中药成分在器官保存液中的应用及作用机制的研究进展

本文综述了近年来中药有效成分在器官保存液中的研究进展.低温保存中,器官保存液中添加中药能够从抗氧化应激、拮抗钙超载、抑制细胞凋亡、抗炎等各个途径减轻缺血再灌注损伤,从而延长器官的保存时间并提高低温保存的质量.随着器官移植的广泛开展及中药的进一步开发,与中药相关的改良保存液必将成为我国医学移植领域中的一大特色和优势.     

器官保存液及其分子机制的研究进展

器官保存液应用于心脏移植，扩大了心脏移植术的适用范围，提高了心脏移植术的成功率。但有效保存时间较短（4～6h），限制了终末期心脏病人的手术治疗。本文介绍了：（1）已有的器官保存液；（2）一种新的心脏停搏剂-钾离子开放剂（PCOs），其不仅可以停搏心脏，而且对心肌细胞、冠状动脉内皮细胞和平滑肌细胞也有较好的保护效果；（3）新型的能量物质添加剂-ATP脂质体（ATP—Load liposomes，ATP—L）；（4）腺苷介导的心肌保护作用的具体机制；（5）心肌缺血再灌注的损伤机制及如何减轻缺血再灌注损伤方法及分子机制；（6）心脏受到损伤刺激时的内源性保护机制。     

低温灌洗UW液和Euro—Collins液保存离体鼠肺效果？…

目的 比较ＵＷ液和Ｅｕｒｏ－Ｃｏｌｌｉｎｓ液的肺保存效果。方法 选用２１只Ｗｉｓｔａｒ大鼠,应用１０℃ＵＷ液和Ｅｕｒｏ－Ｃｏｌｌｉｎｓ液同时分别进行左、右肺动脉内灌洗,灌洗前主肺动脉内快速推注ＰＧＥ１。灌洗结束后干肺充气状态下切取左、右肺,并迅速分别置于１０℃的ＵＷ液有Ｅｕｒｏ－Ｃｏｌｌｉｎｓ液中保存。分别于０,２,４,６ｈ取材,在光镜及电镜下观察肺组织形态学变化,并互相比较,以判定组织活力,一肺     

器官保存的研究进展

随着器官移植的快速发展,器官移植受者数量逐年增多,而当前供者缺乏的现实,使得对器官保存的要求越来越高,传统的器官保存方法很难适应新的要求。器官保存的最新进展主要为保存液及保存技术的改进,选择合适的保存液及保存技术以期提高器官保存时间,减少器官缺血再灌注损伤是目前器官移植的主要任务之一。     

自制多器官保存液对兔肾低温延时保存的形态学观察

目的：观察长征１号（ＣＺ－１）多器官保存液对兔肾低温保存后的形态学变化。方法：将新西兰雄性兔肾脏分别用２～４℃ＣＺ－１液、ＵＷ液及ＨＣ－Ａ液５０～１００ｍｌ灌注，待肾脏变白后，切断所有血管，将肾脏取下放入装有ＣＺ－１液、ＵＷ液和ＨＣ－Ａ液保存罐中２～４℃保存，供取材作形态学观察。结果：７２ｈ以内ＣＺ－１液保存组肾脏组织光镜和电镜下形态学无明显改变，而且ＣＺ－１液保存组低温保存肾脏组织的变化以及细胞和细胞器的变性均缓于ＵＷ液与ＨＣ－Ａ液保存组。结论：ＣＺ－１液能低温保存肾脏在７２ｈ之内。     

器官保存研究进展及展望

维持器官保存期间移植物的活力,是器官移植成功的前提条件和根本保障。目前,单纯低温保存(cold storage,CS)仍是当前各大器官移植中心首选、最常用的保存方法。随着供体需求量的增加,越来越多的老年供体和边缘供体被用于临床,这对传统的器官保存方法提出了更高的要求。文中着重对器官保存的理论、病理生理改变以及器官保存技术等方面的最新进展进行综述。     

UW心肌保存液组成探讨

ＵＷ液是 80年代末由美国威斯康星大学 (ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＷｉｓｃｏｎｓｉｎ)研制的。ＵＷ液最初的成分是蜜三糖及乳糖醛酸 ,通过不断实践及研究 ,加入新成分 ,形成了现在以羟乙基淀粉为基础的灌注保存液。这种液体目前已广泛应用于北美地区的心脏移植手术中。现就ＵＷ液组成成分在心肌保存中的作用探讨如下。1　心肌保存的原理及要求Ｂｅｌｚｅｔ等[1] 认为 ,一种成功的器官保存液的组成应满足下列六个要求 :①减少由于低温保存导致的细胞水肿。②防止细胞的酸化作用。③防止细胞灌洗保存过程的细胞间隙膨胀。④防止氧自由基的损…     

