传染性非典型肺炎患者外周血自然杀伤细胞数量及其表面杀伤细胞免疫球蛋白样受体变化的研究

传染性非典型肺炎(世界卫生组织称之为severe acute respiratory syndrome，SARS)是由SARS病毒引起的急性传染性呼吸系统疾病。研究表明，SARS患者外周血CD4^ T细胞和CD8^ T细胞数量显著减少。自然杀伤细胞(NK细胞)在机体抗病毒感染过程中起重要免疫保护作用。我们采用流式细胞术对不同病程SARS临床诊断患者外周血NK细胞和CD158b^ NK细胞数量进行了检测，     

SARS病变组织细胞凋亡检测及其意义

目的 检测SARS病变组织标本中的细胞凋亡情况和凋亡细胞类型，探讨细胞凋亡在SARS发病过程中的作用及可能机制。方法 DNA片段原位末端检测和免疫组化碱性磷酸酶法单染和双染检测正常组织和SARS病变组织中的细胞凋亡以及白细胞分化相关抗原CD3、CD4、CD8、CD45RA、CD20、CD68的表达情况。结果 与正常组织相比，SARS病人的脾脏、肺组织和淋巴结细胞凋亡明显增多，凋亡细胞包括肺泡上皮细胞、淋巴细胞和单核／巨噬细胞等；各病变组织内均有大量CD68^ 单核／巨噬细胞；病变肺组织基本没有CD45RA^ ／CD20^ B细胞和CD4^ /CD8^ T细胞浸润，淋巴结和脾脏的CD4^ ／CD8^ T细胞、CD45RA^ ／CD20^ B细胞也明显减少，现存的具有上述抗原特性的T细胞和B细胞较少凋亡。结论(1)细胞凋亡现象在SARS病变组织中普遍存在，提示细胞凋亡在SARS发病过程中起一定作用；(2)病变组织内浸润的炎细胞主要为单核细胞，说明单核细胞可能在SARS发病中起重要作用；(3)淋巴结和脾脏的细胞凋亡现象和CD4^ /CD8^ T细胞及CD45RA^ ／CD20^ B细胞减少提示SARS病毒可能对免疫细胞有一定的杀伤效应。     

精神分裂症患者细胞免疫及体液免疫的研究

目的：探讨细胞免疫及体液免疫在精神分裂症病人中的改变及临床意义。方法：用碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶桥联酶标法(APAAP)检测T细胞亚群，免疫单扩法检测免疫球蛋白，酶联免疫吸附法(ELlSA)检测TNF—α。结果：患CD3^ T细胞，CD4^ T细胞及CD4^ /CD8^ T比值均比正常对照显降低(P＜0．01)；1gG含量显升高(P＜0．01)，病程大于5年CD3^ T细胞及CD4^ T细胞降低更明显(P＜0．05)；家族史阳性CD3^ T细胞，CD4^ T细胞，CD8^ t细胞显低于家族史阴性(P＜0．05)；CD4^ t细胞与SAPS总分之间呈负相关(r＝—0．34215，P＝0．0285)。结论：精神分裂症存在免疫功能低下，其降低的程度受家族史影响，且随病程延长而加剧；病人症状严重程度与免疫功能的降低程度有关。     

再生障碍性贫血造血细胞Fas抗原表达与T淋巴细胞功能的研究

目的 研究造血细胞凋亡与T淋巴细胞免疫在再生障碍性贫血(再障，Aplastic anemia，AA)发病机制中的作用及两者相关性。方法 采用流式细胞仪测定40例AA患者和15例非血液、免疫系统疾病对照者骨髓单个核细胞(BMMNC)的总CD34^ 、CD34^ Fas^ 、CD34^ Fas^-、CD3^ 、CD8^ 、CD3^ 、CD3^ CD25^ 标记值。结果 (1)与对照组比较，AA组总CD34^ 细胞％明显减少而其Fas表达率(以占总CD34^ 细胞％为计)明显增高。(2)AA组CD34^ 细胞％数与其Fas抗原表达率无明显负相关。(3)AA组T细胞％明显增多，且以CD8^ 细胞和CD3^ CD25^ 细胞增多为主。(4)AA组CD34^ 细胞％数与其T细胞活化状态无显著负相关。(5)AA组CD34^ 细胞Fas表达率与其T细胞活化状态无显著正相关。结论 AA骨髓存在着造血细胞数量减少和T淋巴细胞亚群数量、功能的异常，造血细胞数量减少还可能与Fas以外途径诱导的凋亡过度有关。骨髓造血细胞凋亡过度可能有活化T淋巴细胞免疫以外的途径诱导Fas途径或活化T淋巴细胞可以通过Fas之外的途径诱导造血细胞凋亡。     

