人巨细胞病毒活动性感染与习惯性流产的关系探讨

目的：探讨人巨细胞病毒（HCMV）活动性感染与习惯性流产的关系。方法：选择2008年5月。2010年5月我院妇产科收治的反复性流产孕妇40例作为研究组,选择同期体检正常孕妇50例作为对照组,采集两组患者外周血,离心分离出有核细胞及血浆,采用实时荧光定量PCR和免疫荧光法检测HCMV-DNA和HCMVpp65抗原,分析HCMVpp65抗原阳性与流产的关系及两种检测方法的一致性。结果：研究组HCMVpp65抗原阳性率明显高于对照组,两组比较,差异有统计学意义（X2=7．69,P〈0．05）;研究组中流产次数多的孕妇,HCMVpp65抗原阳性率明显高于流产次数相对较少的孕妇,差异有统计学意义（x2=8．58,P〈0．05）。研究组中实时荧光定量PCR检测HCMV—DNA和免疫荧光法检测HCMVpp65抗原的一致性较好,达92．5％。结论：孕妇习惯性流产与其体内巨细胞病毒活动性感染有重要联系．习惯性流产孕妇HCMVpp65抗原检测与HCMV—DNA有良好的一致性,可作为习惯性流产的早期判断指标。     

炎性脱髓鞘型神经系统疾病人巨细胞病毒抗原血症检测的临床意义

目的探讨人巨细胞病毒pp65（HCMVpp65）抗原血症与炎性脱髓鞘型神经系统疾病的关系。方法采用HCMV单克隆抗体免疫荧光法检测60例炎性脱髓鞘型神经系统疾病及30例脑梗死及脑供血不足患者外周血的HCMVpp65抗原阳性细胞水平，同时对抗病毒药物疗效进行分析。结果炎性脱髓鞘型神经系统疾病组HCMVpp65阳性18例，阳性率为30%，包括急性脱髓鞘脑病9例、吉兰-巴雷综合征5例、脑脊髓炎2例、视神经脊髓炎1例、多发性硬化1例。对照组HCMVpp65阳性3例，阳性率10%，两组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。对HCMVpp65阳性患者应用抗病毒药物（膦甲酸钠）治疗，有效率88.9%，其中1例急性脱髓鞘脑病患者及1例多发性硬化患者治疗后复查HCMVpp65转为阴性。结论HCMV与炎性脱髓鞘型神经系统疾病的发生密切相关。HCMVpp65抗原血症检测动态观察对临床治疗有指导意义。膦甲酸钠对HCMV所致炎性脱髓鞘型神经系统疾病有良好疗效。     

炎性脱髓鞘型神经系统疾病人巨细胞病毒抗原血症检测盗俅惨庖邋

目的探讨人巨细胞病毒pp65(HCMVpp65)抗原血症与炎性脱髓鞘型神经系统疾病的关系。方法采用HCMV单克隆抗体免疫荧光法检测60例炎性脱髓鞘型神经系统疾病及30例脑梗死及脑供血不足患者外周血的HCMVpp65抗原阳性细胞水平,同时对抗病毒药物疗效进行分析。结果炎性脱髓鞘型神经系统疾病组HCMVpp65阳性18例,阳性率为30%,包括急性脱髓鞘脑病9例、吉兰-巴雷综合征5例、脑脊髓炎2例、视神经脊髓炎1例、多发性硬化1例。对照组HCMVpp65阳性3例,阳性率10%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。对HCMVpp65阳性患者应用抗病毒药物(膦甲酸钠)治疗,有效率88.9%,其中1例急性脱髓鞘脑病患者及1例多发性硬化患者治疗后复查HCMVpp65转为阴性。结论HCMV与炎性脱髓鞘型神经系统疾病的发生密切相关。HCMVpp65抗原血症检测动态观察对临床治疗有指导意义。膦甲酸钠对HCMV所致炎性脱髓鞘型神经系统疾病有良好疗效。     

CMV-PP65抗原检测在预防肾移植术后巨细胞病毒感染的临床价值

目的 探讨巨细胞病毒PP65抗原（CMV-PP65）检测在预防肾移植术后巨细胞病毒（CMV）感染的临床价值.方法 采用间接免疫荧光法和酶联免疫捕获法检测52例肾移植受者术后CMV-PP65抗原和CMV-IgM抗体.结果 52例肾移植受者中CMV-PP65抗原检测阳性25例,CMV-IgM抗体检测阳性17例,随访3~6个月,共15例发生CMV病,CMV-PP65抗原检测均阳性,CMV-PP65抗原检测的敏感度及阴性预测值均高于CMV-IgM抗体检测;25例患者CMV-PP65抗原检测术后首次出现阳性的平均时间为4.2±3.3周,17例患者CMV-IgM抗体检测术后首次出现阳性的平均时间为8.7±5.8周,两者比较有显著差异性（P〈0.05）.结论 CMV-PP65抗原检测可早期排除和预防肾移植术后CMV感染,值得临床推广应用.     

