维生素C对邻苯二甲酸二丁酯雄性大鼠生殖毒性的保护作用

目的 观察邻苯二甲酸二丁酯(di-butylphthalate，DBP)所致雄性生殖毒性效应，并探讨维生素C(vitamin C，Vit C)对DBP所致SD雄性大鼠生殖功能受损的干预调节作用。 方法 将60只SD雄性大鼠随机分组，分别为正常对照组，DBP低、中、高剂量组(DBP 100、500、1 000 mg/kg体重)，VitC对照组(30 mg/kg体重)与VitC与DBP高剂量联合干预组。灌胃干预21 d，检测大鼠脏器重量及血液生化各项指标，大鼠精子活力、浓度、畸形率，以及检测血清睾酮(T)、黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)水平。 结果 与正常对照组相比，DBP高剂量组大鼠睾丸减轻，睾丸脏体比下降，部分血生化指标异常，精子活力下降、畸形率升高，血清T、LH、FSH水平显著下降，差异有统计学意义(均P＜0.05)；与DBP高剂量组相比，VitC干预组大鼠睾丸组织损伤有不同程度的恢复，精子活力、畸形率，以及血清T、LH、FSH水平差异有统计学意义(均P＜0.01)。 结论 DBP可致大鼠睾丸萎缩，精子活力下降，精子畸形率增高；DBP可致血清T、LH、FSH水平降低。VitC可提高血清LDH水平和T、LH、FSH水平，改善DBP所致大鼠精子活力下降，降低精子畸形率，为进一步开展DBP生殖毒性的预防干预提供理论依据。      

邻苯二甲酸二丁酯对青春期雄性大鼠的生殖毒性研究

目的评价邻苯二甲酸二丁酯(DBP)对青春期雄性大鼠生殖毒性和作用机制。方法用DBP剂量分别为1 000、500、250 mg/(kg.d)灌胃染毒雄性Wistar大鼠(28日龄)8周,并停止染毒后恢复8周。观察临床症状,记录动物体重,进行血Zn和激素测定、生殖能力检查和解剖及组织病理学等指标。结果1 000 mg/(kg.d)剂量组动物体重5周后出现显著下降(对照组的70%)、持续到停止染毒恢复期的第5周。1 000 mg/(kg.d)和500 mg/(kg.d)剂量组染毒8周时动物血清睾酮水平降低(对照组的80%~90%),停止染毒后第4周起恢复正常;1 000 mg/(kg.d)和500 mg/(kg.d)剂量组染毒8周时动物血清E2水平升高(对照组的170%~200%);1 000 mg/(kg.d)和500 mg/(kg.d)剂量组染毒8周时动物血清FSH水平升高(对照组的120%~150%);1 000 mg/(kg.d)和500 mg/(kg.d)剂量组染毒8周后精子计数减少(对照组的12%~66%),1 000 mg/(kg.d)剂量组染毒8周后交配成功率0(0/8),500 mg/(kg.d)剂量组染毒8周后交配成功率88%(7/8);1 000 mg/(kg.d)剂量组睾丸系数与对照组比较明显减小,停止染毒后未见恢复;组织病理学发现1 000 mg/(kg.d)剂量组生精上皮严重损伤,生精细胞脱落,曲细精管的损伤度为97.8%,与对照组差异有统计学意义。结论DBP对雄性青春期大鼠具有明显的生殖毒性,具有干扰生殖内分泌激素水平的作用,使睾酮水平降低,雌激素和FSH水平升高,同时引起睾丸萎缩、生精上皮变性、生殖细胞脱落等损伤。本实验中DBP对Wistar大鼠的最低可观察毒性作用剂量水平(lowest observed adverse effect level,LOAEL)为250 mg/(kg.d)。     

斑马鱼在生殖毒性评价中的应用

斑马鱼是一种常见的热带淡水鱼,它繁殖力强、发育同步、胚胎透明、性成熟周期短、体型小,便于体外受精繁殖和易于饲养管理,成为生态毒理学研究的良好模式生物。本文就斑马鱼性腺发育、繁殖力、第二性征、卵黄蛋白原合成及子一代胚胎生长发育作一综述。     