236例SARS患者外周血中幼稚和记忆CD4T细胞亚群变化

目的：研究严重急性呼吸综合征(SARS)患者外周血T淋巴细胞及CD4细胞中幼稚亚群(Tn)和记忆亚群(Tm)的异常变化，以期更好地了解SARS患者细胞免疫功能，从而建立新的实验室指标。方法：采用多色荧光标记流式细胞术结合血液分析仪检测236例不同病程的SARS患者(包括50例重型患者和186例普通型患者)的外周血T淋巴细胞及CD45RA和CD45RO分子在CD4细胞中的表达情况。结果：与正常对照组比较，SARS患者的外周血T淋巴细胞及CD4细胞中Tn和Tm绝对值明显减低，其百分比无明显改变，重型尤其明显。其中，重型组CD4细胞中的Tm百分比高于普通型；各病程SARS患者比较，三个病程组的T淋巴细胞计数均明显低于正常对照组，以I组为最低，CD4、CD8亚群的绝对值均低于正常对照组；在CD4细胞中，各病程Tn和Tm的百分比无明显差异，绝对值以Ⅱ组最高，但均低于正常对照组。结论：伴随着全面低下的细胞免疫功能，SARS患者的CD4^ T细胞的Tn和Tm均明显减少，重型尤其明显，但是在病程中可有轻度回升。相对于百分比而言，CD4细胞中Tn和Tm表面标志分子(分别为CD45RA和CD45RO分子)表达绝对值对于明确机体细胞免疫功能的意义更为重要。     

EB病毒感染患儿淋巴细胞亚群的变化及意义

目的研究EB病毒感染患儿免疫功能及其与临床表现和严重度的关系。方法用流式细胞仪分别对22例EB病毒感染相关性噬血细胞综合征(EBV-AHLH)和46例传染性单核细胞增多症(IM)患儿外周血淋巴细胞CD4、CD8、CD19、CD56和CD16进行检测。结果与对照组相比,IM组患儿CD4+T细胞和CDl9+B细胞比例下降,CD8+T细胞比例升高,CDl6+CD56+NK无明显变化;EBV-AHLH患儿CD4+T细胞下降和CD8+T细胞升高更加明显,CDl6+CD56+NK细胞比例下降。CDl9+B细胞比例明显升高。结论检测外周血淋巴细胞亚群对评估EB病毒感染患儿的免疫功能状况、疾病的诊断、严重度及预后判断有重要意义。     

SARS病例脾、淋巴组织NK细胞、B细胞和T细胞亚群的变化

目的 了解SARS患者免疫功能的变化，指导临床诊断和治疗。方法 通过免疫组织化学和光镜检测SARS患者的NK细胞、B细胞及T细胞亚群的变化，并与正常对照组相比较。结果 与正常对照组相比，B细胞及T细胞亚群的均数明显减少，CD4／CD8比值降低，而NK细胞明显增加。结论 SARS患者存在细胞功能紊乱。     

胸腺肽α1对肝癌动脉插管化疗栓塞患者T细胞亚群影响

目的：研究胸腺肽α1(日达仙，Tα1)对肝癌动脉插管化疗栓塞(TACE)患者T细胞亚群的影响。方法：把20例接受TACE治疗的肝癌患者随机分为不用Tα1组(对照组)和用Tα1组(观察组)，分别用流式细胞仪计数患者CD3^ 、CD4^ 、CD4^ ／CD8^ 、NK细胞阳性百分率化疗前后的变化。结果：用Tα1组的CD3^ 、CD4^ 、CD4^ ／CD8^ 、NK细胞的阳性百分率于化疗后明显高于对照组。结论：Tα1可以提高肝癌TACE患者的免疫功能。     

子宫内膜癌患者T细胞亚群、红细胞免疫与Ag-NORs定量分析的临床意义

目的 探讨子宫内膜癌患者的免疫功能变化及临床意义,方法 采用单隆抗体直接免疫荧光染色法,红细胞花环试验及KL型肿免疫图象分析仪,对21例子宫内膜癌患者和20名正常对照组分别测定其外周血T细胞亚群,红细胞免疫C3b受体花环率（E－C3bRR%)与红细胞循环免疫复合物花环率（ICR％）,核仁银染区面积／细胞核面积比值（I．S％）,结果 子宫内膜癌患者CD3^ T细胞,CD4 ^ T细胞,CD4^ ./CD8^ 比值,E－C3 bRR%,I.S%值明显降低;CD8^ T细胞,T－ICR％明显升高,与对照组相比较差异显著（P＜0．01）,结论 子宫内膜癌患者免疫功能低下,联合检测T细胞亚群,红细胞免疫与Ag-NORs可较全面反映子宫内膜癌患者的免疫功能状态,并可指导临床治疗。     

