人早孕蜕膜基质细胞及免疫活性细胞趋化因子受体CXCR6的表达

目的分析人早孕期蜕膜基质细胞趋化因子配基受体对CXCL16/CXCR6的表达及免疫活性细胞趋化因子受体CXCR6的表达,以探讨CXCL16/CXCR6在蜕膜免疫活性细胞募集中的可能规律.方法收集早孕期蜕膜组织,分离蜕膜基质细胞和免疫细胞,分别采用半定量RT-PCR、免疫细胞化学、流式细胞术分析蜕膜基质细胞CXCL16和CXCR6的表达;流式细胞术分析蜕膜CD56^＋CD16^-NK细胞、CD56^＋CD16^＋NK细胞、NKT细胞、T细胞、γδT细胞、单核细胞CXCR6的表达.结果人早孕蜕膜基质细胞高水平转录趋化因子受体CXCR6,低水平转录其配体CXCL16,但CXCL16和CXCR6在蛋白水平的表达偏低.早孕蜕膜γδT细胞CXCR6阳性率为87.29%;CD14^＋单核细胞CXCR6阳性率为47.71%;NKT细胞CXCR6阳性率为44.14%;T细胞CXCR6表达率为32.91%;而蜕膜两种NK细胞（CD56^＋CD16^-、CD56^＋CD16^＋）几乎不表达CXCR6.结论人γδT细胞、单核细胞、NKT细胞、T细胞可能通过表达趋化因子受体CXCR6被募集到蜕膜局部并驻留,从而参与早孕期母胎界面的免疫调节.     

人早孕期绒毛组织和滋养细胞趋化因子受体转录水平

目的：研究早孕期绒毛组织及滋养细胞18种趋化因子受体的转录水平，以揭示趋化因子受体在母一胎界面生理性调节作用。方法：提取人早孕期绒毛组织及滋养细胞总RNA，半定量RT-PCR检测绒毛组织和滋养细胞18种趋化因子受体mRNA的表达水平。结果：CXCR4及CXCR6在绒毛组织中普遍高表达；CCR6、CCR7、XCR1及CX3CR1呈普遍中等表达；CCR1～CCR5、CCR8～CCR10、CXCR1～CXCR3在部分绒毛组织中表达，部分绒毛组织不表达或表达量很低；早孕人绒毛组织不表达CXCR5。早孕期滋养细胞表达CCR1、CCR3～CCR5、CCR8～CCR9、CXCR1～CXCR4、CXCR6、XCR1、CX3CR1；不表达CCR2、CCR6、CCR7、CCR10及CXCR5。结论：早孕期绒毛组织及滋养细胞表达多种趋化因子受体，它们在正常妊娠中具有重要的生理学意义。     

CXCL12对人早孕期蜕膜基质细胞侵袭性的调节作用

正常妊娠时,独特的母-胎免疫调节对胚胎的生长、发育至关重要.母-胎界面主要组成细胞蜕膜基质细胞(dedidual stromal cells,DSCs)与滋养细胞的相互作用是母-胎免疫调节的重要环节.CXCL12/CXCR4是一对功能广泛的趋化因子配体受体对,本课题组前期研究发现人早孕期DSCs表达趋化因子受体CXCR4,而滋养细胞表达其配体CXCL12,提示CXCL12/CXCR4可能是滋养细胞-DSC相互作用的重要调节分子[1].本研究拟分析滋养细胞来源的CXCL12对DSCs增殖和侵袭功能的调节作用,以解析CXCL12/CXCR4信号通路在滋养细胞-DSC相互调控及母-胎界面免疫微环境形成中的作用.     