邻苯二甲酸二丁酯对雄性果蝇生殖能力影响及其遗传毒性

目的：研究邻苯二甲酸二丁酯（di—n-butyl phthalate,DBP）对雄性果蝇生殖能力的影响及其遗传毒性．方法：①将未交配雄性果蝇随机分为5组,分别给予含DBP为0,1,4,16,64mg／g的培养基喂饲,10d后取存活的实验雄蝇进行交配试验和生育试验．②将雄性果蝇随机分为4组,分别喂饲含DBP为0,50,200,800mg／L的溶液,采用伴性隐性致死（SLRL）试验,观察DBP对雄性果蝇生殖细胞的致突变作用．结果：染毒10d后随着DBP浓度升高各染毒组雄蝇1h交配率和子代发生量逐渐降低,64mg／g组分别为40％和486±265,明显低于对照组的85％和861±312（P〈0．05）;生育期1—10d各染毒组的不育率均显著高于对照组（P〈0．01）,10d后只有较高浓度组的不育率高于对照组（P〈0．05）;50mg／L浓度组精母细胞Ⅲ阶段的SLRL突变率（0．990％）显著高于对照组（0．106％,P〈0．01）．结论：DBP对性成熟的雄性果蝇能造成一定的生育障碍和遗传损伤．     

Fas/FasL系统在邻苯二甲酸二丁酯睾丸毒性机制中的作用

目的 探讨细胞凋亡Fas／FasL系统在邻苯二甲酸二丁酯（DBP）的雄性生殖毒性机制中的作用。方法 在大鼠多代繁殖实验的基础上,运用免疫组织化学染色的方法,通过对睾丸组织损伤的观察和细胞凋亡相关蛋白（Fas／FasL）的检测和分析,探讨不同剂量DBP对成年F;代大鼠（PND70天）睾丸损害的情况及可能的作用机制。结果 与对照组相比较,随着DBP染毒剂量的增高,PND70天F1代雄性大鼠睾丸曲细精管生精上皮退化变性,生精细胞脱落至曲细精管管腔面,甚至有部分曲细精管内的生精细胞耗竭;免疫组织化学染色结果表明,与对照组相比,中、高剂量组（每天250和500mg／kg）大鼠睾丸组织Fas／FasL染色范围扩大,着色细胞数量增多,且存在剂量-反应关系。结论 DBP对大鼠睾丸生精细胞损伤可能是由于DBP启动了睾丸支持细胞Fas／FasL系统,阻抑生精过程造成的,Fas／FasL系统在DBP的雄性生殖毒性中起一定作用。     

番茄红素对DBP所致果蝇生殖毒性的拮抗作用

目的 研究番茄红素对邻苯二甲酸二丁酯(di-n-butyl phthalate,DBP)所致果蝇生殖毒性的拮抗作用.方法 将果蝇随机分为5组,分别给予溶剂对照培养基和含1.0?P及不同浓度番茄红素的培养基喂饲,雌雄配对产子,每日观察并记录子代孵化数和死亡数.结果 与对照组相比,DBP组果蝇的生育率和平均生育数降低,生育期缩短,子代死亡率升高(P＜0.05);随着番茄红素浓度的增加,染毒果蝇的生育率、生育期和平均生育数逐渐提高,子代死亡率逐渐降低.结论 DBP可对果蝇产生生殖毒性,而番茄红素对这种影响有拮抗作用.     

益母草挥发油对斑马鱼胚胎发育毒性研究

目的:研究益母草挥发油对不同发育阶段斑马鱼胚胎毒性作用。方法:将1.5、3.125、6.25、12.5、25.0、50.0、100.0μg/mL的益母草挥发油处理受精后2 h(2 hpf)的斑马鱼胚胎,在12、24、48、72、96 hpf时间点记录斑马鱼胚胎发育情况。结果:益母草挥发油对斑马鱼胚胎具有致死性(12、24、48、96 hpf的LC_(50)分别为42.79±2.02、36.97±1.91、31.92±0.79、6.98±0.88μg/mL)和致畸性(48、72、96 hpf的TC_(50)分别为6.31±0.49、3.56±0.48、1.58±0.19μg/mL),同时使斑马鱼胚胎心率减慢,身体形态发生变化,且毒性随着时间和浓度的增加而增强。结论:益母草挥发油对斑马鱼胚胎发育有一定的毒性,为益母草挥发油临床安全应用提供参考。     

多溴联苯醚作用于斑马鱼的毒性研究进展

多溴联苯醚（PBDEs）对环境和人体造成的巨大潜在性危害日益受到人们的关注。斑马鱼作为一种标准模式脊椎动物以其独特的优势被广泛应用于毒理学研究。本文就PBDEs作用于斑马鱼产生的神经、生殖发育及甲状腺毒性的研究进展作一综述。     

