高效液相色谱法测定西酞普兰血药浓度

 目的建立高效液相色谱法测定西酞普兰血药浓度。方法采用液-液萃取法,用正己烷-异戊醇(98:2)提取血浆中西酞普兰,选用普萘洛尔为内标。色谱柱为NucleodurCN(4.6mm×250mm,5μm),流动相:乙腈-30mmol·L^-1KH₂PO₄缓冲液(0.1%三乙胺,pH5.0)(40:60),激发波长:236nm,发射波长:306nm,流速:1.3ml·min^-1,柱温:室温。结果本法线性范围在1-75μg·L^-1(r=0.9996)。平均方法回收率为(96.8±5.0)%(n=15),日内RSD≤8.6%,日间RSD≤9.6%。结论本法简单、快速、准确,可用于临床血药浓度监测及人体药动学研究。     

HPLC同时测定赤芝中4种三萜酸的含量

目的：建立HPLC同时测定赤芝药材中灵芝酸C₂、灵芝烯酸A、灵芝酸A和灵芝酸D含量的方法。方法：采用Kromasil C₁₈色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相为乙腈-0.03%磷酸水溶液采用梯度洗脱,流速1.0 mL·min^-1,检测波长252 nm,柱温35 ℃。结果：灵芝酸C₂、灵芝烯酸A、灵芝酸A和灵芝酸D的线性范围分别为：5.0～50.0 mg·L^-1(r=0.999 9),7.2～72 mg·L^-1(r=0.999 9),11.67～116.7 mg·L^-1(r=0.999 9)和5.32～53.2 mg·L^-1(r=0.999 8);平均回收率(n=3)分别为98.8%(RSD1.5%),99.1%(RSD1.9%),99.5%(RSD1.4%)和98.5%(RSD1.9%)。结论：该方法简便、准确,重复性好,为赤芝药材的质量控制提供了实验依据。     

HPLC同时测定赤芝中4种三萜酸的含量

目的：建立HPLC同时测定赤芝药材中灵芝酸C₂、灵芝烯酸A、灵芝酸A和灵芝酸D含量的方法。方法：采用Kromasil C₁₈色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相为乙腈-0.03%磷酸水溶液采用梯度洗脱,流速1.0 mL·min^-1,检测波长252 nm,柱温35 ℃。结果：灵芝酸C₂、灵芝烯酸A、灵芝酸A和灵芝酸D的线性范围分别为：5.0～50.0 mg·L^-1(r=0.999 9),7.2～72 mg·L^-1(r=0.999 9),11.67～116.7 mg·L^-1(r=0.999 9)和5.32～53.2 mg·L^-1(r=0.999 8);平均回收率(n=3)分别为98.8%(RSD1.5%),99.1%(RSD1.9%),99.5%(RSD1.4%)和98.5%(RSD1.9%)。结论：该方法简便、准确,重复性好,为赤芝药材的质量控制提供了实验依据。     

HPLC-PDA测定小半夏汤中的核苷类成分

 目的建立同时对小半夏汤中的5种核苷类成分进行含量测定的方法。方法采用Lichrospher C₁₈柱(4.6 mm×250mm,5μm),以乙腈-水(1∶99)为流动相,体积流量1.0 mL·min^-1,λ220～300 nm,柱温30℃。结果小半夏汤中的尿嘧啶、黄嘌呤、尿嘧啶核苷、次黄嘌呤核苷、鸟嘌呤核苷等的线性范围和相关系数分别为6.88～110.08 mg·L^-1(r=0.999 6),2.82～45.04 mg·L^-1(r=0.999 8),22.40～358.48 mg·L^-1(r=0.999 9),1.96～31.32 mg·L^-1(r=0.999 9),16.54～264.72 mg·L^-1(r=0.999 8);加样回收率分别为100.31%(RSD=1.36%),100.21%(RSD=1.22%),99.98%(RSD=1.30%),100.44%(RSD=1.62%)和100.27%(RSD=1.36%);方法精密度、重复性良好,RSD均小于2.0%。结论本法操作简便、结果可靠、重现性好、检测快速、定量准确,可作为小半夏汤中核苷类成分的含量测定方法。     

