22腹水瘤小鼠的抑瘤疗效观察

目的:观察5-氟尿嘧啶(5-FU)腹腔内缓释化疗对H22腹水瘤小鼠的抑瘤作用.方法:昆明种实验小鼠腹腔内注射0.2 ml H22腹水瘤细胞悬液(含癌细胞4×106)制备腹水瘤小鼠模型.成模小鼠分为生理盐水对照组、腹腔化疗组、缓释化疗组和缓释对照组4组,分别给予腹腔注射生理盐水、普通5-FU、5-FU缓释剂以及缓释对照品.观察各组小鼠的生存期;流式细胞仪测定腹腔注射后第9、12天各组小鼠腹水瘤细胞的凋亡率,计算增殖指数;腹腔注射后第12天电镜观察各组腹水瘤细胞涂片.结果:腹腔化疗组小鼠平均生存期低于缓释化疗组[(13.7±1.7) d vs (15.3±2.0) d, P＜0.05],但均明显高于生理盐水对照组和缓释对照组(P＜0.05),而后两者无显著差异.实验第9天,腹腔化疗组小鼠腹水瘤细胞的凋亡率(%)明显高于缓释化疗组(16.5±1.7 vs 8.1±0.9,P＜0.05),而第12天缓释化疗组明显高于腹腔化疗组(10.1±1.3 vs 7.6±0.8,P＜0.05).实验第9、12天,腹腔化疗组和缓释化疗组瘤细胞凋亡率均明显高于生理盐水对照组和缓释对照组(P＜0.05),后两者无显著差异.电镜观察结果显示腹腔化疗组和缓释化疗组腹水瘤细胞呈典型的凋亡形态学变化,而对照组瘤细胞形态无明显变化.结论:5-FU腹腔缓释化疗较腹腔化疗延长了荷瘤小鼠的生存期,对腹腔内肿瘤细胞的抑制作用较持久.     

半枝莲提取物对H22肝癌荷瘤小鼠化疗的增效减毒作用

目的：探讨半枝莲提取物（Scutellaria barbata extract，ESB）在荷瘤小鼠化疗中的增效减毒作用。 方法：将接种H22肝癌细胞的实体瘤和腹水瘤小鼠各分为模型组、ESB高剂量组、ESB低剂量组、5-氟尿嘧啶（5-fluorouracil ,5-FU）组、5-FU＋ESB高剂量组、5-FU＋ESB低剂量组，另设正常对照组，连续给药10d。观察荷瘤小鼠抑瘤率、生命延长率和毒性反应，测小鼠瘤质量、体质量、胸腺指数和脾指数；各组小鼠采血计白细胞数。检测其腹腔巨噬细胞吞噬功能。 结果：5－FU＋ESB组体质量增加量明显高于5－FU单药组，而且厌食、腹胀及消瘦等毒性反应明显减轻。与模型组相比，5－FU＋ESB高剂量与5-FU＋ESB低剂量组生存时间明显延长，生命延长率分别为61．46％和23．59％。高剂量ESB、5-FU、5-FU＋低剂量ESB和5-FU＋高剂量ESB均可明显抑制荷瘤小鼠移植瘤的生长，其抑瘤率分别为36．98％、42．26％、52．45％和65．28％，高剂量ESB与5-FU合用可显著增加荷瘤小鼠移植瘤抑瘤率（P〈0．05）。高剂量ESB能明显增加小鼠胸腺指数和脾指数，且5-FU＋高剂量ESB与5－FU＋低剂量ESB均可改善化疗导致的免疫器官萎缩。5－FU组白细胞数明显下降，5-FU＋ESB组白细胞数有回升趋势。高、低剂量ESB与5-FU配伍均可明显改善5-FU所致小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能降低，与单用5-FU组相比较，吞噬率分别提高78．55％和43．97％，吞噬指数分别提高81．63％和44．90％。 结论：ESB能显著增强5-FU对小鼠H22移植瘤的抑制作用，减轻毒性反应，延长生存时间，改善荷瘤小鼠的免疫功能，具有一定的增效减毒作用。     