肾移植受者活动性CMV感染的发生状况

目的明确肾移植患者术前CMV感染的发生率和术后活动性CMV感染的发生规律.方法检测27例健康成人、以及我院2002年3月至2003年6月138例尿毒症患者肾移植前血清抗CMV抗体(抗CMV-IgG、CMV-IgM);观察肾移植后CMV-pp65抗原血症的动态变化.结果27例健康成人血清抗CMV-IgM均为阴性、抗CMV-IgG的阳性率为70.4%、外周血CMV-pp65( )白细胞数为0～4个/5×10 4 WBC;尿毒症患者术前CMV-IgG、CMV-IgM阳性率分别为93.5%、7.1%,肾移植后外周血CMV-pp65( )白细胞数为0～2 280个/5×10 4 WBC(其中＞5者占87.0%)、其高峰期在术后第6～8周.结论肾移植受者术前CMV感染发生率明显高于健康人群,且至少有7.1%存在着活动性CMV感染;肾移植患者术后6个月内,活动性CMV感染发生率高达86.96%;术后第6～8周是活动性CMV感染最严重的时期.     

PP65抗原检测在预防肾移植术后巨细胞病毒感染中的价值

目的探讨巨细胞病毒PP65抗原（CMV—PP65）检测在肾移植术后患者巨细胞病毒病防治中的价值。方法肾移植术后患者37例，常规随诊接受巨细胞病毒PP65抗原检查。结果37例患者中11例（29．7％，11／37）CMV—PP65抗原阳性，均给予更昔洛韦抗病毒治疗，11例患者中3例（8．1％，3／37）发展成巨细胞病毒病，均发生于停用或未采用更昔洛韦时；另外26例患者（70．3％，26／37）PP65抗原始终阴性，随访3个月无巨细胞病毒病。结论巨细胞病毒PP65抗原检测对于肾移植术后巨细胞病毒病的诊断、治疗尤其是预防起到重要作用。     

巨细胞病毒肝炎婴儿继续母乳喂养的研究与意义

目的 观察比较巨细胞病毒（CMV）肝炎婴儿停哺乳与继续母乳喂养后临床及实验室指标的异同,为临床巨细胞病毒肝炎婴儿确定合理的治疗方案并提供有力的理论依据.方法 87例非淤胆型巨细胞病毒肝炎婴儿为研究对象,发病年龄均〈6个月.根据母乳CMV-IgM阳性,随机分成2组：哺母乳组54例,停母乳组33例;2组均给予更昔洛韦诱导缓解、巩固维持、保肝退黄、调节免疫等治疗.治疗前及治疗3个月、6个月、1年分别应用免疫荧光法检测血清CMVpp65抗原;荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）法检测尿CMV DNA;放射免疫法检测血清CMV-IgM;赖氏比色法、匀相测定法、溴甲酚绿法、改良J-G法等检测肝功能.结果 治疗前及治疗后3个月、6个月,2组巨细胞病毒肝炎婴儿肝功能、HCMVpp65抗原阳性率和CMV-IgM阳性率及尿CMVDNA阳性率相比差异无统计学意义（P〉0.05）;与治疗前相比,治疗后3个月2组婴儿肝功能、HCMVpp65抗原阳性率及CMV-IgM阳性率差异均有统计学意义（P〈0.05）,尿CMVDNA阳性率与治疗前相比差异无显著性（P〉0.05）;治疗6个月后与治疗前及治疗3个月相比各指标差异均有统计学意义（P〈0.05）;随访1年时检测2组患儿肝功能差异无统计学意义（P〉0.05）.结论 非淤胆型巨细胞病毒肝炎婴儿,无需停哺母乳.     

婴儿肝炎综合征肝脏巨细胞病毒低基质磷酸化蛋白的检测意义

目的：观察人巨细胞病毒（HCMV）低基质磷酸化蛋白（pp65）在婴儿肝炎综合征肝脏组织中的表达,为诊断婴儿巨细胞病毒性肝炎提供科学依据.方法：选择30例婴儿肝炎综合征患儿,在B超介导下进行肝组织活检,免疫组化法检测肝组织中HCMV pp65抗原,观察婴儿巨细胞病毒性肝炎特异性病理改变,同时用ELISA方法检测血清HCMV IgM水平,计算并比较两指标的阳性率.结果：30例婴儿肝炎综合征患儿肝组织HCMVpp65抗原阳性18例,血清IgM阳性6例,阳性率分别为60％、20％.两者阳性率比较差异有显著性（P＜0.01）.结论：通过免疫组织化学检测婴儿肝组织中HCMV pp65抗原表达,可用于诊断婴儿巨细胞病毒性肝炎.     