趋化因子受体CCR5、CCR7、CXCR3和CXCR6在丙肝患者肝内及外周血CD4+ T淋巴细胞上的表达及其意义

目的比较趋化因子受体CCR5、CCR7、CXCR3和CXCR6在丙肝患者肝内和外周血CD4^＋T淋巴细胞表面表达水平及其意义,同时进一步了解其与肝脏组织学炎症反应的关系.方法采用荧光标记抗趋化因子受体的单克隆抗体对肝内及外周血中CD4^＋T淋巴细胞表面的趋化因子受体进行染色后,采用9色11参数流式细胞仪LSRⅡ进行检测分析.结果（1）肝内CCR5^＋、CXCR3^＋或/和CXCR6^＋的CD4^＋T淋巴细胞频数高于外周血（P＜0.001）,而CCR7^＋CD4^＋T淋巴细胞频数低于外周血（P＜0.001）;（2）肝内CCR5^＋或CXCR6^＋的活性（CD38^＋）CD4^＋T淋巴细胞频数高于外周血（P＜0.05）;（3）肝内表达2种或2种以上趋化因子受体CCR5、CXCR3和CXCR6的CD4^＋T淋巴细胞频数明显高于外周血（P＜0.001）,而不表达或仅表达一种上述趋化因子受体CD4^＋T淋巴细胞频数明显低于外周血（P＜0.001）;（3）CCR5和CXCR6在肝内CD4^＋T淋巴细胞表面的表达有中等度相关;（4）肝内组织学炎症明显组表达趋化因子受体CCR5、CXCR3或CXCR6的CD4^＋T淋巴细胞频数高于炎症轻微组.结论趋化因子受体CCR5、CXCR3和CXCR6可能介导CD4^＋T淋巴细胞向肝内迁徙定植,并参与肝脏炎症的病理免疫学反应过程.     

HIV-1协同受体CXCR4、CCR5及相关趋化因子SDF-1在胎盘的表达

目的：研究HIV-1协同受体CXCR4、CCR5及CXCR4的特异性配体SDF-1在人胎盘组织的表达，探索HIV-1子宫内垂直传播的分子机制。方法：半定量RT-PCR检测早、中、晚孕期胎盘及早孕滋养细胞CXCR4、CCR5 mRNA水平；免疫组化和免疫细胞化学检测早孕胎盘及原代培养滋养细胞CXCR4、CCR5蛋白表达；原位杂交及免疫组化分析SDF-1在早孕胎盘的表达；ELISA测定滋养细胞SDF-1的动态分泌水平。结果：各孕期胎盘表达CXCR4及CCR5 mRNA；CXCR4蛋白定位于滋养细胞，而CCR5蛋白定位于绒毛基质中。滋养细胞可转录并翻译SDF-1，且能分泌可溶性SDF-1。结论：滋养细胞同时表达CXCR4及SDF-1，SDF-1可能通过降调CXCR4而拮抗X4-HIV-1感染胎儿细胞；R5-HIV-1或许能通过滋养层裂隙感染CCR5^#基质细胞和/或Hotbauer细胞，从而发生子宫内垂直传播。     

人早孕期滋养细胞通过表达趋化因子SDF-1募集蜕膜免疫活性细胞

目的　研究人早孕期绒毛及滋养细胞趋化因子SDF 1的表达、分泌及其对蜕膜免疫活性细胞的募集作用。方法　收集早孕期绒毛组织并检测SDF 1的定位表达 ;用ELISA分析早孕期滋养细胞培养上清液中SDF 1的浓度水平 ;分离早孕期蜕膜免疫活性细胞 ,以趋化试验研究SDF 1及滋养细胞培养上清液对蜕膜免疫活性细胞的趋化作用。结果　人早孕期滋养细胞表达并分泌SDF 1;一定浓度范围的SDF 1对蜕膜免疫活性细胞具有趋化作用 ,最大趋化指数为 3 .2 7± 0 .89;滋养细胞培养上清液亦明显趋化蜕膜免疫活性细胞 ,趋化指数为 2 .11± 0 .79。结论　人早孕期滋养细胞表达的SDF 1对蜕膜免疫活性细胞具有趋化、募集作用 ,从而有助于形成蜕膜独特的淋巴细胞群体并维持母 胎免疫耐受     

人早孕期蜕膜基质细胞下调蜕膜NK细胞杀伤活性

通过分析人早孕期蜕膜基质细胞(decidual stromal cell,DSC)对蜕膜NK细胞(dNK)表面趋化因子受体CXCR4与细胞内颗粒酶B表达水平的影响,研究早孕蜕膜基质细胞对局部NK细胞的训导作用。收集早孕蜕膜组织,分离DSC及蜕膜免疫活性细胞,进一步通过磁珠分选蜕膜CD3-CD56bright NK细胞,将分离的蜕膜NK细胞与DSC按1∶1比例共培养24h,收集蜕膜NK细胞,流式细胞仪检测其表面趋化因子受体CXCR4和细胞内颗粒酶B(granzyme B)的表达水平。结果显示,与对照组相比,在与DSC细胞共培养之后,趋化因子受体CXCR4+NK细胞的百分率明显上升,而蜕膜NK细胞内颗粒酶B阳性率显著下降(P<0.05)。结果表明,人早孕母-胎界面DSC细胞上调蜕膜NK细胞表面趋化因子受体CXCR4的表达,下调NK细胞内颗粒酶B的表达水平,可能抑制其杀伤活性。     

