灵芝复方诱导HL-60白血病细胞凋亡的研究

应用体外集落与液体培养、细胞形态学观察、ＤＮＡ片段凝胶电泳及ＤＮＡ片百分率测定等方法观察灵芝复方对人骨髓ＣＦＵ－ＧＭ生长及ＨＬ－６０细胞增殖和凋亡的作用。发现灵芝复方在一定浓度范围内对人骨髓ＣＦＵ－ＧＭ生长有促进作用,而对白血病系ＨＬ－６０细胞集落生长则表现了剂量依赖性抑制;细胞形态学经为芝复方对ＨＬ－６０细胞凋亡具有剂量和时间依赖性诱导作用。８和１６ｍｇ／ｍｌ灵芝复方作用４８ｈ,可使ＨＬ－６０细     

仙鹤草煎剂对HL-60细胞的体外诱导凋亡作用

本研究采用ＭＴＴ法,细胞形态学观察和流式细胞术检测了仙鹤草煎剂对人白血病细胞系ＨＬ－６０在体外的作用。结果表明,仙鹤草煎剂对ＨＬ－６０细胞有生长抑制作用;用仙鹤草煎剂处理后的ＨＬ－６０细胞呈现出典型的凋亡形态特征;用流式细胞仪测定细胞周期,可见明显的凋亡峰。     

芦笋有效成分熊果酸诱导HL-60细胞凋亡的实验研究

目的：探讨芦笋有效成分熊果酸对ＨＬ－６０细胞增殖、凋亡的影响。方法：Ｅ和ＭＴＴ法、ＤＮＡ凝胶电泳、形态学方法等测定熊果酸对ＨＨＬ－６０细胞增殖、凋亡的影响。结果：熊果酸抑制ＨＬ－６０细胞增殖，对ＨＬ－６０细胞的半数生长的抑制剂量（ＩＣ５０）为８．２６μｍｏｌ／Ｌ，并能导其发生凋亡结论：熊果酸通过抑制ＨＬ－６０细胞增殖和诱导其凋亡发挥抗肿瘤作用。     

复合螺旋藻多糖对人结肠癌HT-29细胞株体外抗肿瘤作用的研究

目的研究复合螺旋藻多糖对体外培养的人结肠癌HT-29细胞的抑制作用及其机制。方法将螺旋藻多糖(PSP)与银杏叶提取物(GBE)按一定比例复合,用不同浓度的复合制剂分别对细胞作用后,在显微镜下观察细胞形态学变化、用MTT法测其生长抑制率、PI及AnnexinV-FITC/PI染色后,流式细胞仪测细胞周期及凋亡率。结果不同比例和浓度的复合螺旋藻多糖对人结肠癌HT-29细胞均有抑制作用,并呈时间和剂量依赖性,抑制作用高于单一成分组;细胞阻滞于S期,凋亡细胞增加。结论复合螺旋藻多糖通过阻断细胞周期而抑制体外培养人结肠癌HT-29细胞的生长,并能够促进细胞凋亡,具有较好的抑肿瘤活性。     

三氧化二砷诱导HL-60细胞凋亡的实验研究

目的：探讨三氧化二砷（Ａｓ２Ｏ３）治疗白血病的疗效机理。该当以ＨＬ－６０细胞株为体外模型，终浓度为０．２０μｍｏｌ／ＬＡｓ２Ｏ３作用２４、４８ｈ后，用ＰＩ／ＡｎｎｅｘｉｎＶ－ＦＩＴＣ双标记，流式细胞术观察Ａｓ２Ｏ３对ＨＬ－６０细胞凋亡及其对细胞株端粒酶活性的影响。结果：Ａｓ２Ｏ３作用于ＨＬ－６０细胞后ＰＩ阴性／ＡｎｎｅｘｉｎＶ－ＦＩＴＣ细胞性细胞增多，提示细胞发生凋亡，ＤＮＡ周期分析显示主要作用在     

人参总皂甙对白血病祖细胞作用的实验观察

采用白血病祖细胞集落形成培养法,观察不同浓度人参总皂ｅｇ－０１白血病细胞株和急性髓细胞白血病患者的骨髓细胞集落形成的影响,并以正常粒单祖细胞作比较。结果正常和白血病祖细胞均对低浓度的ＴＳＰＧ有反应,集落数提高２６．１－３５．４％中等浓度的ＴＳＰＧ仍然刺激正常ＣＦＵ－ＧＭ集落增加,但抑制ＨＬ－６０,Ｍｅｇ－０１和ＣＦＵ＝－ＡＭＬ集落生长,抑制率为５０．８％、２５．１％和１９．０％;较高浓度的６０、Ｍ     

