T细胞产生的细胞因子IL-2,IFN-γ,IL-4,IL-10,IL-13对T淋巴细胞趋化作用的调节

T淋巴细胞在炎性组织中的聚集是一涉及细胞与内皮细胞之间的结合、趋化及受局部组织产生的活性因子作用而增殖的复杂过程,本文探讨了IL-1,IL-8,RANTES对T淋巴细胞的趋化作用及其可能的信号传导途径,同时观察了T淋巴细胞产生的细胞因子(IL-2,IFN-γ,IL-4,IL-10,IL-13)对T淋巴细胞趋化作用的影响。 将人外周血经密度梯度离心后分离出单     

联合应用IL-2和IL-7对增强T细胞体外增殖及功能的作用

应用体外诱导扩增的抗原特异性T细胞治疗恶性肿瘤及某些病毒性疾病已成为一种有效的临床免疫治疗方法，这一方法常规需要用特异性抗原(灭活的肿瘤细胞或提纯抗原)以及抗原递呈细胞作周期性刺激诱导，并在含特定细胞因子，如IL-2的培养系统中扩增以获得具有足够治疗剂量的功能性T细胞。     

联合应用IL-2和IL-7对T细胞体外增殖及功能的增强效应

本文研究了联合应用IL-2和IL-7在体外T细胞培养系统中对小鼠T细胞生长及功能的调节作用。结果表明:单独使用IL-2或IL-7均能增强T细胞对ConA或特异性抗原刺激诱导的增殖反应,但联合使用IL-2和IL-7具有更加显著的协同刺激作用。C57BL/6小鼠抗FBL-3肿瘤特异性T细胞系在IL-2与IL-7联合培养系统中,不但T细胞数量明显增加,且能在保持特异性功能的同时,延长T细胞体外抗原刺激周期。此外,这一细胞因子的组合方案,可大大降低IL-2的应用剂量,避免大剂量IL-2临床应用时所产生的副作用。     

IL-2基因修饰的细胞毒 T淋巴细胞抗肿瘤效应的研究

目的：了解IL－2基因修饰的细胞毒T淋巴细胞（cytotoxic T lymphocytes,CTL)的增殖和杀伤活性,探索细胞因子基因疗法及被动免疫治疗脑胶质瘤的新途径。方法：用昆明种小鼠的脾细胞体外诱导CTL,用腺病毒载体转染IL－2基因,观察其体外增殖活性和样伤活性,再用G422小鼠胶质母细胞瘤细胞建立肺转移瘤模型,36h后经过继回输,2周后计数肺的肿瘤结节,观察IL－2基因转染的CTL对实验性肺转移瘤的治疗作用。结果：重组腺病毒载体在MOI（multipliciy of infection)为100时,转染率达96．8％,IL－2基因修饰CTL增殖活性、IL－2的分泌（248u)和体外杀伤活性（36．4％）明显增强,对实验性肺转移瘤的治疗作用都显著增强,肺转移结节数（28）显著减少（P＜0．01）。结论：IL－2基因转染的CTL过继回输,可直接杀伤和诱导激活机体抗肿瘤免疫反应,使体内抗肿瘤效果显著增强,有效抑制实验性肺转移瘤的生长,为胶质瘤的过继免疫治疗提供了新的思路和实验依据。     

细胞因子IL-21在慢性感染和T细胞衰竭中的作用

HBV、HCV和HIV等病毒的慢性感染长期困扰着免疫学家。病毒特异性CTL细胞（cytotoxic Tlymphocytes）的衰竭被认为是机体不能有效清除病毒的重要机制，即CTL细胞功能耗竭，处于一种不反应的状态，不能增殖，不能分泌细胞因子（IL-2、IFN-y、TNF—α等）和杀伤感染细胞。在这过程中，如果缺失了CD4＋T细胞将导致更加严重的CTL细胞衰竭，然而其具体机制还不清楚。论文作者研究发现，在慢性感染中，CD4＋T细胞分泌的IL-21能够作用于CD8＋T细胞，促进其增殖，从而维持长期有效的抗病毒免疫。     