早孕期人蜕膜趋化因子CCL2及其受体CCR2的表达及意义

目的：分析人早孕蜕膜及蜕膜基质细胞趋化因子受体CCR2及其配体CCL2在人早孕蜕膜组织及蜕膜基质细胞的表达和分泌，以探讨CCR2／CCL2在母-胎界面的生物学作用。方法：收集早孕期蜕膜组织，分离蜕膜基质细胞，分别用半定量RT-PCR、免疫化学方法分析正常人早孕蜕膜组织和培养的人蜕膜基质细胞CCR2／CCL2表达；并且用流式细胞术和ELISA法分别检测蜕膜基质细胞表面CCR2的表达和培养的蜕膜基质细胞上清中CCL2的分泌。结果：人早孕蜕膜组织和蜕膜基质细胞均高水平转录和翻译CCR2／CCL2，培养的基质细胞能分泌大量的CCL2，其分泌量呈时间依赖性。结论：早孕蜕膜高表达和分泌CCR2／CCL2可能参与早孕期母一胎免疫调节。     

CCR5-△32突变基因地域和人群分布的研究进展

艾滋病即获得性免疫缺陷综合症(AIDS)对人类健康造成极大威胁。引起该病的病原体是人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)。HIV-1通过与CD4~+受体以及CC趋化因子受体5(CCR5)或CXC趋化因子受体4(CXCR4)辅受体结合而感染细胞,当CCR5发生32个碱基缺失突变时,其在细胞膜的表达量减少,导致HIV-1无法有效地入侵细胞。我们把这种突变的CCR5称为第一外显子缺失32个碱基的CC趋化因子受体5(CCR5-△32)。近年来,通过对CCR5-△32的深入研究, AIDS的治疗获得很大进展。我们主要总结了该基因的结构功能并且详细统计了不同地区不同人群该基因的分布情况,以期对AIDS的治疗提供帮助。     

HIV/AIDS患者NK细胞趋化因子受体表达研究

目的:探讨中国HIV/AIDS患者NK细胞表面趋化因子受体CXCR4、CCR5表达情况。方法:采用流式细胞仪分析HIV/AIDS患者外周血NK细胞表面趋化因子受体CCR5和CXCR4的表达。结果:未治疗典型HIV/AIDS患者NK细胞表面趋化因子受体CXCR4和CCR5与正常对照无显著差异(P >0 0 5 ) ,HIV长期不进展者NK细胞CCR5受体低于未治疗的典型HIV/AIDS患者(P <0 0 5 ) ,与正常对照相比无显著差异(P =0 0 5 ) ;HAART治疗组NK细胞趋化因子受体CCR5表达显著低于未治疗典型HIV/AIDS患者(P <0 0 1)。结论:趋化因子受体CCR5在NK细胞上表达的变化与疾病的不同阶段密切相连,对NK趋化因子受体的检测有助于艾滋病疾病进程的研究     

中国经采供血HIV感染长期不进展者CD4~+T淋巴细胞趋化因子受体表达研究

目的:了解中国经采供血HIV感染长期不进展者CD4+T淋巴细胞趋化因子受体表达,分析其与疾病不进展的关系。方法:收集43例经采供血HIV感染长期不进展者、82例无症状HIV感染者、35例AIDS病人及40例健康对照的抗凝全血,用流式细胞仪检测趋化因子受体CCR5、CXCR4的表达,并分析其与病毒载量、CD4+T淋巴细胞绝对值及T淋巴细胞活化的相关性。结果:长期不进展组CD4+T细胞表面CCR5的表达明显低于无症状HIV感染组及AIDS组(P0.01),与健康对照无显著差异;CD4+T细胞表面CXCR4的表达各组无显著差异。CD4+T细胞表面CCR5的表达与CD4+T细胞数量显著负相关(r=-0.498,P0.05),与病毒载量无显著相关性。CD4+T细胞表面CCR5的表达与HLA、CD38在CD4+、CD8+T细胞的表达水平显著正相关(P0.001,CD38在CD4+T细胞的表达除外),CD4+T细胞表面CXCR4的表达与HLA在CD4、CD8+T细胞的表达水平显著负相关(P0.01)。结论:HIV感染长期不进展者CD4+T细胞趋化因子受体CCR5表达维持较低水平,与疾病不进展相关。     