分期论治对H22荷瘤小鼠生长的影响

目的 观察中医药分期论治对荷瘤小鼠的治疗作用及对生存期的影响。方法 将昆明种小鼠除正常组外,接种H22瘤株．制备肝癌模型．并随机分为模型组、西药组、非阶段组和阶段组。西药组予喃氟啶（FT-207）,非阶段组予自拟肿瘤基本方,阶段组根据不同治则予肿瘤分阶段处方。观察各组对荷瘤小鼠生长的影响。结果 模型组小鼠生存期最短．阶段组生存期最长。而两药组与非阶段组生存期非常接近。结论 荷瘤小鼠经不同治法分阶段治疗后其生存期呈现延长的趋势。     

参芪化淤方对H22肝癌细胞survivin表达的影响

目的 探讨参芪化淤方对H22肝癌细胞survivin基因表达的影响.方法 将H22肝癌荷瘤小鼠60只随机分为6组,参芪化淤方高、中、低剂量组,环磷酰胺(CTX)对照组,模型组,阴性对照组.参芪化淤方低、中、高剂量组分别予以0.4 mL参芪化淤方(低剂量组:1.04 g/mL,中剂量组:2.08 g/mL,高剂量组:4.16 g/mL)灌胃,CTX对照组予以0.2 mL CTX溶液(小鼠给药剂量为20 mg·kg-1·d-1)腹腔注射,模型组予以0.4 mL生理盐水灌胃,每日1次,给药14 d.免疫组化法检测肿瘤组织survivin基因的表达;同时观察脾、胸腺指数及肿瘤抑制率.结果 参芪化淤方高     

芝麻素对肝癌H22细胞增殖及H22荷瘤小鼠肿瘤生长的影响

目的观察芝麻提取物芝麻素对小鼠肝癌H22细胞增殖的影响及其对H22荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用。方法用MTT法检测不同质量浓度的芝麻素对小鼠肝癌H22细胞体外增殖的影响;同时将移植H22瘤株的昆明种小鼠分成:模型组(生理盐水)、环磷酰胺(30 mg/kg)组、芝麻素高、低剂量(150、15 mg/kg)组、观察芝麻素对荷瘤小鼠的抑瘤作用。结果芝麻素在体外对H22肝癌细胞的增殖有显著的抑制作用,以8、16、32μg/mL组在48 h的抑制率最显著;芝麻素在体内对H22肿瘤细胞的生长有明显的抑制作用,芝麻素低剂量组的小鼠皮下瘤质量较模型组低(P<0.05),但仍比环磷酰胺组高(P<0.05),芝麻素高剂量组和模型组比较无显著差异(P>0.05)。结论芝麻素有明显抑制肝癌H22细胞增殖的作用。     

低密度脂蛋白-阿克拉霉素复合物抗小鼠肝癌H22的实验研究

形成小鼠皮下实体瘤型及腹水型肝癌Ｈ２２模型，观察低密度脂蛋白－阿克拉霉素（ＬＤＬ－ＡＣＭ）复合物和阿克拉霉素（ＡＣＭ）在荷瘤小鼠体内的抗肿瘤作用。结果表明：（１）对照组Ｈ２２实体瘤瘤重为１．７４±０．６０ｇ，ＡＣＭ组为１．３０±０．５７ｇ，ＬＤＬ－ＡＣＭ复合物组为０．８６±０．４４ｇ，与对照组差异有显著性（Ｐ＜０．０５），与ＡＣＭ组差异不明显（Ｐ＞０．０５）；（２）对照组、ＡＣＭ组及ＬＤＬ－ＡＣＭ复合物组荷腹水型肝癌Ｈ２２小鼠的平均生存时间分别为２４．６±７．５０ｄ，２３．４±７．６７ｄ和１７．１±３．４４ｄ。ＡＣＭ组和ＬＤＬ－ＡＣＭ复合物组荷瘤小鼠存活期均明显长于对照组（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１），ＬＤＬ－ＡＣＭ复合物组效果好于ＡＣＭ组（Ｐ＜０．０５）。     