HPLC 测定复方地巴唑氢氯噻嗪胶囊中 8 种组分的含量

  目的 建立高效液相色谱法同时测定复方地巴唑氢氯噻嗪胶囊中氢氯噻嗪、维生素 B₆ 、维生素 B₁ 、硫酸胍生、地巴唑、氯氮、磷酸氯喹和盐酸异丙嗪等 8 种组分含量的方法。 方法 提取溶剂为甲醇 - 水 (50 ∶ 50) ,色谱柱为 Ultimate XB-C₁₈(4.6 mm × 150 mm , 5 μm) ,流动相为甲醇 -5 mmol·L^-1 庚烷磺酸钠溶液 - 冰醋酸 (55 ∶ 45 ∶ 0.25), 检测波长为 284 nm 。 结果 线性范围分别为氢氯噻嗪 30.2~151.0 mg·L^-1 (<>r=0.999 8) ;维生素 B₆10.2 ～ 51.0 mg·L^-1 (<>r=1.000 0) ;维生素 B₁ 10.1~50.5 mg·L^-1 (<>r=0.999 9) ;硫酸胍生 12.1~60.5 mg·L^-1 (<>r=1.000 0) ;地巴唑 99.8~499.0 mg·L^-1 (<>r=0.999 2) ;氯氮 20.1~100.5 mg·L^-1 (<>r= 1.000 0) ;磷酸氯喹 24.88~124.4 mg·L^-1 (<>r=1.000 0) ;盐酸异丙嗪 30.3~151.5 mg·L^-1 (<>r=1.000 0) 。平均回收率 (<>n=9) 分别为氢氯噻嗪 101.2%(RSD=1.4%) ,维生素 B₆102.2%(RSD=0.9%) ,维生素 B₁100.5% (RSD=1.5%) ,硫酸胍生 101.6%(RSD=1.5%) ,地巴唑 101.8% (RSD=1.1%) ,氯氮 99.3% (RSD= 1.3%) ,磷酸氯喹 101.5%(RSD=1.6%) ,盐酸异丙嗪 101.7 % (RSD=1.7%) 。 结论 本法简便快速,准确可靠,适于该复方制剂中 8 种组分的同时测定。     

高效毛细管电泳法测定注射用水溶性维生素的含量

 目的采用高效毛细管电泳法(HPCE)的胶束毛细管色谱(MECC)模式分离和测定注射用水溶性维生素的含量。方法未涂层熔融石英毛细管67 cm(有效长度55 cm)×50μm;运行缓冲液为50 mmol·L^-1 SDS-50 mmol·L^-1的硼酸钠溶液(pH8.33);6.89 KPa×10 s压力进样;运行电压15.0 kV;检测波长214 nm;毛细管柱温25℃。结果注射用水溶性维生素中的九种成分分离完全,烟酰氨、维生素B6、D-生物素、核黄素磷酸钠、维生素B12、维生素C、泛酸钠、叶酸、维生素B1的线性范围分别为4.16～520.0 mg·L^-1(r=0.999 1),0.40～50.0 mg·L^-1(r=0.999 7),0.42-52.0 mg·L^-1(r=0.999 3),0.40～50.0 mg·L^-1(r=0.998 2),0.39-49.0 mg·L^-1(r=0.999 6),8.00～1 000.0 mg·L^-1(r=0.992 0),0.83-104.0 mg·L^-1(r=0.999 5),0.42～53.0 mg·L^-1(r=0.999 0),0.41～51.0 mg·L^-1(r=0.999 8),n=5;精密度(RSD)分别为1.75%,1.04%,1.6%,2.84%,1.85%,3.26%,1.58%,2.5%,1.92%(n=5);最低检测质量浓度分别为0.60,0.16,0.24,0.23,0.21,0.45,0.41,0.20,0.18 mg·L^-1。结论采用HPCE测定注射用水溶性维生素的方法简便、结果可靠。     

