肌营养不良蛋白在假肥大肌营养不良症肌组织中的表达研究

目的检测假肥大肌营养不良症肌组织中肌营养不良蛋白（ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎ）的表达。方法用针对ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎ棒状区第１５～１８重复区域的多克隆抗血清Ａｎｔｉ５～７，对２２例Ｄｕｃｈｅｎｎｅ型（ＤＭＤ）和４例Ｂｅｃｋｅｒ型肌营养不良症（ＢＭＤ）患者及１１例无神经肌肉疾病的急诊外伤患者（作为对照）的肌组织进行免疫组化分析。结果在对照组肌细胞中ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎ存在着可达检测水平的表达，并特异地定位于肌细胞膜上。１９例ＤＭＤ没有可达检测水平的ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎ表达，３例ＤＭＤ存在着ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎ表达。４例ＢＭＤ肌细胞膜上则呈现出斑片状、不连续ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎ弱阳性表达。结论ｄｙｓ－ｔｒｏｐｈｉｎ的缺乏是造成ＤＭＤ／ＢＭＤ表型的基本生化因素，此方法为临床上对ＤＭＤ／ＢＭＤ患者作出确诊提供了直接的特异生化测试指标。     

Dystrophin相关蛋白与肌营养不良

科学家们经过十年的努力 ,已经发现了大多数肌营养不良的分子缺陷。这一迅速发展得益于分子生物学和遗传连锁分析的双重力量。通过肌肉疾病的研究也进一步阐明了肌肉组织的基本生物学性质。其中最主要的成就就是ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎ蛋白基因的发现 ,它的变异可导致Ｄｕｃｈｅｎｎｅ肌营养不良 (ＤＭＤ) [1] 。通过对ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎ的生物化学分析显示 ,肌细胞中存在ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎ相关蛋白家族 (ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎｓ,ＤＡＰ) [2 ] ,编码这些蛋白的基因缺陷导致不同类型的肌营养不良[3 ,…     

应用免疫荧光技术诊断肌营养不良

目的 用免疫荧光技术对迪谢内（ＤＭＤ）、贝克（ＢＭＤ）、肢带－２Ｄ（ＬＧＭＤ２Ｄ）和肢带－２Ｃ（ＬＧＭＤ２Ｃ）型肌营养不良的致病基因编码产物ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎ、α－肌聚糖和γ－肌聚糖进行检测，为临床对肌营养不良的确诊和分型建立特异性的实验诊断手段。方法 用抗ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎ中央棒状区、Ｃ－末端和抗α、γ－肌聚糖单克隆抗体，借助免疫荧光技术对患者骨骼肌细胞膜上的致病基因表达产物进行研究。结果 在１５例临床拟诊为肌营养不良的患者中确诊９例为ＤＭＤ，４例ＢＭＤ，１例ＬＧＭＤ２Ｄ和１例ＬＧＭＤ２Ｃ。结论 分析骨骼肌细胞膜上ＤＭＤ、α－肌聚糖和γ－肌聚糖基因表达产物是诊断ＤＭＤ／ＢＭＤ、ＬＧＭＤ２Ｄ和ＬＧＭＤ２Ｃ型肌营养不良的可靠和特异手段。     

迪谢内/贝克肌营养不良患者视网膜眼电图改变特征

目的 研究迪谢内／贝克肌营养不良（ＤＭＤ／ＢＭＤ）患者视网膜眼电图（ＥＲＧ）的改变特征，探讨ＥＲＧ对ＤＭＤ／ＢＭＤ的诊断价值及ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎ在视网膜信号传导上的作用。方法 对２２例临床确诊的ＤＭＤ／ＢＭＤ患者进行详细的眼科检查和ＥＲＧ检测，采用ＥＲＧ国际测量标准记录结果。结果 全部患者眼科检查无明显异常。２２例患者中１６例（７２．７％）出现异常ＥＲＧ改变；其中１５例为暗适应蓝光ｂ波波幅下降或（和）消失（Ｐ〈０．００１）。１３例暗适应白光ｂ波波幅下降或（和）替伏期延长（Ｐ〈０．００１）。１２例ｂ／ａ波波幅比≤（Ｐ〈０．００１）。１６例振荡电位ＯＰｓ１～４波波幅下降。结论 ＥＲＧ可作为ＤＭＤ／ＢＭＤ诊断和症状的一项有价值的检查。ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎ及同源蛋白在视网膜电信号的传导上起着重要作用。     