鸦胆子油乳治疗H22肝癌荷瘤小鼠的时辰药理学研究

【目的】研究鸦胆子油乳治疗H22肝癌荷瘤小鼠的时辰药理学的规律。【方法】制备H22肝癌荷瘤小鼠模型;造模成功的小鼠分组后,分别在正常光节律及异常光节律条件下进行治疗。治疗结束后计算肿瘤抑制率及脏器指数,测定肝、肾功能指标。【结果】在正常光节律和异常光节律下,各治疗组均能减小瘤体质量,降低瘤重指数,其中,正常光节律下的暗期前期给药组,异常光节律下的暗期前期给药组、暗期中期给药组,分别与相应的模型组比较,差异均有统计学意义（P<0.05）。正常光节律下,暗期前期（10 pm）给药组的肝脏指数显著下降、胸腺指数显著上升,与模型组比较差异有统计学意义（P<0.05）;异常光节律下,暗期前期（7 am）给药组的脾脏指数较模型组显著上升,差异有统计学意义（P<0.05）。【结论】鸦胆子油乳注射液在正常光节律和异常光节律下均有一定抑制肿瘤的作用,药物在暗相期给药治疗效果更佳。     

眼镜蛇毒细胞毒素缓释微球瘤内注射对裸鼠人肝癌皮下移植瘤的影响

目的：评价眼镜蛇毒细胞毒素（cytotoxin,CTX）-聚乳酸-羟基乙酸（polylactic-co-glycolic acid,PLGA）微球经皮瘤内注射治疗裸鼠肝癌的安全性和有效性。 方法：采用甲基噻唑基四唑法检测分离纯化得到的眼镜蛇毒CTX体外细胞毒活性,复乳-溶剂挥发法制备眼镜蛇毒CTX-PLGA缓释微球。40只BALB/c裸小鼠皮下接种人肝癌细胞系BEL-7404细胞建立裸鼠皮下移植瘤肝癌模型,分为生理盐水组、空白微球组、游离CTX组和CTX-PLGA微球组。瘤内注射相应药物,治疗后每周用高频超声观察肿瘤内部回声和血流情况;治疗后第26天,剥离肿瘤称取质量并计算抑瘤率;取肿瘤组织和心、肝、肾等重要脏器,观察其病理学改变。 结果： 眼镜蛇毒CTX对体外培养的人肝癌BEL-7404细胞具有较强的毒性作用。眼镜蛇毒CTX-PLGA缓释微球粒径约（34.45±9.85）μm,具有较高的包封率和较好的缓释效果。瘤体内一次性注射眼镜蛇毒CTX-PLGA微球后,肿瘤体积增长缓慢,抑瘤率达52.36%;光学显微镜观察显示肿瘤组织大部分坏死,但心、肝、肾等重要脏器在形态学上无明显改变。 结论：眼镜蛇毒CTX-PLGA微球瘤内注射可抑制裸鼠肝癌的生长,且具有较高的安全性。     

生物蜂王浆抑制腹水型肝癌细胞H22生长的实验研究

目的：观察生物蜂王浆对腹水型肝癌细胞H22体内生长的抑制作用。方法：以不同的生物蜂王浆即：经扶正抗癌1号方、以毒攻毒2号方、清热解毒3号方喂养的蜜蜂所分泌的蜂王浆分别灌喂荷H22肿瘤小鼠后，观察其体内抗肿瘤效果。并以普通蜂王浆和生理盐水灌喂为对照。结果：在所有生物蜂王浆灌喂组中，1号生物蜂王浆有明显抑制肿瘤生长和延长生存期的作用；并能显增加小鼠外周血白细胞数，升高血IL-2和IFN-γ含量；组织学检查显示，肿瘤细胞大部分变性坏死，肿瘤周围有大量淋巴细胞、浆细胞浸润。结论：1号生物蜂王浆具有明显抗肿瘤作用，其机制可能与抑制或杀伤肿瘤细胞，提高机体的免疫功能有关。     