自体外周血单个核细胞对原代肝癌细胞生长的影响及芦荟多糖对其干预作用

目的 观察、探讨自体外周血单个核细胞(PBMC)对原代肝癌细胞生长的影响及芦荟多糖AP11的干预作用.方法 以手术切除肝癌组织为标本,胰酶短暂消化加吹打、单细胞悬液培养法原代培养肝癌细胞.通过倒置显微镜观察其形态学特征.于分离培养第2天,加芦荟多糖AP11、芦荟多糖AP11干预及未干预的PBMC于癌细胞中,倒置显微镜观察其对癌细胞形态的影响,MTT法观察其对癌细胞生长的影响.结果 采用胰酶短暂消化加吹打分离、单细胞悬液原代培养的方法,可成功获取原代肝癌细胞;与空白对照组相比,芦荟多糖组癌细胞在形态上无明显差别,MTT实验结果表明其对癌细胞的生长无明显影响;与空白对照组相比,芦荟多糖AP11干预与未干预PBMC组癌细胞形态均有较大变化,MTT实验结果表明,其对癌细胞的生长有显著抑制作用.结论 芦荟多糖AP11无直接体外抗肿瘤活性,其抗肿瘤活性可能是通过与PBMC的相互作用,通过调节机体的免疫系统而达到的.     

柴胡皂甙d上调人急性早幼粒白血病细胞糖皮质激素受体mRNA对细胞生长的影响

目的：观察柴胡皂甙ｄ（ＳＳｄ）对人急性早幼粒白血症细胞（ＨＬ６０）糖皮质激素受体（ＧＲ）ｍＲＮＡ表达的调节作用及对细胞生长的影响。方法：用从柴胡中提取的单体成分ＳＳｄ，以＾３Ｈ－胸腺嘧啶（＾３Ｈ－ＴｄＲ）掺入法和流式细胞仪观察细胞生长，用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ分析ＳＳｄ对ＧＲ ｍＲＮＡ的改变。结果：经ＳＳｄ作用后，ＨＬ６０细胞＾３Ｔ－ＴｄＲ掺入率明显降低，呈时间和剂量依赖关系，ＳＳｄ１０μｇ／     

金荞麦抗肿瘤作用研究进展

金荞麦提取物对体外培养的人个旧肺腺癌细胞、宫颈鳞癌细胞、胃腺癌细胞、鼻咽癌细胞具有杀伤作用,在体内对小鼠移植性Ｓ１８０肉瘤、Ｌｅｗｉｓ肺癌、Ｕ１４宫颈癌均有抑制作用,对Ｂ１６－ＢＬ６黑色瘤细胞具有体外抗浸袭活性和体内抗转移作用。金荞麦提取物抗肿瘤作用的分子机制为：（１）抑制癌细胞内的核酸代谢;（２）抑制癌细胞信号转导变异通道中的蛋白激酶。     

双嘧达莫对鬼臼乙叉甙抗肿瘤作用及药代动力学的影响

 体外实验发现，双嘧达莫（ＤＰ），１０ｕｇ／ｍｌ单独作用于人白血病细胞（ＨＬ－６０细胞），不能引起活细胞计数明显减少；ＤＰ与鬼臼乙叉甙（ＶＶ－１６）联合作用于ＨＬ－６０细胞，活细胞计数较单用ＶＰ－１６时明显降低。家兔体内实验表明，ＤＰ不能明显改变ＶＰ－１６的药代动力学参数；ＤＰ有可能对ＶＰ－１６的代谢方式有微弱的影响。本实验结果提示，ＤＰ在体内有可能在不明显影响ＶＰ－１６体内过程的条件下增强其抗肿瘤的作用。     