细胞因子IL-21在慢性感染和T细胞衰竭中的作用

HBV、HCV和HIV等病毒的慢性感染一直以来困扰着免疫学家，病毒特异性CTL细胞衰竭被认为是机体不能有效清除病毒的重要机制——即CTL细胞功能耗竭，处于一种不反应的状态，不能增殖和分泌细胞因子（IL-2、IFN-γ、TNF—α等）或杀伤感染细胞。在这过程中，如果缺失了CD4^＋T细胞将导致更加严重的CTL细胞衰竭，然而其具体机制还不清楚。论文作者发现，在慢性感染中，CD4^＋T细胞分泌的IL-21能够作用于CD8^＋T细胞，促进其增殖，从而维持长期有效的抗病毒免疫。     

卵巢癌患者手术前后IL-2、IL-6及T细胞亚群水平改变的临床意义

目的 探讨卵巢癌患者细胞免疫状况及IL-2、IL-6及T细胞亚群与临床的关系。方法ELISA法检测血清IL-2、IL-6水平，免疫荧光法检测T细胞亚群。结果40例卵巢恶性肿瘤患者手术前及术后7天IL-2产生能力降低，IL-6水平升高，与术后第6疗程化疗结束后4周相比差异有显著意义(P＜0．01)；术前临床Ⅲ、Ⅳ期患者IL-2活性低于Ⅰ、Ⅱ期患者，IL-6水平明显高于Ⅰ、Ⅱ期水平(P＜0．05)；CD4细胞显著减少，CD4／CD8明显降低，与Ⅰ、Ⅱ期患者比较差异有显著意义(P＜0．01)；术后复发的6例患者血清IL-6持续增高。结论 对IL-2、IL-6及T细胞亚群的定期检测有助于观察卵巢恶性肿瘤患者病情变化，为其预后判断提供重要的参考。     

卵巢癌患者手术前后IL-2、IL-6及T细胞亚群水平改变的临床意义

目的探讨卵巢癌患者细胞免疫状况及IL-2、IL-6及T细胞亚群与临床的关系.方法 ELISA法检测血清IL-2、IL-6水平,免疫荧光法检测T细胞亚群.结果 40例卵巢恶性肿瘤患者手术前及术后7天IL-2产生能力降低,IL-6水平升高,与术后第6疗程化疗结束后4周相比差异有显著意义(P＜0.01);术前临床Ⅲ、Ⅳ期患者IL-2活性低于Ⅰ、Ⅱ期患者,IL-6水平明显高于Ⅰ、Ⅱ期水平(P＜0.05);CD4细胞显著减少,CD4/CD8明显降低,与Ⅰ、Ⅱ期患者比较差异有显著意义(P＜0.01);术后复发的6例患者血清IL-6持续增高.结论对IL-2、IL-6及T细胞亚群的定期检测有助于观察卵巢恶性肿瘤患者病情变化,为其预后判断提供重要的参考.     