RP-HPLC同时测定三黄片中4种有效成分的含量

 目的利用梯度洗脱,建立了反相高效液相色谱法同时测定三黄片中大黄素、大黄酚、黄芩苷和盐酸小檗碱含量的方法。方法采用Kromasil C₁₈色谱柱(4.6 mm×250 mm,5.0μm);流动相组成为A:0.5%三乙胺水溶液(醋酸调pH 3.0,内含5mmol·L^-1十二烷基磺酸钠),B:甲醇,C:乙腈,梯度洗脱;检测波长254 nm;流速1.0 mL·min^-1。结果大黄素、大黄酚、黄芩苷和盐酸小檗碱含量测定方法的线性关系良好,线性范围和相关系数分别为0.26～32.88 mg·L^-1(r=0.999 9),0.54～68.88 mg·L^-1(r=0.999 9),9.83～1 258 mg·L^-1(r=0.999 7),3.07～392.8 mg·L^-1(r=0.999 8);回收率分别为99.7%,100.2%,100.2%和98.0%,方法精密度良好,RSD均小于2.0%,方法的重现性良好,RSD均小于1.3%。结论该方法专属性强,结果准确可靠,重现性好,可用于三黄片中大黄素、大黄酚、黄芩苷和盐酸小檗碱的含量测定,更好地控制三黄片的质量。     

HPLC测定马来酸依那普利叶酸片中两种组分的含量

 目的建立同时测定马来酸依那普利叶酸片中马来酸依那普利和叶酸含量的方法。方法采用离子对反相高效液相色谱法。C₁₈柱,以乙腈-40 mmol·L^-1磷酸氢二钾溶液(40∶60)(含10 mmol·L^-1的十六烷基三甲基溴化铵,用磷酸调pH到7.5)为流动相,流速为1.0 mL·min^-1,检测波长为215 nm,柱温为60℃。结果马来酸、叶酸和依那普利之间能够达到很好分离;马来酸依那普利的线性范围为202.5～810.0 mg·L^-1,r=0.999 8(n=6),平均回收率为99.91%,RSD=1.15%(n=9);叶酸的线性范围为16.28～65.12 mg·L^-1,r=0.999 8(n=6),平均回收率为100.11%,RSD=1.20%(n=9)。结论该法能够同时测定两组分的含量,而且简便、准确、快速,可用于批次样品的含量测定及质量控制。     

RP-HPLC测定巴洛沙星的人体血药浓度及生物等效性研究

 目的建立人血浆中巴洛沙星的HPLC测定法,研究巴洛沙星胶囊健康人体相对生物利用度。方法采用双周期自身交叉对照试验设计,20名健康志愿者口服受试巴洛沙星胶囊和参比巴洛沙星片各200 mg后采用HPLC测定血浆药物浓度。色谱柱为Lichmspher ODS(4.6 mm×25 cm,5μm)柱,流动相为水-乙腈-三乙胺-冰醋酸(78:22:1:1),紫外检测波长295 nm。结果巴洛沙星在0.03～4.0 mg·L^-1内线性关系良好(r=0.9997),提取回收率为85.37%～88.34%,相对回收率为98.45%～103.63%。受试、参比制剂的主要药动学参数如下:t_1/2(8.59±1.48)和(8.79±1.43)h,t_max (1.0±0.5)和(1.1±0.5)h,ρ_max(2.09±0.76)和(1.95±0.56)mg·L^-1,AUC_0-36h(15.15±2.98)和(16.77±11.36)mg·h·L^-1,AUC_0-∞(16.00±3.13)和(18.64±11.72)mg·h·L^-1,经对数转换根据两种制剂血药浓度-时间曲线下面积计算国产巴洛沙星胶囊剂相对生物利用度为(99.1±14.0)%。经方差分析及双单侧t检验,显示两制剂无显著性差异,具有生物等效性。结论此法简便、灵敏、准确、稳定,可用于体内药物分析,巴洛沙星胶囊和巴洛沙星片具有生物等效性。     

丁咯地尔片剂在家犬体内药代动力学和相对生物利用度

 目的:比较丁咯地尔(甲氧吡丁苯)两种片剂在家犬体内药代动力学和相对生物利用度?方法:高效液相-紫外检测法?结果:家犬口服后,其体内血药浓度-时间曲线符合一室开放模型,其主要药代动力学参数分别为:c_max(16.24±4.96)mg·L^-1L和(15.91±5.94)mg·L^-1;t_max(0.84±0.45)h和(0.82±0.49)h;AUC(99.13±23.22)mg·h·L^-1和(97.94±25.63)mg·h·L^-1?结论:国产甲氧吡丁苯片剂对进口甲氧吡丁苯片剂相对生物利用度为98.57%,可以认为国产片与进口片生物等效?     