阿奇霉素对斑马鱼心脏毒性的初步研究

目的建立阿奇霉素诱导斑马鱼幼鱼心脏毒性的模型,为后续抗菌类药物心脏毒性的机理研究奠定基础。方法以受精后2 d发育正常的斑马鱼胚胎作为模型,以不同浓度的阿奇霉素处理斑马鱼胚胎3 d后,观察斑马鱼胚胎心脏形态并计算其心率和心搏量以评价斑马鱼胚胎心脏的功能。结果 0.3和1 mm浓度的阿奇霉素作用3 d后,可见斑马鱼胎心明显毒性。与正常对照组比较,模型组斑马鱼胎心肿大,心率减慢和心搏量减小。结论阿奇霉素对斑马鱼胎心有明显毒性作用,且与阿奇霉素的浓度正相关,该模型可以用于后续抗生素类药物引起的心脏毒性的机理研究。     

氧氟沙星对小鼠生殖毒性和致畸性的研究

目的研究氧氟沙星对昆明系小鼠胚胎和胎鼠发育的影响,确定其是否存在生殖毒性和致畸性。方法①雄鼠分别灌服各剂量氧氟沙星,连续10d,末次给药24h后与母鼠合笼,在妊娠第三天取胚胎,记录各剂量组胚胎发育率。②孕鼠妊娠零天给药,分别经口灌服高、中、低剂量[36、72和360mg(kg.bw)]氧氟沙星溶液,连续给药3d,在妊娠第三天收集胚胎,记录胚胎发育率。③孕鼠妊娠零天给药,分别经口灌服各剂量氧氟沙星溶液,连续给药10d,在妊娠第16天取出胎鼠,记录胎鼠体重、胎盘重、活胎数、胎鼠外观畸形和内脏畸形等指标。结果给药组与对照组相比,雄鼠服用高剂量组360mg(kg.bw)氧氟沙星对着床前胚胎发育影响显著(P<0.05),而中等剂量和低剂量组对着床前胚胎发育的影响不显著(P>0.05)。雌鼠服用不同剂量氧氟沙星对着床前胚胎发育影响不显著(P>0.05)。氧氟沙星对受孕鼠的活胎数和吸收胎数均无明显影响,给药组的活鼠体重、胎盘重均未见明显差异(P>0.05);药物组和对照组均未出现外观畸形和内脏畸形,也不存在剂量和效应关系。结论孕鼠服用不同剂氧氟沙星对昆明系小鼠胚胎和胎鼠发育无明显的影响,表明氧氟沙星对雌性鼠不具有明显的生殖毒性和致畸性;但雄鼠服用高剂量氧氟沙星对着床前胚胎发育影响显著。     

邻苯二甲酸二丁酯对小鼠骨髓微核和精子的影响

目的采用小鼠骨髓微核试验和F1代雄性大鼠的生殖毒性实验研究邻苯二甲酸二丁酯（DBP）的遗传毒性和生殖毒性,为综合评价其安全性提供科学依据。方法昆明小鼠分为33、330、3300mg／kgDBP剂量组,经灌胃染毒,按常规方法进行小鼠骨髓微核试验。选择妊娠期和哺乳期sD雌性大鼠,灌胃染毒,DBP剂量分别为0、125、250、500mg／kg,计数F1代雄性大鼠的附睾尾精子数、精子活力、精子畸形率。结果DBP在3300mg／奴时能引起微核率的升高（P〈0．01）。中、高剂量组（250、500mg／kg）DBP可引起F1代仔鼠精子总数、精子活力明显降低（P〈0．01）,精子畸形率升高（P〈0．05）。结论DBP具有一定的遗传毒性和生殖毒性。     