IL-12恢复并促进氟尿嘧啶抑制的T细胞免疫功能

背景与目的:目前,氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)仍然是临床上广泛应用的肿瘤化疗药物之一.白细胞介素-12(interleukin-12,IL-12)的生物学功能是促进Th1细胞分化以及诱导CD8 T细胞γ干扰素(interferon-γ,IFN-γ)的产生.本研究进一步探讨5-FU对正常人外周血T细胞介导免疫应答的抑制机制,以及IL-12是否能够恢复由5-FU引起的免疫抑制功能.方法:观察5-FU对正常人外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)及肝癌细胞株HepG2增殖和活性的影响.另外,PBMCs在anti-CD3或antiCD3 anti-CD28刺激的条件下,加入不同浓度5-FU(0.20～50.00 μg/ml)共同培养,ELISA法检测培养上清中IFN-γ的水平.PBMCs预先加入或不加入5-FU共同培养后,再分别加入anti-CD3 anti-CD28刺激,利用流式细胞术分析T细胞亚群表达细胞因子IFN-γ和IL-2以及细胞活化分子CD25表达的变化.Anti-CD3 anti-CD28、IL-12、5-FU不同配伍组合与PBMCs共培养后收集上清液,ELISA法检测IFN-γ水平,然后利用流式细胞术检测T细胞亚群IFN-γ表达的变化.结果:5-FU抑制PBMCs和HepG2细胞的增殖,同时以浓度依赖方式抑制正常人PBMCs IFN-γ的产生(P=0.024).T细胞亚群分析的结果表明,加入5-FU组与未加入5-FU组相比,表达IFN-γ的CD4 T细胞百分率从2.1%下降到0.7%,CD8 T细胞百分率从3.9%下降到2.2%;表达IL-2的CD4 T细胞百分率从2.5%下降到0.7%,CD8 T细胞百分率从0.4%下降到0.2%;同时这两种细胞亚群CD25的阳性率和平均荧光密度都明显降低.anti-CD3 anti-CD28组,加入IL-12前表达IFN-γ的CD4 和CD8 T细胞百分率分别为1.1%和3.2%,加入IL-12后分别为1.6%和4.1%;anti-CD3 anti-CD28 5-FU组,加入IL-12前表达IFN-γ的CD4 和CD8 T细胞百分率分别为0.5%和1.1%,加入IL-12后分别为1.0%和2.5%.结论:5-FU抑制肿瘤细胞增殖的同时也抑制正常人的免疫功能,IL-12能够恢复并促进由5-FU抑制的T细胞免疫功能.     

IL-21对慢性粒细胞白血病患者调节性T细胞的影响

目的:观察白细胞介素21(interleukin-21,IL-21)对慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)患者CD4+CD25+调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)的作用,为CML的免疫治疗提供新思路.方法:收集兰州大学第二医院血液科初诊CML患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs),免疫磁珠法分选出CD4+T细胞.分别加入50、100、200 ng/ml IL-21与CD4+T细胞共培养72 h后,流式细胞术检测Treg的比例,并设生理盐水空白对照组.Real-time PCR法检测Treg细胞中Foxp3 mRNA的表达,ELISA法检测各组细胞上清液中IL-10、TGF-β的水平.结果:与空白对照组相比,50、100、200 ng/ml IL-21组CD4+ CD25+ Treg占CD4+T细胞的比例均降低[(3.42±0.76)％、(6.81±0.33)％、(7.98±0.76)％vs(12.09±0.91)％,P＜0.05];且3组的Foxp3 mRNA均降低[(0.05±0.02)、(0.16±0.02)、(0.25±0.02)vs 1,P＜ 0.05];Treg分泌IL-10量减少[(26.13 ±7.28)、(44.88 ±3.72)、(79.77±3.94) vs(133.00±12.32) pg/ml,P＜0.05],分泌TGF-β量也减少[(9.25 ±0.84)、(16.70±1.00)、(20.47±1.60)vs (26.05±1.81) pg/ml,P＜0.05].结论:IL-21在体外可减少CML患者外周血中Treg的比例,并抑制其功能.     

肺癌患者外周血调节性T细胞和IL-10的检测及其意义

  目的  探讨肺癌患者外周血调节性T细胞和IL-10检测的诊断意义及与临床特征相关性。  方法  采用流式细胞仪检测60例肺癌患者外周血中CD4+CD25+T细胞的表达水平, 同时采用ELISA法检测IL-10的表达水平。并随机选30例健康体检者作为对照组。  结果  肺癌患者外周血中CD4+CD25+T细胞和IL-10的表达水平明显高于健康对照组（P < 0. 05）; CD4+CD25+T细胞与IL-10的检测结果呈正相关; 肺癌患者外周血中CD4+CD25+T细胞和IL-10的表达水平与临床分期有关（P < 0. 05）, 与病理类型无关（P>0. 05）。  结论  检测肺癌患者外周血中CD4+CD25+T细胞和IL-10的表达水平, 有助于肺癌患者病情的评估和治疗。      