离体移植器官保存液的保护效果及临床应用研究进展

随着科学和医学的急速发展,对移植器官保存的要求越来越严格,尤其在当今供体缺乏的情况下,继续采用传统器官保存方法很难满足当今社会的要求。移植器官保存的最新进展主要是对保存液组成的改进,研究常见传统低温器官保存液和新型器官保存液对离体肝脏、肾脏、心脏等多器官的治疗效果,探讨器官保存液中的各组成特点对移植供体和术后低温热缺血再灌注损伤、炎症反应、抗细胞凋亡等方面的保护效果,可为临床选择保存液提供参考。气体分子以及一氧化碳释放分子的出现有助于进一步提高保存液的效果。     

含饱和氢气HC-A肾保存液减轻大鼠肾脏冷缺血再灌注损伤的研究

目的:研究含饱和氢气的HC-A肾保存液对大鼠肾脏冷缺血再灌注损伤的影响。方法:健康雄性Wistar大鼠24只随机分为3组(n=8)。H1组大鼠仅接受右肾切除;H2组大鼠为冷缺血再灌注模型,以腹主动脉插管和下腔静脉缺口作为灌注和流出通路,用4℃普通HC-A肾保存液对左肾行原位冷灌注,灌注完成后阻断左肾动、静脉,缝合腹主动脉和下腔静脉缺口。阻断45min后移除血管夹,冲洗腹腔后关腹;H3组仅灌注液换用自制的4℃含饱和氢气的HC-A肾保存液,其它处理同H2组。3组大鼠均于24 h后再次手术,取血标本,测定BUN和Cr浓度,评估肾功能。切取左肾,检测肾组织中MDA的水平和SOD、caspase-3的活性,并在光镜下观察肾组织形态学的改变。结果:与H2组相比,H3组BUN、Cr、MDA的水平和caspase-3活性降低(P<0.05),SOD活性升高(P<0.05)。光镜下,H3组肾组织病理损伤较H2组减轻。结论:含饱和氢气的肾保存液能减轻大鼠肾脏冷缺血再灌注损伤。     

HX液保存大鼠肝脏有效时间的探讨

采用大鼠肝脏非循环离体灌注模型比较ＨＸ液和ＵＷ液保存鼠肝效果，取６６只封闭群Ｗｉｓｔａｒ大鼠肝脏，随机采用ＨＸ液或ＵＷ液保存１２、１８、２４和３０小时，测定肝组织含水量，肝窦内皮细胞死亡率、Ｋｒｅｂｓ－Ｈｅｎｓｅｌｅｉｔ液天门冬氨酸转氨酸活性，分泌胆汁的肝脏数量及肝脏组织形态学变化，结果提示：保存时间２４小时内ＨＸ液保存鼠肝效果与ＵＷ液类似。     

低温灌洗UW液和Euro-Collins液保存离体鼠肺效果的组织形态学比较研究

目的　比较UW液和Euro Collins液的肺保存效果。方法　选用 2 1只Wistar大鼠 ,应用 10℃的UW液和Euro Collins液同时分别进行左、右肺动脉内灌洗 ,灌洗前主肺动脉内快速推注PGE1。灌洗结束后于肺充气状态下切取左、右肺 ,并迅速分别置于 10℃的UW液及Euro Collins液中保存。分别于 0 ,2 ,4,6h取材 ,在光镜及电镜下观察肺组织形态学变化 ,并互相比较 ,以判定组织活力 ,确定肺保存效果。结果　低温灌洗 10℃的UW液肺保存效果优于低温灌洗Euro Collins液。 6h后 ,组织损伤表现为不可逆性。结论　在肺保存不超过 6h时 ,UW液比Euro Collins液更有效     

胰导管保护法提高胰岛获取量的实验研究

目的:探讨联合应用胰蛋白酶抑制剂和UW液的胰导管保护方法能否提高保存6 h和24 h大鼠胰腺中胰岛的获取量。方法:从雄性SD大鼠分离得到胰腺,分成5组:组1:新鲜的未用胰导管保护和UW液保存(n=8);组2:末用胰导管保护方法仅用UW液保存6 h(n=8);组3:应用胰导管保护方法并用UW液保存6 h(n=8);组4:未用胰导管保护方法仅用UW液保存24 h(n=8):组5:应用胰导管保护方法并用UW液保存24 h(n=8)。结果:分离纯化后每组的胰岛数量分别为1 820±639,585±151,1 496±676,567±182,1 442±857(胰岛当量±标准差);胰岛存活率分别为(93.8±4.9)%,(82.1±5.6)%,(89.6±4.9)%,(77.9±5.0)%,(86.7±7.1)%;本实验中未应用胰导管保护方法组和应用胰导管保护方法组间差异有显著性(P<0.05,组2和组3相比较,组4和组5相比较)结论:联合应用胰蛋白酶抑制剂和UW液的胰导管保护方法提高了保存6 h和保存24 h胰腺中的胰岛获取量。     