Scutellaria barbata extract enhances efficacy and reduces toxicity of chemotherapy in hepatoma H22-bearing mice

Objective: To study the assistant effect of Scutellaria barbata extract (ESB) in 5-fluorouracil (5-FU) chemotherapy? Methods: A mouse model of transplanted hepatoma H22 was used in this study to evaluate the synergic and attenuating effects of ESB in chemotherapy. Tumor inhibition rate, life span of mice and the toxicity of chemotherapy were observed. The body weight, tumor weight, thymus index and spleen index in H22-bearing mice were also measured. The phagocytotic function of macrophages was studied by observing phagocytiz-ation of peritoneal macrophages. Results: The increase of body weight in 5-FU plus ESB groups was higher than that in 5-FU group, and the side effects such as anorexia, abdominal distention and athrepsy were relieved. Compared with untreated group, prolonged lifetime in 5-FU plus high-dose ESB group and 5-FU plus low-dose ESB group was improved. Life prolongation rates in 5-FU plus high-dose ESB group and 5-FU plus low-dose ESB group were 61.46% and 23.59% respectively. High-dose ESB, 5-FU, 5-FU plus low-dose ESB and 5-FU plus high-dose ESB could inhibit the tumor growth, and the tumor inhibition rates were 36.98%, 42.26%, 52.45% and 65.28%, respectively. Thymus index and spleen index were increased significantly in 5-FU plus low-dose ESB group and 5-FU plus high-dose ESB group. White blood cell (WBC) count was decreased obviously in 5-FU group, while the count of WBC was increased in 5-FU plus low-dose ESB group and 5-FU plus high-dose ESB group. The phagocytotic function of macrophages was also increased in 5-FU plus low-dose ESB group and 5-FU plus high-dose ESB group. Conclusion: ESB can enhance the effect of chemotherapy, relieve the side effects and improve immune function of mice in chemotherapy. These results suggest that ESB, as a biochemical modulator to enhance the therapeutic effects, is useful in cancer chemotherapy.     

高热结合化疗对S180肿瘤模型的治疗作用

目的 :观察高热结合化疗对小鼠S1 80肿瘤模型的治疗效果 .方法 :6 0只S1 80小鼠随机分 4组 :热疗 +化疗组 ,单纯化疗组 ,单纯热疗组 ,对照组 .每组 1 5只 .处理后 1 0日处死动物 ,分离瘤块称湿质量 ,并作病理检查 .结果 :四组肿瘤湿质量各为 (0 .6 7± 0 .2 9)、(0 .78± 0 .37)、(1 .2 4± 0 .4 3)和 (2 .31± 0 .2 2 )g ,热疗 +化疗组肿瘤湿重低于其他各组 ,与单纯热疗组、对照组之间有显著差异 (P <0 .0 1 ) .病理检查见热疗 +化疗组、单纯热疗组肿瘤存在明显坏死 .结论 :热、化疗两因子联合应用具有更好的治疗效果 .热疗可作为肿瘤的辅助治疗方法     