Combined Subchronic Toxicity of Bisphenol A and Dibutyl Phthalate on Male Rats

Objective To evaluate the combined subchronic toxicity of bisphenol A(BPA) and dibutyl phthalate(DBP) in male Sprague Dawley(SD) rats.Methods Forty 4‐week‐old male rats weighing 115‐125 g were randomly divided into BPA‐treated,DBP‐treated group,BPA+DBP‐treated and control groups and fed with a soy‐ and alfalfa‐free diet containing 285.4 ppm BPA,285.4 ppm DBP,285.4 ppm BPA plus 285.4 ppm DBP,and a control diet,respectively,for 90 consecutive days.At the end of the study,the animals were sacrificed by exsanguination via the carotid artery under diethyl etherane aesthesia and weighed.Organs,including liver,kidneys,spleen,thymus,heart,brain,and testis underwent pathological examination.The androgen receptor(AR),gonadotropin‐releasing hormone receptor(GNRHR),and progesterone hormone receptor(PR) genes from the hypothalamus were detected by real‐time PCR.The biomedical parameters were analyzed.Results No significant difference was found in food intake,body weight,tissue weight,organ/brain weight ratio,and biomedical parameters among the four groups(P>0.05).However,BPA and DBP up‐regulated AR,PR and GNRHR expression levels in rats and showed a synergistic or an additive effect in the BPA+DBP group.Conclusion The combined subchronic toxicity of BPA and DBP is synergistic or additive in male SD rats.     

双酚A斑马鱼雄性生殖毒性的表观遗传学基础

目的 从表观遗传学角度探讨双酚A(BPA)影响斑马鱼精子成熟与胚胎发育的机理.方法 将20 dpf斑马鱼幼鱼,暴露在乙醇(溶剂)对照、BPA0.5 mg/L、BPA1.5 mg/L至100 dph.选取各处理组雄鱼,荧光定量PCR检测性腺DNA甲基转移酶(DNMTs)表达量,免疫组化检测性腺全基因组甲基化水平,Western-blot、免疫组化检测性腺组蛋白3赖氨酸三甲基化(H3K9me3、H3K4me3、H3K27me3、H3K36me3)表达水平.各处理组雄鱼与正常雌鱼交配,观察胚胎期相关指标.结果 BPA处理组Dnmt1、Dnmt6、Dnmt7、Dnmt8 mRNA表达量明显升高,与对照组比较差别均具有统计学意义(P<0.05).BPA1.5 mg/L组中成熟精子DNA甲基化水平与H3K9me3水平均明显升高.与正常雌鱼交配,BPA 1.5 mg/组产卵量仅为对照组的63%±2.49%,12 h胚胎死亡率与对照组相比增加202.53%±6.21%,72 h胚胎畸形率与对照组相比增加399.08%±12.16%,差别均具有统计学意义(P<0.05).结论 双酚A诱导斑马鱼成熟精子DNA甲基化程度和组蛋白H3K9me3 表达水平增加,这些变化可能是BPA处理组后代胚胎发育异常的重要基础.     

邻苯二甲酸二丁酯对小鼠骨髓微核和精子形态的影响

目的了解邻苯二甲酸二丁酯(DBP)对微核试验和精子畸形试验的影响。方法将昆明种小鼠随机分为5组,DBP染毒剂量为500mg/kg(低剂量组),1000mg/kg(中剂量组)和2000mg/kg(高剂量组),以及阴性对照组(玉米油)和阳性对照组(环磷酰胺,40mg/kg),每只小鼠计数1000个骨髓嗜多染红细胞(PCE)和每个剂量组的小鼠计数1000个精子的形态。结果中、高剂量组微核率与阴性对照组相比明显升高(P<0.05),且各剂量组微核率随染毒浓度的增加而升高,呈现剂量-反应关系(r=0.937,P<0.01);中、高剂量组精子畸形率与阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),且各剂量组精子畸形率随染毒浓度的增加而升高,呈剂量-反应关系(r=0.904,P<0.01),畸形精子中以无钩为最多,其次是香蕉形、尾折叠、双头,分别为4.5%、3.09%和1.32%,结论DBP染毒在一定剂量下对小鼠骨髓微核试验和精子畸形试验呈现阳性结果。     

Toxicity of Graphene Quantum Dots in Zebrafish Embryo

Objective To evaluate the bio-safety of graphene quantum dots (GQDs), we studied its effects on the embryonic development of zebrafish.
Methods In vivo, biodistribution and the developmental toxicity of GQDs were investigated in embryonic zebrafish at exposure concentrations ranging from 12.5-200 μg/mL for 4-96 h post-fertilization (hpf). The mortality, hatch rate, malformation, heart rate, GQDs uptake, spontaneous movement, and larval behavior were examined.
Results The fluorescence of GQDs was mainly localized in the intestines and heart. As the exposure concentration increased, the hatch and heart rate decreased, accompanied by an increase in mortality. Exposure to a high level of GQDs (200 μg/mL) resulted in various embryonic malformations including pericardial edema, vitelline cyst, bent spine, and bent tail. The spontaneous movement significantly decreased after exposure to GQDs at concentrations of 50, 100, and 200 μg/mL. The larval behavior testing (visible light test) showed that the total swimming distance and speed decreased dose-dependently. Embryos exposed to 12.5 μg/mL showed hyperactivity while exposure to higher concentrations (25, 50, 100, and 200μg/mL) caused remarkable hypoactivity in the light-dark test.
Conclusion Low concentrations of GQDs were relatively non-toxic. However, GQDs disrupt the progression of embryonic development at concentrations exceeding 50μg/mL.     