续断皂苷抗白血病作用的机制探讨

目的探讨续断皂苷(akebia saponinD,ASD)抗白血病细胞及其作用机制。方法用不同剂量(10、30、50、100μg/mL)皂苷处理人急性白血病细胞株U937细胞和人早幼粒白血病细胞株HL-60细胞,采用MTT比色法观察ASD对白血病细胞的作用。以Annexin-Ⅴ染色法检测细胞凋亡并以PCR法检测凋亡相关基因的表达。采用Westernblot法检测P53蛋白的变化。采用Griess分光光度法检测样品中一氧化氮(NO)的代谢产物亚硝酸盐的含量。结果与未处理组相比,50μg/mLASD能明显抑制U937细胞和HL-60细胞的生长并呈剂量依赖性,同时伴随bcl-2mRNA表达的明显下调。Western blot检测结果显示,P53蛋白的表达水平随ASD作用而升高。另外,ASD可以促使U937细胞和HL-60细胞中NO的含量显著提高(P<0.05)。结论 ASD对U937细胞和HL-60细胞具有增殖抑制和诱导凋亡的作用,其机制与bcl-2基因的下调,p53蛋白上调,以及促进白血病细胞内NO含量提高相关。     

中华眼镜蛇蛇毒组分C诱导白血病细胞凋亡作用的研究

目的：研究眼镜蛇蛇毒组分Ｃ诱导白血病细胞凋亡的作用及机制。方法：应用光学显微镜透射电镜，脱氧核糖核酸（ＤＮＡ）电泳，流式细胞仪，逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）等方法，观察白血病细胞经过眼镜蛇蛇毒组分Ｃ处理后，形态学，生物化学及Ｂｃｌ－２／Ｂａｘ基因表达水平的变化。结果：眼镜蛇蛇毒组分Ｃ能诱导人粒细胞白血病细胞系（ＨＬ６０）发生凋亡形态学和生物化学变化；     

植物多糖对S180、K562细胞增殖和唾液酸、磷脂、胆固醇含量的影响

本实验用ＭＴＴ比色分析法研究了茯苓多糖（ＰＰＳ）、刺五加多糖（ＡＳＰＳ）、银耳多糖（ＴＦ）和香菇多糖４种植物多糖对体外培养的小鼠腹水型肉瘤Ｓ１８０细胞和人慢性骨髓性白血病Ｋ５６２细胞增殖的影响，结果证实ＰＰＳ、ＡＳＰＳ在体外具有直接抗肿瘤作用。ＰＰＳ对两种种瘤细胞的半数有效抑制浓度（ＩＣ５０）均为１．５ｍｇ／ｍｌ，ＡＳＰＳ对Ｓ１８０和Ｋ５６２细胞的ＩＣ５０分别为０．３８ｍｇ／ｍｌ和０．２８ｍｇ／ｍ     

仙鹤草多糖的提取及其体外抗脑胶质瘤U251活性研究

目的:优化仙鹤草多糖的提取工艺并测定其对脑胶质瘤U251细胞生长的抑制作用.方法:采用正交设计实验方法对影响仙鹤草多糖得率的提取温度、提取时间、料液比等3因素进行优化;采用MTT比色法测定仙鹤草多糖对U251细胞株增殖的抑制率,应用倒置相差显微镜观察仙鹤草多糖对肿瘤细胞形态结构的影响.结果:仙鹤草多糖提取的最佳工艺条件为:提取温度90℃,提取时间3h,料液比1∶20,在此条件下,仙鹤草总多糖得率可达1.85％.仙鹤草总多糖对脑胶质瘤U251细胞株增殖具有明显的体外抑制作用(P＜0.01),且表现出浓度依赖关系,IC50为1.35 g·L-1.经仙鹤草多糖处理后,U251细胞显示典型的凋亡形态变化.结论:优选的提取工艺简便,高效;仙鹤草总多糖的抗肿瘤效果显著,其抗肿瘤机制可能与诱导肿瘤细胞凋亡有关.     

人参皂甙诱导HL-60细胞凋亡的研究

目的：观察人参皂甙（GS）是否具有诱导髓性白血病HL－60细胞株的凋亡作用。方法：取不同浓度的GS处理HL－60细胞，观察GS所致的细胞形态学的变化；流式细胞术分析细胞DNH含量的改变，并进行DNA片段分析（DNA Ladder);用Annexin V-FITC试验法分析细胞凋亡百分率。结果：人参皂甙能够抑制HL－60细胞生长，在一定剂量和时间范围内可引起细胞凋亡。结论：提示人参皂甙能特异性地诱导HL－60细胞凋亡，可为临床应用人参皂甙作为化疗药物的辅助剂治疗白血病提供实验依据。     