人绒毛滋养细胞体外对T淋巴细胞的调节作用

妊娠是子宫和成熟的囊胚之间复杂的相互作用的结果[1].随着对滋养细胞研究的深入,发现母胎免疫是发生在母胎之间的免疫对话,且贯穿整个妊娠过程[2].作为半同种移植物的胎儿,在母体内安然成长至足月,得益于母胎之间的免疫耐受.母胎界面的胎儿面主要由滋养细胞组成,其起源于上皮细胞,是唯一与母体免疫系统直接接触的胎儿细胞,主要分泌β类趋化因子参与蜕膜免疫细胞的募集.近年来研究发现,RANTES(regulated upon activation normal T-cell expressed and secreted)、 CXCL12和CCL2是母胎界面起关键作用的趋化因子[3],但关于RANTES在妊娠早期对外周血T淋巴细胞Th1/Th2的影响却未见报道.本实验通过体外分离共培养滋养细胞和外周血T淋巴细胞,观察滋养细胞及其分泌的趋化因子RANTES对T淋巴细胞Th1/Th2型细胞因子的影响,为探讨早孕期母胎免疫机制提供实验依据.     

早、中、晚孕期胎盘因子对人外周血淋巴细胞CD4、CCR5和CXCR4表达的影响

目的 通过研究早、中、晚孕期胎盘因子(PF)对人外周血淋巴细胞(PBLs)中CD4、CCR5和CXCR4表达的作用,探讨PF在人免疫缺陷病毒-1(HIV-1)垂直传播中的作用及其机理.方法 制备早、中、晚孕期PF.分离人外周血单个核细胞,并分别与相对浓度为25%的早、中、晚孕期PF作用,培养24 h后收集细胞,荧光抗体标记,流式细胞术检测外周血淋巴细胞(PBLs)中CD4、CCR5和CXCR4表达,以及CD4 T细胞中CCR5 细胞、CXCR4 细胞、CCR5 CXCR4 细胞所占的百分率.结果 各孕期PF均可显著降低PBLs中CCR5的表达,其中早孕期PF的作用明显强于中、晚孕期PF的作用;各孕期PF组CD4 T细胞中CCR5 细胞的百分率均显著低于对照组,早孕期PF组CD4 T细胞中CCR5 细胞的百分率明显低于中、晚孕期PF组;各孕期PF组CD4 T细胞中CCR5 CXCR4 细胞的百分率均显著低于对照组,早孕期PF组CD4 T细胞中CCR5 CXCR4 细胞的百分率显著低于晚孕期PF组.结论 各孕期PF均可显著降低PBLs中CCR5的表达,以及CD4 T细胞中CCR5 细胞和CCR5 CXCR4 细胞的百分率,早孕期PF作用最强,中、晚孕期PF效应相当,PF可能通过抑制R5病毒的人胞而具有抗R5病毒的作用,并可能在阻断HIV-1宫内感染中具有重要作用.     

人早孕滋养细胞条件培养液对外周血单个核细胞的趋化效应

目的:探讨人早孕滋养细胞在蜕膜免疫细胞选择性募集中的可能机制。方法:分离纯化人早孕滋养细胞进行原代培养,制备滋养细胞条件培养液(CM);将CM倍比稀释加入Transwell下室,分离的人外周血单个核细胞加入上室进行趋化实验,流式细胞术分析CM对PBMC各型免疫细胞的趋化效应。结果:4倍稀释的CM即显示对外周CD56+CD16-NK细胞、CD56+CD16+NK细胞、单核细胞的趋化活性,随CM浓度上升,各细胞的趋化活性也升高(P0.001);CM原液也可明显趋化外周T细胞和γδT细胞(P0.05);各浓度CM对NKT细胞均不表现趋化作用。CM趋化后的免疫细胞组成与趋化前显著不同,而与蜕膜免疫细胞的组成相似。结论:人早孕滋养细胞能够分泌多种趋化因子,募集外周血免疫细胞到达母胎界面,帮助形成蜕膜独特的免疫微环境,并维持母胎免疫耐受。     