IL-15对树突状细胞激活的T淋巴细胞免疫反应的作用观察

  目的  观察IL-15和IL-2对树突状细胞疫苗(dendritic cells, DC)激活的淋巴细胞免疫反应的作用。  方法  取健康小鼠的脾淋巴细胞, 在体外采用肿瘤抗原负载的DC疫苗与脾淋巴细胞混合后, 分别加入IL-15或IL-2培养7d。采用流式细胞术检测淋巴细胞免疫表型的变化; 使用酶联免疫斑点实验(ELISPOT)检测分泌干扰素(interferon, IFN)-γ的细胞数量; 利用51Cr释放法检测淋巴细胞对肿瘤细胞的杀伤活性。  结果  IL-15联合DC疫苗增强了T细胞反应, 包括淋巴细胞免疫表型和功能的改变。  结论  与IL-2相比, IL-15能更好的增强DC疫苗诱发的免疫反应, 为IL-15与DC疫苗的联合应用提供了一定的依据。      

IL-7和IL-21修饰的NK-92MI细胞对其自身及正常人外周血T细胞的 影响

目的： 研究经IL-7和IL-21修饰后的NK-92MI细胞的增殖和细胞毒性及其对正常人外周血中T细胞的影响。 方法： 通过基因工程将IL-7和IL-21基因片段构建到电转载体上,通过电转的方式构建了NK-92MI/IL-21和NK-92MI/IL-7&21细胞。 以细胞计数法和CFSE/7-AAD流式术分别对NK-92MI、NK-92MI/IL-21和NK-92MI/IL-7&21细胞体外增殖活性和细胞毒性进行 比较。将正常人PBMC与NK-92MI、NK-92MI/IL-21和NK-92MI/IL-7&21细胞体外共培养后,用流式细胞术检测PBMC中T细 胞的表型变化;同时检测正常人活化后的T细胞与NK-92MI、NK-92MI/IL-21和NK-92MI/IL-7&21细胞共存时相互的细胞毒性以 及对肿瘤细胞的毒性比较。 结果： 成功构建了高表达IL-21的NK-92MI/IL-21细胞和同时高表达IL-7和IL-21的NK-92MI/IL-7& 21细胞;NK-92MI、NK-92MI/IL-21和NK-92MI/IL-7&21细胞对Jurkat和K562细胞的细胞毒性没有变化,但是NK-92MI/IL-21和 NK-92MI/IL-7&21细胞相对于亲本细胞NK-92MI的体外增殖活性有所提高;NK-92MI/IL-21和NK-92MI/IL-7&21细胞对PBMC 中T细胞的活化有一定的促进作用;活化后的T细胞与NK-92MI、NK-92MI/IL-21和NK-92MI/IL-7&21细胞相互之间几乎无细胞 毒性;同时,当T细胞和3种NK细胞共存时,T细胞不影响NK细胞对K562细胞的细胞毒性。 结论： 基因工程修饰的NK-92MI/ IL-21和NK-92MI/IL-7&21细胞体外增殖活性有所提高,它们对外周血T细胞的活化有一定的刺激和促进作用;T细胞和NK- 92MI细胞之间无细胞毒性,同时活化T细胞的存在不影响NK-92MI细胞的细胞毒性。     

化疗对肝癌患者T淋巴细胞内IL-2、IFN-γ的影响

目的探讨化疗对肝癌患者T淋巴细胞内的白细胞介素2(IL-2)、干扰素γ(IFN-γ)的影响.方法应用单克隆抗体和流式细胞术(FCM)分析31例肝癌患者化疗前后T淋巴细胞内IL-2、IFN-γ水平的变化.结果肝癌患者化疗后T淋巴细跑内IL-2和IFN-γ均较化疗前降低(P＜0.05);静脉化疗组与介入化疗组化疗前后T淋巴细胞内IL-2及IFN-γ改变差值均无显著性差异(P＞0.05);不同临床分期化疗前后IL-2及IFN-γ改变差值均无显著性差异(P＞0.05).结论化疗药物可通过降低T淋巴细胞内的IL-2、IFN-γ水平而影响细胞免疫功能,导致机体免疫功能降低.     