力达霉素抑制HL-60细胞增殖和诱导分化作用

 目的 研究力达霉素对人急性髓性白血病细胞(HL-60) 增殖和诱导分化的作用。方法 用不同浓度的力达霉素处理HL-60 细胞,通过MTT法检测力达霉素对细胞的增殖抑制作用;利用瑞氏-姬姆萨染色法观察力达霉素对细胞形态的影响;通过硝基蓝四氮(NBT)还原比色法测定力达霉素对HL-60细胞的诱导分化作用。结果 不同浓度力达霉素处理细胞后,HL-60 细胞的增殖能力明显受到抑制。当力达霉素的作用浓度超过100 μmol·L-1时,抑制率可高达99%,并且抑制作用呈现时间依赖性和剂量依赖性的特点。Wright-Giemsa染色结果显示,力达霉素作用HL-60 细胞后,细胞在形态学方面发生很大变化。同时,力达霉素能够提高细胞的NBT还原能力。1 nmol·L-1和0.1 nmol·L-1浓度的力达霉素可以使HL-60细胞的NBT还原率分别提高到39.2% 和54.5 % ;0.01 nmol·L-1和0.001 nmol·L-1浓度的力达霉素则使阳性细胞的百分率增加到78.6%和89.9% ,与对照组相比,差异具有显著性（P<0.01）。结论 力达霉素具有较强的抑制HL-60细胞增殖的能力,同时,低浓度力达霉素能使HL-60细胞形态发生改变,NBT还原阳性率升高,诱导细胞发生分化,其作用机制有待于进一步深入研究。     

丹参酮ⅡA诱导白血病细胞凋亡过程中端粒酶活性的改变

目的观察丹参酮Ⅱ_A(TanⅡ_A)对HL60,K562细胞端粒酶活性的抑制作用和对凋亡相关基因的影响,探讨丹参酮Ⅱ_A对造血细胞的作用机理。方法以HL60,K562为靶细胞,应用细胞培养技术,流式细胞术,透射电镜观察TanⅡ_A对HL60,K562细胞的作用,利用PCRTRAP方法检测TanⅡ_A处理前后HL60,K562细胞端粒酶活性的改变。结果经05μg·mL^-1TanⅡ_A作用6d后,HL60,K562细胞生长明显受到抑制,生长抑制率分别为756%和563%。经丹参酮诱导后,HL60,K562细胞发生凋亡,出现亚二倍体峰;同时显著下调HL60及K562细胞的cmyc,bcl2基因表达,上调cfos基因表达。HL60,K562细胞在TanⅡ_A作用后,端粒酶活性受到抑制,端粒酶活性抑制率分别为308%,508%。结论TanⅡ_A可明显抑制HL60和K562细胞的增殖和细胞端粒酶活性,并诱导细胞凋亡。     

40种香豆素类化合物对人鼻咽癌细胞株KB和人白血病细胞株HL-60细胞生长抑制活性的筛选

目的:从中药中筛选有抗肿瘤活性的化合物。方法:应用人鼻咽癌细胞株KB和人白血病细胞株HL-60筛选40种香豆素类化合物对其生长的抑制作用。结果:马栗树皮苷、去甲基呋喃皮纳灵、前胡素和二氢山芹醇当归酸酯对人鼻咽癌细胞株KB细胞的生长有一定程度的抑制作用,且呈浓度-效应关系;伞形花内酯刘寄奴酸酯、牛防风素和考迈斯托醇对人白血病细胞株HL-60细胞的生长有一定程度的抑制作用。结论:马栗树皮苷、去甲基呋喃皮纳灵、前胡素和二氢山芹醇当归酸酯对人鼻咽癌细胞株KB细胞的生长有抑制作用;伞形花内酯刘寄奴酸酯、牛防风素和考迈斯托醇对人白血病细胞株HL-60细胞的生长有抑制作用。     

复方丹参注射液增强白血病细胞放射敏感性作用的研究

探讨复方丹参注射液对白血病细胞放射敏感性的影响。方法：采用半固体琼脂集落选培养及流式细胞仪法，观察ＨＬ６０细胞株及新鲜白血病细胞经过药物作用后，其放射敏感性的变化。结果；复方丹参注射液与ＨＬ６０细胞混合培养后照射，细胞存活曲线斜率的倒数，放射剂量为２Ｇｙ时的活存比率分别由１．５３，０．３４降至０．９３，０．１２，细胞凋亡显著增多；