人早孕滋养细胞与蜕膜基质细胞共培养对外周NK细胞的影响

为了分析人早孕母-胎界面功能细胞对外周NK细胞表型及功能的调节作用,我们模拟母-胎界面微环境,建立滋养细胞和蜕膜基质细胞共培养系统,并将此共培养体系与外周NK细胞共培养,采用流式细胞术分析NK细胞的表型和细胞因子的表达,用细胞毒检测试剂盒检测NK细胞的细胞毒活性。研究发现,母-胎界面滋养细胞与蜕膜基质细胞共培养体系能够显著上调外周NK细胞抑制型受体KIR2DL1的表达,下调外周NK细胞杀伤性受体NKp44的表达;显著上调Th2型细胞因子IL-10的表达水平,下调外周NK细胞穿孔素perforin表达及其细胞毒活性。结果表明,母-胎界面功能细胞能够诱导外周NK细胞的耐受表型及Th2型优势,下调外周及蜕膜NK细胞的细胞毒活性,从而有利于形成母-胎界面免疫耐受微环境。     

神经肽P物质对小鼠脾NK细胞迁移及趋化因子受体表达的影响

探讨神经肽P物质(substance P,SP)对小鼠NK细胞迁移能力和趋化因子受体表达的影响,揭示SP对NK细胞迁移功能的调节作用。采用Transwell法检测SP对C57BL/6小鼠脾NK细胞迁移活性的影响;实时荧光定量PCR检测趋化因子受体(CCR5、CXCR4)的mRNA表达水平;流式细胞术检测趋化因子受体(CCR5、CXCR4)的膜表达水平。结果显示,选用10~(-14)～10~(-6)mol/L SP处理小鼠脾NK细胞,在较低浓度范围内,NK细胞迁移作用随着SP浓度的升高而增强;在较高浓度范围内,NK细胞迁移作用随着SP浓度的升高而回落至基础水平。在所选浓度范围内,SP均可增加CCR5 mRNA和CXCR4 mRNA表达;受较低浓度SP刺激后,CCR5和CXCR4表达阳性细胞数随SP浓度升高而逐渐增加,而受较高浓度SP刺激后,CCR5和CXCR4表达阳性细胞数随SP浓度升高而逐渐回降,该趋势与SP促进NK细胞趋化活性的作用趋势基本一致。这些结果提示SP对NK细胞具有直接趋化作用,且SP对某些趋化因子受体的表达有一定的调节作用,这些趋化因子受体的表达可能参与了SP对NK细胞迁移活动的调控。     

移植物抗宿主病小鼠肝脏及异体CD8+ T细胞趋化因子和趋化因子受体表达分析

为探讨趋化因子及其受体介导的效应性细胞迁移在移植物抗宿主病(graft-versus-host disease,GVHD)发生发展中的重要作用,采用次要组织相容性抗原异配的GVHD小鼠模型,应用流式细胞分选术(FACS)、实时荧光定量聚合酶链反应等方法,分析GVHD靶器官和异体CD8+T细胞趋化因子及受体的表达。肝脏高表达干扰素诱导蛋白-10(IP-10)、干扰素诱导的T细胞趋化因子(ITAC)、γ干扰素诱生单核因子(MIG)、巨噬细胞炎症蛋白(MIP)-1α/β等趋化因子。异体CD8+T细胞上则高表达CXC趋化因子受体(CXCR)3和CC趋化因子受体(CCR)5。随着肝脏趋化因子的表达增加,异体CD8+T细胞迁移浸润的数量也增高。因而趋化因子及异体CD8+T细胞上趋化因子受体的特异对应关系,促使大量异体CD8+T细胞迁移浸润并造成肝脏损伤。     

S1P受体激动剂FTY720干扰孕鼠体内DC分布从而诱导妊娠免疫耐受

目的探讨S1P受体激动剂FTY720在降低自然流产模型孕鼠胚胎丢失率进程中的作用及其可能的机制。方法以自然流产模型孕鼠为研究对象,观察腹腔注射FTY720对自然流产模型孕鼠胚胎丢失率的影响,RT-PCR检测DC表面S1PR的表达,流式细胞术及免疫组化检测孕鼠外周血及局部组织中DC数量、成熟度及其表面相应趋化因子CCL19及其受体CCR7的表达情况,趋化实验验证FTY720对DC细胞趋化能力的影响。结果 1)FTY720对正常妊娠模型孕鼠的胚胎丢失率无明显影响(P<0.05),过继转移FTY720能明显降低自然流产模型孕鼠的胚胎丢失率(P<0.05);2)DC表面存在S1P受体的广泛表达,S1P受体激动剂FTY720减少了DC表面趋化因子及其受体的表达(P<0.05),致使趋化至母胎界面DC的数量显著减少(P<0.05);3)FTY720对DC细胞的分化及凋亡率均无明显影响(P>0.05)。结论 FTY720可能通过下调DC表面趋化因子受体CCR7的表达而使趋化至母胎界面的DC数量减少,最终诱导母胎免疫耐受。     