低温肺保护液的pH值对减轻体外循环未成熟肺损伤的影响

目的　观察不同 p H值低温肺保护液对体外循环下未成熟肺急性肺损伤的保护作用 ,探求最适宜 p H值的低温肺保护液 .方法　实验用幼犬 (<30 d) 36只 ,随机分为六组 :A组 :单纯体外循环组 ,B至 F组分别用 p H=6 .6 ,7.0 ,7.4,7.8,8.2肺保护液进行肺动脉灌注 ,阻断 6 0 min,再灌注 6 0min后 ,取标本 ,分别采用髓过氧化酶法、硫代巴比妥酸法和硝酸还原酶法测定 MPO,MDA和 NO,测定肺组织含水量和进行肺组织超微结构观察 .结果　 C,D,E,F组的 MPO和MDA均较 A组明显降低 (P<0 .0 5 ,P<0 .0 1,P<0 .0 1,P<0 .0 5 ) ,其中 E组最低 ,NO含量明显上升 ,(P<0 .0 5 ,P<0 .0 1,P<0 .0 1,P<0 .0 5 ) ,肺组织含水量降低 ,其中 D,E组相差明显 (P<0 .0 5 ,P<0 .0 5 ) ,同时发现灌注组的 型上皮细胞、肺血管内皮细胞损伤减轻 .结论　低温肺保护液可减轻体外循环下未成熟肺损伤 ,其中 p H7.8的肺保护液 ,保护效果最好     

移植肺保护的研究进展

肺移植已成为治疗终末期肺疾病的有效方法之一。作者结合近几年文献，针对术后原发性移植物无功能(PGF)所采取的肺保护方法如低温、肺通气、肺保存等作一系统性回顾，旨在为临床移植肺保护提供更好的方法和策略。     

肝移植3种器官保存液的比较研究

目的 比较UW液、Celsior液和HTK液时移植供肝灌注保存的效果.方法 回顾性分析2002年1月～2004年3月施行的成人首次肝脏移植且术前诊断为良性肝病者263例,根据所采用的灌注保存液分为lAW液组(161例)、Celsior组(45例)和HTK组(57例),3组患者年龄、性别及原发病分布,术前肝功能指标及分级,肝移植术式及供肝冷,热缺血时间差异均无显著性,比较3组患者术后早期移植肝功能指标、血管及胆道并发症发生率和移植物存活率.结果 3组患者肝移植术后早期血清丙氨酸氨基转移酶、门冬氨酸氨基转移酶、碱性磷酸酶和γ-谷氨酰转肽酶差异均无显著性;UW液组术后第7天血清总胆红素(117.4±96.3)μmol/L高于Celsior组[(85.1±77.9)μmol/L,P=0.047]和HTK组[(86.5±82.6)μmol/L,P=0.033];HTK组术后即刻凝血酶原时间(21.9±5.8)s低于UW液组[(24.8±6.2)s,P=0.004]和Celsior组[(26.4±7.0)s,P=0.0011;HTK组凝血酶原时问峰值(24.0±5.2)s低于Celsior组[(27.5±6.1)s,P=0.002].UW液组发生移植肝原发无功能2例(1.2%),但组间差异无显著性(P=0.528).3组患者术后血管并发症、胆道并发症及排斥反应发生率和再次移植率差异均无显著性.移植物1年及3年存活率分别为:UW液组80.7%和73.9%,Celsior组91.1%和82.2%,HTK组94.7%和80.7%,存活时间差异无显著性(P=0.099).结论 UW液、Celsior液和HTK液对移植供肝灌注保存的效果差异无显著性.     