中国人抗肌营养不良蛋白基因缺失的分布特点

目的了解国内Ｄｕｃｈｅｎｎｅ／Ｂｅｃｋｅｒ型肌营养不良症（ＤＭＤ／ＢＭＤ）患者基因缺失的分布特点。方法用１２对引物以多重ＰＣＲ检测与５６例ＤＭＤ／ＢＭＤ患者,分析缺失型患者抗肌营养不良蛋白（ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎ）基因缺失的断裂点分布,并结合国内文献报道的２２１例病例资料,分析９对引物的总检出率及各引物的最佳组合。结果国内ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎ基因缺失断裂点７２％位于４４～５１号内含子内,以４４号内含子最多（２２％）,５０号内含子次之（１７％）,位于４５～５１号内含子内的断裂点是４４号内含子的２．３倍。７号内含子断裂较少,仅４％的断裂点位于该内含子。９对引物的总检出率为４８％,其中５对引物的总检出率为４６％。两对引物的最佳组合为４８号和１７号,可检出３５％的患者。结论国内ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎ基因４４～５１号内含子高度不稳定,容易发生断裂。７号内含子可能不是国内ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎ基因缺失断裂的高发区域。在国内５对引物的总检出率接近９对引物,４８号和１７号外显子的二重ＰＣＲ扩增对于全国范围内ＤＭＤ／ＢＭＤ的筛选,尤其是结合其他方法进行大范围的产前筛选,不失为一种可取的选择。     

迪谢内肌营养不良症基因治疗的评价和问题

迪谢内肌营养不良症 (Ｄｕｃｈｅｎｎｅｍｕｓｃｕｌａｒｄｙｓｔｒｏｐｈｙ,ＤＭＤ)是一种以骨骼肌进行性变性、坏死为主要病理特征的致死性的Ｘ 性连锁隐性遗传性肌病。其发病率为男性活婴的 1/ 35 0 0 ,患者通常 3～ 5岁起病 ,主要表现为骨骼肌进行性近端无力、萎缩、腓肠肌假性肥大 ,12岁前丧失行走能力 ,通常于 2 0岁左右因呼吸衰竭或心力衰竭死亡[1] 。分子病理学研究证实 ,由于ＤＭＤ基因部分区域的缺失、重复或点突变 ,导致肌细胞膜上该基因编码的抗肌萎缩蛋白[2 ] (ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎ ,Ｄｙｓ)的缺乏或结构变异 ,引起肌细胞膜的…     

近端肌强直性肌病的临床研究进展

近端肌强直性肌病(ｐｒｏｘｉｍａｌｍｙｏｔｏｎｉｃｍｙｏｐａｔｈｙ,ＰＲＯＭＭ)是近年来才被认识的一种多系统、常染色体显性遗传性疾病,ＰＲＯＭＭ的特征包括近端肌无力,肌痛,白内障和肌强直等。ＰＲＯＭＭ因为无ＣＴＧ(Ｃｙｔｏｓｉｎｅ,Ｔｈｙｍｉｎｅ,Ｇｕａ－ｎｉｎｅ)复制倍增异常而不同于营养不良性肌强直(ｍｙｏｔｏｎｉｃ ｄｙｓｔｒｏｐｈｙ,ＤＭ)。目前欧美国家相继报道相关病例。作者复习文献,整理出本病的临床、病理、肌电图、影像学和基因学特征。     

检测Duchenne肌营养不良患者基因缺失的新方法

检测Ｄｕｃｈｅｎｎｅ肌营养不良患者基因缺失的新方法曾溢滔，陈美珏，任兆瑞，黄英，仇效坤，黄淑帧对Ｄｕｃｈｅｎｎｅ肌营养不良症（ＤＭＤ）的分子生物学研究表明，位于Ｘｐ２１区的ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎ基因的部分缺失是导致该病的重要原因。我们先前对中国ＤＭＤ病...     

进行性肌营养不良研究进展及前景

进行性肌营养不良是近年来分子生物学研究最活跃的领域之一 ,其中不少疾病的基因已经定位 ,基因产物已经分离 ,进行基因诊断、基因携带者检出、产前诊断已成为可能。基因治疗的实验研究取得了一定成功 ,并为最终治疗疾病开拓了道路。但是在进行性肌营养不良的临床诊断和科学研究中仍存在许多问题。现将进行性肌营养不良国内外的进展及需要探索的问题介绍如下。1 假肥大型肌营养不良自从 1985年Ｋｕｎｋｌｅ等确定了Ｄｕｃｈｅｎｎｅ型肌营养不良 (ＤＭＤ)基因定位于Ｘｐ2 1,1987年Ｈｏｆｆｍａｎ等分离了ＤＭＤ基因编码的蛋白质ｄｙｓｔｒｏ…     