异基因造血干细胞移植后巨细胞病毒检测的探讨

目的探讨异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后巨细胞病毒(CMV)活动性感染的有效检测方法。方法分别应用普通PCR、巢式PCR、流式细胞仪同步检测13例allo-HSCT后患者117份外周血标本的CMV DNA和pp65抗原。结果普通PCR 检测阳性率为44．4％,巢式PCR检测阳性率为24．8％,流式细胞仪检测阳性率为30．8%。临床活动性感染率为27．4％。普通PCR 检测阳性率与临床活动性感染率之间无明显相关性(r=0．207,P>0．05)。巢式PCR和流式细胞仪的阳性检出率之间的差异无统计学意义(P>0．05),它们和临床活动性感染有明显的相关性(r分别为0．518和0．529,P<0．05)。结论巢式PCR检测CMV DNA和流式细胞仪检测pp65抗原可用于allo-HSCT后CMV活动性感染的诊断。     

肾移植患者活动性巨细胞病毒感染临床研究

目的明确肾移植患者术前巨细胞病毒(CMV)感染的发生率和术后活动性CMV感染的发生规律。方法检测55例健康成人以及我院2002年3月~2005年8月期间377例尿毒症患者肾移植前血清抗CMV抗体(抗CMV-IgG、CMV-IgM);观察肾移植后CMV-pp65抗原血症的动态变化。结果55例健康成人抗CMV-IgG的阳性率为69.1%、血清抗CMV-IgM均为阴性、外周血CMV-pp65( )白细胞数为0~4个/5×104WBC;尿毒症患者术前CMV-IgG、CMV-IgM阳性率分别为94.2%、6.9%,肾移植术后6个月内,患者外周血CMV-pp65( )白细胞数为0~3 142个/5×104WBC(其中>5例占86.7%),其高峰期在术后第6~8周。结论肾移植受者术前CMV感染发生率明显高于健康人群,且约有6.9%存在着活动性CMV感染;肾移植患者术后6个月内,活动性CMV感染发生率高达86.7%;术后第6~8周是活动性CMV感染最严重的时期。     

HCMV（pp65）抗原血症-肝、肾移植术后巨细胞病毒感染监测的分析

目的通过5000次肝、肾移植术后病人外周血HCMV（pp65）抗原血症检测结果与用ELISA方法检测HCMV特异性IgM、IgG抗体的检测结果进行比较和观察，探讨各种检测方法在检测器官移植术后HCMV感染中的作用。方法应用间接免疫荧光方法，检测2002年1月至2004年11月在我院接受肝、肾移植手术后病人外周血白细胞内人巨细胞病毒（HCMV）的基质磷蛋白（pp65）共检测血标本5000次，阳性病人应用ELISA方法检测HCMV特异性IgM抗体。结果5000次HCMV（PP65）抗原血症检测中，阳性1053次，占21．06％；1053次HCMV（PP65）抗原血症阳性病人，ELISA方法检测HCMV特异性IgM抗体，103次出现阳性。1053次HCMV（PP65）抗原血症阳性病人中约85．23％出现HCMV感染的症状及HCMV病。结论HCMV（PP65）抗原血症检测与其它检测HCMV方法相比，可以早期、快速、准确的检测出肝、肾移植术后病人巨细胞病毒感染，为临床抗病毒治疗提供依据，使HCMV病的发生率明显降低。     

同种异体肾移植前活动性CMV感染及其影响

目的:明确肾移植患者术前活动性巨细胞病毒(Cytomegalovirus,CMV)感染的发生状况及其对术后CMV的影响.方法:2006年6月～2008年11月期间,使用荧光素标记的抗CMV-pp65单克隆抗体,检测156例肾移植患者术前外周血CMV-pp65抗原血症;肾移植后每2～4周检测1次CMV-pp65抗原血症,共为期6个月;分析术前CMV-pp65抗原血症状况对术后患者CMV-pp65抗原血症强度和CMV病发生率的影响;另于同期内检测32例健康成人CMV-pp65抗原血症作相关对照.结果:32例健康成人CMV-pp65抗原血症均为(-);肾移植前有12.2%(19/156)的尿毒症患者CMV-pp65抗原血症为(+);这类患者肾移植后发生高活动性CMV感染(即CMV-pp65抗原血症指数>100)和CMV病的发生率均明显高于移植前CMV-pp65抗原血症为(-)的患者.结论:肾移植前活动性CMV感染高达12.2%;术前活动性CMV感染是导致肾移植后发生高活动性CMV感染和CMV病的重要原因.     