苯丙醇羟丙基-β-环糊精包合片的生物等效性研究

 目的评价苯丙醇羟丙基-β-环糊精包合片与苯丙醇胶丸的生物等效性。方法采用双制剂双周期交叉实验设计,8只Beagle犬随机分为两组,分别单剂量口服苯丙醇-羟丙基-β-环糊精包合片(受试制剂)和苯丙醇胶丸(参比制剂)各100mg(以苯丙醇计),12d后交叉服药。于给药后0.083,0.25,0.5,1.0,1.5,2,3,4,6,8,12,14,24,36h取血样,0.5mL血浆加入15%高氯酸溶液100μL,涡旋振荡40s,4000r·min^-1离心10min,上清液经0.45μm滤膜过滤后,取20μL进行HPLC分析。流动相为甲醇-双蒸水=60:40,流速为1.0mL·min^-1,色谱柱为Diamond C₁₈柱(4.6mm×250mm,5μm),柱温30℃。紫外检测波长为210nm。结果犬血浆中杂质不干扰样品的测定,犬血浆中苯丙醇质量浓度在0.01287～25.73mg·L^-1内线性关系好(r=0.99999);最低检测质量浓度为0.005mg·L^-1(以S/N≥3计)。参比制剂的t_1/2为(5.68±1.11)h,t_max和ρ_max分别为(0.8±0.5)h和(4.46±0.73)mg·L^-1;受试制剂t_1/2为(4.53±0.72)h,t_max和ρ_max分别为(1.0±0.7)h和(3.05±0.44)mg·L^-1,其相对生物利用度为(104.9±14.0)%。结论所建立方法准确可靠,符合生物样品分析要求;犬单剂量口服受试制剂与参比制剂后,药动学统计数据表明,两种制剂生物等效。     

盐酸多奈哌齐在家兔体内的立体选择性药动学研究

 目的建立高效毛细管电泳法测定家兔血浆样品中盐酸多奈哌齐对映体,并用于口服给药后的立体选择性药动学研究。方法血浆中加入内标L-酒石酸布托菲诺并经碱化后以异丙醇-正己烷(3∶97)提取血浆样品,采用未涂层石英毛细管柱(70 cm×50μm),以25 mmol·L^-1的磷酸-三乙胺(pH 2.5)为运行缓冲液,25 g·L^-1磺化β-环糊精为手性添加剂,进样电压为-20kV,进样时间为15 s,运行电压为-20 kV,对家兔血浆样品中盐酸多奈哌齐对映体进行测定。并用3P97程序计算两者的药动学参数。结果测得血浆样品中多奈哌齐两对映体在0.1～5 mg·L^-1内均呈良好的线性关系。家兔口服30 mg·kg^-1盐酸多奈哌齐后两对映体在家兔体内均符合二房室模型,经统计学t检验,两对映体的ρ_max之间有非常显著性差异(P<0.01),AUC_0-48及AUC_0-∞之间有显著性差异(P<0.05),而两对映体的t_max,t_1/2,MRT之间则无显著性差异(P>0.05)。结论两对映体的家兔体内代谢过程存在立体选择性。     

对香豆酸在大鼠体内的药动学研究

 目的 建立反相高效液相色谱法对对香豆酸的药动学进行研究。方法 血浆样品用甲醇沉淀蛋白,采用Diamonsil C₁₈色 谱柱(4．6 mm×200 mm,5μm),流动相为乙腈-1％冰醋酸(体积比为21:79),流速1．0 mL·min^-1,检测波长为322nm,内标为橙皮 苷。结果 对香豆酸在0．085～10．6 mg·L^-1(r=0．999 3)时其浓度与对香豆酸和橙皮苷峰面积比呈良好的线性关系,定量限 为0．085 mg·L^-1。大鼠腹腔注射对香豆酸溶液后,对香豆酸的药动学行为符合二室模型,K_a为(0．38±0．09)min^-1,t_1/2(Ka)为 (1．85±0．20)min,t_1/2(α)为(8.9±0.9)min,t_1/2(β)为(34±3)min,k₂₁为(0．045±0．008)min^-1,k₁₀为(0．040±0．009)min^-1,k₁₂为 (0．024±0．003)min^-1,AUC为(130±14)mg·min·L^-1,t_max和ρ_max实测值分别为(6．0±0．8)min和(3．5±0．4)mg·L^-1。结论 该方法灵敏、准确,适合于对香豆酸的药动学研究。     