婴儿肠道不同部位T细胞亚群及其表面分子检测——婴儿肠道HIV-感染和复制的可能性分析

通过对婴儿外周血(PB)、肠系膜淋巴结(MLN)和肠上皮内(IE)来源淋巴细胞的比较性研究,以分析婴儿肠道HIV-1感染容许性和HIV-1复制支持性的细胞与分子基础。分离婴儿外周血单个核细胞(PBMC),肠系膜淋巴结淋巴细胞(MLNL)和肠上皮间淋巴细胞(iIEL),制备单细胞悬液,运用流式细胞术结合荧光抗体染色技术:(1)检测不同部位的CD3+T细胞中CD4+辅助性T细胞和CD8+杀伤性T细胞比例;(2)检测不同部位的CD4+T细胞CCR5和CXCR4以及CD69和HLA-DR的表达水平。结果发现:(1)iIEL中的CD4+辅助性T细胞占CD3+T细胞的比例明显低于PBMC和MLNL,而CD8+杀伤性T细胞占CD3+T细胞的比例明显高于PBMC和MLNL;(2)iIEL中CD4+T细胞CCR5和CXCR4以及CD69和HLA-DR的表达水平均明显高于PBMC和MLNL。结果表明:婴儿iIEL中CD4+T淋巴细胞与PBMC和MLNL的CD4+T淋巴细胞相比较,高表达HIV-1入胞共受体CCR5和CXCR4,提示iIEL更易被HIV-1感染;iIEL中CD4+T淋巴细胞高表达细胞活化标记分子CD69和HLA-DR,说明其更有利于HIV-1复制,这种高基础活化率可能与其不断接触小肠来源的食物和共生菌抗原有关。由此可见,婴儿肠道具有了HIV-1感染容许性和HIV-1复制支持性的细胞和分子基础,因此成了HIV-1最易感的解剖部位,这可能是围产期HIV感染的婴儿病毒载量明显高于成年人,且病情进展也比成年人快的原因。     

ConA刺激对CD4+CD25+调节性T细胞趋化特性及其表面趋化因子受体CCR4/CCR6表达的影响

目的：体外动态观察ConA激活的调节性T细胞表面趋化因子受体的表达变化及其趋化特性，为利用调节性T细胞诱导免疫耐受提供线索。方法：①流式细胞仪分选出CD4hiCD12710CD25 hiint细胞。②纯化的调节性T细胞与CD4^＋CD25一T细胞分别用ConA（10Fg／m1）刺激0、24和48小时后，用趋化因子CCL1、CCI5、CCL20、CCI_22做趋化实验，观察各趋化因子作用下调节性T细胞与CD4^＋CD25-T细胞的趋化特性。同时，流式细胞仪检测CCR4与CCR6的表达。结果：①分离得到的调节性T细胞纯度为97．4％，活细胞率为95％，得率：4．1％。②CCL1、CCL20、CCL22均可趋化调节性T细胞，且在ConA激活后趋化效率随时间而改变。CCL1与CCL22对调节性T细胞的趋化指数显著高于CD4^＋CD25^-T细胞；CCL20对调节性T细胞和CD4^＋CD25-T细胞趋化指数都很高；CCL5对调节性T细胞趋化性则显著弱于CD4^＋CD25^-T细胞。③ConA刺激后，调节性T细胞趋化因子受体CCR4、CCR6的表达均明显高于对照组细胞（CD4^＋CD25^-细胞）。随着ConA刺激时间延长，两组细胞CCR4的表达均持续增强；两组细胞CCR6的表达均在刺激24小时后表达明显增强，48小时后CCR6的表达略有减弱，呈下降趋势。结论：①磁珠阴性分选结合流式细胞仪技术可分选出较高纯度及活率的调节性T细胞。②调节性T细胞与CD4^＋CD25^-T细胞相比，二者具有不同的趋化特性。CCL1对调节性T细胞的趋化作用较特异，CCL-22趋化作用较强，CCL5趋化作用较弱。而CCL20对CD4^＋CD25-T细胞和调节性T细胞趋化作用都强。③ConA刺激后48小时内趋化因子CCLl、CCL20、CCL-22对调节性T细胞的趋化作用随刺激时间而增强。④ConA刺激可以增强受体CCR4、CCR6表达。⑤提示趋化因子受体的表达与细胞活化状态有关，且不同受体表达变化趋势不同。