Acute Developmental Toxicity of Panax notoginseng in Zebrafish Larvae

Objective: To evaluate toxicity of raw extract of Panax notoginseng(rPN) and decocted extract of PN(dPN) by a toxicological assay using zebrafish larvae, and explore the mechanism by RNA sequencing assay. Methods: Zebrafish larvae was used to evaluate acute toxicity of PN in two forms: rPN and dPN. Three doses(0.5, 1.5, and 5.0 μg/mL) of dPN were used to treat zebrafishes for evaluating the developmental toxicity. Behavior abnormalities, body weight, body length and number of vertebral roots wer...     

采用模式生物斑马鱼评价三种中药成分的急性毒性

目的：以模式生物斑马鱼为实验对象,观察3种中药有效成份雷公藤甲素、大黄素和苦参碱的急性毒性。方法：将药物添加到鱼只生活的水中为给药方式,观察给药后24h鱼只的死亡情况,以此为判断待测药物毒性大小的依据,并用Bliss法计算各药物对斑马鱼的半数致死浓度（LC50）。结果：雷公藤甲素、苦参碱和大黄素对于斑马鱼的LC50值依次为5．02×10^-3、113．2和1．18×10^3μg／mL,毒性大小顺序与文献报道基本一致。结论：以斑马鱼作为初步评价药物毒性的模型可用于中药成分毒性的快速筛选和评价。     

基于斑马鱼模型研究补骨脂肝损伤效应及作用机制

目的 采用斑马鱼模型探究补骨脂提取物对肝脏的毒性作用。方法 根据斑马鱼幼鱼在不同浓度的补骨脂水提物和醇提物中的存活数和死亡数,计算出幼鱼死亡率初步评估补骨脂水提物和醇提物的毒性大小。药浴后的斑马鱼幼鱼进行组织匀浆,通过生化仪测定谷丙转氨酶（ALT）,谷草转氨酶（AST）和乳酸脱氢酶（LDH）的酶活。斑马鱼成鱼给药24h后冰浴处死,进行HE染色观察肝脏病理变化。采用qPCR和Western Blot法检测成鱼肝脏中固醇调节元件结合蛋白-1c（SREBP-1c）,脂肪酸合成酶（FAS）,乙酰辅酶A羧化酶（ACC1）以及微粒体甘油三脂转移蛋白（MTP）的mRNA表达和蛋白表达。结果 与正常组相比,补骨脂药浴组的斑马鱼幼鱼在2dpf时出现死亡。并且补骨脂对幼鱼的毒性具有一定的浓度依赖性。相同浓度下,醇提`物的毒性大于水提物。HE染色结果可观察到补骨脂醇提和水提给药组的成鱼中肝脏发生脂变,同时给药组的斑马鱼幼鱼匀浆组织液中ALT,AST和LDH含量明显高于空白组。通过qPCR实验发现,补骨脂水提物和醇提物给药组的斑马鱼肝脏中SREBP-1c,FAS,ACC1的表达升高,MTP的表达降低。Western Blot检测结果与qPCR结果一致。结论 浓度为300μg/mL和600μg/mL的补骨脂水提物和浓度为40μg/mL和80μg/mL的补骨脂醇提物药浴给药48h会导致斑马鱼的肝脏产生病变,甚至死亡,且机制可能与肝脂变有关。      

铝的雄性生殖毒性研究进展

铝在地壳中的含量排名第三(仅次于氧和硅)。由于具有良好的理化特性,铝及其化合物被广泛应用于生产和生活中。铝非机体所必需的元素,但随着医学的发展及研究的深入,其对人体的毒性作用被逐渐揭示。铝对神经系统毒性作用的研究比较透彻,而随着近年来随着研究的拓展,人们发现铝对雄性动物生殖系统也有影响。