药物AC-88对荷瘤鼠T细胞内TNF-α、IL-1β和IL-6mRNA含量及其增殖功能影响

目的：探讨AC-88抗肿瘤作用及可能机制。方法：以移植H22肝癌细胞的小鼠为体内模型，研究了AC-88的抑瘤作用；应用细胞培养和MTT法研究荷瘤小鼠T淋巴细胞的增殖功能；用RT-PCR法研究荷瘤小鼠T淋巴细胞TNF-α、IL-1β和IL-6mRNA含量变化。结果：实验发现，AC-88的体内抑瘤率可高达76％，而且AC-88能促进荷瘤鼠T淋巴细胞的增殖，能使T细胞中TNF-α、IL-1β、IL-6等细胞因子的mRNA含量增加2～4倍。结论：AC-88有良好的抑瘤作用，还可以调节T淋巴细胞的功能，是一种具有较高开发价值的抗癌药物。     

Spatially Resolved Transverse Relaxation Times T2 of Human Articular Cartilage – an in vitro and in vivo MRI Study

The transverse MR relaxation time T₂ of articular cartilage could be a helpful parameter for the noninvasive early diagnosis of degenerative joint diseases because it is related to collagen orientation and water content. T₂ maps were determined for human tibial plateau samples in vitro (5 patients) and for patellar cartilage in vivo (5 volunteers) in a standard whole-body MR scanner operating at a field strength of 1.5 Tesla by means of a multi-spin-echo sequence. A high spatial resolution with pixel sizes between 156 μm (in vitro) and 470 μm (in vivo) was achieved. Cartilage T₂ maps showed increases from approximately 10 ms at the bone interface to approximately 50 ms at the articular surface. The short-time reproducibility of the mean T₂ value was approximately 1.4 %. Our results demonstrate that T₂ maps of articular cartilage can be acquired in vivo with good precision. This method may have potential for noninvasive assessment of material properties of cartilage, e.g. to study degenerative changes with aging and disease.     

IL-6、IL-8与卵巢癌

与卵巢癌有关的细胞因子众多，其中IL-6和IL-8的异常表达在卵巢癌的发生、发展中起着十分重要的作用。对其深入探究将有助于阐明卵巢癌的发病机制，协助临床诊断和病情估计，并为卵巢癌的生物治疗提供新的线索和途径。     

IL-6、IL-8与卵巢癌

与卵巢癌有关的细胞因子众多,其中IL-6和IL-8的异常表达在卵巢癌的发生、发展中起着十分重要的作用.对其深入探究将有助于阐明卵巢癌的发病机制,协助临床诊断和病情估计,并为卵巢癌的生物治疗提供新的线索和途径.     

转GM-CSF基因瘤苗联合IL-12治疗T细胞淋巴瘤的实验研究

目的　探讨用转粒细胞巨噬细胞 集落刺激因子 (GM CSF)基因瘤苗 ,联合白介素 12 (IL 12 )治疗小鼠T细胞淋巴瘤的方法。方法　将小鼠GM CSF真核表达质粒 ,用电穿孔法导入小鼠T细胞淋巴瘤细胞系RMA ,有限稀释法制备单个细胞克隆 ,经RT PCR、骨髓祖细胞增殖实验和集落形成实验 ,筛选相对高表达GM CSF的RMA克隆 ,该克隆细胞用丝裂霉素灭活后免疫小鼠 ,以诱导产生抵抗RMA肿瘤细胞再攻击的能力 ,并观察其与IL 12联合应用对淋巴瘤的治疗作用。结果　获得了高表达GM CSF的小鼠T细胞淋巴瘤克隆 ,其动物体内致瘤活性降低 ,将其用丝裂霉素灭活后作为瘤苗可使小鼠产生抗肿瘤的免疫保护力 ,与IL 12联合应用增强其抗肿瘤活性。结论　转GM CSF基因瘤苗可作为有效的抗肿瘤瘤苗 ,与IL 12联合应用较其单独应用更为有效