包涵体肌炎的肌肉病理

1967年Ｃｈｏｕ报道 1例“粘液病毒样结构慢性多发性肌炎”的 66岁男性患者 ,随后Ｓａｔｏ、Ｃｈｏｕ等和Ｃａｒｐｅｎｔｅｒ等报道 1例 ,1 971年Ｙｕｎｉｓ和Ｓａｍａｈａ报道 1例 2 6岁女性患者 ,光镜下可见细胞核、细胞质包涵体 ,电镜下可见微丝。首先提出包涵体肌炎 (ｉｎｃｌｕｓｉｏｎｂｏｄｙｍｙｏｓｉｔｉｓ,ＩＢＭ)这一概念[1 ,2 ] 。 1 978年Ｃａｒｐｅｎｔｅｒ等[2 ] 提出与多发性肌炎 (ＰＭ)、皮肌炎 (ＤＭ)的鉴别要点 ,认为ＩＢＭ主要累及远端肌肉 ,并发胶原血管病及恶性肿瘤罕见 ,皮质类固醇治疗无效。组织学可见线状空泡、…     

中国人dystrophin基因基本结构概况的研究

Ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎ是ＤＭＤ／ＢＭＤ基因完整的ｃＤＮＡ分子所编码的蛋白质产物，称肌营养不良蛋白。该基因跨Ｘｐ２１．１－ｐ２１．３。本文用ＤｙｓｔｒｏｐｈｉｎｃＤＮＡ制作了该基因的部分ＨｉｎｄⅢ限制性图，证实该基因共有６６个Ｈｄ片段。经与ＰｖｕⅡ，ＸｂａⅠ，ＴａｑⅠ等限制性图的对比分析，得出了Ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎ基因至少含有７９个外显子的结论。此外，应用脉冲场电泳的方法作出了Ｘｐ２１区内２７２０ｋｂ的ＳｆｉⅠ限制图，Ｄｙｓ－ｔｒｏｐｈｉｎ基因跨其中的２３００ｋｂ，并分别阐明了其外显子的分布概况。     

面肩肱型肌营养不良的分子贵传学研究进展

面肩肱型肌营养不良 (ｆａｃｉｏｓｃａｐｕｌｏｈｕｍｅｒａｌｍｕｓｃｕｌａｒｄｙｓｔｒｏｐｈｙ ,ＦＳＨＤ)最早于 1884年报道 ,是成人中最常见的肌营养不良 ,国外报道发病率约为 1/ 2 0 0 0 0 ,呈常染色体显性遗传 ,但近年来发现不少新 (当代 )突变的散发病例。多于10～ 2 0岁起病 ,主要表现为面肌、肩胛带肌和上臂肌群进行性无力及萎缩 ,不同患者在起病年龄及临床表型方面有很大差异。 1990年Ｗｉｊｍｅｎｇａ等[1] 将其定位于 4ｑ35 ,从而使ＦＳＨＤ研究进入分子水平。近年来研究发现 ,95 %的病例与 4ｑ35区的一个高度多态性ＥｃｏＲ…     

两步多重聚合酶链反应对假肥大型肌营养不良的基因诊断

应用分子生物学技术，用９组寡核苷酸引物分两步多重聚合酶链反应扩增ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎ基因的９段脱氧核糖核酸序列。对３６例ＤＭＤ和４例ＢＭＤ进行基因诊断。首先用缺失率较高的５对引物扩增，检出缺失者１７例，再用４对引物扩增，检出缺失者２例。这样，９对引物多重ＰＣＲ总缺失率占受检患者的４７．５％，表明此法可检测出７９．１％左右有基因缺失的患者。实验结果提示，两步多重ＰＣＲ可用于ＤＭＤ／ＢＭＤ的基因诊断。     

应用PCR—SSCP技术研究非缺失型DMD／BMD患者的基因内点突变

应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ方法，结合ＤＮＡ测序技术，对２０例非缺失型ＤＭＤ／ＢＭＤ患者的Ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎ基因１７号外显子区域进行检测，发现了一个由Ｇ－Ｔ碱基置换形成的点突变。表明该方法对非缺失型病例发病机制的阐明具有重要意义。     

两步多重聚合酶链反应对假肥大型肌营养不良的基因诊断

应用分子生物学技术，用９组寡核苷酸引物分两步多重聚合酶链反应（ｍＰＣＲ）扩增ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎ基因的９段脱氧核糖核酸（ＤＮＡ）序列。对３６例ＤＭＤ和４例ＢＭＤ进行基因诊断。首先用缺失率较高的５对引物扩增，检出缺失者１７例，再用４对引物扩增，检出缺失者２例。这样，９对引物多重ＰＣＲ总缺失率占受检患者的４７．５％，表明此法可检测出７９．１％左右有基因缺失的患者。实验结果提示，两步多重ＰＣＲ可用于ＤＭＤ／ＢＭＤ的基因诊断。文中从ＤＭＤ／ＢＭＤ的临床表型与基因缺失的关系上进行了比较、探讨。     