盐酸阿比多尔颗粒剂在人体内的药动学及生物等效性研究

 目的建立人血浆中阿比多尔的HPLC测定方法,测定志愿者口服盐酸阿比多尔颗粒剂后的血药浓度,并对受试制剂和参比制剂的生物等效性进行评价。方法血浆样品中加入内标SI-5后以0.1mol·L^-1的NaOH碱化,以环己烷提取,氮气吹干后用流动相溶解,进行HPLC分析,色谱柱为Alltech C₁₈(4·6mm×250mm,5μm);流动相为甲醇-1.32%三乙胺溶液(80∶20);流速为1.0mL·min^-1;检测波长为315nm,进样20μL。20名健康志愿者交叉口服受试制剂和参比制剂,剂量均为400mg,计算主要药动学参数及相对生物利用度以判断生物等效性。结果阿比多尔血浆样本线性范围为0.02～2.0mg·L^-1,检测限为0.01mg·L^-1;受试制剂和参比制剂的峰浓度分别为(0.879±0.175)和(0.741±0.167)mg·L^-1;达峰时间分别为(0.7±0.3)和(1.2±0.4)h;生物半衰期分别为(20.06±4.32)和(21.24±4.42)h,受试制剂的相对生物利用度为(100.4±10.5)%。结论本试验建立的分析方法简便、准确、灵敏、专属性强,统计学结果表明两种制剂生物等效。     

利用MMDL评价尼麦角林胶囊人体生物利用度

 目的建立测定人血浆中1-甲基-10α-甲氧基-9,10-二氢麦角醇(MMDL)浓度的高效液相色谱法,并以MMDL体内的水平为指标研究尼麦角林胶囊的人体生物利用度。方法以二氯甲烷-异丙醇(9∶1)为萃取液,美索巴莫为内标,血浆样品经液-液萃取浓缩后,经Diamonsil C₁₈柱分离,以乙腈-20 mmol·L^-1磷酸二氢钾溶液(22∶78)为流动相,在225 nm波长处检测。18名健康男性志愿者采用随机交叉给药方案,分别单剂量po60 mg受试制剂或参比制剂,不同时间点采血,用HPLC测定血浆中MMDL,比较二者生物利用度。结果MMDL和内标分离良好,内源性杂质不干扰测定,在浓度为1.7～207μg·L^-1内,MMDL浓度与峰面积比线性关系良好,方法回收率为91.7%～101.8%,日内、日间RSD分别小于9.7%(n=5)、11.6%(n=15)。单剂量po受试制剂或参比制剂60 mg后,MMDL的ρ_max分别为(97.9±54.6)和(103.0±60.5)μg·L^-1;t_max分别为(1.2±0.4)和(1.2±0.4)h;t_1/2分别为(3.7±2.6)和(4.4±3.0)h;AUC_{0→12 h}分别为(283.7±218.4)和(305.3±244.6)μg·h·L^-1。相对生物利用度为(93.8±6.4)%。结论此方法灵敏、简便、准确度高,可用于尼麦角林体内过程研究。国产尼麦角林和国外产品的体内过程无显著性差别,两者为生物等效性制剂。     