孕期、哺乳期暴露十溴联苯醚对子代大鼠免疫功能的影响

目的 针对环境污染中十溴联苯醚对母婴健康存在潜在危害日益受到重视,研究经口胃灌十溴联苯醚对子代大鼠免疫功能的影响。方法 对母代孕期前后及哺乳期持续高剂量胃灌十溴联苯醚后,观察其子代大鼠免疫器官发育情况、T淋巴细胞亚群及T淋巴细胞增殖转化功能、NK细胞表面分子CD161表达及免疫球蛋白（IgM、IgG）等变化。结果 实验组免疫器官质量与对照组相比有变化,其T淋巴细胞亚群CD3^＋、CD3^＋CD8^＋、CD3^＋CD4^＋及NK细胞表面分子CD161^＋百分比、CD4^＋/CD8^＋比值下降。CD4^-CD8^-百分比升高。实验组T淋巴细胞增殖转化功能下降不明显,其IgM含量明显低于对照组,IgG含量变化不明显。结论 母代持续暴露高剂量十溴联苯醚后,对子代免疫功能存在一定的不利影响。     

慢性支气管炎性急性发作期危重病人外周血B和T细胞CD分子的检测

目的 对慢性支气管炎急性期和缓解期患者外周血B细胞和T细胞CD分子检测并了解其变化。方法 用荧光单抗CD19^ 、CD4^ 、CD8^ ／CD28^ 对B细胞和T细胞亚群进行标记和记数。结果 慢性支气管炎急性发作期患者与缓解期患者相比,体内辅助性T淋巴细胞无明显变化,抑制性T淋巴细胞增加,细胞毒性T淋巴细胞减少,B淋巴细胞二者间无差异。结论 因慢性支气管炎急性期危重病人T淋巴细胞亚群变化,造成免疫功能紊乱。因此,在治疗疾病过程中,除对症处理外,另须配合使用提高免疫功能的药物,改善免疫功能。     

再生障碍性贫血患者淋巴细胞亚群及T细胞活化水平的分析

目的：观察再生障性贫血患者外周血的淋巴细胞亚群的变化和T细胞活化，探讨免疫机制在再障发病中的作用。方法：用流式细胞术直接免疫法检测48例再障患者外周血淋巴细胞亚群及T细胞的HLA-DR表达。结果：再障组患者的CD4^ 、CD8^ 细胞明显增高，D4^ /CD8^ 比值降低，CD8^ HLA-DR^ 细胞明显增加。结论：再障患者存在淋巴细胞亚群的失调及T细胞的异常活化。提示由T淋巴细胞介导的免疫异常对造血功能的押制在再障的发生中起重要作用。     

重离子治疗恶性肿瘤对机体免疫功能的影响

目的 通过检测患者免疫球蛋白、T细胞亚群及NK细胞的变化.探讨重离子放射治疗恶性肿瘤是否对机体免疫功能产生影响.方法 将26例经病理学证实的恶性肿瘤患者采用重离子束局部外照射,在治疗前后分别取患者外周血,采用化学发光法,用全自动生化分析仪测定血清IgG、IgA、IgM的量,用流式细胞仪检测放疗前后T细胞亚群及NK细胞比例.结果 NK细胞、CD4^＋ T细胞、CD8^＋T细胞及CD4^＋ T/CD8^＋T在治疗前后无明显变化,免疫球蛋白IgG、IgA、IgM在治疗前后无明显变化.结论 重离子治疗对免疫功能无明显影响.     

进展期胃癌患者手术前后细胞免疫状态的变化和临床意义

目的 检测进展期胃癌患者手术前后细胞免疫指标．即T细胞亚群及NK细胞变化的情况。方法 采用流式细胞仪(FACS)对22例进展期胃癌患者手术前后不同时期的T细胞亚群．即所有表达于T细胞表面的分子(CD3^ )．辅助T性细胞表面分子(CD4^ )，抑制性T细胞表面分子(CD8^ )，以及NK细胞表面分子(CD16 56)进行检测。结果 (1)进展期胃癌组CD3、CD4、CD16 56阳性细胞数．CD4^ ／CD8^ 比值明显低于正常对照组．CD8阳性细胞数明显高于正常对照组．机体的细胞免疫机能受到抑制。(2)术后第3天组的CD8阳性细胞数明显高于术前组，CD16 56阳性细胞数、CD4／CD8比值明显低于术前组，机体的细胞免疫机能进一步受到抑制。(3)术后第7天组的T细胞亚群及NK细胞阳性数基本恢复至术前水平．但同正常对照组相比．仍有显著差异。(4)术后第7天组CD4^ ／CD8^ 比值明显高于术后第3天组，提示机体TH／TS比值逐渐好转．细胞免疫功能逐步改善。结论 开展围手术期T细胞亚群及NK细胞群的动态检测．对了解进展期胃癌细胞免疫状态．肿瘤的转移和预后有一定的临床意义．并对进展期胃癌患者术后早期的免疫治疗或免疫化疗提供理论依据。     