含血低钾右旋糖酐液肺保存效果的实验研究

目的:比较含与不含20%自体静脉血的低钾右旋糖酐(LPD)液的肺保存效果。方法:将12只犬分为2组,分别用含与不含20%自体静脉血的LPD液灌注,10℃保存12h后,分别在离体状态下,连续通气和温静脉血再灌注10min。比较供肺流入、流出血的氧分压、二氧化碳分压、呼吸道峰压及再灌注后离体肺的湿/干重量比,并行病理学检查。结果:两组间氧分压犤(21.55±3.94)kPa与(20.90±1.16)kPa犦、二氧化碳分压犤(4.25±0.15)kPa与(4.32±0.11)kPa犦、呼吸道峰压犤(19.00±1.41)kPa与(18.50±1.87)kPa犦及再灌注后离体肺的湿/干重量比(6.47±0.41与6.09±0.28)之间差异无统计学意义(P>0.05),病理切片均未见肺泡内出血。结论:含与不含20%自体静脉血的LPD液的肺保存效果差异无统计学意义,肺保存效果并未因灌注液中加血而明显改善。     

高渗枸橼酸盐嘌呤溶液对胰岛细胞的保存研究

目的：探讨脑死亡自愿捐赠器官的供者多器官联合切取时用于人类胰岛细胞移植的胰腺获取方法及高渗枸橼酸盐漂呤溶液原位灌注后胰岛细胞的活性和冷缺血时间的关系。方法：采用高渗枸橼酸盐漂呤溶液1500－2000ml经主动脉原位灌注后,进行肾－胰腺－十二肠－脾的联合切除,切取后分离肾与胰腺－十二肠－脾,采用胶原酶P消化胰腺,分离并纯化胰岛细胞,进行胰岛细胞活性染色。结果：胰腺与肾脏经高渗枸橼酸盐漂呤溶液原位灌注满意,胰岛细胞的活性与冷缺血时间呈负相关,冷保存指数和胰岛细胞活性呈正相关。结论：在胰岛细胞移植中,经高渗枸橼酸盐漂呤溶液保存的胰腺的冷缺血时间不易超过5－6h。     

Addition of ulinastatin to preservation solution promotes protection against ischemia-reperfusion injury in rabbit lung

Background  The composition of the lung preservation solution used in lung graft procurement has been considered the key to minimize lung injury during the period of ischemia. Low-potassium dextran glucose (LPDG), an extracellular-type solution, has been adopted by most lung transplantation centers, due to the experimental and clinical evidences that LPDG is superior to intracellular-type solutions. Ulinastatin has been shown to attenuate ischemia-reperfusion (I/R) injury in various organs in animals. We supposed that the addition of ulinastatin to LPDG as a flushing solution, would further ameliorate I/R lung injury than LPDG solution alone.

Methods  Twelve male New Zealand white rabbits were randomly divided into 2 groups. Using an alternative in situ lung I/R model, the left lung in the control group was supplied and preserved with LPDG solution for 120 minutes. In the study group 50 000 U/kg of ulinastatin was added to the LPDG solution for lung preservation. Then re-ventilation and reperfusion of the left lung were performed for 90 minutes. Blood gas analysis (PaO₂, PaCO₂), mean pulmonary artery pressure (MPAP) and serum TNF-α level were measured intermittently. The pulmonary water index (D/W), tissue myeloperoxidase (MPO) activity, tissue malondialdehyde (MDA) content and morphologic changes were analyzed.

Results  The study group showed significantly higher PaO₂ and lower MPAP at the end of reperfusion. Serum TNF-α level, left lung tissue MPO and MDA in the study group were significantly lower than those in the control group. D/W and pathologic evaluation were also remarkably different between the two groups.

Conclusions  This study indicated that better lung preservation could be achieved with the use of an ulinastatin modified LPDG solution. Ulinastatin further attenuated lung I/R injury, at least partly by reducing oxidative reactions, inhibiting the release of inflammatory factors and neutrophils immigration.

     

缺血后适应对大鼠肾脏急性热缺血再灌注损伤细胞凋亡的影响

目的 探讨缺血后适应对大鼠急性肾缺血再灌注损伤(isclaemic reperfusion injury,IRI)所导致的细胞凋亡的影响.方法 将40只Wistar健康雄性大鼠随机分为对照组(C组)、缺血再灌注组(IRI组)、缺血后适应组(IPo组)和腺苷组(Ado组)4组,C组仅行右肾切除,左肾蒂游离,其他3组除切除右肾外,IRI组为大鼠肾脏急性热缺血再灌注损伤模型,IPo组于再灌注之前行6个10 s无限制灌注 10 s再缺血循环,Ado组于缺血前10 min经静脉给予腺苷.分别采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)、流式细胞术及肾组织病理形态学的方法观察细胞凋亡.结果 ,与C组相比,IRI组细胞凋亡数显著增加(P＜0.05);与IRI组相比,IPo组和Ado组细胞凋亡数显著减少(P<0.05),而二者之间差异无统计学意义,结论 缺血后适应可以减少缺血再灌注引起的大鼠肾脏细胞凋亡.再灌注损伤;细胞凋亡