马钱子生物碱血浆蛋白结合率的测定与比较

目的:测定马钱子总生物碱中主要有效成分马钱子碱和士的宁的血浆蛋白结合率,并与同浓度单成分的血浆蛋白结合率进行比较.方法:采用超滤法和高效液相色谱法对马钱子生物碱在大鼠血浆中的血浆蛋白结合率进行测定.结果.单成分的马钱子碱在0.520,1.300,2.600 mg·L-1下的血浆蛋白结合率分别为(65.60±3.01)%,(68.20±7.80)%,(59.58±3.78)%.单成分的士的宁在0.936,2.340,4.680 nag·L-1下的血浆蛋白结合率分别为(66.17±6.36)%,(67.10±2.52)%,(57.21±0.79)%.马钱子总生物碱中马钱子碱在0.519,1.288,2.607 nag·L-1下的血浆蛋白结合率分别为(62.19±2.45)%,(69.55±5.84)%,(61.76±3.68)%;马钱子总生物碱中士的宁在0.940,2.338,4.674 nag·L-1下的血浆蛋白结合率分别为(54.79±3.55)%,(57.13±4.49)%,(59.31±3.65)%.结论:马钱子碱和士的宁与血浆蛋白具有中等强度的结合,马钱子总生物碱中马钱子碱与同浓度单体相比,蛋白结合率差异不大;总碱中士的宁与同浓度单体相比,蛋白结合率有所降低.     

蛋白沉淀结合HPLC测定人血浆中尼美舒利及相对生物利用度

 目的建立人血浆中尼美舒利的HPLC-UV测定法,研究两种尼美舒利胶囊的相对生物利用度。方法采用COSMOSIL C₁₈柱(4.6 mm×250 mm,5μm),柱温为30℃,流动相为乙腈-0.015 mol·L^-1的磷酸二氢钾缓冲液(氢氧化钠溶液调pH至7.3)(79:21),流速为1.0 mL·min^-1,检测波长为404 nm。18名健康志愿者采用自身对照随机交叉给药方案,分别单次口服不同厂家尼美舒利胶囊0.1 g,在不同时间点取血,血浆样品以新建立的HPLC-UV测定,比较两药主要药动学参数的差异和相对生物利用度。结果尼美舒利与血浆中内源性杂质分离完全,尼美舒利在0.05～6.0 mg·L^-1内与峰面积比线性良好,血浆中尼美舒利最低定量质量浓度为0.05 mg·L^-1。方法回收率为96.8%～103.6%,日内精密度(RSD)<13.4%,日间精密度(RSD)<9.9%。单剂量口服尼美舒利0.1g后,两种制剂的ρ_max为(5.7±1.5)和(5.4±1.4)mg·L^-1;t_max为(3.4±0.5)和(3.4±0.5)h;AUC_0→24为(41.4±12.5)和(40.3±15.7)mg·h·L^-1;AUC_0→∞为(42.9±13.2)和(41.5±10.8)mg·h·L^-1;t_1/2为(4.1±1.6)和(4.1±1.5)h。结论该方法简单快速,灵敏度高,可用于尼美舒利的体内过程研究。方差分析表明,两制剂之间药动学参数无明显差异,试验制剂与参比制剂为生物等效制剂。     

山楂叶总黄酮在大鼠体内的药动学研究

 目的建立HPLC同时测定大鼠血浆中山楂叶总黄酮(HLF)的两个主要有效成分4″-O-牡荆素葡萄糖苷(GLV)和2″-O-牡荆素鼠李糖苷(RHV)的浓度,并用此方法对HLF在大鼠体内的药动学进行研究。方法大鼠尾静脉注射HLF,于不同时间点断尾取血,甲醇直接沉淀蛋白,HPLC测定GLV和RHV的血药浓度。色谱柱为DiamonsilTMC₁₈(4.6mm×200mm,5μm),流动相为四氢呋喃-甲醇-乙腈-0.5%冰醋酸(19.4∶1∶1∶78.6),检测波长为330nm。结果样品中GLV和RHV被成功分离,线性范围分别为0.23～138.42mg·L-1(r=0.9990)和0.36～218.49mg·L^-1(r=0.9995)。在测定浓度范围内,GLV和RHV的日内精密度(n=5)分别为0.69%～3.91%和0.51%～3.89%;日间精密度(n=5)分别为1.09%～5.03%和1.45%～2.16%;平均方法回收率(n=5)分别为(96.70±5.29)%～(102.20±1.15)%和(96.39±1.44)%～(103.64±2.23)%;平均提取回收率(n=5)分别为(92.68±2.19)%～(95.74±1.19)%和(93.45±1.85)%～(99.26±2.85)%。结论该分析方法简便快速,专属灵敏,精密度和回收率高,可满足药动学研究需要。静注HLF10～40mg·kg^-1,GLV和RHV在大鼠体内药动学特征相似,均符合三室开放药动学模型。