含金属硫蛋白蛋奶粉对小鼠肝细胞实体瘤的治疗作用

目的：观察含金属硫蛋白（MT）蛋奶粉对荷瘤小鼠肝癌有无治疗作用。方法：70只BALB/c小鼠随机分为正常对照组10只、荷瘤鼠组20只、低剂量和高剂量含MT蛋奶粉肿瘤治疗组各20只。除正常对照组小鼠外，在其余小鼠体内移植H-22小鼠肝癌细胞株形成移植性肝癌模型，连续用含MT蛋奶粉给荷瘤小鼠灌胃2周后，每组断头处死10只小鼠，取其脾脏，采用MTT法检测各组小鼠淋巴细胞转化功能和IL-2活性，及流式细胞术检测脾脏CD4⁺、CD8⁺和CD25⁺ T细胞百分率以及淋巴细胞周期进程和凋亡的变化，以及³H-TDR 掺入法检测CTL和NK细胞杀伤活性，并采用细胞病变抑制法检测小鼠IFN-γ活性以及L929 体外杀伤法检测 TNF-α 活性。并于开始灌胃MT蛋奶粉后的第21～31天观察小鼠肿瘤大小。结果：在BALB/c小鼠形成肝癌第27、29及31天，含低剂量和高剂量MT蛋奶粉组小鼠肿瘤体积均明显小于肿瘤对照组（P<0.05）；含低剂量和高剂量MT蛋奶粉肿瘤治疗组淋巴细胞刺激指数(SI)较肿瘤对照组均显著增加 （P<0.01），含高剂量MT蛋奶粉肿瘤治疗组小鼠脾脏CD4⁺细胞百分率及CD4⁺/CD8⁺比值较肿瘤对照组均显著增加（P<0.01，P<0.05），其CD25⁺ T细胞百分率较肿瘤对照组显著降低（P<0.01）；与肿瘤对照组比较，含高剂量MT蛋奶粉肿瘤治疗组小鼠淋巴细胞G₀/G₁期细胞百分率显著降低（P<0.05），G₂/M期细胞百分率显著增加（P<0.05）；同时，含高剂量MT蛋奶粉肿瘤治疗组小鼠淋巴细胞凋亡百分率较肿瘤对照组(荷瘤鼠组)显著降低（P<0.05）；荷瘤小鼠脾脏CTL细胞毒活性显著低于正常对照组（P<0.05），含高剂量MT组CTL细胞毒活性显著高于荷瘤小鼠（P<0.05）；荷瘤小鼠脾脏NK细胞毒活性明显低于正常对照组（P<0.05），而含MT肿瘤治疗组NK细胞毒活性明显高于荷瘤组小鼠，尤其以高剂量组为显著（P<0.01）。与肿瘤对照组比较，含高剂量MT蛋奶粉显著增加了荷瘤小鼠的IL-2和TNF-α活性（P<0.01），含低剂量MT蛋奶粉对荷瘤小鼠的TNF-α活性亦有明显提高作用（P<0.01），对IFN-γ活性并无显著影响。结论：含MT蛋奶粉对肿瘤的治疗性效应可能是通过增强荷瘤小鼠的免疫功能实现的。     

褪黑素对H22肝癌小鼠巨噬细胞功能的调节作用

目的；观察褪黑素（ＭＬＴ）对巨噬细胞的功能的影响。方法；以Ｈ２２肝癌小鼠为模型，采用间接四甲基偶氮唑盐（ＭＴＴ）比色法测定巨噬细胞的杀伤活怀，ＩＬ－１的诱生水平平却显著下降（Ｐ〈０．０１）。结论；巨噬细胞产生新喋呤的高低工与其杀伤活怀及ＩＬ－１的诱生无关 ，ＭＬＴ对巨噬细胞的功能可能有选择性调节作用。     

供者淋巴细胞输注治疗小鼠H22肝癌的实验研究

目的:观察供者淋巴细胞输注(DLI)对小鼠H2 2肝癌的治疗作用。方法:荷瘤昆明小鼠分荷瘤对照组(A组)、5- 氟脲嘧啶(5 - FU)化疗组(B组)、DLI组(C组)及5 - FU加DLI组(D组) 4组。比较各组小鼠生存期、抑瘤率及瘤体病理检查结果,检测NK细胞及IL 2的活性。结果:B、C组生存时间长于A组(P <0 .0 1) ,D组长于C组(P <0 .0 1) ;B、C、D各组抑瘤率依次为61.3 %、3 4.7%、89.5 % ;C、D两组NK细胞及IL 2活性明显高于A、B组(P <0 .0 5 ) ;病理观察见C、D组大量炎性细胞浸润。结论:DLI对小鼠H2 2肝癌有治疗作用,是一种潜在可行的实体瘤细胞过继免疫治疗方法。