人巨细胞病毒被膜磷蛋白pp65的检测及其在肾移植受者CMV病诊断中的临床应用

目的 建立一种简便诊断肾移植受者人巨细胞病毒(HCMV)活动性感染的方法.方法 运用催化信号扩增法检测外周血白细胞中的人巨细胞病毒被膜磷蛋白pp65,并与抗HCMV-IgM检测法作比较.结果 检测100例肾移植受者中,HCMVpp65抗原阳性47例,IgM抗体检测阳性41例,pp65抗原阳性细胞数为(71±45)个,2×105个WBC,而有症状的CMV病29例,抗原阳性细胞指数为(83±46)个,2×105个WBC.对照组50名健康人,pp65抗原检测全为阴性.pp65的敏感性、特异性、阳性预测值与阴性预测值分别是100%、74.6%、61.7%和100%.结论 该法敏感、简便,可作为肾移植术后HCMV病的早期诊断并可指导抗病毒治疗.     

献血者巨细胞病毒感染筛查的初步研究

目的：探讨检测人巨细胞病毒(HCMV)的低基质磷酸化蛋白(pp65)抗原对健康献血巨细胞病毒感染情况的筛查。方法：对2003年2～7月收集的103份EDTA抗凝外周血标本，用免疫组化方法进行pp65抗原血症检测，同时以ELISA法检测其中的86份血清中的IgM和IgG抗体。结果：103份标本中共有10份pp65抗原阳性，阳性率为9．71％；ELISA法检测86份标本CMV—IgM抗体全部阴性，CMV—IgG抗体56例阳性，阳性率为62％(56／86)，10份pp65抗原阳性的标本中，CMV—IgG阳性9例。结论：pp65抗原是检测CMV感染的一种敏感、特异的方法，而检测CMV—IgM、CMV—IgG不能预测CMV的活动性感染，因此对需要输注全血、成分血的免疫力低下或各种移植病人，应进行CMVpp65抗原的检测。     

肾移植前巨细胞病毒感染状况及其对术后的影响

目的明确肾移植前尿毒症患者活动性巨细胞病毒(CMV)感染的发生状况及其对术后的影响.方法自2002年6月～2003年9月,使用荧光素标记的抗CMV-pp65单克隆抗体,检测176例肾移植患者术前外周血CMV-pp65抗原血症;肾移植后每2～4周复查1次,共为期6个月;分析术前CMV-pp65抗原血症状况对术后患者CMV-pp65抗原血症强度和CMV病发生率的影响;另于同期内检测26例健康成人CMV-pp65抗原血症做相关对照.结果 26例健康成人CMV-pp65抗原血症均为(-);肾移植前有11.4%(20/176)的尿毒症患者CMV-pp65抗原血症为( );这类患者肾移植后发生高活动性CMV感染(即CMV-pp65抗原血症指数＞100)和CMV病的发生率均明显高于移植前CMV-pp65抗原血症为(-)的患者.结论肾移植前活动性CMV感染高达11.4%;术前活动性CMV感染是导致肾移植后发生高活动性CMV感染和CMV病的重要原因.     

肾移植围手术期检测CMV-PP65抗原的意义

目的探讨肾移植围手术期检测CMV-PP65抗原的意义.方法采用免疫过氧化物酶法对94例肾移植受体(recipient,R)术前、术后1个月和供体(donor,D)CMV-PP65抗原检测结果进行回顾性分析.结果 D R-组26例,发生CMV感染20例(76.9%),CMV病6例(23.1%);D R /D-R 组50例,发生CMV感染37例(74%),无CMV病发生;D-R-组18例,无1例发生CMV感染或CMV病.D R-和D R 组供体CMV-PP65抗原阳性细胞数无显著性差异,术后D R-组患者CMV-PP65抗原阳性细胞数明显高于D R 组.D R-组中发生CMV病与CMV感染者之间供体CMV-PP65抗原阳性细胞数无显著性差异,但CMV病患者的CMV-PP65抗原阳性细胞数明显高于CMV感染患者.结论CMV-PP65抗原阴性受体接受CMV-PP65抗原阳性供体后发生CMV感染和CMV病的危险性显著增加,术前检测CMV-PP65抗原对减少患者术后发生CMV感染或CMV病有指导意义.术前受体CMV-PP65抗原阳性细胞数可能是影响术后患者CMV-PP65抗原阳性细胞数的一个因素,术后患者CMV-PP65抗原阳性细胞数高低在一定程度上影响CMV病的发生.     