强直性肌营养不良的临床与肌肉病理研究

目的 研究强直性肌营养不良（ＤＭ）的临床与病理变化。方法 总结３例ＤＭ的临床特点，并对肌活检标本进行光镜和电镜检查。结果 ３例ＤＭ患者，年龄２５～４０岁，临床特点为缓慢进行的四肢无力，肌强直发作，腱反射迟钝对称，前额秃发。ＥＭＧ示肌源性损害，可见肌强直发放。肌活检光镜下可见肌纤维萎缩，肌核内移呈核链形成，肌纤维横纹尚存，晚期可见脂肪细胞浸润，电镜下可见肌纤维变性，溶解，Ｚ带破坏，线粒体肿胀、变性，     

应用PCR－SSCP技术研究非缺失型DMD／BMD患者的基因内点突变

应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ方法，结合ＤＮＡ测序技术，对２０例非缺失型ＤＭＤ／ＢＭＤ患者的Ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎ基因１７号外显子区域进行检测，发现了一个由Ｇ～Ｔ碱基置换形成的点突变。表明该方法对非缺失型病例发病机制的阐明具有重要意义。     

多发性硬化症患者cICAM-1、TNF-α与血脑屏障功能的关系

多发性硬化症 (ｍｕｌｔｉｐｌｅｓｃｌｅｒｏｓｉｓ ,ＭＳ)是一种以中枢神经系统 (ＣＮＳ)多灶性炎性细胞浸润和脱髓鞘为特征的脱髓鞘性疾病。部分ＭＳ患者血脑屏障 (ＢＢＢ)可发生损害。我们检测了 31例ＭＳ患者和 2 1例非炎症性其他神经疾病 (ＯＮＤ)患者的ＢＢＢ功能、肿瘤坏死因子 (ＴＮＦα)及可溶性细胞间粘附因子 (ｃＩＣＡＭ 1)的变化 ,以探讨其在ＭＳ发病过程中的相互关系。对象 :ＭＳ患者组 (ＭＳ组 ) 31例 ,男 14例 ,女 17例 ,年龄17～ 5 4岁 ,平均 36岁。活动期 18例 ,静止期 13例 ;均符合Ｐｏｓｅｒ等ＭＳ诊断标准 ,检测前 3…     

结蛋白肌病

一、临床表现结蛋白肌病 (ｄｅｓｍｉｎｍｙｏｐａｔｈｙ)为一种罕见的肌病 ,1980年Ｅｄｓｔｒ ｍ首先报道[1] 。病因未明。发病年龄 2～ 48岁不等 ,男女均可患病。家族性病例多见 ,亦可见散发性病例 ,多呈常染色体显性遗传。骨骼肌、心肌常受累 ,罕见平滑肌受累[1 6] ,Ｄａｌａｋａｓ等[7] 报道 12例结蛋白突变的病人 ,有 7例出现心肌病 ,临床表现具有异质性[8] 。多数病人表现为进行性的远端肌无力 ,少数病人可见全身性肌无力 ,以远端受累明显。肌活检可见细胞质明显的结蛋白微丝聚集 ,以肌膜下蓄积分布为特征[2 4 ] 。曾有不同的命名如…     

包涵体肌炎

包涵体肌炎 (ｉｎｃｌｕｓｉｏｎ ｂｏｄｙｍｙｏｓｉｔｉｓ,ＩＢＭ )首先由Ｃｈｏｕ于 196 7年报道 ,以后Ｙｕｎｉｓ和Ｓａｍａｈａ于 1971年称其为“慢性多发性肌炎”的亚型 ,但其肌活检所见与“多发性肌炎”不同。因此 ,ＩＢＭ被确认为一种独立的疾病实体。为区别于另一类“遗传性包涵体肌病”(ｈｅｒｅｄｉｔａｒｙｉｎｃｌｕｓｉｏｎ ｂｏｄｙｍｙｏｐａｔｈｉｅｓ ,ｈ ＩＢＭ) ,前者称为“散发性包涵体肌炎”(ｓｐｏｒａｄｉｃｉｎｃｌｕｓｉｏｎ ｂｏｄｙｍｙｏｓｉｔｉｓ ,ｓ ＩＢＭ)。一、散发性包涵体肌炎(一 )散发性包涵体肌炎的…