流式细胞术单平台法检测HIV/AIDS个体血液淋巴细胞免疫表型时影响因素的研究

T淋巴细胞亚群的免疫分型能够提供人类获得性免疫功能缺陷综合征(AIDS)患者免疫状态的重要信息,作为人类免疫缺陷病毒(HIV)感染的主要靶细胞,CD4^ T细胞首先被感染,其数量随着进程不断减少。现认为,随着CD4^ T细胞计数的不断下降,患者临床综合征的严重程度将不断加深。因此,     

肿瘤放免治疗后免疫功能变化及其与预后关系

目的：通过检测26例胃肠道恶性肿瘤患者接受放射免疫治疗（放免治疗）前、后LAK细胞活性及其白细胞介素-2受体（IL-2R）表达和T淋巴细胞亚群改变,以及研究这些变化与疗效的关系。以求揭示放免治疗对机体免疫功能的影响及放免治疗的抗肿瘤机理。方法：LAK活性检测采用MTT法;白细胞介素-2受体（IL-2R）表达应用免疫荧光法检测;用流式细胞仪检查T淋巴细胞亚群改变。结果：放免治疗后2周患者外周血CD3^ 、CD4^ 细胞增多,CD4^ /CD8^ 比值增高,LAK细胞活性增强,IL-2R受体阳性LAK细胞数明显增多,CD8^ 细胞无明显改变;治疗后显效组外周血CD3^ 、CD4^ 细胞、CD4^ /CD8^ 比值、LAK细胞活性及IL-2R受体阳性LAK细胞数明显高于非显效组,而治疗前无明显差异。结论：放免治疗可增强机体免疫功能,放免治疗可通过增强机体免疫功能来达到抗肿瘤效果。     

反复呼吸道感染患儿外周血T细胞亚群及总IgE的测定与分析

目的：探讨反复呼吸道感染（RRTI）患者外周血T细胞亚群及总IgE的。方法：测定27RRTI和T细胞亚群、总IgE,同时测定28例正常儿童作对照组,T细胞亚群测定采用间接免疫SPA花环法,总IgE测定采用产免疫吸附试验（ELISA）。结果：经t检验,RRTI患儿组CD4^ ,CD4^ /CD8^ 明显低于对照组（P＜0．01）,CD8^ 明显高于对照组（P＜0．01）,总IgE明显高于对照组（P＜0．05）。结论：RRTI患儿体内T细胞亚群比例失衡,细胞免疫免疫功能紊乱,此可导致患儿免疫功能低下,RRTI患儿体内IgE明显升高,提示TH1／TH2亚群功能失调,易诱发哮喘发作。适当使用免疫调节剂改善患儿免疫功能,将对小儿RRTI的防治起一定的作用。     

支气管哮喘病人CD8+T细胞CD25,CD30表达状况

目的：通过观察哮喘病人外周血CD8^ T细胞CD25，CD30表达水平，了解哮喘病人CD8^ T细胞功能状态。方法：将所分离出的CD8^ T细胞分别用PPD，PHA刺激，最后用流式细胞仪检测细胞表面CD25，CD30表达水平。结果：PHA刺激组CD8^ T细胞CD25表达水平高于健康对照(P＜0．05)，而CD60表达则无差异；PPD刺激组CD8^ T细胞CD25，CD30表达与健康对照组相比无显著差异；哮喘病人自然状态下(即未受抗原剁激)CD8^ T细胞CD25表达与健康对照无差异，而CD30表达低于健康对照(P＜0．05)。结论：哮喘病人CD8^ T细胞活化状态明显异常。     

NOD小鼠CD4^＋CD25^＋调节性T细胞功能变化研究

目的：观察NOD小鼠CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的功能变化。方法：流式细胞仪分析NOD小鼠胰腺引流淋巴结（PLN）CD4^＋CD25^＋T细胞频率,CD4^＋CD25^＋T细胞中FoxP3^＋细胞的比例,CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋T细胞的FoxP3平均荧光强度（MFI）;检测CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的抑制功能。结果：在不同的年龄阶段,CD4^＋CD25^＋调节性T细胞数量未发生明显变化,而随时间的推移,CD4^＋CD25^＋调节性T细胞中FoxP3表达水平降低,CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的功能也下降。结论：CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的抑制功能降低可能是NOD小鼠糖尿病发作的根本原因。