性病患者血清HCMV pp65特异性IgM表达水平

目的建立检测人HCMV pp65特异性lgM的酶联捕获技术,并分析性病患者HCMV感染状态。方法利用抗人IgM（μ链特异性）抗体包被固相载体,采用辣根过氧化物酶（HRP）标记HCMV pp65单克隆抗体或HCMV pp65抗原,建立抗体捕获HCMV pp65特异性IgM酶联免疫技术。用该法检测688例性病患者及450名健康献血员血清样本,并与HCMV-pp65抗原表达水平进行比较。结果性病患者血清HCMV pp65-IgM阳性分别为274例（39.8%,酶标抗体法）和262例（38.1%,酶标抗原法）,与正常对照组（0.89%）存在显著性差异（P〈0.05）。酶标抗体法与酶抗原法在抗体捕获HCMV pp65特异性IgM检测时无显著性差异（P〉0.05）,阳性符合率95.6%,且不受类风湿因子（RF）的影响。结论酶联捕获HCMVpp65特异性lgM法具有简便、快速、特异和敏感等特点,可诊断HCMV活动性感染。     

不同核酸提取法对HCMV-DNA准确定量的影响

目的 评价不同核酸提取法对人巨细胞病毒核酸(HCMV-DNA) 荧光定量PCR准确定量的影响.方法 含HCMV AD169株病毒颗粒的病毒培养物,以不同浓度分别与10份健康人HCMV-DNA阴性血浆标本混合;另取15份临床移植患者HCMVpp65抗原血症阳性血浆样本,上述2种标本分别用碱裂解吸附法、沉淀煮沸裂解法和酚-氯仿抽提法提取病毒核酸模板,随后运用荧光定量聚合酶链反应对样本进行定量分析,并作评价.结果 15例临床检测阳性血浆标本中,酚-氯仿法提取效率为最高(P＜0.05),换算后其相对提取效率为100%,而沉淀煮沸裂解法为90%,碱裂解吸附法为65%;此外,沉淀煮沸裂解法和酚-氯仿法的重复性均好于碱裂解吸附法,变异系数(CV)值分别为0.26、0.30和0.39.结论 经典、传统的酚-氯仿抽提法仍不失为实验室首选的核酸提取方法.     

巨细胞病毒检测及在异基因造血干细胞移植中应用研究

目的:探讨检测巨细胞病毒(CMV)的方法学及在异基因造血干细胞移植(Allo-HSCT)中临床应用的价值.方法:以45例Allo-HSCT为研究对象,采集移植前供者、移植前后及恢复期受者的抗凝血标本,分别采用CMV-pp65单克隆抗体免疫组化法和ELISA法,检测CMV早期抗原和IgG、IgM抗体,并进行多点动态观察.结果:45例患者163份系列标本,CMV早期抗原阳性75份,是在移植后6～242天首次检出,平均70天;其中≤45天出现阳性者26例,占58%.术前供、受者CMV-IgG抗体均阳性,CMV-IgM抗体供、受者各1例阳性,其中受者持续阳性.术后45例中21例出现CMV-IgM抗体阳性,首次检出时间在14～234天,平均127天,比早期抗原检出时间推迟近2个月.45例中因CMV感染而致间质性肺炎25例,占55%.结论:异基因造血干细胞移植采用CMVpp55单克隆抗体免疫组化法检测巨细胞病毒感染,快捷、准确、灵敏,对患者的诊断、治疗和预后判断有重要意义,值得推广.     

器官移植受者巨细胞病毒感染检测的临床意义

目的探讨器官移植受者巨细胞病毒感染早期、快速、准确的检测方法。方法采用核酸基础序列扩增法（nucleic acid sequence—based amplification，NASBA法）检测器官移植受者巨细胞病毒即刻早期信使核糖核酸（immediate—early，IE—mRNA）以及晚期信使核糖核酸（pp67-mRNA），同时行抗原血症（pp65）的检测，并将结果相比较。结果42例器官移植受者中发生有症状的活动性巨细胞病毒感染者（CMV病）共11例，其中IE—mRNA阳性10例，pp67-mRNA阳性6例，pp65抗原阳性（≥1个／5万WBC）8例。IE—mR．NA的敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为90．9％、80．6％、62．5％和96．1％。结论器官移植术后应用NASBA法检测巨细胞病毒IE—mR．NA具有早期、快速、特异的优点，为临床指导抗病毒治疗提供了较客观的依据。